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华中农业大学2 0 0 8 届硕士学位论文 摘要 藤茶( a m p e l o p s i sg r o s s e d e n t a t aw t w a n g ) 是葡萄科蛇葡萄属的一种藤本植物, 广泛分布于我国长江流域以南等省区,是我国民间一茶用、药用植物,富含二氢杨 梅素等黄酮类物质。我国壮族和瑶族人民将其幼嫩茎叶制成保健茶,用于治疗感冒 发热、咽喉肿痛、黄疸型肝炎等症。有关藤茶的研究主要集中在藤茶活性成分的分 离鉴定及黄酮的功能活性等方面,而对藤茶的植物学和生物学特性研究较少。本文 对来自江西定南、湖南衡东、湖北恩施的三个藤茶材料在同一生态环境下的地上部 形态特征及解剖结构进行了比较研究;对三个材料枝梢、叶片的生长发育规律,叶 片净光合速率动态变化,主要化学成分的动态变化进行了系统研究。为藤茶的分类 和新品种的选育,藤茶最佳采收时间的确定、质量控制提供科学依据。 1 藤茶的形态学特征和生物学特性 1 1 形态学特征 对来自江西定南、湖南衡东、湖北恩施的三个藤茶材料在同一生态环境下的芽、 新梢、叶片、花进行了系统的观察记载,发现三个藤茶材料在外部形态学特征上存 在相似性,同时也存在局部差异。相似性表现为:三种藤茶新梢的梢尖无绒毛,呈 紫红色;卷须与叶对生,在新梢上呈不连续分布,二分叉;叶为1 - 2 回羽状复叶, 幼叶无绒毛:花序为伞房状多歧聚伞花序,与叶对生,两性花。差异性表现在:芽、 叶、新稍、卷须的颜色,芽叶的形状、大小,花序数目等方面。提示三种材料可能 存在遗传差异。 1 2 生物学特性 藤茶的物候期观察:观察显示,藤茶萌芽期在2 月中、下旬;花期从5 月下旬 始至8 月下旬终:果实成熟期为9 月底1 0 月初。三种藤茶材料的物候期以湖南藤茶 的最早,恩施藤茶的最迟。 藤茶新梢生长:观察结果表明,3 个藤茶材料新稍生长呈s 形曲线,从3 月下 旬到4 月上旬阶段生长缓慢,4 月中旬到6 月中下旬阶段呈缓慢直线上升生长,到7 月上旬,新稍生长加快,以后生长趋于平缓。同期条件下,恩施藤茶新梢在6 月之 前生长最缓慢,之后增长最快,湖南藤茶新稍生长特点与之相反。藤茶副梢生长从 5 月初到6 月底阶段生长缓慢,到7 月中旬生长加快,以后生长趋于平缓。以湖南 藤茶副稍生长最快。说明湖南藤茶枝梢的顶端优势不强,有利于分枝。 藤茶叶片光合速率动态变化:三个材料的净光合速率( p n ) 的日变化呈“中午降 低型 的双峰曲线,具有明显的“午休 现象。江西藤茶“午休出现在1 2 :0 0 左 藤茶的形态学、生物学特性及主要化学成分研究 右,湖南藤茶和恩施藤茶“午休 出现在1 4 :0 0 左右。三个材料的净光合速率 随季节变化呈单峰曲线,其高光合期是7 月中旬一8 月上旬。为更有效的利用光能, 提高产量,建议藤茶的栽培采用南北方向东西倾v 型叶幕的架势。 2 藤茶的形态解剖学研究 利用石蜡切片技术和扫描电镜技术对藤茶根、茎、叶、花粉的结构特征进行系 统研究。光学显微镜下,发现三个藤茶材料根、茎、叶横切面组织中富含草酸钙晶 体,结构差异不明显;扫描电镜观察发现,三种藤茶材料茎的表皮细胞和非腺毛特 征明显不同;叶片的海绵组织空隙度,上表皮非腺毛的形状和密度,下表面气孔密 度和保卫细胞的形状以及上下表面角质层纹理特征差异明显。花粉扫描电镜观察结 果显示,花粉萌发孔均为三孔沟状,表面的纹饰是孔穴形,三个藤茶材料花粉的形 状和大小性状上存在明显差异。 3 藤茶的化学成分研究 对三个藤茶材料芽叶中水浸出物、总黄酮、二氢杨梅素、多酚、氨基酸、蛋白 质、可溶性糖含量的季节动态变化进行了研究,发现三个藤茶材料主要化学成分的 动态变化趋势基本一致。其中藤茶活性成分总黄酮、二氢杨梅素、多酚在6 月中旬 含量都较高,提示为收获藤茶原料的最佳时期。三个藤茶材料的主要化学成分含量, 湖南藤茶和江西藤茶接近,含量相对较高,是选种的优选材料。 对藤茶叶片的叶绿素和花青素含量进行比较分析,发现三种材料的色素含量的 动态变化趋势相似;总叶绿素、叶绿素f l 和类胡萝卜素含量随叶片的生长而增加, 同一时期,总体以湖北恩施的色素含量最高;花青素以江西藤茶的含量最高,这也 是江西藤茶芽叶多为紫红色的原因。 关键词:藤茶;生物学;形态学;形态解剖;化学成分 2 华中农业大学2 0 0 8 届硕士学位论文 a b s t r a c t t e n g c h a ( a m p e l o p s i sg r o s s e d e n t a t aw t w a n g ) ,b e l o n g i n gt oa m p e l o p s i sm i c h xo f v i t a c e a e , i sd i s t r i b u t e dw i d e l yi nt h es o u t ho ft h ey a n g t z er i v e nr i c hi nf l a v o n e s ,s u c ha s d i h y d r o m y r i c e t i n ( d m ,t e n g c h ai su s e df o rd r i n k i n ga n dm e d i c i n ea