乳酸杆菌的提纯.pdf_第1页
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文档简介

乳酸杆菌的分离纯化乳酸杆菌的分离纯化与保种与保种 一一、实验目的实验目的：利用 MSR 培养基从海参养殖底泥中分离出乳酸杆菌，并对其进行 筛选、分离纯化与保种。 二、二、实验器材与药品：实验器材与药品：MSR 培养基、酒精灯、接种环、涂布棒、保温箱、烧杯、 锥形瓶、脱脂乳试管、显微镜、移液枪、试管 3 个、生理盐水 三、三、实验步骤：实验步骤： （1）MSR 培养基的配制： 蛋白胨 10g，牛肉浸膏 10g，酵母浸膏 10g，葡萄糖 20g，吐温 801g，磷酸氢 二钾 2g，柠檬酸三铵 2g， 醋酸钠 3H2O 5g,MgSO4 7H2O 0.2g,MnSO4 4H2O 0.05g,蒸馏水 1l 将各成分溶于蒸馏水中，调节 PH 至 6.26.6，在 121灭菌 15 分钟。灭菌后 PH 应在 6.06.5。向每升培养基中加入 15g 琼脂即可制成 MRS 琼脂培养基。 （2）倒平板。 （3）取海水底泥，用无菌生理盐水冲洗底泥（1：10），静置一段时间 （4）吸取 0.2ml 上清液用灭菌的涂布棒进行涂布。可涂布六个平板。 （5）40培养 48h， （6） 选取乳酸菌典型菌落转致脱脂乳试管中，40培养 824h 若牛乳出现凝固， 无气泡，显酸性，涂片镜检细胞杆状或链球状，则可将其连续传代 3 次，最终选 择出在 36h 能凝固的牛乳管，作菌种待用。 （7）取菌液与甘油 15:85 比例，放入超低温冰箱中保种。 四、实验结果：四、实验结果： 乳酸杆菌菌落的形态特征：边缘整齐光滑、颜色乳白、
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