芳酸类药物的分析

2010-3-18/23,1,第六章,芳酸类药物的分析,2010-3-18/23,2,基本要求,一、掌握水杨酸类、苯甲酸类药物化学结构与分析方法间的关系；阿司匹林中特殊杂质的检查；水杨酸类药物的酸碱滴定法；苯甲酸类药物的双相滴定法。二、熟悉水杨酸类和苯甲酸类其他含量测定的基本原理与方法。三、了解其他芳酸类药物的分析。,2010-3-18/23,3,一、水杨酸类（一）典型药物结构,第一节典型药物分类与理化性质,水杨酸（salycylicacid）,2010-3-18/23,4,阿司匹林（aspirin),2010-3-18/23,5,对氨基水杨酸钠（sodiumaminosalicylate),2010-3-18/23,6,贝诺酯（benorilate),2010-3-18/23,7,1.酸性SA(PKa2.95)、ASA(PKa3.49均有酸性。2.溶解性:均为固体，有一定熔点。除钠盐溶于水，其余不溶。3.UV和IR光谱特性：分子结构中具有苯环,有UV和IR特征吸收。4.芳伯氨基和酚羟基特性：5.水解特性：ASA及其制剂应检查水杨酸,对氨基水杨酸钠和贝诺酯检查间氨基酚和对氨基酚。,（二）主要理化性质,2010-3-18/23,8,（一）典型药物结构,苯甲酸及其钠盐(benzoicacid）,二、苯甲酸类药物,2010-3-18/23,9,丙磺舒(probenecid),2010-3-18/23,10,甲芬那酸(mefenamicacid),2010-3-18/23,11,（二）主要理化性质,1.溶解性:均为固体，有一定熔点。除钠盐溶于水，其余不溶。2.UV和IR光谱特性：分子结构中具有苯环,有UV和IR特征吸收。3.分解反应特性：苯甲酸钠分解为苯甲酸；丙磺舒分解为SO2。4.酸性：苯甲酸、丙磺舒和甲芬那酸有游离的羧基，可用NaOH直接滴定测定其含量。,2010-3-18/23,12,三、其他芳酸类(一)典型药物结构,氯贝丁酯（clofibrate）,2010-3-18/23,13,布洛芬（ibuprofen）,2010-3-18/23,14,(二)主要理化性质1.溶解性：水中不溶，有机溶剂溶解，氯贝丁酯为液体；布洛芬为固体，有一定熔点。2.UV和IR特征吸收光谱：基于分子结构中具有苯环和特征基团。,2010-3-18/23,15,第二节鉴别试验,一、FeCl3反应,具酚羟基或水解后能产生酚羟基的药物,2010-3-18/23,16,直接：水杨酸、对氨基水杨酸钠、水杨酸二乙胺、对乙酰氨基酚,水杨酸类ChP鉴别（1）取本品的水溶液，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。,2010-3-18/23,17,间接：阿司匹林、氯贝丁酯,阿司匹林ChP鉴别（1）取本品约0.1g，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。,2010-3-18/23,18,2010-3-18/23,19,二、重氮化偶合反应,芳香第一胺类鉴别反应具芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物,2010-3-18/23,20,直接：对氨基水杨酸钠、盐酸普鲁卡因胺间接：贝诺酯、对乙酰氨基酚（扑热息痛）,2010-3-18/23,21,三、水解反应（具有酯结构）,2010-3-18/23,22,1.分解产物的反应,苯甲酸盐丙磺舒,四、特殊反应,2010-3-18/23,23,2.异羟肟酸铁反应,2010-3-18/23,24,1.测定max；min。例如：布洛芬用0.4%NaOH溶液制备0.25mg/ml；max：265nm,273nm;min：245nm,271nm。2.在max处测定一定浓度供试液的吸收度A。例如：丙磺舒，20g/mlmax=249nm;A=0.673.在max处测定供试液的百分吸收系数。例如：贝诺酯在max=240nm;E1%1cm=730760,五、紫外吸收光谱法,2010-3-18/23,25,4.在规定的波长测定吸收度比值（即双波长吸收度比值法）例如：对氨基水杨酸钠10g/ml;A265/A299=1.561.56再例如：甲芬那酸14g/ml;A278280/A348352=1.151.30,2010-3-18/23,26,六、红外吸收光谱法,水杨酸的红外吸收图谱,2010-3-18/23,27,对氨基水杨酸钠的红外吸收图谱,2010-3-18/23,28,第三节特殊杂质检查,一、阿司匹林杂质的检查,1.