m o n gt h ef 0 【t h e t e n d e rs t e m sa n dl e a v e so ft e n g c h ah a v eb e e nm a d ei n t oah e a l t h yd r i n kw h i c hi sc a l l e d “m y s t i ct e a f o rt r e a t i n gr h e u m ,f e v e r , g a l lo ff a u c e s ,h e p a t i t i sa n ds oo n t h i st r a d i t i o n h a sal o n gh i s t o r yo fs e v e r a lh u n d r e dy c a l sa m o n gz h u a n ga n dy a om i n o r i t y _ i nc h i n a i n r e c e n ty e a r s ,m u c ha t t e n t i o nh a sb e e nf o c u s e do ni d e n t i f i c a t i o no fa c t i v ec o n s t i t u e n t sa n d b i o l o g i c a la c t i v i t i e so ff l a v o n e s h o w e v e r , t h e r ea l ef e wr e p o r t so ni t sb o t a n ya n d b i o l o g i c a l c h a r a c t e r i s t i c s t h r e et e n g c h am a t e r i a l s ,f r o md i n g n a nc o u n t y , j i a n g x i p r o v i n c e ;h e n g d o n gc o u n t y , h u n a np r o v i n c ea n de n s h ic o u n t y , h u b e ip r o v i n c e r e s p e c t i v e l y , p l a n t e d i nt h es a m ee c o l o g i c a lc o n d i t i o n t h i sp a p e rd e a l s 、 ,i t l lt h e m o r p h o l o g i c a lc h a r a c t e r i s t i c sa n da n a t o m i c a ls t r u c t u r e s ,g r o w t h - d e v e l o p m e n tl a wo fn e w s h o o t s ,s e c o n d a r ys h o o t sa n dl e a v e s ,d y n a m i cc h a n g e so fn e tp h o t o s y n t h e t i cm t e , d y n a m i cc h a n g e so fm a i nc h e m i c a lc o m p o n e n t s f o rt h ef i r s tt i m e t h er e s u l t sp r o v i d e s c i e n t i f i cf o u n d a t i o n sf o ri t sc l a s s i f i c a t i o n , n e wv a r i e t yb r e e d i n g ,b e s th a r v e s tt i m e d e c i d i n ga n dq u a l i t yc o n t r 0 1 1 m o r p h o l o g i c a la n db i o l o g i c a lc h a r a c t e r i s t i c so ft e n g c h a 1 1m o r p h o l o g i c a lc h a r a c t e r i s t i c s b u d s ,n e ws h o o t s ,t e n d e rs h o o t s ,l e a v e sa n df l o w e r so ft h et h r e et e n g c h am a t e r i a l s w e r eo b s e r v e da n dr e c o r d e d t h er e s u l t ss h o wt h a te x t e r n a lm o r p h o l o g i cc h a r a c t e r i s t i c s o ft h et h r e em a t e r i a l sa r es i m i l a r , b u tn o tt h es a m e t h es i m i l a r i t i e sa r ea sf o l l o w s : n ov i l l u so ns