（水产养殖专业论文）氨氮和亚硝酸盐对黄颡鱼的毒性研究.pdf

华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书 学位论文 如需保密，解密时间年月曰 是否保密舌 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究 成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已 经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位 或证书而使用过的材料，指导教师对此送行了审定。与我一同工作的同志对本研究 所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意。 研究生签名：慈? 出 时间：砂，。年。月，日 学位论文使用授权书 本人完全了解“华中农业大学关于保存、使用学位论文的规定，即学生必须按 照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存提交论文的印刷版和 电子版，并提供目录检索和阅览服务，可以采用影印，缩印或扫描等复制手段保存、 汇编学位论文。本人同意华中农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学 位论文的全部或部分内容。 注：保密学位论文在解密后适用于本授权书。 学位敝储始磐? 冬锄张榜磁 签名日期：加f 口年瑚f 口日签名日期：矽7 9 年疹月厂口日 注：请将本表直接装订在学位论文的扉页和目录之间 华中农业大学2 0 1 0 届硕士毕业论文 目录 摘要i a b s t r a c t i i i 中英文缩略词对照表v 第一章文献综述1 1 1 水体中氨氮和亚硝酸盐的来源1 1 2 氨氮和亚硝酸盐在水产养殖中的作用1 1 3 氨氮和亚硝酸盐对鱼类的毒性研究1 1 3 1 急性毒性试验1 1 3 2 慢性毒性试验2 1 3 2 1 氨氮和亚硝酸盐对鱼类摄食和生长的影响2 1 3 2 2 氨氮和亚硝酸盐对鱼类组织器官结构的影响3 1 3 2 3 氨氮和亚硝酸盐对鱼类血液指标的影响3 1 3 2 4 氨氮和亚硝酸盐对鱼类抗氧化酶系统的影响4 1 4 影响氨氮和亚硝酸盐毒性的因素4 1 4 1p h 和水温对氨氮和亚硝酸盐的影响4 1 4 2 溶氧对氨氮和亚硝酸盐的影响5 1 4 3 盐度对氨氮和亚硝酸盐的影响5 1 4 。4 养殖密度对氨氮和亚硝酸盐的影响5 1 5 研究目的与意义6 1 6 研究内容6 第二章氨氮和亚硝酸盐对不同规格黄颡鱼的急性毒性研究7 2 1 材料与方法7 2 1 1 试验材料7 2 1 2 试验方法8 2 1 3 数据处理8 2 2 试验结果9 2 2 1 中毒症状9 2 2 2 氨氮和亚硝酸盐对黄颡鱼的毒性1 0 氨氮和亚硝酸盐对黄颡鱼的毒性研究 2 3 讨论1 1 2 3 1 中毒症状1 1 2 3 2 氨氮和亚硝酸盐对黄颡鱼的毒性1 2 第三章不同溶氧水平下氨氮和亚硝酸盐对黄颡鱼的急性毒性研究1 5 3 1 材料和方法15 3 1 1 试验材料1 5 3 1 2 试验方法15 3 1 2 1 溶解氧对氨氮和亚硝酸盐浓度的影响1 5 3 1 2 2 预试验方法1 6 3 1 2 3 急性毒性试验方法1 6 3 1 3 数据处理1 6 3 2 试验结果1 6 3 2 1 溶解氧对氨氮和亚硝酸盐浓度的影响1 6 3 2 2 中毒症状18 3 2 3 氨氮对黄颡鱼的毒性1 8 3 2 4 亚硝酸盐对黄颡鱼的毒性l8 3 3 讨论1 9 第四章慢性氨氮胁迫对黄颡鱼的生长、摄食以及血液指标的影响2 3 4 1 材料与方法2 3 4 1 1 试验鱼来源2 3 4 1 2 试验方法2 3 4 1 3 试验观察和测量2 4 4 1 3 1 中毒症状2 4 4 1 3 2 生长和摄食2 4 4 1 3 3 血液指标2 4 4 1 4 数据处理2 5 4 2 试验结果2 6 4 2 1 中毒症状2 6 4 2 2 慢性氨氮胁迫对黄颡鱼生长和摄食的影响2 6 华中农业大学2 0 1 0 届硕士毕业论文 4 2 3 慢性氨氮胁迫对黄颡鱼鱼体成分和能量收支的影响2 6 4 2 4 慢性氨氮胁迫对黄颡鱼血液指标的影响2 8 4 3 讨论2 9 4 3 1 慢性氨氮胁迫对黄颡鱼活动和死亡的影响2 9 4 3 2 慢性氨氮胁迫对黄颡鱼生长和摄食的影响3 0 4 3 3 慢性氨氮胁迫对黄颡鱼血液指标的影响。