尿液检验.ppt

尿液检验的临床应用,淄川区医院检验科 刘继龙 2019.1.30,1,淄 川 区 医 院 检 验 科,尿液分析必要性,尿液是具有重要意义的排泄物，尿液成分的变化可以反映泌尿系统及其他组织器官的病变，其检验结果的准确性直接关系到疾病的诊断与治疗。,2,淄 川 区 医 院 检 验 科,尿液分析必要性,诊断及鉴别泌尿系统疾病及邻近的生殖系统疾病外伤、炎症、结石、肿瘤、畸形、血管病变等 协助了解其他系统疾病心、脑、血管病、代谢性疾病（高血压、糖尿病肾损害，自身免疫疾病如狼疮性肾损害及变态反应病肾损害，寄生虫如滴虫病） 相关疾病肾损害：多发性骨髓瘤、乙肝 安全用药监护抗生素招致肾损害 职业病防护铅、汞、镉、铋等肾损害 健康人群保健体检 遗传代谢病筛查新生儿苯丙酮酸尿症等 肾上腺疾病等儿茶酚胺等,3,淄 川 区 医 院 检 验 科,尿液（常规）分析内涵 尿液分析(Urinalysis) 是尿液（Urina）和分析（Analysis）二词组合，相当于我国沿用的尿常规(Urine Routine)检验。 临床工作中相当于尿干化学加尿沉渣检验。,4,淄 川 区 医 院 检 验 科,物理检查 化学成分粗筛 有形成分细筛 脱落细胞学 生化、免疫学 微生物 其它,目视或自动分析外观,颜色,浊度 折射率仪,渗透压仪,尿干化学分析仪(手工,半自动或全自动),尿流式、层流式分析仪、计数板、 显微镜检查和染色技术 指标多样性，数据可靠，敏感性 特异性高,尿液系列分析,质谱分析、色谱分析等,5,淄 川 区 医 院 检 验 科,有形成分分析方法（简介）,传统离心法 不离心直接用血球计数池滴量尿定量计数法 标准镜检法 尿沉渣工作站 尿沉渣流式分析和染色技术 图像分析系统,6,淄 川 区 医 院 检 验 科,尿液现代检验的系列化概念,干化学成分定性筛选,物理检查 理学结果,细胞、管型形态确认,LIS系统 整体化报告,生化成分蛋白成分,其他成分检验,7,淄 川 区 医 院 检 验 科,1 传统离心法,方法 优点 简单,容易普及 缺点 不讲究留尿方式 不注明留尿时间 离心，弃去上清液,离心条件不一致 主观判别,不标准 报告方式用+,+,+，结果不统一 无可比性 为缺乏标准化的方法应该淘汰,8,淄 川 区 医 院 检 验 科,2 不离心直接用血球计数池滴量尿定量计数法,方法 ： 用Fuchs Rosenthals板,深度0.2 毫米 不离心，计数板上直接计数,换算成每微升的细胞个数 优点:简易,便于病程观察 缺点 不适合过筛 不适合于脓尿,血尿的治疗后观察 难以普及,9,淄 川 区 医 院 检 验 科,3 标准镜检法,方法 现行全国尿液检验标准化委员会CCCLS 10ml.400g离心，5min,取0.2ml,KOVA板和专用离心管 人工报告 XX个/L 优点:基层也可以开展 缺点 速度慢 主观识别需丰富经验，影响因素多 计数和结果均受主观因素影响,10,淄 川 区 医 院 检 验 科,4 尿沉渣工作站,方法:显微镜,计数板,电脑 优点 发出人工判读的定量报告 缺点 速度慢 管道易堵塞,清洗困难 产品差异大,方法和结果不统一 主观判断结果的所有影响因素都存在,11,淄 川 区 医 院 检 验 科,流式细胞技术宽线性保证结果准确可靠,线性范围宽0 60,000个/ul 保证尿液中细胞呈单个高速流经检测孔 分析的颗粒更多，精密度更高，敏感性更好 检测速度快,流式细胞技术,12,淄 川 区 医 院 检 验 科,半导体激光技术体积小，能耗低，经久耐用 根据细胞的大小和长度、核酸的含量、结构的复杂程度等信息进行分类 采用流式细胞技术，专用通道，专用试剂，提高细胞分析的准确性和精确性。