（森林培育专业论文）濒危植物峨眉拟单性木兰群落特征及繁育技术研究.pdf

摘要 峨眉拟单性木兰( p a r a k m e r i ao m e i e n s i sc h e n g ) 为我国特有种，分布于四川峨眉 山，野生植株仅存二十几株，是国家一级濒危保护植物。本文研究了峨眉拟单性木兰 的群落特征、组培技术、嫁接技术、多酚氧化酶( p p o ) 活性和总酚含量。研究结果 如下： 1 峨眉拟单性木兰群落特征峨眉拟单性木兰零星分布于峨眉山红椿坪扁担岩 常绿阔叶林中，群落内植物5 0 种，隶属于3 7 科4 8 属，其中双子叶植物占绝对优势， 占整个群落的8 0 ，把含有三个属以上的科看作优势科，分别有木兰科、壳斗科、樟 科、蔷薇科，占总科数的1 0 8 。该群落植物区系具有热带亚热带性质，可分为9 个 类型，热带分布区的植物成份所占的比率高于温带分布区的植物成份，而热带分布区 的植物成份中又以泛热带为主。群落中高位芽植物占物种数的7 4 ，其中，中高位芽 植物和矮高位芽植物约占6 4 ；地上芽植物占4 ，地面芽植物占6 ，隐芽植物和 一年生植物均占8 。乔木层郁闭度达7 0 ，以重要值较高的山茶科、罗汉松科、壳 斗科、木兰科植物为主，其次为槭树科和樟科植物。其中峨眉拟单性木兰在群落中呈 零星分布，平均株高2 0 m ，平均枝下高1 3 8 m 左右，胸径达3 1a n ，平均冠幅6 m ；更 新层数量较多的有麦叶罗汉松、巫山新木姜子、南方红豆杉，以巫山新木姜子占绝对 优势，在该层未见峨眉拟单性木兰幼苗；灌木层平均盖度达7 2 ，鄂西玉山竹占绝对 优势，其次是刺叶铁仔和西南菝葜；草本层物种单一，盖度5 3 0 ，主要为青绿 苔草。分别计算各层次物种多样性指数，得出乔木层生物多样性最高，辛普森指数 0 8 6 1 0 ，s h a n n o n - w e i n e r 指数2 3 0 6 2 ，均匀度最大0 8 5 0 8 ，生态优势度最低，为o 1 3 9 0 ， 其次是更新层o 1 8 2 3 ，灌木层生态优势度最高0 8 5 2 1 ，均匀度最小0 1 5 7 8 。 2 峨眉拟单性木兰组织培养组培取材的最佳时间是4 - - , 5 月，平均污染率在 2 0 以下，升汞对茎段外植体的最佳处理时间是( 7 + 8 ) m i l l ，此时污染率低，且腋芽 诱导不会受到抑制，诱导率达7 4 3 ；在培养基中添加1 0 m g l 的v c 和1 9 l 的p v p 都能有效地控制褐化，其中1 0 m g l 的v c 效果最好，褐化率仅占对照的1 2 ，项芽启 动率达7 7 8 ；有利于峨眉拟单性木兰带芽茎段腋芽诱导的最佳培养基配方组合为： b 5 + 6 b a l 5m g l + i b a 0 1m g t , ，诱导率达9 2 9 ；适合腋芽茎段伸长生长的培养基 是：m s + 6 - b a l 0 + i b a 0 i + n a a 0 1 或b 5 + 6 一b a l 5m g l + i b a 0 1m g l ；有利于顶芽启 动培养的最佳培养基配方组合为：m s + b a0 5i i 虮+ m a0 0 5m g t ；适合峨眉拟单 性木兰茎段愈伤组织诱导的最佳培养基组合为：b 5 + 6 b a i 5m g l + n a a 0 5 m g l ，培 养条件为暗培养；4 月取材为诱导茎段愈伤组织的最佳时间；m s ( b 5 ) + 6 b a 0 2 m g l + z t0 2 m g l + n a a 0 i m g l 是适合芽增殖培养的最佳培养基组合。 3 峨眉拟单性木兰嫁接技术不同的砧木之间嫁接成活率的比较结果为：河南 辛夷 白玉兰 江油辛夷，不同的嫁接季节成活率比较：春季 秋季。 4 峨眉拟单性木兰p p o 活性和总酚含量的测定对峨眉拟单性木兰新鲜茎段材 料进行p p o 活性的最佳试验条件及性质进行了研究，旨在为进一步探索峨眉拟单性 木兰组织培养过程中的褐变机理提供可靠的试验方法，并为褐变的控制提供科学依 据。试验结果发现，测定峨眉拟单性木兰p p o 活性的最适p h 值为7 0 ，最适温度为 2 5 ，或高或低都会降低酶活性，邻苯二酚浓度为0 1 4m o l l 时p p o 活性最大，v c 、 柠檬酸和n a 2 s 0 4 三种抑制物中，v c 的抑制效果最好；峨眉拟单性木兰p p o 活性和 总酚含量与物候期有较为密切的关系，生长季节的p p o 活性高于休眠季节，而生长 旺盛的季节和休眠季节的总酚含量高于抽稍季节；研究组培初代的茎段外植体p p o 活性和总酚含量动态变化得出，接种后的一、二周p p o 活性呈上升趋势，两周后就 不断下降，而总酚含量呈上升下降一匕升的趋势变化。 