药物的鉴别药物分析.ppt

药物的鉴别,药物分析第三章,鉴别：利用一定方法辨别药物真伪，除鉴别项下内容外，需结合性状项下进行确认。,药物鉴别，仅已知物作“验证”真伪分析，不对未知物作“是何物”作分析。,药品检验四大内容性状、鉴别、检查、含量测定,药物分析药品的鉴别,理化法：显色、沉淀、荧光、产气、测熔点等,仪器法：紫外分光光光度法、红外法、薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等、旋光法。,生物学法：生物法、微生物法等,生化方法：酶法、免疫法等,按方法,一般鉴别试验：鉴别为某类药物专属鉴别试验：鉴别为某个药物,按范围,药品的鉴别鉴别方法,1、一般鉴别试验（补充）验证某一类药物共同具有结构特征（多种药物具有）的试验。通过一般鉴别试验，只能证实是某类药物，而不能证实是哪一个药物。,例,焰色反应为黄色，证实有。与氯化钡（BaCl2)反应生成白色，有。与银离子（Ag+)反应生成白色，有。,钠,硫酸离子,氯离子,药品的鉴别鉴别方法,一般鉴别试验方法（补）,一、丙二酰脲类（巴比妥类）,药品的鉴别鉴别方法,（1）与Ag+作用,药品的鉴别鉴别方法,利用银盐反应鉴别巴比妥类药物方法：,例：异戊巴比妥鉴别方法（中国药典2015年版）,取供试品约0.1克，加碳酸钠试液10ml,振摇，逐滴加入硝酸银试液，产生白色沉淀，振摇，沉淀即溶解；继续滴加过量的硝酸银试液，沉淀不再溶解。,CH.P.(2015),药品的鉴别鉴别方法,巴比妥类药+Ag+一银盐（可溶）二银盐（白）,巴比妥类药物与银盐反应试验,开始滴入银离子，银离子局部过浓，生成二银盐，白色；振摇，银离子稀释，又生成一银盐，溶液澄清。,加入银离子至过量，全部生成二银盐，不再溶解。,药品的鉴别鉴别方法,（2）与铜离子作用生成配位化合物,(硫酸铜4克溶于90ml水，再加吡啶30ml),紫红色,绿色,以上为母核反应，取代基反应见各药物！,药品的鉴别鉴别方法,二、水杨酸类,1、酚羟基，三氯化铁反应,阿司匹林的鉴别：取本品约0.1g，加水10ml，煮沸放冷后，加三氯化铁1滴，即显紫堇色。,药品的鉴别鉴别方法,三、芳香第一胺反应（重N化-偶合反应）,鉴别方法：取供试品盐酸普鲁卡因50mg，加稀盐酸1ml，必要时缓缓煮沸，使溶解，放冷，加0.1mol/L亚硝酸钠溶液数滴，再加碱性-萘酚试液数滴，生成橙黄到猩红色沉淀。,四、有机氟化物反应,方法：氧瓶燃烧法有机破坏后，F-与茜素蓝+硝酸亚铈试液，显蓝紫色。,氧瓶燃烧法,原理：将有机药物在充满氧气的锥形瓶中燃烧，燃烧产物被吸入吸收液后，采用适宜的分析方法进行鉴别、检查或含量测定。,药品的鉴别鉴别方法,维他立反应（阿托品、山莨菪等）,本类药物与发烟硝酸作用，生成黄色三硝基衍生物，遇醇制氢氧化钾即生成紫色的醌型化合物,取本品约10mg，加发烟硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黄色残渣，放冷，加乙醇23滴湿润，加固体氢氧化钾一小粒，即显深紫色。,氢溴酸山莨菪碱的鉴别：,例,六、托（品）烷类生物碱反应,钾盐的焰色反应,七、无机金属盐：常用焰色反应；铵盐，碱下加热，有氨臭。,药品的鉴别鉴别方法,八、无机酸根：相应的化学试剂反应。