3 0 参考文献3 2 附录4 2 致谢4 3 华中农业大学2 0 1 0 届硕士毕业论文 摘要 本文研究了氨氮和亚硝酸盐对不同发育阶段黄颡鱼( p e l t e o b a g r u sf u l v i d r a c o ) 的急性毒性效应，并初步阐明了不同溶解氧水平下氨氮和亚硝酸盐对黄颡鱼急性毒 性效应的影响，并深入分析了慢性氨氮胁迫对黄颡鱼幼鱼生长、摄食的影响；同时， 通过血液生化指标和能量收支代谢，分析黄颡鱼机体的应激反应和能量收支代谢途 径变化规律，丰富了黄颡鱼的毒理研究资料，为黄颡鱼的健康养殖提供科学依据。 首先，为了明确黄颡鱼对氨氮和亚硝酸盐的敏感性，以及敏感性是否与黄颡鱼 规格存在密切联系，通过9 6h 半静水方式水生生物急性毒性试验法，采用了4 种规格 的黄颡鱼( 规格10 0 3 44 - 0 0 0 2g 、规格1 10 2 9 64 - 0 0 4 9g 、规格i i l 3 5 1 64 - 0 9 4 6g 和 规格3 2 9 5 8 士5 7 4 8g ) 进行了急性毒性试验。结果表明：4 种规格黄颡鱼在氨氮和 亚硝酸盐暴露9 6h 后，其非离子氨的9 6h 半致死浓度( 9 6hl c 5 0 ) 分别为0 3 7m g l 、 0 5 4m g l 、o 7 1m g l 、1 0 3r a g l ：亚硝酸盐的9 6hl c s o 分别为6 9 0 3m g l 、9 7 1 8 m 叽、1 3 3 5 5m g l 、1 9 5 9 6m g l 。从仔鱼到成鱼阶段，黄颡鱼对非离子氨和亚硝酸 盐的敏感性逐渐降低，其鱼体规格与9 6hl c s o 存在密切的相关性( 尸 0 0 5 ) 。 在高溶氧( 1 0 。7 74 - 0 4 0 ) m g l 、中等溶氧( 6 8 94 - o 3 3 ) m g l 和低溶氧( 3 4 5 4 - o 5 4 ) m g l 水平下，通过9 6h 半静水方式水生生物急性毒性试验法，研究了氨氮和 亚硝酸盐对黄颡鱼急性毒性效应。结果显示：高溶氧水平下，非离子氨和亚硝酸盐 对黄颡鱼的9 6hl c 5 0 分别为0 7 4m g l 、1 3 7 6 9m g l ：在中等溶氧水平下，氨氮和 亚硝酸盐对黄颡鱼的9 6hl c 5 0 分别为o 5 4m g l 、9 7 1 8m g l ；而低溶氧水平下，氨 氮和亚硝酸盐对黄颡鱼的9 6hl c 5 0 分别为0 3 4m g l 、5 4 2 2m l 。在3 种不同溶氧 水平下，非离子氨对黄颡鱼的毒性明显大于亚硝酸盐对黄颡鱼的毒性，说明氨氮对 黄颡鱼的毒性成为其养殖过程中的重要影响因子；同时，高溶氧可以降低非离子氨 和亚硝酸盐对黄颡鱼的毒性，因而，可以通过增加水体中溶解氧来降低非离子氨对 黄颡鱼的毒性，提高黄颡鱼养殖的存活率。 为了进一步探讨慢性氨氮胁迫对黄颡鱼幼鱼的生长、摄食及血液指标的影响， 挑选规格相近的健康黄颡鱼分别饲养在氨氮浓度为3 3 6m l ( a 1 ) 、6 7 2m g l ( a 2 ) 、 1 3 4 4m g l ( a 3 ) 、2 6 8 8m g l ( a 4 ) 的水体中，对照组( a o ) 用不加外源氨氮的自 然晾晒的自来水饲养。每组放养试验鱼3 0 尾，暴露5 6d 。结果表明，非离子氨对黄 氨氮和亚硝酸盐对黄颡鱼的毒性研究 颡鱼幼鱼的生长、摄食及血液指标存在显著影响( 尸 0 0 5 ) ，而对鱼体成分的影响 不显著( 胗o 0 5 ) 。随着非离子氨浓度升高，高浓度组摄食率明显下降，饲料利用 率降低，生长缓慢，特定生长率( s g r ) 和存活率都较对照组低。血氨浓度随非离 子氨浓度升高而显著升高( p 0 0 1 ) ，各处理组血氨浓度远低于其所处环境总氨氮 ( 吖州) 浓度，而血浆尿素氮( u r - n ) 水平逐渐降低但差异不显著。a 3 和碱性磷 酸酶( a k p ) 活性和皮质醇水平升高较快，a l 和a 2 尽管呈上升趋势但与对照组差异 不显著( 胗o 0 5 ) 。血糖( g l u ) 浓度总体上表现为降低的趋势，2 个高浓度组( a 3 和) 下降速度较快。谷丙转氨酶( a l t ) 和谷草转氨酶( a s t ) 活性总体呈升高 趋势，非离子氨浓度越大其升高趋势越明显。因此，黄颡鱼幼鱼不宜长期生活在高 浓度的氨氮胁迫环境中，适宜的养殖水体中氨氮应该保持在低于6 7 2m g l 水平。 