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文档简介
GoodLook-2000型薄层色谱成像系统用 户 手 册(V2.1版)上海科哲生化科技有限公司目 录一、简介11. 关于GoodLook-200012. 安全规程2二、安装31. 必需组件32. 拆箱43. 仪器外观与结构54. 薄层成像系统软件安装6三、软件界面介绍131. 主界面132. 图像处理142.1图像处理界面152.2 数据管理界面203. 用户信息234. 图像获取245. 相似度比对286. 图像比对297.指纹图谱30四、日常操作与维护351. 开机程序352. 操作方法353. 关机程序364. 日常保养36五、常见问题及解决37六、附录381. 含量计算方法382. 售后服务41一、简介1. 关于GoodLook-2000非常感谢您使用上海科哲生化科技有限公司的产品。GoodLook-2000型薄层成像系统整合了薄层图像处理系统与中药指纹图谱专家系统、LIMS实验室信息管理系统的功能,符合GLP/GMP规范要求,是中药指纹图谱分析的最优选择。GoodLook-2000型薄层成像系统主要用于:(1)中药企业薄层色谱板检视拍照存档比对;(2)中药新药申报的高质量薄层照片资料制作;(3)中药薄层图像指纹图谱方法建立与质量控制;(4)指导药品合理勾兑,调节含量比例保持一致性。2. 安全规程注意:在设备使用前,请必须仔细阅读下面的安全规程,以免使用过程中出现意外!勿倾斜或倒置!上方不可置重物!勿放置在高温、高湿或有腐蚀性气体的环境中!勿自行拆卸!在仪器后表面所贴的两个标签为一次性揭底留字激光防伪标签,如 破损或撕下,厂方不负维修责任!紫外线强烈,切勿用肉眼从舱门直视光源! 注意安全!严禁用金属物品伸入机箱! 仪器不使用时,请拔除相机的USB连接线!除厂家书面授权,严禁擅自拆装!否则厂方不负任何责任!所有操作均需严格按照操作规程进行二、安装1. 必需组件除了GoodLook-2000型薄层成像系统及其配件,用户还需要以下设备来配置完整的色谱系统:l 用于安装色谱工作站成像系统软件的电脑,建议配置内存512M、CPU1.8GHz以上,显示器分辨率1024*768,最低16位真彩色,具有光驱、USB2.0接口,使用Windows XP或Win7 32位系统l 薄层板l 点样针或定量毛细管(可选用本公司点样仪系列产品)l 展开缸(可选用本公司展开仪系列产品)l 衍生用喷雾器(可选用本公司喷雾器系列产品)l 加热平台,在需要时选用(如选用本公司点样仪系列产品则无需配备,自带加热平台)l 排气系统如通风橱,衍生喷雾时需要使用2. 拆箱GoodLook-2000型薄层成像系统主机和附件用同一箱子运输。小心拆开所有部件,确认装箱单上的所有物品都包括在内,并且完好无损。保留所有的纸箱和包装材料以备日后使用。GoodLook-2000型薄层成像系统应包括以下附件:l GoodLook-2000型薄层成像系统主机l 佳能相机l GoodLook-2000型薄层成像系统用户手册l 安装光盘及软件锁;l 适配电源(已装在仪器内);l 相机数据线l 三相电源线l USB数据线l 固定架l 保险丝l 组合电脑一台(含显示器)GoodLook-2000型薄层成像系统被妥善交付运输,确保到达用户手中时包装完好,如有任何损坏请立即与科哲公司联系。3. 仪器外观与结构 1. 载物台 2.电源开关 3.通讯口 4.电源插座图2-1 GoodLook-2000型薄层成像系统结构示意图数据线与电源线连接:将USB数据线一端插入仪器侧面的插座,另一端与计算机USB口相连。电源线接口为D型插头,缺口方向对准仪器侧面的电源接口插入。相机数据线连接:将相机的USB数据线一端插入相机的插孔,另一端插入计算机的USB接口。拍摄室中包括灯箱和载物台。