,（二)核酸荧光染色技术,DNA/RNA荧光染色技术细胞本质鉴别，结果准确可靠,13,淄 川 区 医 院 检 验 科,DNA/RNA荧光染色技术,经典的DNA/RNA染色技术 对各有形成份的细胞膜、细胞核、细胞质进行特异性的核酸荧光染色，具有更高的特异性,全新DNA/RNA染色技术依细胞本质鉴别,细菌 (BACT),14,淄 川 区 医 院 检 验 科,标本采集一般要求,患者告知： 1、患者应处于安静状态，按平常生活饮食。 2、用于细菌培养的尿标本须在使用抗生素治疗前采集，以有利于细菌生长。 3、运动、性生活、月经、过度空腹或饮食、饮酒、吸烟及姿势和体位等可影响某些检查的结果。 4、清洁外生殖器、尿道口及周围皮肤，女性患者应特别避免阴道分泌物或经血污染的尿液。 5、如果采用导尿标本或耻骨上穿刺尿标本，一般应由医护人员先告知患者及家属有关注意事项。然后由医护人员进行采集，采集婴幼儿尿，应由儿科医护人员指导，用小儿专用尿袋收集。,15,淄 川 区 医 院 检 验 科,标本采集一般要求,明确标记： 在尿液采集容器和检验申请单上，应准确标记患者姓名、性别、年龄、留尿日期和时间、尿量、标本种类等信息，或以条形码做唯一标识。,16,淄 川 区 医 院 检 验 科,尿液标本种类、保存和防腐,种类：随机尿、晨尿、午后尿、中段尿、膀胱导尿、穿刺尿、12小时尿、24小时尿 2小时内完成送检，不能及时送检的置于2-8条件下保存 甲苯、甲醛、三氯甲烷、麝香草酚、盐酸、冰乙酸常用于尿液防腐,17,淄 川 区 医 院 检 验 科,检验项目： 可检测8/10/11/12/14项,白细胞（LEU，leukocyte） 尿胆原（URO，urobilinogen） 蛋白质（PRO，protein） 胆红素（BIL，bilirubin） 葡萄糖（GLU，glucose） 维生素C（VitC，vitamin C，抗坏血酸） 比重（SG，specific gravity） 酮体（KET，ketones） 亚硝酸盐（NIT，nitrite） 酸碱度（pH，power of hydrogen，pH值） 红细胞（BLD，erythrocyte，潜血、隐血） 微量白蛋白（MCA，micro albumin） 肌酐（CRE，creatinine） 钙离子（CA，calcium，尿钙）,18,干化学试带法,18,淄 川 区 医 院 检 验 科,一、酸碱度（pH）,酸碱度（pH）：采用pH指示剂法。用甲基红（pH4.66.2）和溴麝香草酚蓝（pH6.07.8）两种指示剂适量组合成为复合pH试剂模块，其呈色范围为pH4.59.0，颜色发生橙红、黄绿及蓝色变化。,19,淄 川 区 医 院 检 验 科,酸碱度（pH）,注意： 1、pH7.5时，以导致蛋白假阳性 2、应确保标本新鲜、容器未被污染。陈旧标本可因尿二氧化碳挥发或细菌生长使PH增高，细菌和酵母菌可使尿葡萄糖降解为酸和乙醇，则PH减低。,20,淄 川 区 医 院 检 验 科,酸碱度（pH）,临床意义 尿酸度检测主要用于了解机体酸碱平衡和电解质平衡情况，是临床上诊断呼吸性或代谢性酸碱中毒的重要指标。