关键词：氨氮；亚硝酸盐；黄颡鱼；急性毒性；慢性胁迫；半致死浓度( l c 5 0 ) ；摄 食；成活率；血液学指标 华中农业大学2 0 1 0 届硕士毕业论文 a b s t r a c t i nt h i sp a p e r ，t h et o x i c i t yo fa n m a o n i aa n dn i t r i t ew e r es t u d i e di n d i f f e r e n t d e v e l o p m e n t a ls t a g e so ft h ey e l l o wc a t f i s h ( p e l t e o b a g r u sf u l v i d r a c o ) ，a n dt h ec h r o n i c i m p a c to fa m m o n i al e v e l so ng r o w t hp e r f o r m a n c eo fj u v e n i l ey e l l o wc a t f i s h a n dw e e x p l a i n e df i r s t l yt h ee f f e c t so fa m m o n i aa n dn i t r i t et o x i c i t yo ny e l l l o wc a t f i s ha th i e ) ， m e d i u m ，a n dl o wd i s s l o v e do x y g e n t h r o u g ht h e r e s u l t so ft h e b l o o db i o c h e m i c a l c a t f i s h s t r e s sr e s p o n s ea n de n e r g ym e t a b o l i s mp a t h w a yw e r eu n d e r s t a n di ny e l l o w t h e9 6hm e d i a nl e t h a lc o n c e n t r a t i o n ( 9 6hl c s o ) t e s t sw e r ec o n d u c t e du s i n gf o u r d i f f e r e n ts i z e so fy e l l o wc a t f i s ht op r o v i d ep r i m a r yi n f o r m a t i o no nt h es e n s i t i v i t yo f t h i s s p e c i e st oe l e v a t ea m m o n i a o rn i t r i t e ，a n dt od e t e r m i n ei ft h es e n s i t i v i t yi sm e d i a t e db y s i z e t h er e s u i t ss h o w e dt h a tt h e9 6 hl c 5 0o f f i s hw e i g h t e d10 0 3 44 - 0 0 0 2g ，1 10 2 9 64 - 0 0 4 9g ，i i l 3 5 1 64 - 0 9 4 6ga n di v 3 2 9 5 84 - 5 7 4 8gt ou n - i o n i z e da m m o n i a w e r e0 3 7 m g l ，0 5 4m g l ，0 7 1 m g la n d1 0 3m g l ，r e s p e c t i v e l y ，a n dn i t r i t ew e r e6 9 0 3m g l ， 9 7 1 8m g l ，1 3 3 5 5m g m a n d1 9 5 9 6m g l ，r e s p e c t i v e l y t h e s er e s u l t si n d i c a t e dt h a tt h e s u s c e p t i b i l i t yo ft h i sf i s ht oa m m o n i a o rn i t r i t er e d u c e dw i t hi n c r e a s i n gs i z e ，a n de x i s t e d i nc e r t a i n l yc o r r e l a t i o n sb e t w e e nt h e m ( p 0 0 5 ) t h r o u g h9 6ht h ew a t e ra q u a t i c a c u t et o x i c i t yt e s t , t h ea c u t et o x i ce f f e c t so f a m m o n i a 锄dn i t r i t eo ny e l l o wc a t f i s hw e r es t u d i e da th i g hd i s s l o v e do x y g e n ( 1 o 7 74 - 0 4 0 ) m g m ，m e d i u md i s s l o v e do x y g e n ( 6 8 94 - 0 3 3 ) m g l ，a n dl o wd i s s l