灯箱: 用于提供254nm、365nm和白光光源。载物台:用于摆放薄层板的平台。勿猛力打开或关闭,拍摄过程中请保持舱门处于关闭状态,避免杂散光对拍摄结果的影响。4. 薄层成像系统软件安装安装GoodLook-2000型成像系统双击光盘根目录下的“autorun.exe”,弹出如下所示的窗口,其中数据线驱动、软件锁驱动、应用软件和相机软件为必装软件。图2-2l 软件锁驱动:为配件所带的软件锁硬件驱动,因生产批次不同,如为免驱动软件锁则跳过此步骤直接进入数据线驱动安装。1) 单击“next”图2-32) 选择“I accept the license agreement”后单击“next”图2-43) 单击“next”图2-54) 软件锁安装正在进行图2-65) 单击“Finish”完成软件锁的安装图2-7l 数据线驱动:为仪器和电脑桥接线的驱动,如驱动未安装成功软件将无法正常使用1) 点击“下一步”图2-82) 安装软件正在进行图2-93) 单击“完成”,完成驱动的安装图2-10l 安装相机安装控制软件,方法如下:点击安装光盘根目录的“相机安装控制软件”文件夹,双击“setup.exe”。图2-11在出现的对话框中,选择【自定义安装】。图2-12注:建议不要选择【简易安装】,因为简易安装会把默认的所有功能都安装到计算机中,使你无法选择你所要安装的功能。而在实际使用中有许多的功能都用不到,这样就给计算机带来资源上的浪费,所以,建议不要选择【简易安装】。单击【确定】。图2-13选择需要安装的产品列表:此处只需要选择第二项(EOS Utility),其它都不勾选,单击【下一步】按钮。图2-14注:只选择EOS Utility的原因同上,在实际使用中不需要其他功能,若全部安装会给计算机带来资源上的浪费。同时不要改变其安装路径,若改变,会导致软件无法正常打开。若对此给您带来安装不便,我们表示非常抱歉。单击【安装】按钮。图2-15单击【是】按钮。图2-16正在安装。图2-17安装结束,单击【下一步】按钮。图2-18完成安装,单击【完成】按钮。图2-19三、软件界面介绍1. 主界面包含文件,用户信息,图像获取,视图,辅助分析,窗口和帮助菜单(图3-1)。图3-1主界面l 文件系统新建:新建一个图像处理的窗口,用于图像的处理,图像数据的编辑以及含量计算等功能。可新建多次,即软件能够同时处理多个图片。退出:退出当前的软件环境。l 用户信息用户信息:设置当前用户的详细信息,用于报表打印和数据导出功能。l 图像获取图像获取:打开一个图像获取的窗口,用于控制灯源。打开相机:打开相机的控制软件。l 视图工具栏:用于显示/隐藏界面的工具栏。状态栏:用于显示/隐藏界面的状态栏。界面风格:用于设置当前软件界面的风格。l 辅助分析相似度比对:打开一个窗口,用于不同样品间的相同物质的相似度值的比较。图像比对:打开一个窗口,用于获取样品间的不同RGB值下的峰型图比较。指纹图谱:打开指纹图谱的操作界面。l 窗口排列当前的窗口显示,并提供当前多窗口的管理。l 帮助帮助:打开帮助文档,内容等同于用户使用说明书的软件操作部分。关于:显示当前软件的版本信息。2. 图像处理工具栏 包含对图片的基本的处理,以及获取图像上的斑点,并对斑点数据进行数据管理以及含量计算功能,如图3-2和图3-3。明暗调整预览区域状态栏显示区域 图3-2 图形处理界面图3-3 数据管理界面2.1图像处理界面包含工具栏,显示区域,预览区域,明暗调整,状态栏。l 工具栏:包含一系列对图像处理的功能按钮,如图3-4所示。图3-4工具栏1) 打开:弹出打开文件对话框,允许软件打开一个后缀名为.jpg或是.bmp的图像文件,并将该图像文件加载至显示区域,然后重置所有的数据。2) 保存:保存当前在显示区域的图像,保存格式为.bmp的图像文件。3) 打印:单击打印将弹出如图3-5所示的窗口。