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文档简介
MS固体培养基的配制一、实验目的通过实验实训,掌握MS固体培养基的配制技术及操作技能。 二、材料与用具配制MS培养基的各种母液、生长调节物质母液、琼脂、蔗糖、蒸馏水、移液管、量筒、电饭煲、全自动高压灭菌器、pH试纸、0.1mol/L的NaOH、0.1mol/L的HCl、培养瓶、标签、铅笔等。三、方法与步骤 (一)按母液顺序和规定量,用吸管提取母液,放入盛有一定量(150-200ml)纯净水的量筒中。母液一 30ml/L母液二 15ml/L母液三15ml/L母液四 15ml/L母液五30ml/L母液六7.5ml/L1-8组4人配1L,9-10组3人配1L。(二)加入植物生长调节物质 加入的具体调节物质与量视培养物不同而异(本次实验不加生长调节剂)。(三)定容 加纯净水定容至1000ml。(四)倒入预先用铅笔标好刻度的电饭煲中。(五)加糖、加热:加入蔗糖20g/L并开始加热。(六)加琼脂粉12g/L:在电饭煲中给培养基加温至冒热气时均匀缓慢地加入琼脂粉,用玻璃棒不断搅拌至全部熔解并煮沸。(七)调节pH值:煮沸后,用试纸测试pH值,用0.1mol/L的NaOH或0.1mol/L的HCl把培养基的pH调整到5.65.8;加水至预先标注的刻度处,煮沸1-2分钟。(八)培养基分注 把配置好的培养基用烧杯分注到培养瓶中,分注前用量筒量取30ml水倒入培养瓶测试,每瓶装30ml(3瓶/100 ml)左右。分注后立即加盖,贴上标签,注明培养基的名称、配制时间、配制人姓名。(九)培养基灭菌,无菌水、无菌瓶、无菌纸片制作。1.将蒸馏水注入灭菌腔,直至水流进入水位板中间的水位指示器。2.将待灭菌的物品放入提篮中,将提篮放入灭菌腔中。3.插上电源,打开开关。4.旋紧“排汽旋钮”,关闭灭菌腔盖,直至指示灯“LOCKED”亮起。5.选择灭菌程序,按“SET/ENT”键设置温度为121,保温时间20min。6.长按“START”键开始灭菌。7.灭菌结束时,所有程序执行完毕且温度低于80时,指示灯“COMP”闪烁,系统发出5声长声。8.先旋松“排汽旋钮”,
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