关键词：峨眉拟单性木兰；群落特征；组织培养；p p o 活性；总酚含量 a b s t r a c t p a r a k m e r i ao m e i e n s i sc h e n gi st h er a r ep l a n te n d e m i ct oe m e im o u n t a i ni nc h i n a , w h i c hw a sl i s t e da st h ef i r s tl e v e lp r o t e c t e dp a i n t so fc h i n a 硼：l et o t a ln u m b e ro ft h e p a r a k m e r i ao m e i e n s i sc h e n gi nw i l di so n l ym o r et h a n2 0 t h i sa r t i c l es t u d i e dt h e c o m m u n i t yc h a r a c t e r i s t i c s ，t i s s u ec u l t u r e ，g r a f t i n g ，p p oa c t i v i t ya n dt o t a lp h e n o l sc o n t e n t t h em a i nr e s u l t sw e r ea sf o l l o w s ： 1 t h ec o m m u n i t yc h a r a c t e r i s t i c so fp a r a k m e r i ao m e i e n s i sc h e n g t h e r ew e r e s o m es c a t t e r e dp a r a k m e r i ao m e i e n s i sc h e n gi ne v e r g r e e nb r o a d l e a v e df o r e s to f b i a n d a n y a ni ne m e im o u n t a i n 啊1 ec o m m u n i t yc o n t a i n e d5 0p l a n ts p e c i e s ，b e l o n g i n gt o 3 7f a m i l i e sa n d4 8g e n e r a , a m o n gt h e mt h ed i c o t y l e d o nh a dc o m p a r a t i v ea d v a n t a g e ， a c c o u n t i n gf o r8 0 o ft h et o t a lc o m m u n i t y m a g n o l i a c e a e ，f a g a c e a e ，l a u r a c e a ea n d r o s a c e a ea c c o u n t e df o r10 8 o ft h et o t a lf a m i l i e si nc o m m u n i t y , w h i c hc o n t a i n e dm o r e t h a n3g e n e r ab er e g a r d e da st h es u p e r i o r i t y ，n 地d i s t r i b u t i o n so ft h ep l a n t si nt h i s c o m m u n i t yw e r em o s t l yi nt h et r o p i ca n ds u b t r o p i ca r e a , w h i c hc o u l db ed i v i d e di n t o9 t y p e s ，t h er a t i oo ft h ep l a n t sw h i c hw a st ob et r o p i cw a sh i g h e rt h a nt e m p e r a t ez o n e ，a n d t h eu n i v e r s a lt r o p i c a lp l a n tw a sd o m i n a t e d i nt h i sc o m m u n i t y , t h ep h a n e r o p h y t e s a c c o u n t e df o r 7 4 ，m e s o p h a n e r o p h y t aa n dn a n o p h a n e r o p h y t a a c c o u n t e df o r 6 4 ， c h a m a e p h y t e s ，h e m i c r y p t o p h y t e s ，g e o p h y t e sa n dt h e r o p h y t e sa c c o u n t e df o r4 ，6 ，8 a n d8 啊1 ec o v e r a g eo ft h ea r b o rl a y e rw a s7 0 ，t h e a c e a e , p o d o c a r p a c e a e ，f a g a c e a e a n dm a g n o l i a c e a ew a sd o m i n a t e dw i t hh i g hi m p o r t a n c ev a l u e ，t h e nt h ea c e r a c e a ea n d l a u r a c e a