其中,标准打印是打印自定义打印的所有模块,自定义打印分为5个部分,用户信息代表在主窗口的用户信息窗口所输入的有关用户的详细信息,图像来源代表用户在单击打开按钮时所打开的图像,处理后图像代表用户在对打开的图像所进行一系列操作后得到的显示区域内的图像,样品图像代表每个样品所产生的峰型图,图像数据代表当前已选择的斑点数据。单击确定后将弹出打印报表,单击取消则取消当前的打印。图3-5打印选择4) 剪切:单击此按钮后,鼠标在显示区域将呈现十字模式,鼠标左键在将要剪切的图像的起点单击,然后向其右下角拖动,直到要选取图像的结束点松开鼠标左键,完成剪切操作。在鼠标移动的过程中显示区域将会显示一个矩形的虚线框,如图3-6(建议进行完此操作之后将图片进行保存后再处理)。图3-6图像处理5) 反色:当图像的背景颜色高于斑点颜色时,需要对图片进行反色操作。注:如不反色将无法正常计算出斑点数据。6) 平滑:对当前图像进行光滑操作,消除图像中的突出杂点。注:此操作可能使得图像斑点的边缘显得比较模糊。7) 锐化:对图像进行锐化操作,突出斑点。注:如果用户连续快速的单击此按钮,可能导致软件卡死。8) 变形校正:对图片做变形校正,校正展开时样品产生的泳道倾斜。单击此按钮后,然后依次在图像的左上,右上,左下,右下四个角用鼠标单击选择校正的位置,再次单击校正按钮,软件将按照所设置的校正系数进行图像的校正,如图3-7所示的四个小黑圈即校正的位置。图3-7变形校正9) 文字标注:对图像上的斑点进行文字标注说明。单击此按钮,鼠标在显示区域右键单击,此时弹出的菜单栏如图3-8所示。再次单击文字标注则停止标注功能。注:由于此功能涉及到图像像素的操作,故而做完此功能后不能进行图像的放大或缩小,旋转功能,并且以加入文字标注的图像再次打开时,加入的文字将不能在进行编辑而且会影响斑点的数据。图3-8添加文字标注添加:单击后弹出添加对话框,在框里输入文字后单击OK按钮将确定此次输入。字体设置:设置要添加文字的字体,包含格式,加黑,倾斜和大小。字体颜色:设置要添加文字的颜色,建议选择的颜色不要和图片的背景太接近,否则无法正常区分。移动鼠标到任何一个文字标注处,鼠标右键单击,将显示如图3-9所示,单击删除,则将删除图片上选中的文字标注。图3-9删除文字标注10) 恢复:取消对图像所做的修改,恢复成原始图像,即打开时的图像。11) 旋转:当图像中的点纵向不垂直时,需要进行此操作,此功能包括90度、180度、270度、任意角度四种旋转方式。方法为选择工具条中的旋转下拉框,其中选择任意角度时将弹出旋转角度的对话框。12) 显示比例:当图片过大超出显示区域时,或是图片过小无法正常进行编辑时,需要进行此操作,显示比例10%300%可供选择。13) 增大:增大显示比例,每次增大10%。14) 缩小:缩小显示比例,每次缩小10%。15) 原点:设置图片在衍生时的原点位置,单击此按钮,鼠标移动至显示区域后左键单击,将在图片中添加原点,如图3-10。16) 前沿:设置图片在衍生时的前沿位置,单击此按钮,鼠标移动至显示区域后左键单击,将在图片中添加前沿,如图3-10。注:此操作应该在设置原点后进行,并且前沿设置不能低于原点设置。17) 设置:当用户选取图像后无法正常出现峰数据时需要用到此功能,单击后将弹出最小峰高和最小峰宽的设置,默认的值是(5,5)。l 显示区域:用于显示当前的图片,并获取图片的斑点数据。1) 右键菜单:其所有功能介绍与工具栏的介绍一致。2) 数据获取:在设置图片的原点和前沿完成后,鼠标左键在图片上按下,然后拖动鼠标在图片上移动,此时图片会显示矩形的虚线框,在将要选取分析区域的结束点松开鼠标左键,数据预览区域将显示此次所选取图片内的斑点数据,如图3-10。注1:选取分析区域时,鼠标拖动方向应为从左上到右下,否则软件无法识别。注2:如果选取分析区域时鼠标拖动到原点和前沿外,将导致数据预览的RF值呈负数显示。