附子与白芍配伍减毒的有效成分研究.ppt

附子与白芍配伍减毒的有效成分研究,申请人:余天宇（08中药2班）项目组成员:宋维锋、史新、应洁、蒲宝婵、邓昱霖指导教师:赵骏,附子:毒性较大的中药，其毒性主要由脂溶性二萜类生物碱引起，其中主要是乌头碱、中乌头碱和次乌头碱等。它们对热很不稳定，特别是在酸、碱水溶液中加热易破坏，水解后产物毒性明显降低，以低毒的单酯型生物碱(苯甲酰乌头原碱、苯甲酰中乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱)为主。临床上常用其炮制品或与其他药相互配伍使用，降低毒性。来源:为毛茛科植物乌头的子根。性味:辛甘，热、有毒；入心、脾、肾经。功效:回阳救逆，补火助阳，散寒除湿。主治:阴盛格阳，大汗亡阳，吐利厥逆，阳萎宫冷等。,一、研究概况,白芍:异名金芍药(安期生服炼法)。来源:为毛茛科植物芍药的根。性味:苦酸，凉;入肝、脾经。功效:养血柔肝，缓中止痛，敛阴收汗。主治:治胸胁疼痛，泻痢腹痛，自汗盗汗，阴虚发热，月经不调，崩漏带下。,古代附子与白芍临床配伍应用,1.益卫固表、敛阴止汗素问生气通天论云:附子善走诸经，能温一身之阳;白芍酸收，既能养血，又能敛阴。二药相伍，可收益卫阳而固表，敛阴止汗之效。2.温阳散寒，养血通脉素问痹论称二药合用，气血相配，附子得白芍之制，燥烈之性不著，白芍得附子之助，能行血脉而通痹。3.温肾化气，回阳护阴真武汤中附子白芍配伍，方中取附子大辛大热，温肾暖脾，回阳救逆。其用白芍，一取其缓急止痛，一取其养阴利小便。总之，附子辛热，白芍酸寒。二药相合，辛散酸收，散邪固表，温阳敛阴。既能温阳补火而不伤阴液，又能养血敛阴而不滞气血。有相互制约、相互促进的作用,白芍成分:主要含芍药苷，也有黄酮、蹂质、挥发油、芳酸还有醇胺、脂类及多糖等等化学成分芍药苷类结构:,主要成分结构与药理作用,抗炎、镇痛、镇静、抗惊厥、提高免疫力、改善血液流变性等,附子成分:附子中主要毒性生物碱为：乌头碱（Aconitine）、中乌头碱（Mesaconitie）、次乌头碱（Hypaconite）。去甲乌头碱、氯化甲基多巴胺、去甲猪毛菜碱等双酯型生物碱结构式:,抗炎、镇痛、镇静等,强心、抗休克、抗心律失常、抗心肌缺血、扩张外周血管,目前存在的问题,在临床上常用附子与白芍配伍后可达增效减毒的双重效应。但与白芍增效减毒方面的研究很少报道,对于机理方面研究仍不够深入。另外对于附子与白芍配伍剂量对附子毒性成分影响需进一步研究证实。,二、研究目的与意义,研究附子与白芍配伍前后，附子中最主要的有毒成分生物碱含量变化，及附子与白芍共煎液的药渣成分，从而探索白芍中能降低附子毒性的成分。附子与白芍配伍，以不同煎煮时间、附子与白芍配伍比率两个因素来研究其对白芍与附子配伍毒性降低的影响，从而更好指导临床用药，避免常见的神经系统、循环系统和消化系统等中毒症状。,三、研究内容,附子与白芍配伍，毒性减弱受多方面因素影响，如温度、煎煮时间、配比、压力、酸碱度等，本实验以煎煮时间及附子与白芍两者配伍比率为主要考虑因素，研究附子与白芍配伍前后最主要毒性成分变化，及探索白芍中能降低附子毒性的成分。,四、研究路线,一、药液制备：（1）附子与白芍三因素四水平正交表2）附子与白芍单煎制备：分别以共煎相应的药物含量进行单煎制备，方法同上。,二、采用HLPC方法对药液中主要成分含量的测定,芍药总苷,测定,主要毒性成分双酯型生物碱,水解产物单酯型生物碱,乌头碱,中乌头碱,次乌头碱,苯甲酰乌头原碱,苯甲酰中乌头碱,苯甲酰次乌头原碱,测定,白芍单煎液,附子单煎液,乙醚：氯仿（3：1）萃取，流动相：缓冲液（0.2%冰醋酸，用三乙胺调PH至6.25）：乙睛（71:29)，波长235nm,70%乙醇萃取，流动相：甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾-异丙醇-冰醋酸（67：173：4：4）波长230nm,白芍与附子共煎液,白芍对附子毒性成分溶出的影响,白芍对附子生物碱水解情况,煎液：双脂型生物碱含量测定,药渣：双酯型生物碱含量测定以及化学成分的检测,单酯型生物碱,共煎液平分两份，方法如单煎液,三、探索白芍中能降低附子毒性的成分：,白芍对附子中毒性成分溶出影响,芍药苷类与双酯型生物碱共煎,白芍对附子中生物碱水解情况,芳香酸与双酯型生物碱共煎,五、创新点,白芍与附子经常配伍使用，对心肌缺血的改善作用明显增强。国内外很少文献报道附子与白芍配伍前后附子中最主要毒性成分含量变化。通过研究附子与白芍配伍前后，附子中最主要的有毒成分生物碱含量变化，及附子与白芍共煎液的药渣成分，从而探索白芍中能降低附子毒性的成分。,六、总体安排和进度,2010年7月2011年9月研究内容：附子与白芍配伍前后，附子中最主要的有毒成分生物碱含量变化。了解两者配伍比例、煎煮时间对附子的毒性影响，更好的拓展附子应用范围，指导临床用药。2010年9月2011年3月研究内容：探索白芍中能降低附子毒性的成分。,1、在某个煎煮时间内，附子的毒性越来越低。2、白芍与附子配伍，在一定程度上，随着白芍比率增大，附子毒性降低的也就越明显。3、白芍与附子共煎液中，有机酸可能会促进毒性成分水解，单酯型生物碱水解成分增多