（动物学专业论文）棘螈属和疣螈属（有尾目：蝾螈科）骨骼系统的研究.pdf

四川大学硕士学位论文 声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在赵尔宓导师指导下进行的研究工作及 取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中 不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川大学或其他 教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的 任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。 本学位论文成果是本人在四川大学读书期间在导师指导下取得的，论文成 果归四川大学所有，特此声明。 硕士研究生签轹压奇玛共 四川大学硕士学位论文 棘螈属和疣螈属( 有尾目：蝾螈科) 骨骼系统的研究 专业：动物学 硕士生：余平静指导老师：赵尔宓 摘要 棘螈属( e a h i n o t r i t o n ) 和疣螈属( t y l o t o t r i t o n ) 均属于两栖纲有尾目蝾螈 科。两属主要分布于我国西南、亚洲西南部、东南亚及日本。根据赵尔宓等 ( 2 0 0 0 ) ，棘螈属在我国已知3 种：e c h i n o t r i t o na n d e r s o m ( 琉球棘螈) 、e c h i n h a i e n s i s ( 镇海棘螈) 、ea s p e r r j m u s ( 细痣棘螈) 。疣螈属在我国已知4 种： t y l o t o t r i t o nk w e i c h o w e n m s ( 贵州疣螈) 、zs h a n j i n g ( 红瘰疣螈) 、 t a l i a n g e n m s ( 大凉疣螈) 、7 ：v e t t u c o s u s ( 棕黑疣螈) 由于琉球棘螈在中国野外已经灭绝，我们未获得其标本。本文运用硬骨一 软骨双染色技术对镇海棘螈，细痣棘螈，贵州疣螈，大凉疣螈，红瘰疣螈，棕 黑疣螈总共6 种2 7 号标本的骨骼系统做了较全面的观察研究，包括中轴骨骼和附 肢骨骼，并对各骨块的形状、位置以及与邻近骨块的关系都作了详细的描述。 实验结果如下：细痣棘螈头骨的方骨没有钩状的突起，疣螈属4 种的头骨方 骨也没有突起，而镇海棘螈和琉球棘螈头骨的方骨有明显的突起。除此之外， 细痣棘螈的尾椎的数目在3 3 3 6 之间，和疣螈属4 种的尾椎数目相近，并远远多 于镇海棘螈的尾椎数目。因此，细痣棘螈归为疣螈属较为适宜。文中我们还讨 论了红瘰疣螈和棕黑疣螈之间的关系。我们观察了7 号红瘰疣螈和6 号棕黑疣螈 标本。观察发现，红瘰疣螈和棕黑疣螈虽然在头骨的形态上差别极小，但是躯 椎数目存在明显的差别，7 号红瘰疣螈标本有5 号躯椎数目为1 4 ，1 号为1 3 ，1 号为 1 2 。6 9 - 棕黑疣螈标本中，有5 号标本躯椎数目为1 3 ，l 号标本因为腰带跟荐椎连 接的不对称性，躯椎数目为1 2 。虽然个体间躯椎数目存在变异，但是总体说来， 躯椎数目还是呈现出相对的稳定性，可以作为分类依据，因此支持红瘰疣螈种 四j i i ) k 学硕士学位论文 级地位。文中还讨论了种内和种间前后肢骨骼的变异。由于所研究的标本数量 还不是很充足，因此还不能确定这种前后肢骨骼的变异是否有一定的分类意义。 【关键词】有尾目；蝾螈科；棘螈属；疣螈属；骨骼系统；头骨；椎骨；附 肢骨 2 四j i i k 学硕士学位论文 s t u d i e so nt h es k e l e t o ns y s t e mo fg e n u s e c h i n o t r i t o na n dt y l o t o t r i t o n ( c a u d a t a ： s a l a m a n d r i d a e ) m a j o r ：z o o l o g y m d c a n d i d a t a ：p i n g - j i n gy us u p e r v i s o r ：e r - m iz i - l a o a b s t r a c t e c h i n o t r i t o na n dl l o t o t r i t o n ( a m p h i b i a ：c a u d a t a ：s a l a m a n d r i d a e ) r a n g eo v e r s o u t h w e s t e r nc h i n a , s o u t h w e s t e r na n ds o u t h e a s t e ma s i aa n dj a p a n a c c o r d i n gt o z h a o ( 2 0 0 0 ) ，t h e r ea r et h e es p e c i e si ng e n u se c h i n o t r i t o ni nc h i n a , i e ，e c h i n o t r i t