同时，可通过了解尿PH的变化来调节结石患者的饮食摄入，通过酸碱制剂的干预来帮助机体解毒或药物排泄。,21,淄 川 区 医 院 检 验 科,二、尿蛋白（PRO）,尿蛋白（PRO）：采用 pH指示剂蛋白误差法。试剂模块中主要含有酸碱指示剂溴酚蓝、枸橼酸缓冲系统和表面活性剂。在pH3.2时，溴酚蓝电离、带负电荷并释放H，带负电荷的溴酚蓝与此时带正电荷的蛋白质（白蛋白）生成复合物，导致溴酚蓝进一步电离产生更多的H，当超过缓冲范围时，指示剂发生颜色改变（黄、绿及蓝），变色程度与蛋白质含量成正比。,22,淄 川 区 医 院 检 验 科,尿蛋白（PRO）,注意： 1、主要检测白蛋白，对球蛋白的灵敏度仅为清蛋白的1/100-1/50，可漏检本周蛋白，故试带法不适用于肾脏疾病的疗效观察及预后判断。 2、由于血液、脓液、黏液或生殖系统排泌物，如白带、月经血、精液、前列腺液等混入尿液，可导致尿蛋白定性试验阳性。,23,淄 川 区 医 院 检 验 科,尿蛋白（PRO）,3大剂量滴注青霉素或用庆大霉素、磺胺、含碘造影剂易假阳性。 4、尿PH9，可假阳性如：服奎宁、奎宁丁、嘧啶等或尿中含聚乙烯、吡咯酮、氯已定、磷酸盐、季胺盐消毒剂等，尿呈强碱PH9.0尿PH3，可假阴性。最适尿PH5-6，故必要时可先调标本PH值。,24,淄 川 区 医 院 检 验 科,尿蛋白（PRO）,5、尿酸碱度与摄入食物有关，检查前1天应避免单一摄入 过多 肉类或蔬菜、水果，进食应均衡。 6、严格遵循规范操作，保证浸渍时间恰到好处，时间过短过长均可造成结果偏差。试带浸渍时间过长，反应颜色变深。易造成假阳性。试带浸渍时间过短反应不完全或浸渍时间过长膜块中试剂流失易造成假阴性。,25,淄 川 区 医 院 检 验 科,尿蛋白（PRO）,临床意义： 1生理性蛋白尿：功能性、体位性、偶然性、输入性、妊娠性。 2病理性蛋白尿 肾前性蛋白尿：如浆细胞病、血管内溶血性疾病、急性肌肉损伤、酶类增高性疾病。,26,淄 川 区 医 院 检 验 科,尿蛋白（PRO）,肾性蛋白尿 肾小球性蛋白尿见肾病综合征、原发（继发）性肾小球肾炎等 肾小管性蛋白尿见肾小管间质病变、重金属中毒、药物中毒、器官移植等 肾后性蛋白尿：泌尿、生殖系炎症反应如膀胱炎、尿道炎、前列腺炎、精囊等。泌尿系结石、结核、肿瘤等。泌尿系邻近器官疾病：如急性阑尾炎、慢性盆腔炎、宫颈炎、盆腔肿瘤等，泌尿系邻近器官炎症或肿瘤刺激。,27,淄 川 区 医 院 检 验 科,尿葡萄糖（GLU）： 采用葡萄糖氧化酶法。尿液中葡萄糖在试带中葡萄糖氧化酶的催化下，生成葡萄糖酸内酯和过氧化氢。在有过氧化物酶的情况下，以过氧化氢为电子受体使色素原（邻甲联苯胺、碘化钾等）氧化而呈色。色素原不同，呈色可为蓝色、红褐色或红色。,三、尿葡萄糖（GLU）,28,淄 川 区 医 院 检 验 科,尿葡萄糖（GLU）,注意： 1、尿标本容器残留如漂白粉、次亚氯酸等强氧化性物质或尿液比密过低可产生假阳性。 2、标本久置后葡萄糖被细菌或细胞酶分解，或尿液酮体浓度过高（0.4g/L）可导致假阴性。 3、当尿液在低葡萄糖浓度（14mmol/L）时，维生素C（500mg/L）与试带中的试剂发生竞争性抑制反应产生假阴性。 4、与半乳糖不反应，班氏试剂纠正。,29,淄 川 区 医 院 检 验 科,尿葡萄糖（GLU）,临床意义： 尿糖检测主要用于内分泌性疾病如糖尿病及其他相关疾病的诊断、治疗监测、疗效观察等。