ABCC4和CEA在胃癌中的作用.doc

ABCC4和CEA在胃癌中的作用 王晓亮李绍刚李赛飞林寒冰曹斌校王军 奉化市人民医院，浙江奉化315500 摘要目的研究ABCC4和CEA在胃癌中的作用，并探讨了两者之间的相关性。方法该院就诊的100例胃癌患者的胃癌术后标本采用石蜡包埋，用免疫组化法检测标本中ABCC4、CEA表达水平，分析其与胃癌临床病理因素的相关性，并探讨了ABCC4与CEA在胃癌中的相关性。结果ABCC4在胃癌组织中的阳性表达率为19.0%，在胃粘膜组织中的阳性表达率为1.0%，ABCC4在胃癌组织中的阳性表达率明显高于胃粘膜组织中的阳性表达率(P0.05)；ABCC4和CEA表达水平与分化程度有显著相关性(P0.05)，Spearman法分析显示CEA和ABCC4表达水平在胃癌中无显著相关性(P0.05)。结论ABCC4和CEA与胃癌的分化程度相关，与浸润深度、淋巴结转移、术后复发无相关性，同时两者的调控没有协同作用，但是联合检测ABCC4和CEA可能有助于对胃癌分化程度做出准确的评价。 关键词胃癌；ab4；cea R7357A1674-074（4）11（a）029-04 据Pakin研究报道，胃癌为高发生率肿瘤，其死亡例数排位世界第二1。流行病学显示胃癌在我国是最常见的恶性肿瘤之一。虽然胃癌的诊疗技术有了很大的提高，但是多数患者就诊时处于晚期，总体预后仍较差。ABCC4(ATP-bindingcassette，subfamilyCmember4)，是Cole等研究小细胞肺癌时发现的耐药基因家族成员2。CEA为癌胚抗原,属于CEA基因家族成员。该研究通过检测胃癌组织标本中的ABCC4、CEA表达水平，分析其与胃癌临床病理因素的相关性，以期作为评估治疗及预后的标志物，现分析xx年1月xx年1月间该院收治的100例胃癌患者的临床资料，报道如下。 1资料与方法 1.1一般资料 随机选取在该院收治的胃癌患者100例。病例特点：男性76例，女性24例；年龄2980岁，平均年龄（61.2310.4）岁。手术后病理结果：pT213例，pT351例，pT4?36例；淋巴结pN028例，pN121例，pN226例，pN325例；pTNM分期：IIA期7例，IIB期23例，IIIA期19例，IIIB期21例，V期8例；随访到xx年7月，随访期间死亡20例。病例纳入标准：符合美国癌症联合委员会(AJCC)(第7版)进展（期）胃癌诊断标准。排除标准：术前化疗，术前放疗，术前行胸片、腹部CT检查肺部、肝脏、腹主动脉旁淋巴结等远处转移者。 1.2试剂与方法 1.2.1标本所有组织蜡块均由该院病理科包埋，每例胃癌组织病理切片均由两位专家确诊。胃粘膜组织取自上述100例标本距癌组织3cm以上的癌旁胃粘膜组织。 1.2.2试剂ABCC4单克隆抗体购自美国SantaCruz公司，CEA单克隆抗体购自福州迈新生物开发公司。 1.2.3方法采用免疫组织化SP法。将标本连续切片，常规脱蜡、水化，经3%的H2O2消化内源性过氧化物酶，高压抗原修复，一抗(鼠抗人ABCC4、CEA单克隆抗体)、二抗(生物素标记)作用后，用DAB显色，苏木素复染后脱水透明，常规中性树胶封固后显微镜下观察。以PBS代替一抗作阴性对照。 1.3免疫组化结果判定 ABCC4阳性表达定位于细胞膜或浆，呈现棕黄色或棕褐色颗粒，取5个高倍视野，每个视野分别计数100个细胞，计算阳性细胞所占百分率。染色结果根据阳性细胞占比率分为4个等级，0.05)；ABCC4阳性表达率在N0、N1、N2、N3分别为17.9%、19.0%、23.1%、16.0%，差异无统计学意义(P0.05)；ABCC4阳性表达率在胃低分化腺癌、高分化腺癌中分别为11.3%、27.7%，差异有统计学意义(P0.05)，见图3，图4，表1。 2.3CEA在胃癌中的表达与临床病理因素的关系 在100例胃癌标本中，CEA阳性表达率在T2、T3、T4分别为38.5%、33.3%、36.1%，差异无统计学意义(P0.05)；CEA阳性表达率在N0、N1、N2、N3分别为28.6%、42.9%、26.9%、44.0%，差异无统计学意义(P0.05)；CEA阳性表达率在胃高分化腺癌、低分化腺癌中分别为23.4%、45.2%，差异有统计学意义(P0.05)，见表2。 2.4胃癌组织中CEA与ABCC4表达水平的相关性分析 在CEA表达阳性的35例中，ABCC4阳性表达占6例；在CEA表达阴性65例中，ABCC4阳性表达占13例，Spearman法分析显示CEA和ABCC4在胃癌组织中表达无相关性，差异有统计学意义(P0.05)，见表3。 3讨论 ABCC4在人类中定位于染色体13q32，长312kb，含有31个外显子3，是ABC家族中结构最简单的蛋白4，广泛分布于胰腺和肠等多种组织中5-6。结直肠癌、头颈鳞癌细胞中ABCC4强表达7-8，提示ABCC4与肿瘤的发生发展相关。佟柏峰等9通过ABCC4基因RNAi有效靶点慢病毒(ABCC4siRNA)感染SGC-7901细胞的研究表明，ABCC4基因能促进胃癌细胞增殖。本研究通过免疫组化法发现ABCC4在胃癌组织中呈高表达，并且阳性率明显高于癌旁胃粘膜组织，说明了ABCC4与胃癌的发生相关。 此外，该研究还发现，ABCC4表达水平与胃癌组织分化程度相关。