o n a n d e r s o n i ，e c h i n h a i e n s i s ，a n de a s p e r r i m u s g e n u s1 y l o t o t r i t o ni n c l u d e sf o u r s p e c i e si nc h i n a ，i c t y l o t o t r i t o n 似舢c n 弛皤，t k w e i c h o w e n s i s ，t t a l i a n g e n s i s ， a n dt s h a n j i n g a l lo ft h es e v e ns p e c i e sa r ei nd a n g e r ea n d e r s o n ii se x t i n c ti n f i e l d i nc h i n at a i w a n i nt h ep a p e r , s i xs p e c i e s ( c x c c p te a n d e r s o n i ) i n c l u d i n g t w e n t y s e v e ns p e c i m e n sw e r ed i s s e c t e da n de x a m i n e d w ed i c u s st h et a x o n o m yo f a s p e r r i m u s w et l l i i l l 【t h a ta s p e r r m u ss h o u l db ei n c l u d e di n 巧z d f d 椭咖t h er e a s o n i st h a tt h e r ei sn oc u r v e dh o o ki nt h eq u a d r a t eo fa s p e r r m u sw h i c hi st h ef a m ea s t h ef o u rs p e c i e so fg e n u st y l o t o t i r t o n ，w h i l eb o t ho ft h et w os p e c i e si ne c h i n o t r i t o n s u c ha se c h i n h a i e n s i sa n dea n d e r s o n i , h a v eac u r v e dh o o ki nt h eq u a d r a t e f u r t h e r m o r e , t h en u m b e ro fc a u d a lv e r t e b r a eo fa s p e r r i m u si st h i r t yt ot h i r t y - s i x ， w h i c hi sd o s et ot h er a n g eo ft h es p e c i e si n 黟鼢打硼，a n dm u mt h a nt h en u m b e r o f e c h i n h a i e n s i s w ea l s o d i s c u s s t h er e l a t i o n s h i p o f t v e r r l t c o s u $ a n d t s h a n j i n g w eo b s e r v es e v e ns p e c i e so f t s h a n j i n gf i v es p e c i e sh a v e f o u r t e e nt r u n k v e r t e b r a e ，o n eh a st w e l v e ，o n eh a v et h i r t e e n s i xs p e c i e so ft ，v e r r u c o s u sa r e 3 四川大学硕士学位论文 o b s e r v e d ，w h i l ef i v eo ft h e mh a v et h i r t e e n ，o n eh a st w e l v e t h en u m b e ro ft r u n k v e r t e b r a eb e t w e e nt h et w os p e c i e si sd i f f e r e n t t h e r ei sv a r i a t i o ni nt h en u m b e ro f t r u n kv e r t e b r a ei nt v e ” u c o s u $ a n dt s h a n j i n g b e s i d e s ，w cd i s c u s st h ev a r i a t i o no f l i m bm o r p h o l o g y o u rs a m p l e sa r ei n a d e q u a t et od e t e r m i n ew h e t h e ro rn o ti th a s t a x o n o m i cs i g n i f i c a n c e k e yw o r d s c a u d a t a ；s a l a m a n d r i d a e ；e c h i n o t r i t o n ；t y l o t o t r i t o n ；s k u l l ；v e r t e b r a e ； l i m b 4 四川大学硕士学位论文 第一章棘螈属和疣螈属的研究概况 第一节概述 我国棘螈属已知有3 种：e c h i n o t r i t o n a n d e r s o n i ( 琉球棘螈) 、e c h i n h a i e n s i s ( 镇海棘螈) 、占a s p e r r i m u s ( 细痣棘螈) 。