e p a r a k m e r i ao m e i e n s i sc h e n gw e r es c a t t e r e di nt h i sc o m m u n i t y ，t h ea v e r a g e h e i g h tw a s2 0 m , t h eh e i g h to fc l e a r a n c ew a sa b o u t1 3 8 m ，t h ed i a m e t e rr e a c h e d3 1 c ma n d t h ea v e r a g ec l d w nw i d t hw a sa b o u t6 m 1 1 1 en u m b e ro ft h ep o d o c a r p u sn e r i i f o l i u sd d o r 毛 n e o l i t s e aw u s h a n i c a ( c h u n ) m e r ra n dt a x u sc h i n e n w s i sv a r m a i r e ic h e n ge tl kw a s r a l a t i v l ym u c hm o r ei nr e g e n e r a t i o nl a y e r , a n dt h en e o l i t s e aw u s h a n i c a ( c h u n ) m e r rw a s d o m i n a t e d ，b u tt h es e e d l i n go fp a r a k m e r i ao m e i e n s i sc h e n gw a s n o tf o u n di nt h i sl a y e r 啊ka v e r a g ec o v e r a g eo ft h es h r u bl a y e rw a s7 2 ，y c o n f u s a ( m c c l u r e ) z pw a n ge tg h y ew a s d o m i n a t e d , t h e nt h em y r i s n es e m i s e r r a t aa n ds m i l a xb o c k i iw a r b 硼kp l a n ts p e c i e si nh e r bl a y e r w a ss i n g l e ，t h ec o v e r a g ew a s5 3 0 ，t h ec a r e xl e u c o c h l o r ag g e w a sd o m i n a t e d t h e b i o d i v e r s i t yo ft h ea r b o rl a y e rw a st h eh i g h e s t , s i m p s o ni n d e xo fw h i c hw a s0 8 6 1 0 ， s h a r m o n - w e i n e ri n d e xw a s2 3 0 6 2 ，t h ee v e n n e s sw a st h eh i g h e s t , o 8 5 0 8 ，t h ee c o l o g i c a l d o m i n a n c ew a st h el o w e s t , o 13 9 0 ，t h e nt h er e g e n e r a t i o nl a y e r , o 18 2 3 ，t h ee c o l o g i c a l d o m i n a n c eo f t h es h r u bl a y e rw a st h eh i g h e s t ，0 8 5 2 1 ，t h ee v e n n e s sw a st h el o w e s t , 0 1 5 7 8 2 1 1 1 et i s s u ec u l t u r eo fp a r a k m e r i ao m e i e n s i sc h e n g 1 1 1 ep e r i o df r o ma p r i lt o m a y w a st h eo p t i m a lt i m ef o re x p l a n t sc o l l e c t i o ni nc a u s eo ft h ep o l l u t i o nr a t en e a r l y2 0 c o n t i n u o u s l ys t e r i l i z et w i c e ( 7 + 8 ) r a i nw a st h es u i t a b l es t e r i l i z i n gc o n d i t i o nf o rs t e m s e g m e n t , t h ep o l l u t i o nr a t ew a st h el o w e s ta n dt h ea x i l l a r yb u d si n d u c t i o nw a s7 4 3 m e d i