注3:如果在确定选取区域内有斑点数据并且是将要分析的斑点,但是在预览里没有分析出该斑点数据,请用户手动更改工具栏里“设置”按钮的最小峰高和最小峰宽的值,并重新选择分析区域。注4:显示区域所显示的图片必须在显示区域内,如果图片超出显示区域,则在分析时会出现错误。注5:如果用户在选择多泳道分析时出现泳道数据明显不正常,这是由于选取的区域过大,导致分析误差所致,请用户缩小选择区域即可。图3-10图像处理l 预览区域:用于显示当前所选分析区域的数据和峰型。1) 数据预览:显示当前所选分析区域的数据,包含序列,点位,X坐标,Y坐标,RF值,积分值和面积百分比。用户每次选择分析区域都会刷新数据预览所显示的数据。 操作1:鼠标左键单击任何一个数据预览的单元格,显示区域将会显示当前选择点的在图 像中的具体位置,如图3-11所示,矩形框的大小和所判峰的实际起峰降峰位置对应。图3-11预览区域操作2:鼠标右键单击表格,出现如图3-12所示的菜单,单击样品确定按钮,则数据预览的所有数据将导入到数据管理的界面(注:样品确定按钮的单击选项与选中的单元格无关,例如表格显示五种样品,但是用户只选中一个单元格并单击了样品确定按钮,此时也会导入五种样品的数据)图3-12数据表格2) 峰型预览:显示当前所选分析区域的峰型(即使不添加原点前沿,峰型预览也可显示当前所选区域的峰型) 横向:显示分析区域延横向的峰型数据。 纵向:显示分析区域延纵向的峰型数据。l 明暗调整:调整显示区域所显示图片的对比度和亮度。1) 亮度:拖动亮度调节的滑块可进行图片的亮度调整,初始值为50%。向右拖动增大亮度,向左拖动减小亮度。2) 对比度:拖动对比度调节的滑块可进行图片的对比度调整,初始值为50%。向右拖动增大对比度,向左拖动减小对比度。l 状态栏:用于显示当前图像的信息,包括鼠标移动时的X和Y坐标(以图像的左上角为原点计算),RF值(只有在添加原点和前沿后才会显示),图像的大小,以及图像的在硬盘上的位置,如图3-13所示。图3-13状态栏2.2 数据管理界面包含数据管理区域,功能区域,数据图像区域,原图显示区域。原图显示区域功能区域数据图像区域数据管理区域图3-14数据管理界面l 数据管理区域:所有的数据均为在图像处理的数据预览单击样品确定后所得。数据管理的数据,只有左边第一列的选中按钮,样品序列,浓度,点样量,类型和备注可供更改,数据管理的其他数据不提供更改选项。1) 样品删除:鼠标右键单击将要删除的斑点所处的单元格,此时出现如图3-14所示的右键菜单,单击删除则完成该斑点的删除,软件会自动重新计算该序列中其他物质的面积百分比,并更改点位。2) 样品数据预览:鼠标左键单击将要预览的样品数据,则在数据图像区域将显示该样品的峰型数据,并且在原图显示区域显示该样品在图片中所处的位置。3) 含量计算:将要计算含量的样品最左边单元格的复选框选中,即代表当前样品的数据将要参与到含量计算之中。4) 样品序列:双击将要改动样品序列的名称的单元格,输入将要改动的名称即可。5) 浓度:输入含量计算时的浓度,只有当类型选择为标准品时该浓度输入才为有效值,若类型为样品则为依据标准品计算出的浓度。6) 点样量:输入含量计算时需要用到的样品和标准品的点样量。7) 类型:更改当前选中单元格的样品的类型,只有标准品(已知浓度)和样品(未知浓度)可选。8) 备注:双击将要改动样品备注的单元格,输入该样品的备注信息即可。l 功能区域提供用户打开和保存当前数据管理区域的数据,导出数据管理区域的数据(Excel格式),进行含量的计算,标准方程的查看。1) 数据打开:打开用户保存的数据,后缀名为“.scan”。2) 数据保存:保存当前数据管理区域的数据,同时保存该数据分析所使用图片的位置注:如果在数据保存后改变此图片的保存位置,将导致已保存的数据打开失败。3) 数据导出:将当前的数据导出Excel格式,方便用户使用Excel进行后处理。