h o o tt i p ,a n dt h ec o l o u ri sm a u v e ;t e n d r i l sd i s t r i b u t i o nt y p ei sd i s c o n t i n u o u s a n d t w ob i f u r c a t e ;l e a ft y p ei sp i n n a t e l yc o m p o u n dl e a f , y o u n gl e a v e sh a v en ov i l l u s ;t h e f l o w e r , a sac y m e ,i sb i s e x u a l t h ed i f f e r e n c e sl i ei nt h ec o l o u ro fb u d s ,l e a v e s ,n e w s h o o t sa n dt e n d r i l s ;t h es h a p ea n ds i z eo fb u d sa n dl e a v e s ;t h en u m b e ro fi n f l o r e s c e n c eo n e a c hn e ws h o o ta n ds oo n t h er e s u l t si n d i c a t et h a tg e n e t i cd i v e r s i t ym a ye x i s ti n t h et h r e e t e n g c h am a t e r i a l s 1 2b i o l o g i c a lc h a r a c t e r i s t i c so ft e n g e h a p h e n o l o g i e a lp e r i o do ft e n g e h a :t h er e s u l t so fo b s e r v a t i o ns h o wt h a tg e r m i n a t i o n s t a g ei si nt h es e c o n da n dl a s tt h i r d so ff e b r u a l y , f l o r e s c e n c ei sf r o mt h el a s tt h i r do fm a y t ot h el a s tt h i r do fa u g u s t ,f r u i tm a t u r i t ys t a g ei sa tt h ee n do fs e p t e m b e ra n d b e g i n n i n go f o c t o b e r 3 藤茶的形态学、生物学特性及主要化学成分研究 t h eg r o w t ho fn e ws h o o t s :o b s e r v a t i o nr e s u l t si n d i c a t et h a tt h eg r o w t ho fn e w s h o o t ss h o w e dat y p i c a ls i n g l es i g r n o i dc u r v e t h eg r o w t hw a ss l o wf r o mt h el a s tt h i r do f m a r c ht ot h ef i r s tt h i r do fa p r i l ,t h e nw e n tu pa n dp r e s e n t e ds l o wv e r t i c a ll i n ea s c e n d i n g f i o mt h em i d d l et h i r do fa p r i lt ot h em i d d l ea n dl a s tt h i r d so fj u n e ,u pt ot h ef i r s tt h i r do f j u l y , r a p i d l yg r o w na n dp r e s e n t e dv e r t i c a ll i n ea s c e n d i n g ,a f t e r w a r d ,t h eg r o w t hb e c a m e f l a t d u r i n gt h es a r f l ep e r i o d , e n s h it e n g c h an e ws h o o t ss h o w e dt h es l o w e s tg r o w t h b e f o r ej u n e ,b u ta f t e rt h a tt h e yg r e wf a s t e s ta m o n gt h et h r e em a t e r i a l s t h eg r o w t h c h a r a c t e r i s t i co fh u n a nt e n g c h an e ws h o o t sw a so p p o s i t e t h eg r o w t ho ft h et h r e e ss e c o n d a r ys