u m s u p p l e m e n t e dw i t h10 m g lv ca n dlg lp v pc o u l dc o n t r o lb r o w n i n ge f f i c i e n t l y , a n dt h e f o r m e rw a sb e t t e r , t h eb r o w n i n gr a t ew a sa b o u t1 2o ft h ec o n t r o l ，t h ei n d u c t i o no fa p i c a l b u d sw a s7 7 8 t h es t e m so fp a r a k m e r i ao m e i e n s i sc h e n gw e r et a k e na se x p l a n t s ，t h e o p t i o n a lc u l t u r em e d i u mf o rt h ei n i t i a t i o nw a sb 5 + 6 b a l 5m g l + i b a 0 1m g l ，t h e s t a r t u pr a t ew a s9 2 9 t h eo p t i o n a lc u l t u r em e d i u mf o rt h ee l o n g a t i o ng r o w t hw a s m s + 6 - b a l o + i b a o i + n a a 0 1 或b 5 + 6 一b a l 5m g l + i b a o 1m g l t h eo p t i o n a lc u l t u r e m e d i u mf o r t h ei n d u c t i o no fa p i c a lb u d sw a sm s + b a0 5m g l + i b a0 0 5m g l b 5 + 6 - b a l 5m g l + n a a 0 5 m g lw a st h eo p t i m a lc u l t u r em e d i u mf o rc a l l u si n d u c t i o no f t h es t e ms e g m e n to fp a r a k m e r i ao m e i e n s i sc h e n g , t h ee x p l a n t sw e r ep a l c e di nd a r k n e s s a p r i lw a st h eo p t i m a lt i m ef o re x p l a n t sc o l l e c t i o nt oi n d u c tc a l l u s m s ( b 5 ) + 6 - b a 0 2 m g l + z t0 2 m g l + n a a 0 1 m g l w a st h e o p t i m a l c u l t u r em e d i u mf o rb u d m u l t i p l i c a t i o n 3 t h eg r a f t i n go fp a r a k m e r i ao m e i e n s i sc h e n g t h ec o m p a r i s o no fs u r v i v a l a m o n gd i f f e r e n tr o o t s t o c k sa n di nd i f f e r e n ts e a s o n , m a g n o l i al i l i f l o r ad e s r ( h e n a n ) m a g n o l i ad e n u d a t e m a g n o l i al i l i f l o r ad e s r ( j i a n g y o u ) ，s p r i n g a u t u m n 4 t h em e a s u r e m e no ft h ep p oa c t i v i t ya n dt o t a lp h e n o l sc o n t e n to f p a r a k m e r i a o m e i e n s i sc h e n g s t u d i e do nt h eb e s tt e s tc o n d i t i o na n dp r o p e r t yo ft h ep p o a c t i v i t y w i t hf b c s hs t e ms e g m e n to fp a r a k m e r i ao m e i e n s i sc h e n g , p r o v i d e dt h er e l i a b l et e s t i n g m e t h o do nb r o w n i n gm e c h a n i s mi nt i s s u ec u l t u r ef o rf t l r t h e re x p l o r i n g t h