注:请确保安装使用的计算机已安装office软件,如未安装Excel软件,将导致此功能调用失败。4) 含量计算:计算当前在数据管理区域所选择将要计算的样品(即保证数据管理区域的最左边一列的复选框选中,并填写了对应单元格的浓度和点样量)。注:含量计算需要使用2个以上的标准品(不同体积或不同浓度)。5) 标准方程:单击后将弹出如图3-15所示的窗口,显示当前的线性方程和相关系数注:此按钮只有在含量计算后才可正常使用。图3-15标准方程l 数据图像区域显示当前在数据管理区域选中样品的峰型数据,无法编辑,并会随着选中样品的不同而进行显示的更改。l 原图显示区域显示当前在数据管理区域选中样品在原图中的位置,无法编辑且图片会自动进行缩放,如图3-16所示,其中的红色矩形框为当前选中的样品。图3-16原图显示区域3. 用户信息用户信息用于输入用户相关信息及样品信息。在用户信息窗口中可根据需要输入相关信息,包括“测试人”、“测试时间”、“测试地点”、“仪器名称”、“仪器编号”、“报告编号”、“标准品名称”、“样品名称”、“环境温度”、“环境湿度”、“薄层板类型”、“展开剂”、“显色剂”、“备注”。填写完毕,点击【刷新】按钮将清空用户所填数据,点击【确定】按钮将保存用户所填数据,如图3-17。图3-17用户信息窗口4. 图像获取包含灯源的控制和相机的控制。注:窗口首次打开时会自动进行连接,连接失败则会显示如图3-18所示的再次连接按钮。图3-18图像获取窗口l 灯源控制:单击图标则可控制该灯源的开关。其中图标表示已打开,而表示已关闭;l 打开相机控制单击“打开相机控制”按钮,进入相机控制窗口,如图3-19所示。图3-19 GoodLook-2000型薄层成像系统相机控制软件1) 选择第三项“相机设定/遥控拍摄”选项,打开相机控制主面板,如图3-20。图3-20 相机控制主面板图片中的“9999”代表当前存储位置的剩余存储量。通过点击或点击面板下方的“首选项”,在弹出的对话框中设置“目的文件夹”选项来指定拍摄照片的存储位置。右上角的为快门键,按下此键可拍摄照片。图3-21 相机设定界面首选项图3-22 照片存放位置选择2) 在图3-23相机拍摄参数设置中,首先需要将相机机身上的模式拨盘旋转为M(手动)模式。拍摄参数分别为“快门速度”、“光圈大小”、“曝光补偿”、“ISO”、“白平衡”、“对焦模式”、“照片品质”。要分别进行设置时,双击该项即可设置。图3-23 相机拍摄参数设置:此处显示的是照片的曝光时间,双击此处可以通过上面的按钮进行曝光时间的调节。不同光源曝光时间设置范围:白光范围1/501/100,通常情况下设定在1/70附近;254nm范围1/101/50;365nm设定在1附近。:表示设定的光圈的大小,双击可以通过显示的按钮调节光圈大小,在仪器安装时,光圈会设定好,用户无需自己调节。:表示曝光率,光源选择白光时曝光率设定范围为200400,选择365nm光源时曝光率设定范围为8001600。3) 在图3-20相机控制主面板中,单击“实时显示拍摄”,可以打开实时显示窗口,根据相机拍摄参数设置,可以即时的看到拍摄效果,如图3-24。图3-24 实时预览窗口4) 在窗体的右侧,可以设置“白平衡”,调节对焦,预览当前亮度情况或RGB色彩情况,点击“试拍摄”可以观察当前照片效果,面板下侧可设置旋转、显示或隐藏网格线、放大,如图3-25。图3-25 试拍摄窗口注:在实时拍摄时,应将对焦框(白色矩形框)置于要拍摄的点上,单击右上侧的对焦按钮,分别为(左粗调、左中调、左微调、右微调、右中调、右粗调),进行对焦结束后,单击主面板(图3-20)上的快门按钮进行拍摄。5. 相似度比对包含功能区域,显示区域,数据区域,状态区域,如图3-26所示。功能区域数据区域显示区域状态区域图3-26相似度对比l 功能区域:1) 调整显示比例:选择相似度比对窗口工具栏中的“显示比例”下拉框,调整显示比例。