h o o tw e n tu pa n dp r e s e n t e ds l o wv e r t i c a ll i n e a s c e n d i n gf r o mt h ef i r s tt h i r do fm a yt ot h el a s tt h i r do fj u n e i nt h em i d d l eo fj u l y , t h e g r o w t hq u i c k e n e d ,a f t e r w a r d ,t h eg r o w t hb e c a m ef l a t t h eg r o w t ho fh u n a nt e n g c h a n e ws h o o ti st h es l o w e s t ,w h i l ei t ss e c o n d a r ys h o o tg r e wt h ef a s t e s t t h er e s u l t ss h o wt h e a p i c a ld o m i n a n c eo fh u n a nt e n g c h as h o o t si sn o ts t r o n g ,a n di ti se a s yt ob r a n c h d y n a m i cc h a n g e so fn e tp h o t o s y n t h e t i cr a t e ( p n ) o ft e n g c h al e a v e s :d i u r n a l c h a n g e so fn e tp h o t o s y n t h e t i cr a t e ( p n ) o ft h r e et e n g c h al e a v e sp r e s e n tt y p i c a l n o o n d r o p ”b i m o d a lc u r v e s ,w h i c he x p r e s sao b v i o u sl u n c hb r e a kp h e n o m e n o n t h e l o w e s tp np o 缸o fh u n a nt e n g c h aa n de n s b jt e n g c h aa p p e a ra ta r o u n d1 4o c l o c k , h o w e v e r , t h ej i a n g x it e n g c h a sl o w e s tp o i i l ti sa ta r o u n d1 2o c l o c k s e a s o nd y n a m i c c h a n g e s 。o fp no ft h r e et e n g c h al e a v e sa l lp r e s e n t as i n g l e - p e a kc u r v e ,i t sh i g l l p h o t o s y n t h e t i cd u r a t i o no c c u r si nt h es e c o n dt h i r do fj u l ya n dt h ef i r s tt h i r do fa u g u s t t o u s el i g h te n e r g ya n di n c r e a s i n gy i e l db e t t e r , w es u g g e s tn o r t h s o u t hr o wd i r e c t i o n c u l t i v a t i o np o s t u r e s 2 r e s e a r c ho na n a t o m i c a is t r u c t u r eo ft e n g c h a s t r u c t u r ea n a t o m yo fr o o t , s t e m ,l e a fa n df l o w e ro ft h et h r e et e n g c h am a t e r i a l sw e r e o b s e r v e db ym i c r o s c o p ea n ds c a n n i n ge l e c t r o nm i c r o s e o p e ( s e m ) r i c hc a l c i u mo x a l a t e c r y s t a l sa r eo b s e r v e di n 仃a r 坞v e r s es e c t i o no fr o o t ,s t e ma n dl e a v e so ft h et h r e eb y m i c r o s c o p e o b s e r v e db ys e m ,e p i d e r m a lc e l l sa n dn o n - g l a n d u l a rh a i r so fs t e m sf r o mt h e t h r e ea r eo b v i o u s l yd i f f e r