尿糖检测时应同时检测血糖，以提高诊断准确性。 血糖增高性糖尿:代谢性糖尿和内分泌性糖尿,30,淄 川 区 医 院 检 验 科,尿葡萄糖（GLU）,血糖正常性糖尿：又称肾性糖尿，因肾小管重吸收葡萄糖能力减低，肾糖阈减低所致。常见家族性糖尿、新生儿糖尿、妊娠或哺乳期 暂时性糖尿：进食大量碳水化合物、应激性糖尿 其他糖尿：原尿中乳糖、半乳糖、果糖、蔗糖的吸收率虽低于葡萄糖，但尿中含量并不高。当进食过多 或受遗传因素影响时，机体糖代谢失调，这些糖的血浓度增高而出现相应的糖尿。,31,淄 川 区 医 院 检 验 科,尿亚硝酸盐（NIT）：采用偶氮法。尿液中含有来自食物或蛋白质代谢产生的硝酸盐，如尿液中含有大肠埃希菌等具硝酸盐还原酶的细菌时，可将硝酸盐还原为亚硝酸盐，亚硝酸盐与芳香胺的重氮化反应形成重氮盐，随后发生偶联反应，形成红色重氮色素。 硝酸盐还原酶,四、尿亚硝酸盐（NIT）,32,淄 川 区 医 院 检 验 科,尿亚硝酸盐（NIT）,干扰因素及评价,33,淄 川 区 医 院 检 验 科,尿亚硝酸盐（NIT）,临床意义 主要用于尿路感染的快速筛检。与大肠埃希菌感染的符合相关性很高，阳性结果常表示有细菌存在，但阳性程度不与细菌数量成正比。NIT单一试验影响因素较多，结果阴性不能排除菌尿的可能，结果阳性也不能完全肯定泌尿系统感染，因此解释结果时可与白细胞酯酶尿沉渣镜检结果综合分析。 尿细菌培养法为确证试验。,34,淄 川 区 医 院 检 验 科,五、尿白细胞（LEU）,尿白细胞（LEU）：采用中性粒细胞酯酶法。中性粒细胞的酯酶能水解吲哚酚酯生成吲哚酚和有机酸，吲哚酚可进一步氧化形成靛蓝，或吲哚酚和重氮盐反应生成紫色重氮色素。 检测中性粒细胞酯酶,35,淄 川 区 医 院 检 验 科,尿白细胞（LEU）,假阳性： 发生率较高，主要见于尿标本被阴道分泌物污染，也见于尿中污染甲醛、在酸性尿环境中呈红色或深色的药物或食物，如高浓度胆红素、非那吡啶等。,36,淄 川 区 医 院 检 验 科,尿白细胞（LEU）,假阴性： 1、尿中以淋巴细胞为主，因此白细胞酯酶检测呈阴性如肾移植后发生排斥反应时. 2、见于尿白细胞少于10-25/微升；尿蛋白5g/L、葡萄糖30g/L、高比重尿液，尿中含维生素C、庆大霉素、头孢菌素等。正常人尿液PH4.5，草酸多以草酸盐的形式存在，如尿标本中加酸化剂使尿PH4.4，草酸盐被还原为草酸，则酯酶反应偏低或出现阴性。,37,淄 川 区 医 院 检 验 科,尿白细胞（LEU）,检测前标本应新鲜，若久置后白细胞破坏，可导致试带法与镜检结果差异过大。 临床意义 ：用于诊断泌尿系统感染。 应以镜检白细胞结果为准。,38,淄 川 区 医 院 检 验 科,六、尿酮体,尿酮体 亚硝基铁氰化钠法 尿中乙酰乙酸或丙酮与亚硝基铁氰化钠反应生成紫色化合物。亚硝基铁氰化钠法不与酮体中的羟丁酸成分发生反应。 注意事项 尿中含较多量肌酐、肌酸，高色素尿，尿中含酞、苯丙酮、头孢霉素等制剂、醛固酮还原酶阻断剂、布西拉明制剂等可导致假阳性。 标本收集保存不当，试带受潮失活等可致假阴性,39,淄 川 区 医 院 检 验 科,尿酮体,临床意义 尿酮体检查常被用于糖代谢障碍和脂肪不完全氧化疾病或状态的辅助诊断。强阳性试验结果具有医学决定价值，只有约10%体内仅有羟丁酸积聚的患者可产生阴性结果。