疣螈属已知4 种：t y l o t o t r i t o n k w e i c h o w e n s i s ( 贵州疣螈) 、t s h a n j i n g ( 红瘰疣螈) 、t t a l i a n g e n s i s ( 大凉疣 螈) 、t v e r r u c o s u s ( 棕黑疣螈) 。棘螈属和疣螈属主要分布于我国西南、亚洲 西南部、东南亚及日本，其中镇海棘螈、贵州疣螈、大凉疣螈为我国特有种( 表 1 ) 。两属总共7 种，均被列入中国濒危动物红皮书两栖爬行动物卷中。 表1 ：棘螈属和疣螈属物种的分布，濒危等级及保护 5 四川大学硕士学位论文 第二节棘螈属和疣螈属命名史 j a n d e r s o n ( 1 8 7 1 ) 依据采于我国云南西部腾冲n a n t i n 和陇川户撒标本的 标本命名为v e r r o $ 1 $ ，并依之建立新属t y l o t o t r i t o n ( 疣螈属) ，称为t y l o t o t r i t o n v e r r u c o s i t $ 本种中文名称曾长期被称为红瘰疣螈，其中体背有红色瘰粒的居群 被独立成种后，赵尔宓、张学文等( 2 0 0 0 ) 将体背棕黑而无红色瘰粒的t y l o t o t r i t o n v e r r u c o s u 爆的中文名称改为棕黑疣螈1 。g a b o u l e n g e r ( 1 8 9 2 ) 将日本冲绳 岛的标本命名为i l o t o t r i t o na n d e r s o n i 。w u n t e r s t e i n ( 1 9 3 0 ) 将我国广西瑶 山标本命名为t y l o t o t r i t o na s p e r r i m u s ( 细痣疣螈) 。我国学者张孟闻( 1 9 3 2 ) 依 据采于浙江镇海县( 现为宁波市北仑区) 城湾的1 号标本命名新种t y l o t o t r i t o n c h i n h a i e n s i s ( 镇海疣螈) 。同年( 1 9 3 2 ) ，方炳文和张孟闻又将贵州西部大定县 ( 1 9 5 8 年更名为大方县) 的标本命名新种t y l o t o t r i t o nk w e i c h o w e n s i s ( 贵州疣 螈) 。刘承钊( 1 9 5 0 ) 将采于西康省( 1 9 5 5 年该省金沙江以东地区划归四川省) 富林县( 即汉源县) 菩萨岗( 现属石棉县) 的2 号标本命名新种t y l o t o t r i t o n t a l i a n g e n s i s ( 大凉疣螈) 。费梁、叶昌媛( 1 9 8 4 ) 根据外部形态和头骨特征将甘 肃文县和海南的标本命名为细痣疣螈文县亚种t y l o t o t r i t o na s p e r r i m u s w e n x i a n e n s i s 和海南疣螈l ，l o t o t r i t o nh a i n a n e n s i s 。之后( 1 9 9 0 ) ，又将文县亚种 上升为种级阶元，定为砂l o t o t r i t o nw e n x i a n e n s i s ( 文县疣螈) ，但是该种的有效 性一直存在着争议。赵尔宓( 1 9 9 0 ) 认为，海南疣螈l l o t o t r i t o nh a i n a n e n s i s 是 细痣棘螈e a s p e r r m u s 的同物异名。邓其祥和余志伟( 1 9 8 4 ) 依据四川平武 标本和细痣疣螈外部形态上的四点差异，而命名细痣疣螈平武亚种t y l o t o 州t o n a s p e r r i m u s p i n g w u e n s i s 。由于镇海棘螈( 1 9 8 2 年之前为镇海疣螈) 模式标本在 日本侵华战争中丢失，蔡春抹和费梁( 1 9 8 4 ) 将在原模式标本产地附近的瑞岩 寺采集到的标本建立新模，并对它的外部形态，骨骼特征及生态习性进行了描 述。r a n u s s b a u m 和e d b r o d i e ( 1 9 9 5 ) 发现在云南的标本中有两种颜 色类型。一种背部完全为棕黑色，另一种背部和体侧瘰粒均为橙色。他们将后 一种命名为新种t y l o t o t r i t o ns h a n j i n g 。 