o v e do x y g e n ( 3 4 5 士0 5 4 ) m g l t h er e s u l t ss h o w e dt h a tt h e9 6hl c s 0o f u n - i o n i z e da m m o n i aa n d n i t r i t et ot h ey e l l o wc a t f i s hw e r e0 5 4m g l ，a n d9 7 18m g lr e s p e c t i v e l ya tm e d i u m d i s s 0 1 v e do x y g e nl e v e l w h i l et h e yw e r ee x p o s e dt oh i g hd i s s o l v e dc o n d i t i o n s ，t h e9 6h l c 5 0o fu n i o n i z e da m m o n i aa n dn i t r i t ew e r ei n c r e a s e dt o0 7 4m g la n d 13 7 6 9m g l r e s p e c t i v e l y w h e nt h e yw e r ee x p o s e dt ol o wd i s s o l v e dc o n d i t i o n s ，t h e9 6hl c s 0o f u n i o n i z e da m m o n i aa n dn i t r i t ew e r er e s p e c t i v e l yd e c r e a s e dt o0 3 4m g l ，5 4 2 2m e g l r e s p e c t i v e l y n om a t t e r a tw h a td i s s o l v e do x y g e nc o n d i t i o n s ，a m m o n i aw a sm u c h s t r o n g e rt h a nn i t r i t ei nt o x i c i t yt oy e l l o wc a t f i s h s oa m m o n i ai nt o x i c i t yt ot h ey e l l o w i i i 氨氮和亚硝酸盐对黄颡鱼的毒性研究 c a t f i s hi so n ei m p o r t e n tf a c t o ri nd u r a t i o no fa q u a c u l t u r e a tt h es a m et i m e ，y e l l o wc a t f i s h t o l e r a t e dm u c hh i g h e rc o n c e n t r a t i o n so fn i t r i t eo ru n - i o n i z e da m m o n i au n d e rh i 曲 d i s s l o v e do x y g e n a tl a s t ，t h ew a yt h a tc o u l di m p r o v e dt h ey e l l o wc a t f i s he n d u r a n c et o n i t r i t ea n dt i n i o n i z e da m m o n i aw a sa l s oa d v a n c e di nt h i ss t u d yt oi n c r e a s et h es u r v i v a lo f t h ey e l l o wc a t f i s hf a r m i n g t h ee f f e c t so fs u b l e t h a la m m o n i aw e r ed e t e r m i n e dw i t hr e s p e c tt ot h es t r e s so n g r o w t h ，f o o di n t a k ea n db l o o dp a r a m e t e r so ft h ey e l l o wc a t f i s hj u v e n i l e s t h eh e a l t ho f c a t f i s hw e r er e s p e c t i v e l yk e p ti na m m o n i ac o n c e n t r a t i o n ( 3 3 6m g l ，6 7 2m g l ，1 3 4 4 m e g l ，2 6 8 8m g l ，a n dt h ec o n t r o lg r o u p