,40,淄 川 区 医 院 检 验 科,七、胆红素,胆红素 根据偶氮偶合法的原理，在强酸介质中，结合胆红素与重氮盐发生偶联反应呈红色。颜色深浅与胆红素含量成正比。,41,淄 川 区 医 院 检 验 科,胆红素,假阳性：见于患者接受大剂量氯丙嗪治疗或尿中含有盐酸苯偶氮吡啶代谢产物时。 假阴性：尿维生素C浓度达1.42mmol/L和存在亚硝酸盐时，可抑制重氮反应。尿标本保存不当，尿胆红素遇光氧化。 尿蓝母产生橘红色或红色可干扰结果。 胆红素在强光下易变为胆绿素，应避光和新鲜尿标本检测尿胆红素。,42,淄 川 区 医 院 检 验 科,胆红素,临床意义 尿胆红素检测主要用于黄疸的诊断和鉴别诊断。 尿胆红素阳性见于胆汁淤积性黄疸、肝细胞性黄疸、而溶血性黄疸为阴性。,43,淄 川 区 医 院 检 验 科,八、原胆原,原胆原 根据偶氮结合法的原理，尿胆原在强酸条件下和重氮盐偶联形成胭脂红色素。,44,淄 川 区 医 院 检 验 科,原胆原,注意： 标本中含甲醛亚硝酸盐使检测灵敏度下降。 标本久置，尿胆原分解氧化成尿胆素，标本中大量胆红素引起色泽干扰。 碳青霉烯系抗生素，酚噻嗪类、磺胺类、普鲁卡因、氯丙嗪类药物可使尿色变化，尿胆原假阳性。,45,淄 川 区 医 院 检 验 科,原胆原,临床意义：有助于对黄疸进行诊断和鉴别诊断 指标 正常人 溶血性 肝细胞性 梗阻性 颜色 浅黄 深黄 深黄 深黄 尿胆原 1：20阴性 强阳性 阳性 阴性 胆红素 阴性 阴性 阳性 阳性,46,淄 川 区 医 院 检 验 科,九、隐血（血红蛋白）,血红蛋白 血红蛋白分子中含有血红素基团，具有过氧化物酶样活性，能催化过氧化氢作为 电子受体使色原氧化呈色，借以识别微量血红蛋白的存在，其呈色深浅与血红蛋白含量成正比。常用色素原有邻甲联苯胺和四甲替联苯胺等。,47,淄 川 区 医 院 检 验 科,隐血（血红蛋白）,注意 假阳性：尿中含对热不稳定酶、尿液被氧化剂污染或尿路感染时某些细菌产生过氧化物酶。 假阴性：尿中含大剂量维生素C或其他还原物质、甲醛过量、大量亚硝酸盐（反应延迟）,48,淄 川 区 医 院 检 验 科,隐血（血红蛋白）,临床意义 尿中出现HB是血管内溶血的证据之一，因此尿HB测定有助于血管内溶血疾病的诊断。 引起溶血的疾病有红细胞破坏，生物因素，动植物所致溶血，微血管性溶血性贫血，服氧化剂药物，免疫因素等。,49,淄 川 区 医 院 检 验 科,十、维生素C,维 生素C 还原法：维生素C具有1，2-烯二醇还原性基团，在酸性条件下，能将试带膜块氧化态粉红色的2，6-二氯酚靛酚还原为无色的2，6-二氯二对酚胺。呈色反应由绿或深蓝至粉红色变化。呈色深浅与维生素C含量成正比。,50,淄 川 区 医 院 检 验 科,维 生素C,干扰因素 假阳性见于龙胆酸、L-多巴或尿PH大于4.0时的内源性酚及巯基化合物、半胱氨酸和硫代硫酸钠等。 假阴性：碱性尿液（因维生素C易分解）。 当试带法酮体阳性、葡萄糖阴性，注意是否因维生素C浓度过高的影响。,51,淄 川 区 医 院 检 验 科,维 生素C,临床意义 尿维生素C水平与外源性摄入量有极大相关性。尿液维生素C浓度增高，可对隐血/血红蛋白，胆红素，葡萄糖，亚硝酸盐试带反应产生严重的负干扰。,52,淄 川 区 医 院 检 验 科,十一、比重,比重 采用多聚电解质离子解离法。