6 四川大学硕士学位论文 第三节棘螈属和疣螈属之间的关系 疣螈属系1 8 7 1 年j a n d e r s o n 依据我国云南西部发表的t ，v e f e u c o s u $ 建 立的属，此后相继订立t a n d e r s o n i ( 琉球疣螈) 、t a s p e r r i m u $ ( 细痣疣螈) 、 r c h i n h a i e n s i s ( 镇海疣螈) 、t k w e i c h o w e n s i s ( 贵州疣螈) 、t t a l i a n g e n s i s ( 大凉疣螈) 。r a n u s s b a u m 与e d b r o d i e ( 1 9 8 2 ) 以t y l o t o t r i t o na n d e r s o n i b o u l e n g e r ，1 8 9 2 为模式种建立新属e c h i n o t r i t o n ( 棘螈属) ，除a n d e r s o n i ( 中文 名相应改称为琉球棘螈) 外，尚辖c h i n h a i e n s i s ( 中文名相应改称为镇海棘螈) ， 共2 种。他们建立该属的依据有主要有四点。第一，方骨侧后前弯的突起。第 二，肋骨远端尖锐，伸出躯干背肌之外。第三，皮肤瘰粒外侧一行大，被肋骨 游离端刺入。第四，卵较大，直径3 0 - 3 2 毫米，产于陆地。而赵尔宓，胡其雄 ( 1 9 8 4 ) 认为，在r a n u s s b a u m 和e d b r o d i e ( 1 9 8 2 ) 所提到的棘螈属 的次要性状的中，如头骨背面的嵴棱不显著，上颌骨与方骨、上颌骨与翼骨连 接的程度均较强，跗骨数目减少，尾长小于头体长等，这些特征在疣螈属的种 问，甚至种内均有变异，不足以作为两属之间恒定的属间差别。因此，赵与胡 认为棘螈属不能作为一个独立的属，应作为疣螈属的一个亚属。在该书中，他 们还特别讨论了细痣疣螈的分类地位。细痣疣螈除了方骨没有外侧突起外，其 余3 项特征都与棘螈属相似，说明它与棘螈属相近，而且细痣疣螈与棘螈属有 相似的生活史，如陆地繁殖的习性，孵出期幼体无平衡枝等，赵与胡认为，细 痣疣螈应归隶于棘螈属为宜在之后的研究中，赵尔宓( 1 9 9 5 ，2 0 0 0 ) 将棘螈 属与疣螈属作为两个有效的属，但仍将a s p e r r m 淞归入棘螈属中。形态学和生 态学方面的研究表明，疣螈属和棘螈属之间的亲缘关系较近，在蝾螈科中都处 于很原始的状态，其中疣螈属最原始。 7 四川大学硕士学位论文 第四节棘螈属和疣螈属的研究简史 1 形态学研究 我国学者刘承钊( 1 9 5 0 ) 在华西两栖类一书中，对华西地区疣螈属3 个物种进行了系统全面的描述，除了发表新种zt a l i a n g e n s i s 外，还对 t k w e i c h o w e n s i s 的外部形态、肋骨等进行了描述和测量，并指出了它的变异 现象，同时也对t v e y f u c o s u s ( 现t s h a n j i n g ) 的分布和外部形态特征进行 了详细的描述。o z c t i 和d b w a k e ( 1 9 6 9 ) 研究了t v e r r u c o s b i $ 和t a n d e r s o n i 的舌骨和鳃弓，构建了蝾螈科1 3 个属之间的系统发育树，研究认为疣螈属由 于具有最多的原始性状而自成一支，其次是肋突螈属。r a n u s s b a u m 和 e d b r o d i e ( 1 9 8 2 ) 分别对t v e m i , i c ：o s u s 和t a n d e r s o n i 的头骨，肋骨及 四肢骨进行了研究，依据三个形态学性状和一个生态性状建立棘螈属，辖 a n d e r s o n i 和c h i n h a i e n s i s 两种。 2 生态学研究 蔡春抹和费梁( 1 9 8 4 ) 研究了e c h i n h a i e n s i s 的生态习性，对它的生境、 生活习性、繁殖习性和幼体发育等进行了描述。辜永河和尚源( 1 9 9 4 ) 报道了 t k w e i c h o w e n s i s 夏季栖息环境，活动习性，繁殖及食性与捕食行为嘲。王延 斌( 1 9 9 5 ) 报道了t k w e i c h o w e n s i s 的繁殖习性，详细描述了它们的求偶、排 精、产卵及变态过程。m s p a r r e b o o m 等人( 2 0 0 1 ) 研究了e c h i n h a i e n s i s 的 繁殖行为，描述了它的交配及产卵过程，并与e ，a n d e r s o n i 和疣螈属进行了比 较，认为e c h i n h a i e n s i s 的交配行为与e a n d e r s o n i 有很大的相似，而与疣螈 属差异较大。t u t s u n o m i y a 等人( 2 0 0 2 ) 在实验室条件下对e a n d e r s o n i 的 交配行为进行了研究，文中还提到了精包形态学的观察对分类研究的必要性。 