PCR试题要点.doc

【A型题】 在五个选项中选出一个最符合题意的答案（最佳答案）。1以下哪种物质在PCR反应中不需要（ ）ATaq DNA聚合酶BdNTPsCMg2+DRNA酶E合适pH缓冲液2以下哪种酶可耐高温（ ）ATaq DNA聚合酶BHind CT4连接酶DRNA酶EKlenow片段3PCR反应正确过程应为（ ）A退火变性延伸B变性退火延伸C退火延伸变性D变性延伸退火E延伸变性退火4 PCR技术的本质是（ ）A 核酸杂交技术B 核酸重组技术C 核酸扩增技术D 核酸变性技术E 核酸连接技术5Taq DNA聚合酶酶促反应最适温度为（ ）A37B5055C7075D8085E94956温度均一性较好的PCR仪为（ ）A水浴锅PCR基因扩增仪和压缩机PCR基因扩增仪B半导体PCR基因扩增仪和离心式空气加热PCR基因扩增仪C压缩机PCR基因扩增仪和半导体PCR基因扩增仪D压缩机PCR基因扩增仪和离心式空气加热PCR基因扩增仪E水浴锅PCR基因扩增仪和离心式空气加热PCR基因扩增仪7一步就可以摸索出最适合反应条件的PCR仪为（ ）A普通PCR仪B梯度PCR仪C原位PCR仪D荧光PCR仪E实时PCR仪8能在细胞内进行PCR扩增的PCR仪为（ ）A普通PCR仪B梯度PCR仪C原位PCR仪D荧光PCR仪E实时PCR仪9SteadySlope技术是下列哪一家公司的专利技术（ ）Aeppendorf公司BMJ公司CCepheid公司DRoche公司EABI公司10应用SteadySlope技术的是哪种PCR仪（ ）A普通PCR仪B梯度PCR仪C原位PCR仪D荧光PCR仪E实时PCR仪11在下列哪种PCR仪扩增样品可以了解样品中DNA原始拷贝数（ ）A普通PCR仪B梯度PCR仪C原位PCR仪D荧光实时PCR仪E定性PCR仪12以下是经过PCR扩增后得到的Ct值，哪个样品的DNA原始拷贝数最多（ ）A样品A，Ct = 20B样品A，Ct = 22C样品A，Ct = 24D样品A，Ct = 26E样品A，Ct = 2813以空气为加热介质的PCR仪是（ ）A金属板式实时定量PCR仪B96孔板式实时定量PCR仪C离心式实时定量PCR仪D各孔独立控温的定量PCR仪E荧光实时定量PCR仪14以下哪个PCR扩增仪的PCR扩增样品槽被设计为离心转子（ ）AABI 7500BABI 7900CLight CycleTMDSmartCyclerERG300015以下哪个PCR扩增仪使用的是同一个激发光源和检测器（ ）AABI 7500BABI 7900CLight CycleTMDSmartCyclerERG300016可以在同一台定量PCR仪上分别进行不同条件定量PCR反应的是（ ）AABI 7500BABI 7900CLight CycleTMDSmartCyclerERG300017拥有独立智能升降温模块的是（ ）AABI 7500BABI 7900CLight CycleTMDSmartCyclerERG300018容纳样品量大，无需特殊耗材的是（ ）AABI 7500BABI 7900CLight CycleTMDSmartCyclerERG300019PCR基因扩增仪最关键的部分是（ ）A温度控制系统B荧光检测系统C软件系统D热盖E样品基座20“位置的边缘效应”是指（ ）A温度的准确性欠佳B温度的均一性欠佳C边缘升降温速度快D边缘升降温速度慢E梯度模式和标准模式温度不一致21PCR扩增仪升降温速度快有很多优点，以下哪一项应除外（ ）A缩短反应时间B提高工作效率C消除位置的边缘效应D缩短非特异性反应时间E提高反应特异性22在梯度模式下得出最佳反应条件，并以此条件在标准模式下单独做，但结果却不如人意，最有可能的原因是（ ）A样品孔温度与设定温度不一致B样品孔间的温度有差异C样品孔位置的边缘效应较高D升降温速度不够快E不同模式温度特性有差异23定量PCR扩增仪的关机次序一般为（ ）A关软件关PCR仪关电脑B关软件关电脑关PCR仪C关PCR仪关软件关电脑D关PCR仪关电脑关软件E关电脑关PCR仪关软件24、PCR技术扩增DNA,需要的条件是( )目的基因引物四种脱氧核苷酸 DNA聚合酶等mRNA核糖体A、B、C、D、25、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为（ ）A、0.3-1mmol/LB、0.5-1mmol/LC、0.3-2mmol/LD、0.5-2mmol/L26、多重PCR需要的引物对为（ ）A、一对引物B、半对引物C、两对引物D、多对引物27、PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应，其特异性决定因素为（ ）A、模板B、引物C、dNTPD、镁离子28、在PCR反应中，下列哪项可以引起非靶序列的扩增的扩增( )A、TaqDNA聚合酶加量过多B、引物加量过多C、A、B都可D、缓冲液中镁离子含量过高29、PCR技术是一种DNA的扩增技术。