Pgp、GSTπ和TopoII在涎腺多形性腺瘤中的表达及意义.doc

Pgp、GST和TopoII在涎腺多形性腺瘤中的表达及意义 金晓东 湖北省郧县人民医院湖北省郧县442500 【摘要】目的：探讨P-gp、GST-和TopoII在涎腺良、恶性多形性腺瘤多药耐药基因的表达情况及意义。方法：应用免疫组织化学技术(SP法)检测19例涎腺恶性多形性腺瘤（MPA）、27例涎腺良性多形性腺瘤（PA）及12例正常涎腺组织中P-gp、GST-和TopoII的表达。结果：涎腺恶性多形性腺瘤组织中P-gp、GST-和TopoII表达阳性率分别为89.5%(17/19)、94.7%(18/19)和26.3%(5/19)；涎腺良性多形性腺瘤组织中P-gp、GST-和TopoII表达阳性率分别为88.9%(24/27)、37.0%(10/27)和25.9%(7/27)；正常涎腺组织中P-gp、GST-和TopoII表达阳性率分别为58.3%(7/12)、41.7%(5/12)和0%(0/12)。涎腺恶性多形性腺瘤中GST-表达阳性率高于良性多形性腺瘤，差异有统计学意义（P0.001）。结论：GST-在涎腺恶性多形性腺瘤的多药耐药机制中具有重要作用。检测P-gp、GST-和TopoII可为临床拟定化疗方案提供依据，也可作为判断涎腺恶性多形性腺瘤预后的参考。 关键词多药耐药；p-gp；gst-；topoii；涎腺；多形性腺瘤；免疫组织化学 1材料和方法 1.1标本 选择我院病理科xx年7月xx年9月存档涎腺恶性多形性腺瘤组织蜡块19例，病史完整。年龄范围1572岁，平均51.5岁，其中男性11例，女性8例，术前均未接受化疗和/或放疗。另27例涎腺良性多形性腺瘤，正常涎腺组织12例。以上病例组织标本连续切片，常规制成4张4m石蜡切片。取1张进行常规HE染色，余3张进行免疫组化染色。 1.2主要试剂 鼠抗人P-gp、GST-、TopoII单克隆抗体、过氧化物酶标记的链霉卵白素(SP)染色试剂盒和显色剂DAB试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。 1.3免疫组化染色 常规免疫组织化学SP法染色，DAB显色，苏木精复染，中性胶封片，显微镜下观察。用己知阳性组织切片作阳性对照，以PBS代替一抗作阴性对照。 1.4结果判定 细胞内出现棕黄色或棕褐色颗粒为阳性细胞。记分方法：无色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。实验切片在高倍(400)显微镜下观察，随机选取5个视野，各记数200个肿瘤细胞，再将阳性细胞所占的百分比打分：0分为阴性，1分为阳性细胞75%。染色强度与阳性细胞百分比乘积3分时为免疫反应(+)。 1.5统计学处理 应用SPSS16.0统计软件对数据采用四格表确切概率法及Spearman相关性检验进行统计学分析，P0.05被认为有统计学意义。 2结果 P-gP阳性表达定位于细胞膜或细胞质上，GST-阳性表达定位于细胞质和部分细胞核，TopoII阳性表达定位于细胞核。P-gp、GST-和TopoII在19例涎腺恶性多形性腺瘤、27例涎腺良性多形性腺瘤及12例正常涎腺组织中均有不同程度表达，其中恶性多形性腺瘤中GST-的阳性表达率明显高于良性多形性腺瘤，差异有统计学意义（P0.05) 19例涎腺MPA组织中P-gp和GST-的共表达率为47.4%（9/19），两者的表达呈正相关(r=0.5864,P0.05)。 3讨论 P-糖蛋白(P-gp)是腺苷三磷酸(ATP)依赖性药物外排转运体，属ATP结合盒(ATPbindingcassette，ABC)转运家族中最大的一个亚系1。P-gp属于单向药物外输蛋白质，在耐药癌细胞膜表面呈现高表达，最终导致化疗效果降低。另外，还可通过p-Akt途径介导P-gp的肿瘤多药耐药。 拓扑异构酶-（Topo-）通过催化DNA双链的断裂而改变空间结构，降低ATP与酶结合的能力，影响染色体分离、基因重组和转录及DNA损伤与修复。所以肿瘤对化疗药物的敏感性取决于Topo-的水平，Topo-表达水平下降，肿瘤对化疗药物的敏感性下降，耐药性增高。 本研究中19例涎腺恶性多形性腺瘤组织中仅有5例TopoII阳性表达，表达率为26.3%，与段树全等报道的直肠癌中66.7%(44/126)等其他肿瘤相比处于较低水平，提示涎腺恶性肿瘤细胞化疗药物靶点相对较少，使其对以TopoII为靶点的化疗药物有一定的耐药性。 参考文献 1冯慧玲,熊玉卿.与P-糖蛋白及MDR1基因关联的药物转运研究现状J.中国临床药理学杂志,xx,30(11):1062-1064. 2BaguleyBC.MultidrugresistanceincancerJ