,一般鉴别试验：验证某一类药物共同具有结构特征（多种药物具有）的试验。通过一般鉴别试验，只能证实是某类药物，而不能证实是哪一个药物。,1、l-:+Ag+,白色沉淀。2、24：+a2+，白色沉淀。,药品的鉴别鉴别方法,专属鉴别反应,专针对某药物的反应，可以验证某一药物结构特异性。,一般试验,某类药物,专属试验,某个药物,一般试验+专属试验（24个鉴别试验），共同验证药物真伪。,药品的鉴别鉴别方法,常见专属反应,苯巴比妥，有苯，与甲醛硫酸作用，红色。硫喷妥钠，有硫，铅离子作用，白色，加热，变黑。司可巴比妥，有丙烯基，还原性，与氧化剂作用。,还有很多很多，不要求记住，但要知道有这类鉴别反应。,药品的鉴别鉴别方法,一般鉴别反应与专属鉴别反应地位与作用,共同验证某一药物结构特异性。,一般试验,某类药物,专属试验,某个药物,一般试验+专属试验（24个鉴别试验），共同验证药物真伪。,药品的鉴别鉴别方法,原料药：24方法共同验证，结合性状结果。制剂：一般经一定处理后，按原料药法。,药的鉴别方法：,化学鉴别法光谱鉴别法色谱鉴别法生物学鉴别法,药品的鉴别鉴别方法,第一节化学鉴别法,药物与一定试剂在适当条件下与药物发生氧化、缩合、脱水等化学反应，产生颜色、荧光、沉淀或气体等现象而对药物进行真伪鉴别的方法。化学法是药物鉴别中最常用的方法，其仪器简单，操作简便快速。,药品的鉴别化学鉴别方法,一、常见化学鉴别类型,1.呈色反应：2.沉淀反应：,生物碱显色剂浓硫酸、浓硝酸、钼硫酸、钒硫酸、硒硫酸和甲醛硫酸生物碱沉淀剂碘化铋钾、碘化汞钾、二氯化汞、磷钼酸、硅钨酸、碘一碘化钾、鞣酸、铁氰化钾、苦味酸（三硝基苯酚）,药品的鉴别化学鉴别方法,3.荧光鉴别法,理论依据：某起中药制剂中化学成份，如黄酮类、蒽醌类、香豆素类等，在紫外光下可发出荧光。有的成分本身没有荧光，与一定试剂作用后，也可在紫外光下产生荧光。,药品的鉴别化学鉴别方法,取本品0.5g（含糖型）或0.3g（无糖型），加水5ml使溶解，静置，取上清液点于滤纸上，晾干，置紫外光灯(365nm)下观察，斑点显蓝紫色。,板蓝根颗粒鉴别,药品的鉴别化学鉴别方法,4.气体生成反应鉴别,胺类：强碱下加热，氨臭味含：强酸下加热，2气体含碘：直火加热，紫色碘蒸气含乙酸酯或乙酰胺：水解，加乙醇，香味。,药品的鉴别化学鉴别方法,5.衍生物熔点测定：药物与试剂反应，得产物。测定产物的熔点。,化学鉴别法学习要求1.记住常见特征反应（名称、对象）2.记住某类反应对象要求。,药品的鉴别化学鉴别方法,（1）供试品和供试液的取用量应按各该药品项下的规定，固体供试品应研成细粉；液体供试品如果太稀可浓缩，如果太浓可稀释。（2）试药和试液的加入量、方法和顺序均应按各试验项下的规定；如未作规定，试液应逐滴加入，边加边振摇；并注意观察反应现象。,二、化学试验注意事项,药品的鉴别化学鉴别方法,（3）试验在试管或离心管中进行，如需加热，应小心仔细，并使用试管夹，边加热边振摇，试管口不要对着试验操作者。（4）试验中需要蒸发时，应置于玻璃蒸发皿或瓷蒸发皿中，在水浴上进行。,药品的鉴别化学鉴别方法,（5）沉淀反应有色沉淀反应宜在白色点滴板上进行，白色沉淀反应应在黑色或蓝色点滴板上进行，也可在试管或离心管中进行；如沉淀少不易观察时，可加入适量的某种与水互不混溶的有机溶剂，使原来悬浮在水中的沉淀集中于两液层之间，以便观察。