在一定条件下，加入模板DNA、DNA聚合酶、dATP、dCTP、dGTP、dTTP可以实现DNA的扩增。据此判断不合理的是 AdATP在DNA扩增中可以提供能量，同时作DNA合成的原料BdTTP完全水解后产物有胸腺嘧啶、磷酸、核糖CDNA扩增过程未加解旋酶，可以通过先适当加温的方法破坏氢键，使模板DNA解旋DCTP水解脱去两个磷酸基后是组成RNA的基本单位之一 30、多聚酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环：95下使模板DNA变性、解链55下复性（引物与DNA模板链结合）72下引物链延伸（形成新的脱氧核苷酸链）。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是：（ ）A变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现B复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成C延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸DPCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高31、下列有关PCR技术的叙述，不正确的是：（ ）APCR技术经过变形、复性、延伸三个阶段BPCR技术可用于基因诊断，判断亲缘关系等 CPCR技术需在体内进行 DPCR技术是利用碱基互补配对的原则32、PCR技术扩增DNA,需要的条件是( )目的基因 引物 四种脱氧核苷酸 DNA聚合酶等mRNA核糖体A、 B、 C、 D、33、在基因工程中，把选出的目的基因（共1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸460个）放入PCR仪中扩增4代，那么，在PCR仪中放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数至少应是A640 B8100 C600 D864034、对禽流感的确诊，先用PCR技术将标本基因大量扩增，然后利用基因探针，测知待测标本与探针核酸的碱基异同。下图P表示禽流感病毒探针基因在凝胶的电泳标记位置，M、N、Q、W是四份送检样品在测定后的电泳标记位置， 哪份标本最有可能确诊为禽流感 （ ）AM BN CQ DW 35、某考古学家在西伯利亚泰加林地区的冰中，发现了一种冰冻的已灭绝的巨大动物的肌肉。他想了解该巨型动物的DNA与现今印度大象的DNA的相似性，于是做了如下检测工作，其中正确的操作步骤及顺序是降低温度，检测处理后形成的杂合DNA双链区段 通过PCR技术扩增巨型动物和大象的DNA 把巨型动物的DNA导入大象的细胞中 在一定的温度条件下，将巨型动物和大象的DNA水浴共热A.B. C.D.36、 PCR的发明人是A. Mullis B. 牛顿 C.Kenny D. James37、 退火温度一般比引物的熔解温度（Tm）低多少合适A. 7 B. 10 C. 5 D. 2 E. 2038、引物的最佳浓度为A. 0.1-0.5 M B. 1-2M C. 5-10M D. 100M E. 200M39、专门用于制备单链DNA的PCR技术是A、对称PCRB、反向PCRC、RTPCRD、不对称PCRE、嵌套PCR40、PCR变性温度一般为A 96 B. 85 C. 72 D. 55 E. 10041、pre-mRNA 内含子的5-末端一般为 （ ）A、AUB、GUC、AGD、CGE、AC42、在大肠杆菌的DNA损伤修复时，对于填补缺口可能最重要的酶是A、DNA聚合酶B、DNA聚合酶C、DNA聚合酶D、RNA聚合梅E、以上都不是43、 可用于扩增未知序列的PCR方法是（ ）A、 对称PCRB、 反向PCRC、 RT-PCRD、不对称PCRE、 嵌套PCR44、在聚合酶链反应（PCR）中最常用的DNA聚合酶是 AT4 DNA连接酶 BT7 DNA聚合酶 C Taq DNA聚合酶DE. coli DNA聚合酶I EE. coli DNA聚合酶II45、下列关于PCR引物设计的说法错误的是（ ）A设计引物时应考虑使3端引物和5端引物具有相似的Tm值B每条引物自身不应有稳定的发夹结构C上下游引物之间不宜形成稳定的二聚体结构D引物的5和3端必须和模板严格配对结合E引物与非特异扩增区的序列无同源性46、Taq DNA聚合酶可以不依赖模板在dsDNA的3末端加上一个碱基为（ ）A. G B. A C. T D. C E. I 【X型题】 每题的备选答案中有两个或者两个以上正确答案。