3 核型研究 核型研究是研究种属演化关系和亲缘关系的依据之一到目前为止，两属 7 个物种中有5 个种的核型进行了研究( 表2 ) 。f c r r i e r ( 1 9 7 3 ) 对t v e r r u c o s i i s 8 四川大学硕上学位论文 的核型进行了研究，结果表明该种体细胞染色体数为2 n = 2 4 ，第6 、7 、1 1 对是 亚中部着丝粒染色体( s m ) ，第1 2 对是亚端部着丝粒染色体( s t ) ，其余8 对 为中部着丝粒染色体( m ) 。s e t oe t a l ( 1 9 8 2 ) 研究了t a n d e r s o n i 的核型，结 果表明第6 、8 、1 0 、1 1 对是亚中部着丝粒染色体，第1 2 对是亚端部着丝粒染 色体，其余7 对为中部着丝粒染色体。杨玉华( 1 9 9 0 ) 对t p g r r u c o s u 哼( 现 t s h a n j i n g ) 和t k w e i c h o w e n s i s 的核型进行了研究，结果认为从核型角度看 疣螈属是蝾螈科中最原始的属，并且通过与琉球棘螈的核型相比较，为恢复棘 螈属提供一定的细胞遗传学依据。谷晓明、高晓冬( 1 9 9 6 ，1 9 9 7 ) 研究了 e a s p e r r i m u s 和t k w e i c h o w e n s i s 的染色体组型，并对t k w e i c h o w e n s i s 的c 带进行了研究。谷与高的结果表明，虽然e a s p e r r i m u s 有与棘螈属e a n d e r s o n i 相似的地方，但是更有与疣螈属种类特别是t k w e i c h o w e n s i s 相似的地方，要 确定细痣疣螈的分类地位尚需要进一步的研究。此外，文中还特地提出了贵州 疣螈具有高度分化的异形性染色体。 表2 ：棘螈属和疣螈属物种的核型 4 分子生物学的研究 同工酶的研究有助于探讨个体发育过程中的基因表达与调控，同时还能揭 示生物种群的进化和亲缘关系，从分子水平阐明物种的多样性乳酸脱氢酶 ( u ) h ) 研究已广泛地应用于物种鉴定，物种问亲缘关系以及系统分类等研究 领域中。谷晓明、田应洲( 2 0 0 0 ) 对t k w e i c h o w e n s i s 和e a s p e r r i m u s 进行了 乳酸脱氢酶( l d h ) 研究，结果表明t k w e i c h o w e n s i s 和e a s p e r r i m u s 均为五 9 四川大学硕士学位论文 谱带型，两者的亲缘关系较近，同时2 个种在l d h 谱带上迁移率，谱带问间隔 上和某条酶带有无的差异则反映了其种间差异。此外他们还对这两种螈进行了 酯酶同工酶( e s t ) 分析，结果亦说明了两者间有较近的亲缘关系。除同工酶 研究外，t a t i t u s 和a t a r s o n ( 1 9 9 5 ) 用线粒体基因的1 2 s r r n a 和1 6 s r r n a 对世界蝾螈科进行了系统学研究，并结合形态特征构建了蝾螈科的系统发育树。 疣螈属中以t v e r r u c o $ 1 a f f 和t t a l i a n g e n s i s 为代表。结果说明疣螈属为单系群， 并与肋突螈属互为姐妹群。这与0 z c t i 和d b w a k e 的研究有一定的差异。 第五节存在的问题及展望 1 细痣棘螈的归属问题 根据前面所述，可知对于细痣棘螈的归属这一问题存在一定的争议。赵尔 宓等人根据形态特征和生态习性方面的特点认为它应归于棘螈属。而一些学者 认为它应归于疣螈属。谷晓明等人利用染色体和同工酶技术对细痣棘螈进行了 研究分析认为从核型对称性看，它跟疣螈属的亲缘关系更近。因此要确定细痣 棘螈的分类地位尚需要进一步的研究。 2 部分形态相似种的有效性问题 镇海棘螈和琉球棘螈在形态上差别比较小，繁殖习性极为相似。镇海棘螈 仅分布于我国浙江，琉球棘螈则分布于日本琉球群岛。因此镇海棘螈是否为琉 球棘螈的同物异名，或者是它的亚种，它们之间的关系究竟如何，为什么存在 现今的地理分布格局等等这些问题都值得我们关注，并有待今后通过更多的方 法来进行深入的研究。此外，近年发表的t y l o t o t r i t o nh a i n a n e n s i s 和 t w e n x i a n e n s i s 以及t a s p e r r i m u sp i n g w u e n s i s 仅仅在形态上进行了描述，而 在染色体、同工酶及d n a 方面的研究尚未进行报道，它们究竟是细痣棘螈的 同物异名，还是不同种或是相同物种的不同地理群体( 亚种) 等，需要进一步 证实，同时这也有利于探讨物种的分布与现今的地理分布格局形成之间的关系。 1 0 四川大学硕士学位论文 3 小结 总结上述几个方面的研究，我们可以看出，国内外的学者对棘螈属和疣螈 属的部分物种分别从宏观和微观方面进行了研究，但主要是对物种之间的亲缘 关系以及它们在科中各属之间的演化关系进行研究，对属内从形态和分子水平 上研究它们的系统发育关系还未有报道，而且棘螈属和疣螈属在分类方面还有 进一步研究的必要，比如在形态学方面缺乏系统全面的解剖学研究；棘螈属和 疣螈属有些种和有些亚种的有效性需要证实。