2) 打开图像:点击相似度比对窗口的工具栏中的“相似度比对”按钮,打开指定位置的图像(格式为BMP/JPEG),点击该按钮时重置所有数据。3) 原点:具体设置等同于图像处理的原点设置。4) 前沿:具体设置等同于图像处理的前沿设置。5) 选择比较品1:获取当前选择的区域的斑点数据并将其填充至数据区域的比较品1信息。6) 选择比较品2:获取当前选择的区域的斑点数据并将其填充至数据区域的比较品2信息。7) 计算相似度:点击相似度计算按钮,计算相似度。注:需要比较品1和2的序列个数相同。8) 刷新:清空比较品1和2信息框内的所有值。l 显示区域:斑点信息选取操作:等同于图像处理的斑点信息获取的操作。l 数据区域:显示当前已选择的比较品1和比较品2的信息。包含点位,X坐标和Y坐标,RF值,积分值和面积百分比;l 状态区域:显示当前鼠标移动的X和y值,以显示区域的左上角为原点,并显示打开图像的位置。6. 图像比对包含显示区域,数据区域和状态区域,如图3-27。状态区域数据区域显示区域图3-27图像对比l 显示区域1) 打开图像:加载一张分析图片到显示区域。2) 显示比例:当前图片在显示区域的大小;可调范围为10%300%。注:要保证图片不能超过显示区域边界。3) 数据获取操作:见图像处理的数据获取操作l 数据区域1) 用户每次在显示区域框选分析区域时,在数据区域都会显示当前的峰型图,峰型图分为纵向和横向两种模式,对应每种模式有灰度(0.299R + 0.587G + 0.114B),R值(红色分量),G值(绿色分量),B值(蓝色分量)。2) 用户单击按钮“”可把当前显示的峰型图加载到图像框中,单击“”则清空所有峰型图。层叠显示和平铺显示如图3-28和3-29所示。 图3-28层叠显示 图3-29平铺显示l 状态区域显示当前鼠标移动的X和Y值,以显示区域的左上角为原点,并显示打开图像的位置。7.指纹图谱在主控界面点击“指纹图谱”按钮,进入指纹图谱系统,显示如下图。图3-30 指纹图谱分析窗口l 获取图谱:用户可以通过两种途径获取图谱,从图像中获取分析图谱和从KH-3000的扫描文件中获取图谱。1) 从图像中获取分析图谱步骤:进入“从图像中获取分析图谱”窗口打开图像设置原点前沿选择分析样品填写样品信息添加图谱a. 进入“从图像中获取分析图谱”窗口:点击指纹图谱窗口上方的工具栏中的“从图像中获取分析图谱”按钮,显示“从图像中获取分析图谱”窗口,如下图所示。图3-31 从图像中获取分析图谱窗口b. 打开图像:点击窗口上方的“打开图像”按钮,打开图像。c. 设置原点前沿:点击“原点(前沿)”按钮,将鼠标移动到图像中预选择的原点/前沿位置,左键单击。d. 选择分析样品:在图像中左键拖动选择要分析的样品区域,选择时要包括原点前沿。e. 填写样品信息:在窗口右上方的样品信息区域中填写样品名称、测试板来源、处理方法等样品信息。f. 添加图谱:点击工具栏右方的“添加到对比图谱1(添加到对比图谱2)”按钮将当前的分析图谱添加到对比图谱中去。2)从KH-3000的扫描文件中获取图谱步骤:进入“打开KH-3000的扫描图谱”窗口打开薄层扫描数据选择分析样品设置原点前沿填写样品信息添加图谱a. 进入“打开KH-3000的扫描图谱”窗口:点击指纹图谱窗口上方的工具栏中,“打开KH-3000的扫描图谱”按钮,显示“打开KH-3000的扫描图谱”窗口,如下:图3-32 打开KH-3000的扫描图谱窗口b. 打开薄层扫描数据:点击窗口上方的“打开薄层扫描数据”按钮,打开已保存的薄层扫描文件。c. 选择样品:点击工具栏中的样品选择下拉框,在弹出的下拉框中选择要分析的样品,如下图。图3-33 选择样品d. 设置原点前沿:首先点击“原点(前沿)”按钮,接着将鼠标移动到图谱中,点击鼠标。e. 填写样品信息:在窗口右上方的样品信息区域中填写样品名称、测试板来源、处理方法等样品信息。