在高分化胃癌组织中ABCC4表达的阳性率明显高于低分化胃癌，提示随着胃癌的恶性程度进展,ABCC4阳性表达率下降。临床发现某些分化程度低、恶性程度高的癌症患者较分化程度高的患者对化疗敏感,结合Yasui等10比较顺铂耐药肿瘤细胞KK47/cDDP1O的ABCC4拷贝数高于顺铂敏感肿瘤细胞的ABCC4拷贝数，提示ABCC4在癌组织中的阳性表达率增高可能是肿瘤细胞对化疗药物产生耐药性的原因之一，有待进一步分组研究证实。 CEA是癌细胞膜上的一种结构蛋白，通常在体内浓度极低，但内胚层组织恶变时，如胃癌、肝癌、肺癌等组织中浓度可升高1，11。该研究发现胃高分化腺癌的CEA阳性表达率高低于低分化腺癌的阳性表达率，这提示胃癌分化程度越低,CEA阳性表达率越高，与王海燕等12的报道相符。 目前对肿瘤发生机制的研究已从单一基因发展到多基因协同作用和互相调节的研究。该研究发现CEA和ABCC4表达水平与胃癌的分化程度有关，但用Spearman法分析发现CEA和ABCC4在胃癌组织中的表达无相关性，这提示CEA和ABCC4对胃癌细胞的调控可能没有协同作用，可能通过不同的调控机制起作用。如CEA可诱导CEACAM1介导的凋亡途径13，ABCC4可通过参与转运细胞cAMP和cGMP等内源性分子，调控细胞内的环核苷酸水平，调节细胞凋亡14。 综上所述，该研究通过免疫组化法观察ABCC4和CEA在胃癌组织中的表达水平，分析其与胃癌临床病理因素的关系,证明了ABCC4和CEA表达与胃癌的分化程度有关，但二者的调控没有协同作用，联合检测ABCC4和CEA，可能有助于对胃癌分化程度做出准确的评价。 参考文献 1焦淑成，王恒，杜彦峥.血清CEA和CA199表达水平评估胃癌病情的应用价值J.国际检验医学杂志,xx,35(6):661-666. 2LinX，RamamurtbiK，MishimaM，etal.P53modulatestheeffectoflossofDNAmismatchrepaironthesensitivityofhumancoloncancercellstothecytotoxicandmutageniceffectsofcisplatinJ.CancerRes,xx，61(4):1508-1516 3LambaJK，AdachiM，SunD，eta1NonsensemediateddecaydownregulatesconservedalternativelysplicedABCC4transcriptsbearingnonsensecodonsJHumMolGe，xx，12(2):99-109. 4RavnaAW，SagerGMolecularmodelingstudiesofABCtransportersinvolvedinmultidrugresistanceJMiniRevMedChem，xx，9(2)：186-193 5RavnaAW，SylteI，SagerGBindingsiteofABCtransporterhomologymodelsconfirmedbyABCB1crystastructureJTheorBiolMedModel，xx，6:20PublishedonlineSep4,xx. 6张广钰，田小林.ABCC4基因与胃癌关系的研究进展J华夏医学，xx,25（6）：920-923. 7HollaVR，BacklundMG，YangP，etal.RegulationofprostaglandintransportersincolorectalneoplasiaJCancerPrevRes，xx，1(2)：93-99 8SethiS，BenningerMS，LuM，etalNoninvasivemoleculardetectionofheadandnecksquamouscellcarcinoma：anexploratoryanalysisJ.DiagnMolPathol，xx，18(2)：81-87 9佟柏峰，李云龙，宋茂力，等.ABCC4表达与胃癌细胞增殖的相关研究J国际遗传学杂志，xx，10(6)：326-329 10YasuiK，MiharaS，ZhaoC，eta1AlterationincopynumbersofgenesasamechanismforacquireddrugresistanceJCancerRes，xx，64(4)：1403-1410 11CaleagnoDQ,LealMF,SeabraAD,etal.Interrationshipbetweenchromosome8aneuploidy,C-MYCamplifireationandinereasedexpressioninindividualsfromnorthernBrazilwasgastricadenocarcinomaJ.WorldJGastroenterol,xx,12(38):6207-6221. 12王海燕,姚桂芹,高佩增,等.CA242,CEA,CA199在胃癌及癌前病变组织中表达的相关研究J.临床消化病杂志,xx,17(6):279-811. 13SternN,MarkelG,ArnonTI,etal.Carcinoembryonicantigen(CEA)inhibitsnkkillingviainteractionwithcea-relatedcelladhesionmolecule