er e s u l t ss h o w e d t h a tt h eb e s tt e s tc o n d i t i o no np p oa c t i v i t yo fp a r a k m e r i ao m e i e n s i sc h e n gw a sp h7 0 ， 2 5 c ，t h et e m p e r a t u r eb et o oh i g ho rt o ob e l o ww o u l di n h i b i tt h ep p oa c t i v i t y , t h eo p t i m a l c o n c e n t r a t i o no fo d i h y d r o x y b e n z e n ew a s0 14 m o l l ，a m o n gv c ，c i t r i ca c i da n d n a 2 s 0 4 ， v cw a st h eb e s tt oc o n t r o lb r o w n i n g p p oa c t i v i t ya n dt o t a l p h e n o l sc o n t e n t o f p a r a k m e r i ao m e i e n s i sc h e n gh a dc l o s er e l a t i o n s h i p 砸n lp h e n o p h a s e ，p p oa c t i v i t yi n g r o w i n gs e a s o nw a sh i g h e rt h a nd o r m a n c ys e a s b n , t h et o t a lp h e n o l sc o n t e n ti ng r o w i n g s e a s o na n dd o r m a n c ys e a s o nw a sh i g h e rt h a ns t o o l i n gs t a g e s t u d i e do nt h ed y n a m i c c h a n g eo fp p oa c t i v i t ya n dt o t a lp h e n o l sc o n t e n to fs t e ms e g m e n te x p l a n t si ni n i t i a l c u l t i v a t i o n , t h er e s u l t ss h o w e dt h a t , i ni n o c u l a t i o nt w ow e e k s ，p p oa c t i v i t yw a sr i s i n g t r e n d , t h e nd e c r e a s e dt w ow e e k sl a t e r , t h ed y n a m i cc h a n g eo ft o t a lp h e n o l sc o n t e n tw a s r i s i n g ，d e c r e a s i n g ，a n dt h e nr i s i n g k e yw o r d s ：p a r a k m e r i ao m e i e n s i sc h e n i g , c o m m u n i t yc h a r a c t e r i s t i c s ，t i s s u ec u l t u r e ， p p oa c t i v i t y , t o t a lp h e n o l sc o n t e n t 英文缩写 争b a 2 ，4 _ d n a a i b a z t a c v c p v p o d 缩略词表 英文全称 6 - b e n z y l a m i n o p u r i n e 2 ，4 - d i c h l o r o p h e n o x ya c i d a - n a p h t h a l e n ea c e t i ca c i d i i n d o l e b u t y r i c z c a t i n a c t i v ec a r b o n l - a s e o r b i ca c i d ( v i t a m i nc ) p o l y v i n y l p y r r o l i d o n e o p t i c a ld e l n s i t y 中文名称 6 一苄氨基腺嘌呤 2 。4 - 二氯苯氧乙酸 q 一萘乙酸 吲哚丁酸 玉米素 活性炭 抗坏血酸 聚乙烯吡咯烷酮 光密度 5 l 论文独创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的 成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，学位论文中不包含其他个 人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教育机 构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已 在论文中作了明确的说明并表示了谢意。 