f o u rh u n d r e da n df i f t yf i s hi ng o o dh e a l t ha n d c o n d i t i o nw e r ee v e n l yd i s t r i b u t e da m o n gf i f t e e n2 8 0 - lc i r c u l a rf i b e r g l a s st a n k s ，a n dt h e e x p o s u r et i m ew a s5 6d t h er e s u l t ss h o w e dt h a tu n i o n i z e da m m o n i ah a ds i g n i f i c a n t l y e f f e c t e do ng r o w t h ，f e e d i n ga n db l o o dp a r a m e t e r sf o rt h ey e l l o wc a t f i s hj u v e n i l e s ，b u tn o t s i g n i f i c a n t l yd i f f e r e n to nt h eb o d yc o m p o s i t i o np 0 0 5 ) w i t ht h ei n c r e a s eo fu n i o n i z e d a m m o n i a , f e e d i n gr a t ew a ss i g n i f i c a n t l yd e c r e a s e da n df e e de f f i c i e n c yr e d u c e d ，w h i c h h a v i n gs l o w l yg r o w t ha n dh i g h e rm o r t a l i t y p l a s m aa m m o n i ac o n c e n t r a t i o ns i g n i f i c a n t l y i n c r e a s e d 泸 o o1 ) ，a n dt h et r e a t m e n tg r o u pb l o o da m m o n i ac o n c e n t r a t i o nw a sm u c h l o w e rt h a nt h es u r r o u n d i n gt o t a la m m o n i a ( t a n ) h o w e v e r , p l a s m au r e an i t r o g e nl e v e l s w e r en o td i f f e r e n c es i g n i f f i c a n t l yi na l le x p e r i m e n t a lg r o u p s a l k a l i n ep h o s p h a t a s e ( a k p ) a c t i v i t ya n dc o r t i s o l l e v e l si n c r e a s e dq u i c k l yi nt w oc o n c e n t r a t i o ng r o u p ( a 3 ，a 4 ) ， a l t h o u g hi n c r e a s e di nt h el o wc o n c e n t r a t i o ng r o u pc o m p a r e dw i t ht h ec o n t r o lg r o u p ，b u t n o ts i g n i f i c a n t l yd i f f e r e n tp o 0 5 ) g l u c o s e ( g l u ) c o n c e n t r a t i o n sg e n e r a l l ys h o w e da d e c r e a s i n gt r e n do ft w oh i 曲c o n c e n t r a t i o ng r o u p ( a 3 ，a 4 ) d e c r e a s e dr a p i d l y a l a m i n e a m i n o t r a n s f e r a s e ( a l t ) a n da s p a r t a t ea m i n o t r a n s f e r a s e ( a s t ) a c t i v i t yt e n d e dt oi n c r e a s e o v e r a l l ，t h em o r eo b v i o u si nt h