e n t ;a l s ot h e r ea r eo b v i o u sd i f f e r e n c e si ns p o n g yt i s s u ev o i d a g e , t h es h a p ea n dd e n s i t yo fu p p e re p i d e r m i sn o n - g l a n d u l a rh a i r so fl e a v e s ,s t o m a t a ld e n s i t y a n ds h a p eo fg u a r dc e l lo fl o w e re p i d e r m i s ,c u t i c l et e x t u r eo fu p p e ra n dl o w e re p i d e r m i s ; t h eo b s e r v i n gr e s u l t so ft h et h r e et e n g c h ap o l l e ns h o wt h a tt h et y p eo fa p e r t u r ei s t r i c o l p o r a t e ,e x i n eo r n a m e n t a t i o ni sf o v e o l 毛w h i l et h ed i f f e r e n c e si n t h es i z e sa n ds h a p e s o ft h et h r e et e n g c h ap o l l e n 目面n sa r eo b v i o u s 4 华中农业大学2 0 0 8 届硕士学位论文 3 c h e m i c a lc o m p o n e n t so ft e n g c h a c h e m i c a lc o m p o n e n tc o n t e n t so ft h et h r e e t e n g c h a , s u c ha s ,t o t a lf l a v o n e , d i h y d r o m y r i c e t i n , p o l y p h e n o l s ,z h n i n oa c i d s ,p r o t e i na n ds o l u b l es u g a rw e r ea n a l y z e d t h er e s u l t ss h o wt h a tt r e n d so fm a j o rc h e m i c a lc o m p o n e n tc o n t e n t sa r es i m i l a ra n dt h e p e 出a p p e a ri nt h em i d d l et h i r d o fj u n e ,a n dt h i ss u g g e s t st h eo p t i m u mp e r i o do f h a r v e s t i n g m a i nc h e m i c a lc o m p o n e n tc o n t e n t so fj i a n g x it e n g c h aa n dh u n a nt e n g c h a a r eb a g h e r , a n dt h et w oa r eo p t i o n a lm a t e r i a l so fi m p r o v e dv a r i e t y c h l o r o p h y l la n da n t h o c y a n i d i nc o n t e n t so ft h et h r e et e n g c h al e a v e sw e r ea n a l y z e d t h ef i n d i n g sa r ea sf o l l o w s :d y n a m i cc h a n g et r e n d sa r es i m i l a r ;t h ec o n t e n t so f c h l o r o p h y l l ,c h l o r o p h y l l aa n d c a r o t e n o i d si n c r e a s e dw i t ht h eg r o w t ho fl e a v e s ;p i c k e da t t h e 鼢l n et i m e ,t h ep i g m e n tc o n t e n to fh u b e it e n g c h ai st h eh i g h e s t , a n dt h e a n t h o c y a n i d i nc o n t e n to fj i a n g x it e n g c h ai st h eh i g h e s t , t h a t sw h yt h ec o l o u ro fj i a n g x i t e n g c h ab u d sa n d l e a v e si sm a u v e k e y w o r d s :t e n g