f. 添加图谱:点击工具栏右方的“添加到对比图谱1(添加到对比图谱2)”按钮将当前的分析图谱添加到对比图谱中去。l 处理图谱步骤:进入“指纹图谱分析”窗口选择处理功能处理图谱手动分峰校正指纹峰、次要峰a. 进入“指纹图谱分析”窗口:点击指纹图谱窗口上方的工具栏中的“指纹图谱分析”按钮,显示“指纹图谱分析”窗口,如下图。图3-34 指纹图谱分析b. 选择处理功能:点击“处理”按钮,激活处理功能按钮,如下图。图3-35 处理图谱c. 处理图谱:包括图谱归一化、基线校正、剪切、图谱翻转、光滑等功能。 归一化:此功能用于将图谱数据进行归一校正,其横向归一标准为原点前沿,纵向归一标准为最大量程。计算相似度前最好进行“归一化”处理。 基线校正:此功能用于处理基线不平,校正基线。 图谱翻转:用于处理倒峰情况。 光滑:此功能用于处理图谱数据中的杂散峰。d. 手动分峰此功能应与自动分峰配合使用,在设置最小峰高,最小峰宽并自动分峰之后,如感觉自动分峰不当,可使用添加峰、删除峰、修改峰功能手动分峰。e. 校正指纹峰、次要峰注:自动分峰功能会将一些积分值较小的峰自动分到次要峰中,如设定不当用户可使用指纹峰、次要峰功能,重新指定。方法为:选中要重新分类的峰,点击“指纹峰(次要峰)”按钮。l 分析图谱步骤:选择计算因子设置权重计算图谱相似度a. 选择计算因子在计算因子标示旁边选中相应的计算因子,默认的为积分值和RF值,如下图:图3-36 计算因子、权重b. 设置权重权重分为计算因子的权重和指纹峰次要峰的权重,为必须填写的一项,如不填写,则为默认值0。c. 计算图谱相似度:点击“计算图谱相似度”按钮,显示计算的相似度。l 保存图谱信息及数据点击窗口上方的“保存指纹图谱”按钮,保存指纹图谱的样品信息,样品数据。四、日常操作与维护1. 开机程序 首先确认薄层成像系统与电脑已处于连接状态(相机USB口连接线和系统控制USB口连接线),打开GoodLook-2000薄层成像系统软件,然后打开GoodLook-2000薄层成像系统主机电源,软件将自动连接。2. 操作方法在开始仪器测试之前请先进行样品的点样、展开和衍生工作。将待测薄层板放入薄层成像系统的载物台,载物台上有相应的卡槽,请将薄层板尽量放正以免照片倾斜,关好仪器舱门。进入GoodLook-2000型薄层成像系统,点击主窗口上方的“用户信息”按钮,进入用户信息窗口,根据需要填写用户信息。点击主窗口左方工具栏中的“图像获取”按钮,进入“图像获取”窗口,然后根据需要选择光源,点击相应的光源控制按钮,打开光源,接着单击“打开相机控制”按钮,进入相机控制软件,单击“相机设定/遥控拍摄”按钮,对相机进行实时操作并拍摄。拍摄结束后可根据需要对图像进行旋转、反色处理、光滑、锐化、调节亮度、调节对比度、设置文字标注等。设置原点前沿,选择分析区域,最后查看分析数据,确定无误后,点击“样品确定”按钮。单击数据管理窗口的选项卡,进入含量计算窗口,选择标准品(样品),输入点样量和标准品浓度,最后点击“含量计算”按钮。点击数据管理窗口的“保存(*.scan)”按钮,将薄层图像的用户信息、图像信息、分析数据保存到指定的位置。点击主窗口的“打印”按钮,选择需要的打印方式后生成报表打印。3. 关机程序拍摄结束后,将薄层板从薄层成像系统中取出,关闭舱门,关闭薄层成像系统主机电源,非联机状态下工作站仍然可以处理图像数据信息。4. 日常保养每隔2个月至少开机一次,工作至少半小时,以使设备保持良好的工作状态。仪器的外壳表面经过了喷漆工艺的处理,在使用过程中请不要将溶液洒在外壳上,否则会在外壳上留下难以消除的印迹。如果不小心将溶液洒到仪器上请立即用湿毛巾擦拭干净,禁止使用有机溶液擦拭。使用硫酸等强腐蚀性衍生剂后请将薄层板背面擦拭干净后再放入仪器,以免对仪器造成腐蚀。