eh i g ha n i o n i z e da m m o n i ac o n c e n t r a t i o n ，t h eg r e a t e rt h e t e n d e n c yo fi t si n c r e a s e t h e r e f o r e ，i tw a sn o ta p p r o p r i a t ef o ry e l l o wc a t f i s hj u v e n i l e si n t h eh i g hc o n c e n t r a t i o no fa m m o n i a , a n ds h o u l db em a i n t a i n e da tl e s st h a n6 7 2m e g l k e yw o r d s ：a m m o o n i a ；n i t r i t e ；p e l t e o b a g r u sf u l v i d r a c o ；a c u t et o x i c i t y ；c h r o n i cs t r e s s ； m e d i a nl e t h a lc o n c e n t r a t i o n s ( l c 5 0 ) ；f e e d i n gr a t e ；s u r v i v a l ；h a e m a t o l o g i c a lp a r a m e t e r s i v 华中农业大学2 0 1 0 届硕士毕业论文 中英文缩略词对照表 a k p碱性磷酸酶 a l k a l i n ep h o s h p a t a s e a l t谷丙转氨酶 a l a m i n ea m i n o t r a n s f e r a s e a s t谷草转氨酶 a s p a r t a t ea m i n o t r a n s f e r a s e f a a游离氨基酸 f r e ea m i n oa c i d g l u血糖 l c s o p a t a n u i a n g l u c o s e 半致死浓度 5 0 l e t h a lc o n c e n t r a t i o n 血氨 总氨 总蛋白 非离子氨 p l a s m aa m m o n i a t o t a la m m o n i a n i t r o g e n t o t a lp r o t e i n u n i o n i z e da m m o n i an i t r o g e n u r - n尿素氮 u r e an i t r o g e n - v 华中农业大学2 0 1 0 届硕士毕业论文 第一章文献综述 1 1 水体中氨氮和亚硝酸盐的来源 养殖水体中产生的氨有三个方面：( 1 ) 含氮有机物的分解产生氨；( 2 ) 水中缺 氧时，含氮有机物被反硝化细菌还原产生氨；( 3 ) 水生动物的代谢以氨的形式排出 体外。亚硝酸盐的主要来源是在缺氧的条件中氨氮在厌氧细菌的硝化作用转化而生 成的；此外，硝酸盐还原和浮游植物代谢活动也可以产生亚硝酸盐。在精养池塘中， 残饵和鱼类排泄物沉积在池底，在高温季节会产生大量的氨氮、硫化氢( h 2 s ) 和亚 硝酸盐等，其中氨氮含量增加显著( h a r g r e a v e s ，1 9 9 8 ；h a g o p i a na n dr i l e y , 1 9 9 8 ；孙 舰军和丁美丽，1 9 9 9 ) 。 1 2 氨氮和亚硝酸盐在水产养殖中的作用 在水产养殖中，利用氨水能杀灭池塘中的野杂鱼和其他有害生物( 王武，2 0 0 0 ) ， 也可以用于鱼病防治；通常氨氮作为水生植物和浮游植物生长中最重要的氮源，水 体氨氮含量不足常常成为初级生产力的限制因素( 张东鸣等，1 9 9 9 ) 。亚硝酸盐在水 体中含量不稳定，当水体溶氧充足时，亚硝酸盐氮在硝化细菌的作用下转化为无毒 的硝态氮，而在缺氧条件下反硝化细菌又将其转化为毒性更强的氨氮。 氨氮和亚硝酸盐对水生生物的主要作用是有害的，具体表现为消耗水体的溶氧， 影响鱼类的正常呼吸和摄食，延缓鱼类的生长，对鱼体生理指标和组织器官会造成 严重影响( h a r g r e a v e sa n dk u c u k ，2 0 0 1 ：r a n d a l la n dt s u i ，2 0 0 2 ；朱耘等，1 9 9 5 ；余 瑞兰等，1 9 9 9 a ，b ；魏泰莉等，1 9 9 9 ；谭烨辉等，2 0 0 3 ；夏苏东等，2 0 0 9 ) 。大量研 究结果表明，发病池塘的非离子氨和亚硝酸盐浓度均高于未发病池塘，硝酸盐却低 于未发病池塘，因而非离子氨和亚硝酸盐是诱发鱼病的主要环境因子( 王鸿泰和胡 德高，1 9 8 9 ；赵玉宝等，1 9 9 4 ；蒋艾青等，2 0 0 5 ) 。 