我们认为，在以后的工作中从形 态学方面特别是从内部的解剖学特征来研究物种的分类和系统发育仍然不容忽 视，形态学性状一直是研究分类和系统发育关系的重要特征之一。另外，由于 部分物种生境的一致性，而使不同的分布区域的部分物种呈现出形态相似性， 它们究竟是因为不同种趋同进化而形成的种间相似性，还是因为原始种在不同 的分布区域形成一定的分化，这很值得我们认真研究。近年来发展的分子标记 技术，作为一种新的手段，越来越受到分类学的重视，分子标记技术为揭示种 间的亲缘关系提供一定的依据，因此将经典的形态学分类与分子技术相互结合， 将能从一定程度上提高系统发育学的研究水平。此外，棘螈属和疣螈属物种中 绝大多数都是国家i i 级保护动物，并且一些还处于濒危状态，因此我们应大力 开展保护生物学这方面的工作。 1 1 四川大学硕士学位论文 第二章棘螈属和疣螈属骨骼系统的研究 引言 在脊椎动物中，骨骼系统是研究动物进化史及比较解剖学的重要内容。对 骨骼形态的比较研究不仅有助于探讨脊椎动物的起源和演化，而且还能够为物 种的分类和鉴定提供重要的资料和依据。骨骼形态和结构的研究对种和属以上 高级阶元的分类有很大的意义。作为从水生过渡到陆生的有尾两栖动物，更为 引人注目。我国除张孟闻等以头骨为标准来研究有尾类的分类外，许多学者先 后对极北鲵、大鲵、巴鲵、东方蝾螈等骨骼系统做过研究本文对棘螈属和疣 螈属现存6 种的骨骼系统进行了详细的研究。 第一节材料和方法 1 实验材料及其说明 对棘螈属和疣螈属6 种”号标本( 表1 ) 进行了解剖和观察。 表1 实验材料说明 四川大学硕士学位论文 2 实验方法 2 1 硬骨一软骨双染色法 采用杨安峰( 1 9 8 7 ) 和陈彬，王跃招( 2 0 0 2 ) 的方法，并做改进。步骤如下； 将已用福尔马林浸泡的标本( 或用9 0 - 9 5 的乙醇浸泡) 除去皮肤，内 脏，眼睛和有色素沉着的结缔组织。 将标本用流水冲洗2 3 小时，晾干，放入软骨染色液中( 纯乙醇6 0m 1 ， 乙酸4 0m 1 ，2 0l n g 阿利辛兰) ，浸泡至软骨染成蓝色为止。 将染色后的标本置于梯度脱色液中( 2 5 ，5 0 ，7 5 ，l o o 乙醇) ，约 2 4 小时换液一次，至肌肉变成白色。 将标本晾干浸入硬骨染色液中( 5r a g 茜素红，1 0 0m l0 3 m o l lk o hl o o m l ) ， 至肌肉成冻状，硬骨染成红色。 四川大学硕士学位论文 将染好的标本依次浸泡于梯度透明液中( 2 5 ，5 0 ，7 5 ，1 0 0 甘油) ， 每次2 4 小时。 最后保存在1 0 0 的甘油中。 2 2 观察和绘图 本实验使用l e i c am 2 6 解剖镜进行观察，然后拍照绘图。 第二节实验结果 1 头骨s k u l l 头骨扁平。镇海棘螈和琉球棘螈的头骨宽明显大于长，细痣棘螈、贵州疣 螈和棕黑疣螈的头骨长和宽几乎相等，大凉疣螈和红瘰疣螈的头骨宽略大约长。 骨片较薄，属平颅型，分脑颅和咽颅两大部分。头骨前端弧形，上下颌均有细 齿。外鼻孔由前颌骨、上颌骨及鼻骨围成，内鼻孔由上颌骨、犁骨、前额骨和 眶蝶骨围成。头骨后端具明显的枕骨大孔，大孔两侧各有一枕髁。头骨腹面有 发达的犁骨，犁骨齿列呈倒v 形。额鳞弧粗壮。 1 1 脑颅c r a n i u mc e r e b r a l 鼻骨n a s a l ( 图l 忉一对，为组成鼻腔顶壁的主要骨片。前接前颌骨与上颌 骨，共同构成外鼻孔的后缘，后接额骨，外侧部分接前额骨。鼻骨的形状不规 则。两鼻骨围成囟门。囟门的大小在种间存在着差别。在所观察的6 个种中， 大凉疣螈和红瘰疣螈的囟门较大。镇海棘螈囟门极小。琉球棘螈没有囟门( 佐 藤井歧雄1 9 4 3 ) 。 前额骨p r e f r o n t a l ( 图1 7 ) 一对，呈三角形。前内接鼻骨，内接额骨，外侧与 上颌骨相接。后端参与构成眼眶前缘。 额骨f r o n t a l ( 图1 忉一对，是颅骨背面最大的骨片，前与鼻骨、前额骨相接， 后与顶骨相接，额骨的后外侧向后伸出突起而与鳞骨前枝相接形成粗壮的额鳞 弧。额鳞弧隆起形成嵴，其上附着头背部肌肉。大凉疣螈的额鳞弧稍细。 顶骨p a r i e t a l ( 图1 7 ) 一对，呈不规则四边形，前接额骨，后接外枕骨。 外枕骨e x o c c i p i t a i ( 图l 一7 ) 一对，位于顶骨的最后端。外枕骨背侧前方外缘 与鳞骨相接，腹面外缘前方与翼骨相连。 1 4 四川大学硕士学位论文 副蝶骨p a r a s p h e n o i d ( 图1 1 ) 一枚，位于腹面中央，是组成颅腔腹壁主要成 分，骨片光滑而薄。前端被两侧犁骨覆盖，后端宽，与外枕骨一起围成枕骨大 孔。大凉疣螈的副蝶骨前端不及其他种细尖而较平。镇海棘螈副蝶骨后端略尖。 眶蝶骨o r b i t o s p h e n o i d ( 图l 7 ) 一对，近似长方形，位于额骨，顶骨与副蝶骨 之间，部分被犁骨覆盖。眶蝶骨构成颅腔的外侧壁及眼眶的内侧壁。 1 2 咽颅c l a n i u l l lv i s c e r a l e 前颌骨p r e m a x i l l a ( 图8 ) 一对，位于上颌的最前端，外侧与上颌骨相接，腹 面着生细齿。