研究生签名：醮 幽驴年6 月伊日 关于论文使用授权的声明 本人完全了解四川农业大学有关保留、使用学位论文的规定，l i p ：学校有权保留并向 国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可以采用 影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可以用不同方 式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。 研究生签名： 导师签名： 怅羡 孑硎系 钳圹年月护日 加p 年f 月罗口日 i l j 一 月i j 吾 峨眉拟单性木兰( p o m e i e 瑚i sc h e n g ) 是木兰科( m a g n o l i a c e a e ) 拟单性木兰属( p a r - a k m e r i ah ue t 仇删植物，我国特有种，分布于四川峨眉山，属白垩纪残遗种，对研 究第三纪植物区系起源有着十分重要的科研价值。1 9 4 0 年郑万钧教授在四川峨眉山采 到雄花标本，1 9 5 1 年与胡先辅教授确立为新种，定为拟单性木兰属的模式种n 棚。由 于其特有的生物学性质，该种在自然繁殖上存在一定的困难，曾一度被认为灭绝，2 0 世纪8 0 年代野外植株得以重新发现，引起人们的关注1 。 目前，峨眉拟单性木兰野外植株仅存二十几株，被列为国家一级濒危保护植物， 列入中国物种红色名录。而现有相关研究甚少，仅局限于形态学分类研究和光合特性、 群落分布的初步研究3 1 ，致使该物种的保护和开发几乎处于空白。所以，加强该物 种无性繁殖、群落特征及生物多样性的研究具有重要的生态意义和科研价值。 1 文献综述 1 1 峨眉拟单性木兰生物学特征及分布区概况 1 1 1 生物学特性 峨眉拟单性木兰为木兰科拟单性木兰属常绿乔木，又名峨眉拟克茉莉木、黄木兰， 高达2 0 m ，胸径达4 0 e r a ，树皮深灰色，小枝光滑。叶革质，狭椭圆形或倒卵状椭圆 形，长8 1 2 c m 先端短渐钝尖，基部契形或窄契形，上面深绿色，有光泽，下面淡灰 绿色，被腺点，侧脉8 1 0 对；叶柄长1 5 - 2 c m 。花单生枝顶，雄花与两性花异株。雄 花花被片1 2 ，外轮3 片较薄，淡黄色，长圆形，先端圆或钝，长3 3 8 e m ，内3 轮较 窄小，乳白色，肉质，倒卵状匙形；雄蕊约3 0 枚，长约2 c m ，花药长l e n a ，药隔顶 端钝尖，药隔及花丝深红色，花托顶端钝尖；两性花花被片与雄花同，雄蕊1 6 1 8 ： 雌蕊群椭圆形，长约l e n a ，心皮8 1 2 。聚合果倒卵圆形，长3 - 4 e r a 。种子倒卵圆形， 径6 - 8 m m ，外种皮红褐色。 从物候或生育期的角度来看，峨眉拟单性木兰在春天气温为9 8 c 甚至可能更低 的气温条件下就能进行光合作用，4 月上旬是萌芽期，中下旬为展叶初期，是净光合 作用的一个高峰期；而展叶盛期( 花蕾期) 出现在净光合作用的低谷期，5 月下旬为 初花期b 一1 ，果期9 月。峨眉拟单性木兰分布于四川峨眉山，生于海拔1 0 0 0 1 2 0 0 m 处 的常绿阔叶林中，呈零星分布状态。 1 1 2 峨眉拟单性木兰分布区自然环境特征 峨眉山位于四川盆地西南，北纬2 9 0 3 0 ，_ 2 9 0 3 8 ，东经1 0 3 0 1 5 - - - 1 0 3 0 2 8 ，为邛崃 山南段余脉。峨眉拟单性木兰分布于峨眉山红椿坪，当地基岩为红椿坪组白云岩，土 壤中性，多砾质，有机质与大量元素丰富。分布区内具备气候温和、雨量充沛、湿润 多雾的基本气候特点，年相对湿度8 2 - - 9 5 b 1 。 1 2 拟单性木兰属植物的资源概况及分布情况 拟单性木兰属分布于我国东南、西南地区，共有5 个种，分别为光叶拟单性木兰 ( p a r a k m e r i an i t i d a ) ，恒春拟单性木兰( 尸k a c h i r a c h i r a i ) ，云南拟单性木兰( e y u n n a n e n s i sh u ) ，峨眉拟单性木兰和乐东拟单性木兰l o t u n g e n s 话) 盯1 。其中光叶拟单性木兰 分布于云南西北部、广西中部、西藏东南部，生于海拔1 8 0 0 2 5 0 0 m 的山地阔叶林中， 缅甸北部也有分布嘲。恒春拟单性木兰分布于台湾东南( 大武山和南仁山) ，生于海 拔5 0 0 - - 1 3 0 0 m 的常绿阔叶林中嘲。云南拟单性木兰是国家二级保护植物，主要分布在 滇东南的马关、西畴、麻栗坡等县，呈单株或散生在东南季风常绿阔叶林中，现存种 群少，在纯林中更新效果良好，散生在常绿阔叶林中，更新效果很差，迁地栽培保存 生长良好，适应力强，适生范围较广，扩大栽培，有助于消除其濒危n 们。乐东拟单性 木兰是国家二级保护植物，自然分布区包括海南、两广、贵州、湖南、江西、福建、 浙江等省，其中湖南省是其分布中心，垂直分布于海拔3 0 0 1 4 0 0 m 之间n u 。