c h a ;b i o l o g y ;m o r p h o l o g y ;a n a t o m i c a ls t r u c t u r e ;c h e m i c a l c o m p o n e n t s 5 藤茶的形态学、生物学特性及主要化学成分研究 英文缩写词语表 6 华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书 学位论文 否 如需保密,解密时间 是否保密 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果尽我所 知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成 果,也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,指导教师对 此进行了审定与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明, 并表示了谢意 研究生签名:张孥娟时间:,l ,o 孑年6 , e lf 宁日 学位论文使用授权书 本人完全了解“华中农业大学关于保存,使用学位论文的规定”,即学生必须按照学校要求 提交学位论文的印刷本和电子版本;学校有权保存提交论文的印刷版和电子版,并提供目录检 索和阅览服务,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存,汇编学位论文本人同意华中农 蝴槲张弥粤娟 撇名:_ 1 礴 签名魄翮年月f ? 日 签名魄硼年f 月7 日 华中农业大学2 0 0 8 届硕士学位论文 第一章文献综述 藤茶,系葡萄科( v i t a c e a em i c h x ) 蛇葡萄属( a m p e l o p s i s ) 的一种野生藤本植物, 学名为显齿蛇葡萄( d m p e l o p s i sg r o s s e d e n t a t aw t w a n g ) ,是一种典型的类茶植物, 俗称山甜茶、白茶、甘露茶、白毛猴等( 王文采,1 9 7 9 ;中国科学院植物研究所, 1 9 8 3 ) 。它是瑶族常用药之一,至今已有数百年的药用历史,入药以叶为主,带有 少量的茎枝。藤茶具有清热解毒、祛风湿、强筋骨、消炎、抑菌、止咳、祛痰、镇 痛、保肝、消脂、降血糖、抗高血压、消除自由基和增强免疫力等药理作用( 莫国 艳,2 0 0 3 ;y a b ec ta 1 ,1 9 9 7 ) ,民间常用于治疗感冒发热、咽喉肿痛、黄疸型肝炎、 疱疖等症( 广西植物研究所,1 9 7 4 :王文采,1 9 7 9 :中国科学院植物研究所,1 9 8 3 ; 全国中草药汇编,1 9 9 7 ) ,是一种非常古老的中草药资源、类茶植物资源和药食两 用植物资源( 广西植物研究所,1 9 7 4 ;全国中草药汇编编写组,1 9 9 7 ;张友胜等, 2 0 0 3 ) 。 l 藤茶的植物学特性、生物学特性、生理特征研究进展 1 1 藤茶的植物形态学研究进展 藤茶系木质藤本植物,茎攀援,分枝或少分枝,小枝圆柱形,有显著纵棱纹, 无毛,节膨大。卷须2 分叉,弯曲,相隔2 节间与叶对生( 刘建新和周天达,1 9 9 9 ) 。 叶为l 2 回羽状复叶,叶柄长1 5 - 3 c m ,无毛,托叶早落,枝上部叶几无柄,顶 生小叶具柄,侧生小叶无柄,少偏斜,两面均无毛,侧脉3 - - 5 对,网脉微突出,最 后一级网脉不明显。2 回羽状复叶者,基部一对为3 小叶,小叶卵圆形、卵椭圆形、 长椭圆形,长2 - - 5 c m 、宽1 2 5 c m 、顶端急尖或渐尖、基部阔楔形或近圆形,边 缘每侧有2 - 5 个锯齿,上面绿色,下面浅绿色( 陈杖洲,2 0 0 3 :易诚和宾东梅,2 0 0 1 ) 。 枝端或叶腋生聚伞花序,与叶对生,长3 6 c m ,直径2 3 - - - 一5 c m ,有梗,长4 c m : 包片小,三角形;花萼盘状,直径2 2 r a m :花瓣5 片,长圆形,长2 m m ;雄蕊5 枚; 花盘浅杯状( 陈杖洲,2 0 0 3 ) 。 果为浆果近球形,成熟时紫黑色,直径3 、 6 m m 。花期5 8 或6 9 月,果期8 1 2 或7 1 1 月( 刘建新和周天达,1 9 9 9 ) 。 1 2 藤茶形态解剖学研究进展 通过光学显微镜和扫描电镜研究植物各器官表面特征及内部解剖构造特征,可 为分类提供更为清晰准确的依据。 刘建新等利用常规石蜡切片的方法对藤茶的叶、茎、卷须、根横切面进行了研 究,为藤茶的生药鉴定和利用提供参考依据( 刘建新和周天达,1 9 9 9 ) 。肖冰梅等 7 藤茶的形态学、生物学特性及主要化学成分研究 对藤茶主要药用部位叶及叶柄进行了扫描电镜研究( 肖冰梅等,2 0 0 4 ) ,表明与常 规石蜡切片比较,电镜方法快速清晰,角质层纹理、表面非腺毛特征明显、极易区 分,鉴别意义大,扫描电镜方法的应用为藤茶药材的来源鉴别提供了一个新的有价 值的科学依据。何桂霞( 何桂霞,2 0 0 4 ) 对湖南藤茶地上营养器官叶、茎、叶柄的形 态结构进行了初步研究。已有的研究大多只对单个藤茶材料局部的形态结构进行研 究,对多个材料进行系统比较研究的较少。 