棕黑疣螈的前颌骨鼻突最明显，贵州疣螈和红瘰疣螈鼻突次之， 大凉疣螈的鼻突弱。镇海棘螈和细痣棘螈没有鼻突。 上颌骨m a x i l l a ( 图9 ) 一对。较长且扁，前段较粗，与前颌骨相连接，并着生 细齿。细痣棘螈上颌骨的后部分明显粗大，而其他种后端渐细。各种上颌骨后 端与方骨相接程度存在差异。镇海棘螈上颌骨与方骨连接非常紧密。细痣棘螈 次之，疣螈属4 种中，大凉疣螈上颌骨与方骨相距最远。红瘰疣螈和贵州疣螈 上颌骨与方骨几乎相接。 犁骨v o m e r ( 图1 0 ) 一对，是头骨腹面较大的骨片。前部呈扇形，后部延伸形 成细且尖的突起，如刺刀状，并着生一纵列犁骨齿。左右两齿列呈倒v 形。大 凉疣螈两侧犁骨组成的夹角最大。 方骨q u a d r a t e ( 图l 叼一对较小的骨片，位于鳞骨腹面外侧方。其腹内侧膨 大成一关节面，与下颌的关节骨相连。镇海棘螈方骨外侧有较强的钩状突起 琉球棘螈方骨的钩状突起稍弱( 佐藤井歧雄1 9 4 3 ) 。细痣棘螈和疣螈属4 种均 没有钩状突起。 翼骨p t e r y g o i d ( 图l 忉一对，近似三角形或倒t 型，内侧与外枕骨相连，骨 片腹面尚存细长的软骨质。 齿骨d e n t a r y ( 图1 2 ) 一对，是构成下颌的主要部分。骨体细长成弧形，左右 两齿骨外侧端以韧带相连。 前关节骨p r e a r t i c u l a r ( 图1 2 ) 一对，位于下颌内侧，呈三角形。 关节骨a r t i c u l a rf 图1 2 ) 一对，下颌骨最外侧部分，前端较细。 舌器( 图1 2 ) 由一对舌弓及两对鳃弓组成。部分保留软骨，部分已骨化。舌 四川大学硕士学位论文 器位于下颌底部，后端直达下颌的后方及两侧。舌弓( a r c u sh y o e d e u s ) 为一 对发达的长条形骨。前半段为角舌软骨，后半段为骨化的上舌骨。第一对鳃弓 ( a r c u sb r a n c h i a l i s1 ) 已经骨化，第二对鳃弓( a r c u sb r a n c h i a l i s2 ) 仅有角鳃软 骨。两对鳃弓以基鳃软骨相连。6 种的舌器无明显差异。 图1 琉球棘螈ea n d e r s o n 的头骨( 仿佐藤井歧雄1 9 4 3a 背面观b 腹面观下同) 1 鼻骨z 前额骨3 上颌骨4 额骨5 顶骨6 鳞骨7 枕骨8 方骨9 前颌骨1 0 犁骨 1 1 眶蝶骨1 2 翼骨1 3 副蝶骨 图2 镇海棘螈ec h n h a e n s s 的头骨( s c u m 0 5 0 8 6 9 y p j ) 四川大学硕士学位论文 图3 细痣棘螈ea s p e r r m u s 的头骨( s c u m 0 5 0 8 5 s y p o 图4 大凉疣螈2 7 t a l i a n g e n s i s 的头骨( s c u m 0 5 0 8 4 5 y p j ) 1 7 四川大学硕士学位论文 图5 贵州疣螈zk w e c h o w e n s s 的头骨( s c u m 0 5 0 8 6 4 y p j ) 图6 红瘰疣螈zs h a n j i n g 的头骨( s c u m o s 0 8 5 3 y p j ) 四川入学硕士学位论文 图7 棕黑疣螈zm m 的头骨( s c u m 0 5 0 8 5 硼 图8 6 种的前颌骨 e e ：s c u m 0 5 0 8 6 9 e a ：s c u m 0 5 0 8 5 8 y p jt k ：s c u m 0 5 0 8 6 4 n ：s c u m 0 5 0 8 4 5 弧：s c u m 0 5 0 8 5 3 t 、，：s c u m 0 5 0 8 5 删 注释：缩写( 下同) e e = e c h i n h a i e n s i se a = e a s p e r r i m u st k = t k w e c h o w e n s s t t = t t a l i a n g e n s i s 1 b 2 z s h a n j i n g t v 2 zv e r f u c o $ 1 t $ 四川大学硕士学位论文 图9 6 种的上颌骨 e c ：s c u m 0 5 伽6 9 y p ，e a ：s c u m 0 5 0 8 5 8 t k ：s c u m 0 5 0 8 6 4 y p j 1 、：s c u m 0 5 0 8 4 5 1 毫：s c u m 0 5 0 8 5 3 t 、，：s c u m 0 5 0 8 5 7 哪 2 0 四川大学硕士学位论文 图1 0 6 种的犁骨 e c ：s c u m 0 5 0 l y p je a ：s c u m 0 5 0 8 5 8 y p jt k ：s c u m 0 5 0 8 6 4 y p j t t ：s c u m 0 5 0 8 4 5 y p jt s ：s c u m 0 5 0 8 5 3 t v ：s c u m 0 5 0 8 5 7 y 玎 四川大学硕士学位论文 图1 1 6 种的副蝶骨 e e ：s