蛾眉拟 单性木兰为国家一级保护植物，产于四川峨眉山，散生于常绿阔叶林中，对其引种驯 化的技术研究尚处于起步阶段。 拟单性木兰属在国内分布见附图1 。 1 3 拟单性木兰属植物的利用价值及保护措施 1 3 1 利用价值 1 3 1 1 用材资源 拟单性木兰属植物为大乔木树种，树干通直，木材细致、均匀，适于作家具、建 筑等用材。生长迅速，可为大径材，切削容易，为旋制胶合板的优良用材n 副；还可以 提取芳香精油，如：张茂钦等n 卅用云南拟单性木兰的花瓣、叶片提取芳香精油，鲜花 精油得率0 2 3 ，鲜叶精油得率0 2 1 o 2 8 。所以应当加强本属植物培育技术研 究，大力培育人工林。 1 3 1 2 观赏资源 2 木兰科树种花大美丽、具有芳香气味、树形美观，集观叶、观花、观果于一体， 是城镇园林和庭院的良好观赏树种，应在城镇绿化树种和造林树种方面扩大利用u 引， 与新兴的观赏绿化树种云南拟单性木兰和乐东拟单性木兰一样，峨眉拟单性木兰树干 高大通直，枝叶茂盛，四季常青，花芳香，具有开发成为行道绿化树种的潜力。 1 3 1 3 科研价值 木兰科植物最早、最可靠的大化石见于我国吉林，地质时代为早白垩纪，刘玉壶 等认为比较接近于现代的拟单性木兰属，所以它是研究被子植物起源、系统发育的宝 贵材料嘲。刘玉壶认为拟单性木兰属不同于木兰属的形态特征是经过长期系统发育的 较进化的特征，是两性花向单性花的过度类群n “甜。由于某些种分布地域狭窄，采种 困难等诸多因素，致使其繁殖研究滞后n 引，所以加强无性繁殖工作具有重要的科研价 值。 1 3 2 保护措施 拟单性木兰属是两性花向单性花的过度类群，靠甲壳虫传粉，雄蕊先熟，而两性 花植株甚少，自然受粉率低，种子容易被鼠类、鸟类食吃，加上植株分散，这就造成 了自然繁殖受到障碍n 2 j 5 1 1 。其中的几种如峨眉拟单性木兰原生地只剩二十几株，已 经濒临灭绝，成为国家一级保护植物；云南拟单性木兰和乐东拟单性木兰成为国家二 级保护植物。所以，对本属植物应采取一定的措施进行保护，保护的措施包括原生地 保存、迁地保存、离体保存。 1 3 2 1 原境保存 原境保存又称就地保存，就是种质资源在原生态环境中，不迁移而采取措施就地 加以保护。如划定自然保护区、保护林、国家森林公园、人工圈护稀有的良种单株等， 同时应完善管理制度，禁止对其果实盲目采摘，严禁砍伐，尽量保证其生境条件不受 破坏。 1 3 2 2 迁地保存 迁地保存又称异地保存，是将种质材料迁出自然生长地，在与原生地环境条件相 似的地区建立植物园和树木园等，将其迁移至此地保护，或在迁移地设置配备适宜其 生长的环境条件n 朝。同时对自身繁殖困难的物种进行人工繁育、引种，扩大其种群数 量，尽量减少因生物影响造成的濒危嘲。我国现有两个比较完整的木兰园，一个是广 州华南植物园中的木兰园；另一个是中国林科院亚热带林业研究所与浙江建德林场合 建的江南木兰园，而华南植物园引种保存的木兰科植物已具一定的规模捌。 3 朱志建等恻在浙江省湖州市从江西省引进的乐东拟单性木兰栽培获得初步成 功；余朝霞等慨1 在浙江富阳引进乐东拟单性木兰、云南拟单性木兰和光叶拟单性木兰， 其中，乐东拟单性木兰生长良好，发育正常；云南拟单性木兰生长一般，发育正常； 而光叶拟单性木兰全部死亡。张茂钦等n 们对迁地保存在昆明、西畴、文山三个不同生 态环境中的云南拟单性木兰进行了生态生物学研究，发现不同生长环境其生长峰期有 所差异，研究也表明云南拟单性木兰对温暖、湿润的环境比较适应，生长较好，在较 干旱或气温略低的环境中也能生长。 1 3 2 3 离体保存 离体保存又称设备保存，是将种质资源的种子、花粉、芽、根或枝条等繁殖材料 分离开母体，利用设备进行贮藏保存。这种方法不受环境、社会等因素干扰啪1 ，能较 好地保护物种及其遗传的多样性，种子贮藏和组织培养是常用的手段。在组织培养条 件下，种质的保存有两种形式：一是培养物的反复继代培养；二是超低温保存，即将 原生质、细胞、组织器官或花粉经处理后，放入液态氮中保存孙删。对于珍稀濒危植 物，通过离体培养保存的种质资源，更便于国际、国内的交流、交换、购买等。 总之，在抢救保护如峨眉拟单性木兰这样的珍稀濒危树种时，应注意保护种源， 建立原料基地，同时开展引种、培植、驯化、繁殖、改良工作制。 1 4 拟单性木兰属植物繁育技术 目前，本属植物只有乐东拟单性木兰和云南拟单性木兰在繁育技术上有相关报 道，恒春拟单性木兰只有一篇报道提到了嫁接繁殖，光叶拟单性木兰的研究未见报道。 而峨眉拟单性木兰的研究仅限于形态分类、染色体数目等方面口崩1 ，对于该物种的生 长发育、细胞组织以及繁育技术等领域尚属空白。 1 4 1 种子繁殖 大多数木兰科植物的繁殖主要是以种子进行有性繁殖，种子成熟的时间为8 1 1 月，其种子的发芽率与其质量、采收时间、贮藏时间、处理方法以及播种后的水分与 温度控制有非常密切的关系。但是有人认为种皮的有无和种子的埋藏深度几乎不会影 响到种子的存活率1 。 乐东拟单性木兰种子采集后，经保温保湿、种沙混藏催芽效果好，发芽率可达 9 0 以上，播种时间一般在2 3 月，播种方式为撒播或条播，若条播，条沟不宜太 深，4 - 6 锄为宜删。 对云南拟单性木兰的种子进行湿沙贮藏，到次年开春前几天进行催芽直播，播种 4 方式为撤播，出苗率较高泌捌。 