1 3 藤茶的分布与适宜环境 藤茶主要分布于我国长江流域以南的广东、广西( 桂平、平南、隆林、岑渗等 地) 、湖南( 茶陵县、江华、衡阳、怀化、湘西) 、湖北西部、江西( 南部定南县、 萍乡、资溪、黎川、井冈山等地) 、福建( 南靖、上杭、建宁、南平建瓯、武夷山) 、 云南及贵州等省区的山地,在湖南衡东的罗霄山脉余脉,湖南湖北交界的武陵山脉, 雪峰山脉等地有大量分布( 韦家福和黄燮才,1 9 9 6 :王文采,1 9 7 9 ;潘利华和夏云 梯,2 0 0 1 ;宋纬文,1 9 9 6 :张育松和陈洪德,1 9 9 9 ;黄虹等,2 0 0 1 ;易诚,2 0 0 2 ) 。 黄虹等调查发现,该植物性喜温湿润的环境,喜温暖而略偏酸性的红黄壤或肥 沃沙质壤土,在土质疏松、阴湿、阳光不太强烈的地方生长良好,而在沙地或盐碱 地上生长发育严重受阻或不能生长,忌强光,怕干旱( 黄虹等,2 0 0 1 ;郑道君和刘 国民,2 0 0 6 :宋纬文等,1 9 9 7 ) 。多生长在海拔4 0 0 m - - 1 3 0 0 m 的山地,集中或散 生在阳坡或阴地的混杂林中和山地沟边。伴生的灌林和草本植物主要有野漆树、刺、 山莓、芒及芒萁等;另外还稀疏伴生有杉木、枫香等乔木( 黄虹等,2 0 0 1 ) 。 1 4 藤茶的物候期和生态习性 藤茶的物候期:雨水至惊蛰芽露白,春分左右发新芽、长新叶,小满至立秋茎 叶生长茂盛。盛花期立夏至夏至,立秋至立冬前果实成熟,立冬后开始落叶,植株 逐渐停止生长。从发新芽长出新叶到植株枯萎,整个生长期需2 2 0 d 2 5 0 d 左右。在 湘西南,藤茶( 显齿蛇葡萄) 每年从惊蛰开始萌发新芽( 叶) ,当年寒露节开始落叶, 生长季节历时7 个月左右( 郑道君和刘国民,2 0 0 6 ) 。 藤茶适应性强,不论处于自然或栽培条件下,一般当气温5 天内持续l o 时, 越冬后的植物即可开始萌发生长,最适生长温度2 0 - - - 2 5 ,秋季气温下降至8 以下时,叶片变黄开始脱落。在优越环境条件,全年生长而无明显的休眠现象:其 中5 - - 7 三个月营养生长特别旺盛( 黄虹等,2 0 0 1 ) 。 1 5 藤茶的人工栽培和苗种繁殖 藤茶主要为野生分布,呈匍匐状攀岩在山地杂木、灌木表面( 中国科学院植物 研究所,1 9 8 3 ) 。据不完全统计,全国野生藤茶分布的面积大约3 0 0 多万亩。随着人 8 华中农业大学2 0 0 8 届硕士学位论文 们对藤茶资源的利用,野生藤茶已不能满足需求。上世纪9 0 年代初期,湖南吴应邦 等人开始对显齿蛇葡萄进行小面积人工栽培试验( 郑道君和刘国民,2 0 0 6 ) 。经人 工栽培的藤茶一年生长季节内割蔓次数可由原来的3 , - - , 4 次增加到7 次。刘国民( 2 0 0 2 ) 在海口地区人工栽培试验也取得成功,认为夏季用5 0 6 0 遮阳网遮荫有利于提 高藤蔓产量。李安琪( 李安琪,2 0 0 7 ) 对藤茶的施肥进行了研究,发现氮肥、磷肥、 钾肥、复合肥、农家肥对藤茶主要品质成分影响显著。磷肥、钾肥有利于藤茶黄酮、 多酚、水浸出物及c a 、m g 、f e 、z n 的积累。氮肥有利于藤茶中氨基酸、可溶性蛋 白质和水浸出物含量的增加。 郑小江等系统研究和制作了湖北地方标准来凤藤茶种植技术规程,并经湖 北省质量技术监督局批准、发布、实施。这为规范藤茶( 显齿蛇葡萄) 种植,保证 藤茶原料生产质量,使藤茶资源开发利用走上产业化、科学化轨道和制定国家标准 提供了依据( 郑小江等,2 0 0 6 ) 。 为解决大面积人工栽培带来的种苗问题。宋纬文等( 宋纬文等,1 9 9 7 ) 以细砂 或细土作为苗床,以三年生野生枝条带2 3 个节的插穗进行扦插育苗试验,并获得 了成功。刘国民2 0 0 2 年从湖南通道侗族自治县和湖南江华瑶族自治县引进野生藤茶 的藤蔓至海口地区进行扦插育苗和人工栽培试验,并取得初步成功( 郑道君和刘国 民,2 0 0 6 ) 。易诚等( 易诚,2 0 0 3 ) 使用不同浓度的n a a ( 萘乙酸) 、n a ( 吲哚 乙酸) 、i b a ( 吲哚丁酸) 、a b t ( 生根粉) 等生长调节物质在不同的基质进行扦插 育苗试验,为藤茶种苗的规模化生产提供了可能。此外,易诚、张霞等对藤茶组织 培养相关技术也作了初步研究,为藤茶的快速繁殖提供了参考依据( 易诚等,2 0 0 5 ; 张霞,2 0 0 7 ) 。 郑小江等( 郑小江等,2 0 0 4 ) 从鄂西地区生长的显齿蛇葡萄植株中选育出了优 良无性系“绿凤品种,为藤茶的人工栽培奠定了基础。目前在湖北、湖南等地已 有大面积的人工栽培藤茶园。有关藤茶的栽培管理技术都处在摸索阶段,还有待深 入研究。 2 藤茶主要化学成分的研究进展 2 1 藤茶的基本化学成分研究 张友胜( 2 0 0 1 ) 测定了湖南显齿蛇葡萄的基本成分,表明叶片含粗蛋白1 3 9 4 , 可溶性蛋白0 5 5 ,氨基酸2 5 3 ,总多酚18 5 0 ,总黄酮3 9 左右,二氢杨梅素 3 0 6 0 ,其中,对氨基酸组分及无机元素也进行了分析。薛慧( 2 0 0 4 ) 等分析了恩 施来凤藤茶微量元素含量,并与绿茶进行了比较,发现藤茶中f e 、c u 、z n 、m g 、 m n 、s e 、n a 、f 及i 的含量比常用绿茶高。 