1 3 氨氮和亚硝酸盐对鱼类的毒性研究 1 3 1 急性毒性试验 急性毒性试验( a c u t et o x i c i t yt e s t ) 是指在短时间内( 通常为4 8 - 9 6h ) 接触高 氨氮和亚硝酸盐对黄颡鱼的毒性研究 浓度毒物时，被测试化学物质能引起试验动物群体产生特定百分数有害影响的试验 ( 姜福全，2 0 0 6 ) 。u s e p a ( 1 9 8 4 、1 9 8 9 ) 报道了淡水鱼非离子氨的l c s o 是2 7 9m g l ， 海水鱼非离子氨的l c 5 0 是1 8 6m g l 。其中，非离子氨对印鲮( c i r r h i n u sm r i g a l a ) 的9 6hl c 5 0 为1 0 2 9m g l ( d a se ta 1 ，2 0 0 3 ) 。鲤鱼( c o m m o nc a r p ) 在水温2 0 - 2 2o c 时，对总氨氮的2 4hl c s o 是1 2 3m g l ，非离子氨是4 5 5m g l ( p e y g h a na n dt a k a m y , 2 0 0 2 ) 。亚硝酸盐对尼罗罗非鱼的9 6hl c 5 0 是2 8m g l ( 赵元凤等，1 9 9 1 ) 。亚硝酸 盐对长尾墨金丝神仙幼鱼的9 6hl c 5 0 是4 8 9 0m g l ( 魏东等，2 0 0 7 ) 。有关学者对 氨氮和亚硝酸盐的毒性进行了对比试验。杜浩等( 2 0 0 7 ) 研究了亚硝酸盐和非离子 氨对中华鲟稚鱼的9 6hl c 5 0 分别为2 5 7m g l 、0 3 9m g l 。而且，对食蚊鱼进行9 6 h 氨氮和亚硝酸盐的急性毒性试验，发现食蚊鱼对氨氮的2 4 、4 8 、7 2 、9 6h 的l c s o 分别为8 0 0 0 、5 4 8 1 、5 2 7 8 、4 4 5 8m g l ，非离子氨的2 4hl c s o 为2 0 0m g l ；对 亚硝酸氮的2 4 、4 8 、7 2 、9 6h 的l c 5 0 分别为9 1 9 、7 46 、6 0 6 、5 9 9m g l ( 熊泽泉 等，2 0 0 9 ) ，鱼类对亚硝酸盐的耐受力强于非离子氨。王侃和刘荭( 1 9 9 6 ) 研究发现， 非离子氨对鳜鱼苗( 9 1 2m m ) 的9 6hl c 5 0 为0 3 2m g l ，而高银爱( 1 9 9 9 ) 测定了 非离子氨对鳜鱼种( 2 5g ) 的9 6hl c s o 为0 5 2 5m g l ，说明非离子氨对鳜鱼的毒性 随鱼体规格增大而降低，而耐受力逐渐增强。一般认为，对于大多数鱼类来说，非 离子氨对鱼类的急性致死浓度为0 2 2 0m g l 。 1 3 2 慢性毒性试验 毒物在较长的时间内，能引起试验动物的生理应激反应，而且毒物可以产生慢 性毒性影响。在水产养殖的过程中，大部分水体中氨氮浓度在大多数时间里面没有 达到对鱼体产生急性毒性致死浓度，但是低浓度氨氮和亚硝酸盐会对鱼类的生长、 摄食、组织器官、血液指标和免疫机能产生一定的影响( r a n d a l la n dt s u i ，2 0 0 2 ；p i n t o 甜a 1 ，2 0 0 7 ) 。 1 3 2 1 氨氮和亚硝酸盐对鱼类摄食和生长的影响 国内外已经有大量有关非离子氨和亚硝酸盐对鱼类摄食和生长的毒理研究 ( a l d e r s o n ，1 9 7 9 ；p e r s o n l er u y e te ta 1 ，1 9 9 7 ；d o s d a te ta 1 ，2 0 0 3 ；p i n t oe ta 1 ，2 0 0 7 ； 王琨，2 0 0 7 ；赵海涛，2 0 0 6 ) 。水中氨氮浓度高于7 4 4m g l 时，虹鳟鱼苗生长和存 2 华中农业大学2 0 1 0 届硕士毕业论文 活将受到影响( b r i n k m a ne ta 1 ，2 0 0 9 ) 。l e m a r i e 等( 2 0 0 4 ) 研究了非离子氨对舌齿 鲈幼鱼的影响，在试验开始的第一阶段，对照组的试验鱼增重3 4 倍，而高浓度组 ( 0 9 0m g l ) 只有1 8 倍，并且增重率与非离子氨成负相关，非离子氨为0 2 6 m g r l 为其安全限制浓度。s i i k a v u o p i oa n ds a t h e r ( 2 0 0 6 ) 研究发现，大西洋鳕暴露于1m e t , 、 2 5m g l 、5m g l 亚硝酸盐溶液9 6d 后，其摄食率和饲料系数与对照组之间不存在 显著差异。