尿比密偏高时，尿液中所含盐类成分较多，试带中电解质多聚体释放出H+增多，溴麝香草酚蓝为分子型，呈现黄色；尿比密偏低时，尿液中所含盐类成分较少，试带中电解质多聚体释放出H+减低，溴麝香草酚蓝为离子型，呈现蓝色。,53,淄 川 区 医 院 检 验 科,比重,假阳性见低PH值和含超过500mg/dl的尿蛋白时。 假阴性：碱性尿液,54,淄 川 区 医 院 检 验 科,十二、管型,当尿液中出现病理管型时，肾病已经达到了一定的程度。由于全人工操作存在一定的漏检。不能用于慢性肾病早期筛查。,55,淄 川 区 医 院 检 验 科,十三、红细胞均一性,56,淄 川 区 医 院 检 验 科,红细胞形态信息 (根据红细胞前向散射光强度直方图判断) (不均一小红细胞) = 提示红细胞源于肾小球 Isomorphic 或Normocytic ? (正常均一红细胞) = 提示红细胞非来源于肾小球 Mixed 或Non-Classified? (混合型) = RBC前向散射光直方图显示出一个混合型细胞分布,UF-100 屏幕显示结果,红细胞均一性,57,淄 川 区 医 院 检 验 科,（1）尿液干化学测定结果与传统湿化学法存在差异。 （2）尿液干化学试带检查仅是一个过筛手段，蛋白质、白细胞、红细胞、亚硝酸盐中任一项阳性，必须进行人工镜检。 （3）尿液干化学测试结果应与理学、显微镜检查结果相结合，互相印证才能为临床提供有价值的信息。 (4)尿蛋白主要检测白蛋白，对球蛋白可漏， 大剂量滴注青霉素呈假阳性,尿液干化学测定结果分析注意,58,淄 川 区 医 院 检 验 科,（5）肾移植病人发生免疫排斥时尿液中出现大量淋巴细胞，但由于其胞质无中性粒细胞酯酶，干化学试带法检测白细胞阴性。 （6）白细胞检测时出现干化学试带法“阳性”而镜检“阴性”的结果，可能与尿液在膀胱贮存时间过长、中性粒细胞中被破坏后其酯酶释放到尿液中有 （7）红细胞出现此类结果可能是因为红细胞在尿液中被破坏，无完整红细胞（血红蛋白释放），或尿液中含高活性不耐热的触酶。对于后者，可将尿液煮沸冷却后再测试，验证和排除“假阳性”结果。,尿液干化学测定结果分析注意事项,59,淄 川 区 医 院 检 验 科,确证实验 干化学法定位于“过筛试验”。 1.尿蛋白用磺基水杨酸法确证； 2.尿葡萄糖用葡萄糖氧化酶定量法确证； 3.尿胆红素用哈里逊（Harrison）法确证； 4.尿红细胞、白细胞、 管形用显微镜确证。,60,淄 川 区 医 院 检 验 科,尿生化检测是目前临床上最常用的方法之一，在一定程度上反映了肾小球滤过和肾小管重吸收功能，定量测定有利于泌尿系统疾病及一些全身性疾病的筛查和愈后观察。,尿液生化检测,61,淄 川 区 医 院 检 验 科,临床应用： 蛋白尿已作为肾脏功能损害的标志物。当血中的蛋白质出现在尿中，是由肾小管的重吸收功能障碍或肾小球滤过功能受损引起。肾后性的蛋白尿是由感染，出血或恶性疾病导致。生理性的蛋白尿是由于发热，剧烈运动或紧张引起。,1.尿总蛋白（UTP）尿液生化检测,62,淄 川 区 医 院 检 验 科,2.尿肌酐（CRE）,基础信息： 主要来自肌肉代谢，正常情况下经由肾小球滤过后随尿液排出体外。 临床应用： 尿肌酐的测定是辅助评价肾脏功能的必要指标。 尿肌酐和尿蛋白的排泄受相同内环境因素的影响，随机测定MA/尿CRE值与24小时蛋白尿的临床意义具有良好的相关性，能更方便准确的诊断出早期肾损伤 尿肌酐降低：见于肾脏功能不全、甲状