9 藤茶的形态学、生物学特性及主要化学成分研究 熊皓平( 2 0 0 4 ) 分析了显齿蛇葡萄春、夏、秋幼叶、幼茎及春、夏幼嫩茎叶加 工样中水浸出物、水溶性糖、水溶性蛋白质、氨基酸总量、多酚类物质总量、黄酮 类物质总量、总灰分等。结果表明:显齿蛇葡萄春、夏幼嫩茎叶的水浸出物含量高 ( 接近5 0 ) ,其中水溶性糖含量约为1 0 ,氨基酸含量约为5 ,具有丰富药理功 能的多酚类化合物含量约为2 0 ,黄酮类化合物含量在3 0 以上。 2 2 藤茶成分的提取分离、结构鉴定研究进展 周天达等从藤茶乙醇提取物中分离纯化出二氢杨梅素( d i h y d r o m y r i e e t i n ,简称 d m y ) 、杨梅素( m y r i c e t i n ,简称m y r ) 物质( 周天达和周雪仙,1 9 9 6 :覃洁萍等, 1 9 9 7 ;何桂霞等,1 9 9 9 ) 。张友胜等先后从藤茶中分离出槲皮素、槲皮素葡萄糖甙、 花旗松素、洋芹素、藤茶甙和藤茶素、杨梅黄素、杨梅甙等黄酮类物质以及龙涎香 醇、d 一谷甾醇、棕榈酸、b 一谷甾醇、大黄素、没食子酸甲酯等化合物( 张友胜等, 2 0 0 3 ;王定勇和许素英,1 9 9 9 ) 。q i z h e nd u ( d u e ta 1 ,2 0 0 4 ) 采用高速逆流色谱 ( h s c c c ) 分离出2 种黄酮苷5 ,7 一羟基一3 ,4 ,5 一三羟基黄酮一3 一o 一6 一鼠 李糖和5 ,7 一羟基一3 ,4 一二羟基黄酮- - 3 - - 0 - - 6 - - 鼠李糖。此外,罗祖友等( 罗 祖友等,2 0 0 5 ) 研究表明,藤茶中含大量活性多糖,并研究了从藤茶水溶液中提取 活性多糖的工艺路线。 符史良等( 符史良等,2 0 0 4 ) 从藤茶乙醇萃取物中分离出4 0 个组分挥发性化学 成份,鉴定出其中3 4 种化合物,主要为酚类和酯类化合物。此外,王华夫等( 王华 夫和游小清,1 9 9 6 ) 从藤茶中分离并鉴定出2 8 种香气成份,占香精油总量的6 4 。 张友胜等( 张友胜等,2 0 0 1 ) 从藤茶春季和夏季幼嫩茎叶中分别鉴定出2 6 和1 7 种 挥发油化合物,其春季样、夏季样的挥发油成分差别大,其中仅有7 种成分相同, 但该7 种成分占较大比例,尤其是叶绿醇、正十六酸和雪松醇占主要地位。 2 3 藤茶主要活性成分二氢杨梅素的提取分离、测定方法研究进展 藤茶的主要活性成份为黄酮类化合物,其中,以二氢杨梅素为主。因此,有关 藤茶二氢杨梅素的提取分离的研究也较深入。二氢杨梅素的提取分离方法目前主要 有水提法和醇提法两种。水提法一般先采用石油醚回流脱去脂溶性色素,再用水提 取,滤液浓缩后放置得粗结晶,粗晶用丙酮溶解分离,进一步用5 0 乙醇分步重结 晶,得到较纯的产品( 覃洁萍等,2 0 0 2 ) 。李卫等人( 2 0 0 4 ) 则利用逆流法提取二 氢杨梅素,通过对提取温度、料液比、p h 、时间等因素的研究,优化出沸水提取料 液比1 :1 0 ,提取时间6 0 m i n ,用偏碱性水溶液提取的分离条件,得到较好效果。杨 铃等进一步采用微波辅助水提技术,可提高二氢杨梅素提取效率( 杨铃等,2 0 0 5 ; 郑成等,2 0 0 6 ) 。 醇提法是先用石油醚回流脱脂,残渣加9 5 7 , 醇回流提取,除去乙醇加适量蒸 1 0 华中农业大学2 0 0 8 届硕士学位论文 馏水加热溶解过滤,冷却析晶,离心,收集沉淀,复溶析晶得到产品( 罗祖友,2 0 0 5 ) 。 王岩采用l 9 ( 3 ) 4 正交实验法初步研究了乙醇浓度、乙醇用量、提取时间和提取次数4 个因素对蛇葡萄素提取率的影响,结果选用8 0 乙醇,乙醇用量为药材量的1 0 倍, 加热回流2 次,每次6 0 m i n 为最佳方案( 王岩和周莉玲,2 0 0 2 ) 。 q i z h e nd u ( d ue ta 1 ,2 0 0 2 ) 等采用高速逆流色谱和高效液相色谱联合法分离纯 化的二氢杨梅素纯度可达9 9 以上。 测定藤茶中二氢杨梅素含量的方法多采用h p l c 法,选用c 1 8 柱,流动相选择 甲醇:水:磷酸( 2 7 :7 3 :0 1 ) 或乙腈2 冰醋酸( 2 3 :7 7 ) ,可达到较好分离效果。 该方法操作简便,分离效果好,精确度高( 何桂霞等,2 0 0 4 ;李瑛琦等,2 0 0 3 ) 。 此外采用差示分光光度法、薄层扫描法也可以较准确地测定藤茶中二氢杨梅素含量 ( 覃洁萍等,2 0 0 2 ;何桂霞等,2 0 0 0 ) 。 3 藤茶的药理学研究进展 在民间人们习惯用藤茶嫩枝叶泡水来治感冒、咽喉肿痛、急性结膜炎、痈疖及 病毒性肝炎等病,认为有消炎、抑菌、保肝、降血糖等功效。为进一步证实其疗效, 不少专家进行了相应的药理学研究。 3 1 抑菌化脓 林芹等等对藤茶的抑菌作用进行了研究,证明藤茶的煎剂对8 种常见致病菌有 较好的抑制作用,特别是对金黄色葡葡球菌、白色葡萄球菌、奈氏菌、痢疾杆菌、 伤寒杆菌和绿脓杆菌都有较好的抗菌效果( 林芹和林英辉,2 0 0 0 ) ;杨书珍等研究 表明二氢杨梅素对牛奶酸

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