五、常见问题及解决1 问题:图像预览时出现黑屏现象解决:请将连接相机的USB线重新插拔,等待30秒后重新点击“GoodLook-2000型薄层成像系统”的图像捕捉窗口的“设备控制”窗口的“开始采集”按钮。2 问题:光源控制失败解决:请关闭GoodLook-2000型薄层成像仪器的电源,等待30秒后,重新开机。3 问题:图像不清晰解决:l 需调节曝光值(曝光值越大,图像亮度越大),在设备控制窗口中输曝光值,然后点击“设置”按钮。l 因仪器剧烈振动或碰撞导致CCD相机错位,需重新调节CCD相机的镜头设置(建议谨慎操作):首先打开仪器后测上方的盖板,轻微的调节CCD相机的镜头旋钮(两个旋钮),下方旋钮为调整光圈(调整进光量大小),上方光圈为调整相机的焦距。4 问题:选择框中明显有斑点但是却没数据解决:这是由于部分图片的斑点过于模糊和背景靠近,需要用户根据斑点所出的峰型手动更改最小峰高和最小峰宽六、附录1. 含量计算方法以中国药典2000年版中的“山茱萸”为例,说明含量计算的方法。药典中关于“山茱萸”的说明如下: 山 茱 萸ShanzhuyuFRUCTUS CORNI【含量测定】取本品粗粉约1g,精密称定,置索氏提取器中,加乙醚适量,加热回流提取4小时,提取液回收乙醚至干,残渣用石油醚(3060)浸泡2次,每次15ml(约浸泡2分钟),倾去石油醚,残渣加无水乙醇-氯仿(3:2)混合液微热使溶解,转移至5ml量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。另取熊果酸对照品,加无水乙醇制成每1ml中含0.5mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法试验,吸取供试品溶液5l和10l、对照品溶液4l与8l,分别交叉点于同一硅胶G薄层板上,以环己烷-氯仿-醋酸乙酯(20:5:8)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在110加热5-7分钟,至呈现紫红色斑点,取出,在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板,周围用胶布固定,照薄层色谱法进行扫描,波长:S = 520nm,R = 700nm,测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值,计算,即得。本品含熊果酸(C30H48O3)不得少于0.20%。首先需要说明的是,计算含量采用的方法为外标两点法,这就要求对照品至少有两种点样量才可以进行计算。本软件采用最小二乘拟合的方式进行直线方程拟合。如果对照品只有两个点样量,并且每种点样量的点样数目不超过2个,那么可以手动进行线性方程拟合的计算;如果对照品的点样量超过两种,如对照品的点样量为4l,5l,8l三种(或者更多),或者点样量为两种(如4l,8l),但每种点样量点的斑点比较多(超过2个),那么手工计算就会比较复杂繁琐,可以利用计算机编制相关算法来进行最小二乘拟合计算。下面的示例为对照品采用两种点样量,每种点样量为两个点进行的手工计算,仅供用户参考。扫描的结果如下:类型点样量(l)积分值1供试品1521022对照品1A419283对照品2A837254供试品21039535对照品1B419126对照品2B83703供试品称样量为1000mg 供试品定容量为5ml对照品的浓度为0.5mg/ml供试品点样量为5l和10l对照品点样量为4l和8l供试品积分值为2102和3953对照品积分值分别为:4l:1928、19128l:3725、3703取4l对照品的平均值为:SR1 = (1928+1912)/2 = 1920取8l对照品的平均值为:SR2 =(3725+3703)/2 =3714设直线方程为:Y = A*
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