f o s s 等( 2 0 0 4 ) 研究了非离子氨对大西洋鳕的影响，其生长明显受到抑 制，摄食量减少：当非离子氨大于0 0 6m e d l 时，由于日摄食量的减少，生长率明 显降低。对一般养殖鱼类来说，水体中非离子氨浓度超过o 1 0m g l 被认为鱼类慢 性中毒( 乔顺风和李红顺，2 0 0 5 ) 。 1 3 2 2 氨氮和亚硝酸盐对鱼类组织器官结构的影响 在高浓度氨氮和亚硝酸盐环境中，鱼类鳃组织将会受到不同程度的损伤，降低 ， 血液吸收和输送氧的能力( l a n ge la 1 ，1 9 8 7 ；d a se ta 1 ，2 0 0 3 ，2 0 0 4 a ，b ；s p e n c ee ta 1 ， ， 2 0 0 8 ) 。粘杜父鱼( c o t t u sc o g n a t u s ) 在非离子氨浓度o 8 3 4 - 1 6 6 8m g l 环境条件下， 经过长时间的慢性毒性作用，通过鱼类组织病理学检测，结果表明鱼鳃明显溃烂， 锻 鳃小片显著增厚，影响鱼类的呼吸作用( s p e n c ee t a l ，2 0 0 8 ) 。尼罗罗非鱼在长时间 的亚硝酸盐环境中，鳃部充血、氯细胞增殖、鳃小片分解、毛细血管扩张，肝脏组 织出现水肿而肾脏严重充血( a y s e le ta 1 ，2 0 0 8 ) 。氨氮还会引起肾小管和动脉球退化， 肾小囊膨胀、充血、阻塞和出血，肝充血、退化、甚至出现坏死腔( p e y g h a ne ta 1 ， 2 0 0 2 ) 。 1 3 2 3 氨氮和亚硝酸盐对鱼类血液指标的影响 氨氮和亚硝酸盐的慢性中毒可以使鱼体血液部分理化指标发生变化( r e m e n ， 2 0 0 8 ：王明学等，1 9 9 7 ；魏泰莉等，2 0 0 1 ) 。非离子氨能够抑制塞内加尔鳎( s o l e a s e n e g a l e n s i sk a u p1 8 5 8 ) 的生长，血糖浓度降低，但差异不显著；部分游离氨基酸 ( f a a ) 存在很大的差异( p i n t oe ta 1 ，2 0 0 7 ) 。印鲮( c i r r h i n u sm 厂忉肠) 在较高浓度 氨氮( 8 1 6m g l ) 作用下，成熟红细胞减少，总白细胞数量增加，在高浓度组血液 部分红细胞壁受损( d a se ta 1 ，2 0 0 3 ) 。同时，印鲮( c i r r h i n u sm r i g a l a ) 的红细胞数 量随着亚硝酸盐增加而急剧降低，血红蛋白和血清蛋白数量增加，血糖先降低后增 加( d a se ta 1 ，2 0 0 4 a ) 。p a r k 等( 2 0 0 7 ) 研究了亚硝酸盐对无备平触( s e b a s t e si n e r m i s ) 氨氮和亚硝酸盐对黄颡鱼的毒性研究 9 6h 的急性和亚急性毒性试验，发现随着亚硝酸盐浓度的升高，红细胞数量、血红 蛋白数量、血糖降低，在高浓度组( 7 0 0r a g l ) 中鱼体体表、鳃、肝脏和肾脏已经 发生病变。 血糖( g l u ) 是机体重要的能源物质，对维持鱼类正常生命活动有重要作用( 钱 云霞等，2 0 0 2 ) 。r e m e n 等( 2 0 0 8 ) 研究氨氮和溶氧对大西洋鳕的影响，研究结果表 明，随着非离子氨的增加，血糖水平降低。正常情况下血清中只有少量的谷丙转氨 酶( a l t ) ，但是当心脏、肝脏等内脏器官发生损伤时，组织内a l t 的活性降低而 血清内a l t 的活性升高( 李茂深，1 9 8 7 ；沈同，1 9 9 9 ) 。鱼类血液中的氨氮可以通 过大多数的半透膜，以扩散的方式进入到水中，减少体内氨氮的积累。但是，如果 环境中的氨氮增加，大量氨氮进入鱼体，氨氮排泄将会受到抑制( p i n t oe t a l ，1 9 9 8 ) 。 随着非离子氨浓度升高，鲤鱼苗血浆中氨氮浓度升高，肝糖元浓度减少，而血糖增 加( p a l a c k o v ae ta 1 ，1 9 8 6 ) 。大量研究结果表明，血液中的氨与环境中氨氮水平成正 相关( k n o p ha n do l s e n ，19 9 6 ；p e m o n - l ee ta 1 ，19 9 8 ；p e r s o n - l ee ta 1 ，2 0 0 3 ) 。 1 3 2 4 氨氮和亚硝酸盐对鱼类抗氧化酶系统的影响 已有研究结果表明，氨氮和亚硝酸盐对鱼类抗氧化酶系统会产生一定的影响( 李 飞等，2 0 0 5 ；谭树华等，2 0 0 5 ) 。李飞等( 2 0 0 5 ) 研究了氨氮对南方鲶超氧化物歧化 酶( s o d ) 、过氧化酶( p o d ) 和抗菌活力的影响，在浓度低非离子氨时，s o d 和 p o d 活性没有发生明显变化，随着非离子氨浓度升高，s o d 和p o d 被诱导增强； 当体内氨氮