但是种子繁殖中，随着种子储存时间的增加，种子活力下降，且易遭病虫害，不 利于种质资源的保存，加上本属植物种子难以采集，所以应加强无性繁殖技术的研究。 1 4 2 扦插繁殖 扦插是植物无性繁殖的常用方式之一，但是目前对于木兰科扦插繁殖的报道集中 在鹅掌楸属、含笑属等树种，而有关拟单性木兰属扦插的具体研究仅乐东拟单性木兰 和云南拟单性木兰有报道。 众多学者研究发现，乐东拟单性木兰和云南拟单性木兰的扦插繁殖较困难，生根 率低，扦插苗在春季易遭虫害，成活率最高只有5 0 0 左右删。扦插成活率与扦插时 间和插穗的选择有密切关系，生长期采用嫩枝扦插成活率相对较高。生长调节剂的使 用也是影响扦插成活的重要因素之一，使用适当的激素能有效地促进其生根，常使用 的是a b t 生根粉和n a a 。 1 4 3 嫁接繁殖 对一些不是本地原生而适应性差的种类，用当地适生种做砧木进行嫁接，可以极 大地提高其适应能力，有利于珍稀濒危植物的保存和利用。木兰科植物的芽接、枝接、 腹接、切接均有较高的成活率，在砧木种类的选择上，属间嫁接是完全亲和的，含笑 属、木莲属、木兰属、拟单性木兰属之间互做砧木嫁接均可获得成功，成活率略有差 异；落叶树种普遍以秋季切腹接成活率较高，而常绿树种则以春季切接成活率较高啪。 陈万利等对3 8 种木兰科植物嫁接繁殖进行了试验，得出嫁接时间必须根据接穗 与砧木两者的物候状况来择定，其最佳时间应是接穗处于萌动而砧木则处于韧皮部能 较易剥离木质部的时期，一般为1 - - 3 月，其中以白玉兰( m a g n o l i ad e n u d a t ad e s r 夕 为砧木，恒春拟单性木兰为接穗，采用腹接的方式，成活率在4 0 左右。叶桂艳u n 以白玉兰作砧木，一年生乐东拟单性木兰枝条的中上段作接穗，用切接法，3 月中旬 进行，成活率6 5 左右，当年苗高可达4 0 m 以上。而对峨眉拟单性木兰的嫁接技术研 究目前尚属空白。 1 4 4 组织培养 利用组织培养方法对植物进行快繁研究，不仅可以克服种子繁殖中存在的诸多问 题，而且可以克服常规无性繁殖速度慢、繁殖率低的缺点。加上组织培养不受季节、 气候等因素的制约，节省土地，速度快，质量高，技术密集，便于集约化管理和工厂 化生产嘲0 因此，将植物组织培养技术应用于珍稀植物的快速繁殖，对保护珍稀树 5 种的种质资源，缓解其濒危状况，都具有重要的理论意义和实际应用价值。 1 4 4 1 研究现状 目前，对木兰科树种的组织培养研究已被众多学者重视，建立优良的无性系，对 保存珍贵的木兰科树种种质资源具有重大意义，但就目前的具体情况来看，有关木兰 科植物的组织培养的报道并不多，大部分处于初步探索的阶段1 ，原因是褐化严重、 生根困难，有成功报道的集中在含笑属、鹅掌楸属、木兰属一1 。拟单性木兰属只有 云南拟单性木兰和乐东拟单性木兰有关组织培育的报道，苏梦云呻1 等经研究得出，乐 东拟单性木兰适合于芽的增殖的培养基为：w p m + b a l 5m g l + k t 0 5m g l - 1 + n a a 0 2 m g l - 1 + i a a l m g l - 1 , 1 2 m s + n a a 0 3 m g l - 1 + i b a 0 2 m g l 1 + a c 15 9 l 1 的培 养基上有利于生根；邓小梅在乐东拟单性木兰的组织培养上也作了相关研究，包括 在褐化、污染的控制上以及生成完整植株的方法、途径等方面，取得了较好的结果， 最高诱导率可达6 6 ，生根率最高达到了7 7 。陈芳等啼研究出云南拟单性木兰的增 殖培养基为：m s + 6 - b a0 5m g l 1 + n a a0 01m g l ；生根培养基为1 2 m s + n a a0 5 n a g l - 1 + i b a 3 0n a g l 。至今为止，关于峨眉拟单性木兰的组织培养研究未见报道。 1 4 4 2 存在的两大难题 众多学者在研究木兰科植物的组织培养时发现，在合适的培养条件下，营养器官 能够继续生长，但是形成不定根却有一定的困难；同时该科树种的酚类物质较多，褐 化严重嗽1 。因此，木兰科植物的组织培养中褐化和生根问题的解决成为其成功的关键 问题。 褐变分为酶促褐变和非酶促褐变1 。酶促褐变涉及到酶、底物和氧三个条件，酚 类物质在多酚氧化酶的催化作用下，被氧化成醌类物质，对植物具有一定的毒害作用， 影响其正常生长；非酶促褐变是由于细胞受胁迫条件或其它不利条件影响所造成的细 胞死亡或自然发生的细胞死亡而造成的褐化，其中不涉及到酚类物质的产生。目前认 为植物组织培养中的褐变主要是酶促褐变。 引起褐变的原因总的来说包括两个方面g 即外植体自身因素和培养环境，前者包 括生理状态、生长状态、遗传特性等，后者包括培养基的成分和培养条件。植物组织 培养中的褐变往往是多因素同时作用的结果，所以应采取相应的措施抑制褐化，除了 对材料进行预处理外，还应在培养基中添加抗氧化剂或吸附剂，使用抗氧化剂的种类 和量因不同的植物而异。有研究表明嘲在木兰科的组织培养中，培养基中加入抗坏血 酸0 5 1 0 m g l 或p v pl g l ，并且在暗培养的条件下防褐效果较好，其中，v c 是抗氧化 6 剂，将酶的辅基