1PCR技术每一个循环均包含以下哪些环节（ ）A酶切B变性C退火D延伸E连接2以下哪些酶可用于PCR反应（ ）AKlenowBHind CTaq DNA聚合酶DRNaseEDNase3目前常用的PCR基因扩增仪控温方式有（ ）A水浴锅控温B压缩机控温C半导体控温D离心式空气控温E金属控温4普通PCR基因扩增仪除通常的定性PCR仪外，还包括（ ）A水浴式PCR仪B梯度PCR仪C原位PCR仪D变温金属块式PCR仪E变温气流式PCR仪5按变温方式不同，PCR基因扩增仪可分为（ ）A水浴式PCR仪B梯度PCR仪C原位PCR仪D变温金属块式PCR仪E变温气流式PCR仪6目前市场上实时荧光定量PCR仪一般有哪些类别（ ）A金属板式实时定量PCR仪B梯度定量PCR仪C原位定量PCR仪D离心式实时定量PCR仪E各孔独立控温的定量PCR仪7下列产品哪些属于金属板式实时定量PCR仪（ ）ALight CycleTM荧光定量PCR仪BABI 7500荧光定量PCR仪CMJ公司Chromo 4荧光定量PCR仪DBio-rad公司iCycler荧光定量PCR仪ERotor-Gene 3000荧光定量PCR仪8下列产品哪些属于离心式实时定量PCR仪（ ）ALight CycleTM荧光定量PCR仪BABI 7500荧光定量PCR仪CMJ公司Chromo 4荧光定量PCR仪DBio-rad公司iCycler荧光定量PCR仪ERotor-Gene 3000荧光定量PCR仪9PCR基因扩增仪的温度控制主要是指（ ）A温度的准确性控制B温度的均一性控制C退火温度控制D升降温速度控制E延伸温度控制10荧光定量PCR仪的荧光检测系统主要包括（ ）A发光二极管B激发光源C检测器D光度计E光电倍增管11荧光定量PCR仪的荧光强度减弱或不稳定，可能的原因有（ ）A滤光片发霉B光源损耗C半导体模块故障D荧光染料污染E光电倍增管灵敏度下降12、PCR实验室应具备至少几个区域A. 试剂准备区 B. 标本制备区 C. 扩增区 D. 污染处理区 E. 观察区13、PCR时，在样品的收集、抽提和扩增的所有环节都应该注意：A使用一次性吸头，严禁与PCR产物分析室的吸头混用，吸头不要长时间暴露于空气中，避免气溶胶的污染；B. 避免反应液飞溅，打开反应管时为避免此种情况，开盖前稍离心收集液体于管底。若不小心溅到手套或桌面上，应立刻更换手套并用稀酸擦拭桌面；C. 操作多份样品时，制备反应混合液，先将dNTP、缓冲液、引物和酶混合好，然后分装，这样即可以减少操作，避免污染，又可以增加反应的精确度；D. 最后加入反应模板，加入后盖紧反应管；E. 操作时设立阴阳性对照和空白对照，即可验证PCR反应的可靠性，又可以协助判断扩增系统的可信性；14、关于PCR引物正确的是A.引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。B. 引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。C. 引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶 核苷酸的成串排列。D避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。E引物3端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。、关于Taq DNA聚合酶的生物学活性已下正确的是：7080 150核苷酸/S/酶分子70 60核苷酸/S/酶分子55 24核苷酸/S/酶分子高于90时， DNA合成几乎不能进行温度要先高后低、PCR扩增出现假阳性可能原因是A. 引物设计不合适 B. 整个基因组或大片段的交叉污染 C. 空气中的小片段核酸污染 D. 试剂或器材均消毒不彻底 E. 退火温度不合适【A型题】1D 2