杂质来源原料残存（生产过程中乙酰化不完全）、水解产生（贮存过程中水解产生）,2010-3-18/23,29,二、杂质检查原理及方法,（一）溶液的澄清度,限制无羧基的杂质（如酚类、苯酯类杂质）,检查原理阿司匹林可溶于碳酸钠无羧基杂质不溶于碳酸钠,2010-3-18/23,30,苯酚,乙酰水杨酸苯酯,水杨酸苯酯,醋酸苯酯,2010-3-18/23,31,*原料残存（原料乙酰化不完全）,1、来源,（二）游离水杨酸,2010-3-18/23,32,*水解产生,2010-3-18/23,33,2、检查方法限量检查法,（1）原理,2010-3-18/23,34,（2）限量规定,原料0.1%阿司匹林片0.3%阿司匹林肠溶片1.5%阿司匹林栓1.0%,2010-3-18/23,35,（三）易炭化物,检查药物中遇硫酸易炭化或氧化而呈色的微量有机杂质,检查方法比色法,2010-3-18/23,36,其他杂质：乙酰水杨酸酐（ASAN）、乙酰水杨酰水杨酸（ASSA）、水杨酰水杨酸（SSA）色谱法,2010-3-18/23,37,二、对氨基水杨酸钠中间氨基酚的检查,1.杂质来源原料残存、脱羧产生,2.检查方法ChP含量测定法（双相滴定法）。,2010-3-18/23,38,原理：利用对氨基水杨酸钠不溶于乙醚，间氨基酚溶于乙醚的性质，使二者分离后，在乙醚中加水适量，用盐酸滴定，控制盐酸滴定液体积以控制间氨基酚限量。,2010-3-18/23,39,三、氯贝丁酯中对氯酚及挥发性杂质的检查GC，限度0.0025%,2010-3-18/23,40,第四节含量测定,一、酸碱滴定法,直接滴定法pKa36阿司匹林分子中有游离羧基，其电离常数为3.2710-4（直接滴定的条件：CaKa10-8,滴定突跃（pH）0.6单位时，才能以强碱直接滴定），可以用标准碱溶液直接滴定。,2010-3-18/23,41,阿司匹林ChP取本品约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml，溶解后，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）滴定。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。,2010-3-18/23,42,反应式：,2010-3-18/23,43,（1）计算公式：,式中：C标为氢氧化钠的浓度（mol/L）；W为供试品的称样量（g）;V为滴定所消耗的氢氧化钠的量（ml）;,2010-3-18/23,44,（2）讨论中性乙醇溶解阿司匹林且防止酯键水解。优点：简便、快速缺点：酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定）,酸性杂质干扰（如水杨酸）适用范围：不能用于含水杨酸过高或制剂分析，只能用于合格原料药的含量测定,2010-3-18/23,45,2.水解后剩余滴定法酯的一般含量测定方法,阿司匹林,原理：利用ASA分子中含有的羟基酯结构在碱性溶液中易于水解的性质，加入定量过量的氢氧化钠滴定液，加热使酯水解，剩余的碱用酸溶液回滴。,2010-3-18/23,46,USP（29）方法：取本品约1.5g，精密称定,加入氢氧化钠滴定液（0.5mo1/L）50.0m1，混合，缓缓煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mo1/L）滴定剩余的氢氧化钠，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的氢氧化钠滴定液（0.5mol/l）相当于45.04mg的C9H8O4。,2010-3-18/23,47,2NaOH（过量）H2SO4Na2SO42H2O,剩余滴定：,水解：,2010-3-18/23,48,计算公式：,反应摩尔比为12优点：消除了酯键水解的干扰缺点：酸性杂质干扰,2010-3-18/23,49,3.两步滴定法阿司匹林片、阿司匹林肠溶片、氯贝丁酯,原理：片剂中除了加入少量的酒石酸（1%）或枸橼酸稳定剂外，制剂工艺过程中又可能有水解产物（水杨酸、醋酸）产生，这些酸都消耗氢氧化钠，导致测定结果偏高。故不能采用直接滴定法，而采用先中和与供试品共存的酸，再将ASA在碱性条件下水解后测定的两步滴定法。,2010-3-18/23,50,取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）溶解后，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）至溶液显粉红色，再精密加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）40m1，置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。