c u m 吣5 0 8 6 9 y p je a ：s c u m 0 5 0 8 5 8 t k ：s c u m 0 5 0 8 6 4 y p j t t ：s c u m 0 5 0 8 4 5 t s ：s c u m 0 5 0 8 5 3 y p jt v ：s c u m 0 5 0 8 5 7 唧 四川大学硕上学位论文 图1 2 贵州疣螈zk e c h o w e n s s 的下颌骨和舌器( s c u m 0 5 0 s 6 4 y p j ) a ：下颌骨内侧观1 前关节骨2 关节骨3 麦氏软骨4 齿骨 b ：舌器1 角舌软骨2 基舌骨第一指状突3 基舌骨第二指状突4 基鳃软骨 5 第一角鳃骨6 上舌骨7 第二角鳃骨8 上鳃骨 2 脊柱 脊柱大约由5 0 余枚脊椎骨组成，可区分为颈椎、躯椎、荐椎和尾椎。椎骨主 要包括椎体、髓弓、髓棘、横突、前关节突和后关节突。椎体均为后凹型( 图 1 3 ) 。 颈椎c e r v i c a lv e r t e b r a ( 图1 4 a ) 均为1 枚，不具横突与肋骨。髓弓形成明显 的髓管。前端具有一对关节面，与头骨的枕髁相关节，椎体向前伸出突起，与 枕骨大孔腹面相连。6 个种的颈椎无显著的差异。 躯椎t r u n kv e r t e b r a ( 图1 3 ，1 4 1 3 ) 具有横突及肋骨。第一至四枚躯椎有比 较强的肋突，之后比较弱或没有不仅种间躯椎数目有所不同，而且个体间躯 椎数目也存在差异( 表2 ) 。 荐椎s a c r a lv e r t e b r a ( 图1 4 c ) 一般为1 枚，具有更宽厚的横突及肋骨。肋骨 不象一般躯干椎上的肋骨斜向后方两侧，而是向腹面弯曲，与腰带的肠骨相关 节。在观察过程中，我们发现有1 号棕黑疣螈标本腰带两侧的肠骨和两侧荐椎 呈现不对称连接，因此该号标本荐椎数目为2 枚。 尾椎c a u d a lv e r t e b r a ( 图1 4 d ) 数目不定。前3 枚尾椎有明显的横突。之后， 椎体腹面有髓弓，尾椎从前向后依次变小，后部的尾椎无髓弓，仅仅保留椎体 四川大学硕士学位论文 部分。镇海棘螈的尾椎数目较少，在2 0 枚左右。细痣棘螈和疣螈属4 个种的尾 椎数目较多，一般都在3 0 至4 0 之间。 图1 3 贵州疣螈zk w e c h o w e n m s 的第四枚躯椎( s c 删o s o s 6 4 y p o a ：1 髓弓z 前关节骨3 髓棘4 横突5 后关节突6 肋骨 b ：1 前关节骨2 椎体3 横突4 j 协骨5 后关节突 图1 4 贵州疣螈zb 油“出各椎体( s c u m0 5 0 8 “y l ，j ) a 颈椎正面观b 第四枚躯椎左侧观c 荐椎左侧观d 第六枚尾椎正面观 四j i l x 学硕士学位论文 表2 棘螈属和疣螈属6 种躯椎数目和尾椎数目统计 3 附肢骨骼 3 1 肩带p e c t o r a lg i r d l e 由喙骨、前喙骨、肩胛骨、上肩胛骨组成。大部分 为软骨质，只有关节窝附近发生骨化( 图1 5 ) 。 喙骨c o r a c o i d 一对，软骨质，位于腹中央，左右两块喙骨在中央彼此交错重 叠。6 个种中，大凉疣螈的喙骨最大。 前喙骨p r e c o r a c o i d 一对较小的软骨片，是喙骨向外侧突出的部分。 肩胛骨s c a p u l a 一对，已经骨化，与前肢的肱骨相关节，远端与上肩胛骨相 连。 上肩胛骨s u p r a s c a p u l a 一对，近似方形，尚未骨化，位于躯干部的背侧方， 腹边缘较厚，背面较薄，近端与肩胛骨相连。 四川大学硕士学位论文 图1 5 棘螈属和疣螈属6 种的肩带 1 前喙骨2 喙骨3 肩胛骨4 上肩胛骨 e c ：s c u m 0 5 鸺2 3 删e a ：s c u m 0 5 0 8 5 啪jn ：s ( = u m 0 5 0 8 4 5 t 、，：s c u m 0 5 0 8 5 3 1 ：s c u m 0 5 0 8 5 7 y p j t k ：s c u m 0 5 0 8 6 4 y p j 3 2 胸骨s t e r n u m 一枚，为游离的骨片，位于两喙骨重叠处的正下方，腹面有 一坚韧的韧带连在两侧喙骨基部，且有胸肌附着。胸骨的形状在种间存在很大 的不同( 图1 6 ) 。镇海棘螈的胸骨细且尖。 四川大学硕士学位论文 图1 6 6 种的胸骨 e c ：s c u m 0 5 0 8 2 3 y p je a ：s c u m 0 6 0 7 3 0 l t t ：s c u m 0 5 0 8 4 5 y p j t k ：s c u m 0 5 1 6 删1 ：s c u m 0 5 0 8 5 3 t v ：s c u m 0 5 0 8 5 7 唧 3 3 腰带p e l v i c g i r d l e 一般由前耻骨、耻骨、坐骨和肠骨构成( 图1 7 ) 。 前耻骨p r c p u b i s 为一细长的“y ”形软骨，位于腰带前部腹中线，后端与耻 骨相连接。 耻骨p u b i s 一对，位于腰带坐耻骨板的前缘，软骨质，不发达。镇海棘螈和 细痣棘螈没有耻骨。大凉疣螈耻骨较大，贵州疣螈、红瘰