,2010-3-18/23,51,第一步中和,2010-3-18/23,52,第二步水解后剩余滴定,水解：,2010-3-18/23,53,2NaOH（过量）H2SO4Na2SO42H2O本法消除了酸性杂质的干扰，降低了酯键水解的干扰,剩余滴定：,2010-3-18/23,54,计算公式：,式中：V0为空白试验消耗硫酸量（ml）；V为剩余滴定时消耗硫酸量（ml）；C标为硫酸滴定液的实际浓度（mol/L）；W为供试品片粉量（g）；,2010-3-18/23,55,3.双相滴定法芳酸碱金属盐,如苯甲酸钠ChP(2000),溶剂：水乙醚,2010-3-18/23,56,取本品1.5g，精密称定，置分液漏斗中，加水25m1、乙醚50ml及甲基指示液2滴，用盐酸滴定液（0.5mo1/L）滴定，随滴随振摇，至水层显橙红色，分取水层，置具塞锥形瓶中，乙醚层用水5ml洗涤，洗液并入锥形瓶中,加乙醚20m1，继续用盐酸滴定液0.5mo1/L)滴定，随滴定随振摇，至水层显持续的橙红色。每1ml的盐酸滴定液（0.5mol/L）相当于72.06mg的C7H5NaO2。,2010-3-18/23,57,乙醚的作用是：萃取反应生成的苯甲酸，使水相中的中和反应进行到底滴定中要强力振摇。随着滴定不断进行，苯甲酸不断被萃取入有机溶剂层，使滴定反应完全，终点清晰。,优点：消除了反应产物的干扰,2010-3-18/23,58,二、亚硝酸钠滴定法具芳伯氨基或潜在芳伯氨基（芳酰氨基水解或硝基还原）的药物,2010-3-18/23,59,三、紫外分光光度法1.直接紫外分光光度法贝诺酯及其片剂在max=240nm，测A,2010-3-18/23,60,2.柱分配色谱紫外分光光度法USP（29）阿司匹林胶囊可同时定量测定阿司匹林和水杨酸（1）水杨酸的限量测定固定相：FeCl3SA保留，冰醋酸洗脱，306nm测水杨酸的量（2）含量测定固定相：NaHCO3AAS、SA保留冰醋酸洗脱，280nm测总量,2010-3-18/23,61,四、HPLC1.阿司匹林栓剂ChP（2000）离子抑制色谱法内标法定量,2.对氨基水杨酸钠USP（24）离子对反相HPLC内标法定量,3.丙磺舒USP（24）离子抑制色谱法外标法定量,2010-3-18/23,62,95：129.乙酰水杨酸片剂可采用的测定方法为A.非水滴定法B.水解后剩余滴定法C.两步滴定法D.柱色谱法E.双相滴定法,（CD）,2010-3-18/23,63,96：78苯甲酸钠的含量测定，中国药典（1995年版）采用双相滴定法，其所用的溶剂体系为A.水乙醇B.水冰醋酸C.水氯仿D.水乙醚E.水丙酮,（D）,2010-3-18/23,64,99：83.双相滴定法可适用的药物为A.阿司匹林B.对乙酰氨基酚C.水杨酸D.苯甲酸E.苯甲酸钠,（E）,2010-3-18/23,65,例15A两步酸碱滴定法B直接酸碱滴定法C两者皆是D两者皆不是1.苯甲酸钠的测定2.氯贝丁酯的测定3.盐酸的测定4.酸碱滴定法5.阿司匹林片的测定,（D）,（A）,（B）,（C）,（A）,2010-3-18/23,66,例6.采用直接酸碱滴定法测定阿司匹林的含量时，已知阿司匹林的分子量为180.2，所用氢氧化钠滴定溶液的浓度为0.1mol/L，请问1ml氢氧化钠滴定溶液相当于阿司匹林的量应是A.180.2mgB.180.2gC.18.02mgD.1.802mgE.9.01mg,2010-3-18/23,67,例7.阿司匹林加碳酸钠试液加热后，再加稀硫酸酸化，此时产生的白色沉淀应是A.苯酚B.乙酰水杨酸C.水杨酸D.醋酸钠E.醋酸苯酯,2010-3-18/23,68,例8.水杨酸与三氯化铁试液生成紫堇色产物的反应，要求溶液的pH值是A.pH10.0B.pH2.0C.pH78D.pH46E.pH2.00.1,（D）,2010-3-18/23,69,例9.两步滴定法测定阿司匹林片或阿司匹林肠溶片时，第一步滴定反应的作用是A.测定阿司匹林含量B.消除共存酸性物质的干扰C.使阿司匹林反应完全D.便于观测终点E.有利于第二步滴定,（B）,2010-3-18/23,70,例10对氨基水杨酸钠中的特殊杂质是A.水杨酸B.间氨基酚C.氨基酚D.苯酚E.苯胺,（B）,2010-3-18/23,71,例11.能用与FeC13试液反应产生现象鉴别的药物有A苯甲酸钠B水杨酸C对乙酰氨基酚D氢化可的松E丙酸睾酮,（ABC）,2010-3-18/23,72,例12.采用双相滴定法测定苯甲酸钠含量时，加入乙醚的目的是A.防止反应产物的干扰B.乙醚层在