,药品的鉴别化学鉴别方法,（6）试验中需分离沉淀时，采用离心机分离，经离心沉降后，用吸出法或倾泻法分离沉淀。,药品的鉴别化学鉴别方法,（7）颜色反应须在玻璃试管中进行，并注意观察颜色的变化。（8）试验温度，一般温度上升10，可使反应速度增加24倍，应按各试验项下规定的温度进行试验，如达不到时，可适当加温。（9）反应灵敏度极高的试验，必须保证试剂的纯度和仪器的洁净，为此应同时进行空白试验，以资对照。,药品的鉴别化学鉴别方法,（10）反应不够灵敏，试验条件不易掌握的试验，可用对照品进行对照试验。（11）一般鉴别试验中列有一项以上的试验方法时，除正文中已明确规定外，应逐项进行试验，方能证实，不得任选其中之一作为依据。,药品的鉴别化学鉴别方法,第二节光谱鉴别法,利用光作工具的一类仪器分析方法,利用紫外光或可见光对物质进行分析的一种方法。,方法概述,小结,为一类仪器分析方法,药品的鉴别光谱鉴别方法,可见分光光度计,结构,紫外-可见分光光度计,结构,紫外-可见分光光度计,结构,药品的鉴别光谱鉴别方法,利用待分析物质对光吸收情况，或发射光情况，而对该物质进行分析的一种方法。,小结,药品的鉴别光谱鉴别方法,分析,鉴别：不同物质吸收或发射光特征不同而定论。（如发射红光、黄光）,含量测定：利用待分析物质量大小与吸收或发射光大小成比例而进行。,物质量（M）光强,小结,药品的鉴别光谱鉴别方法,光学分析方法,紫外可见分光光度法红外分光光度法荧光分光光度法原子吸收分光光度法X光仪分析法光仪分析法核磁共振仪分析法,药品的鉴别光谱鉴别方法,（一）简述：应用物质对紫外光或可见光有吸收，根据吸收大小（光度）而用于鉴别或含量测定（应用时吸收光为单波长光（分光）,小结,一、紫外可见分光光度法,紫外外波长：可见光波长：,药品的鉴别光谱鉴别方法紫外法,（二）对象要求：,1、具有共轭双键结构物质吸收紫外光。2、有色溶液吸收可见光。,如果待测物无色，可加一定试剂与其作用，发生化学反应，产生颜色后再测定。,旧称“比色法”，现统称“分光光度法”！,小结,药品的鉴别光谱鉴别方法紫外法,对象,饱和烃,杂原子,药品的鉴别光谱鉴别方法紫外法,（二）对象要求：,1、具有共轭双键结构物质吸收紫外光。2、有色溶液吸收可见光。,如果待测物无色，可加一定试剂与其作用，发生化学反应，产生颜色后再测定。,旧称“比色法”，现统称“分光光度法”！,小结,药品的鉴别光谱鉴别方法紫外法,1.物质对光选择性吸收,选择性吸收白光中某种颜色的光。被吸收的颜色与溶液颜色称“互补色”。,溶液颜色产生原因：,小结,药品的鉴别光谱鉴别方法紫外法,溶液的颜色，与它的浓度有关浓度大，颜色深。溶液的颜色，与它对光吸收大小有关吸收大，颜色溶。溶液的浓度与它对光吸收有关浓度大，吸收大。,药品的鉴别光谱鉴别方法紫外法,2.朗伯-比尔定律,一束平行单色光（单波长光）通过液体介质时，光被溶液吸收，吸收大小（以“A”表示，称“吸光度”）与溶液浓度C、过光溶液厚度L成正比。,A=ELC朗伯-比尔定律,仪器测得,吸光系数各药固有,小结,药品的鉴别光谱鉴别方法紫外法,物质对光吸收特性：加和性,ABC,如下图：混和ABC溶液对光总吸收，等于A对光+B对光吸收+C对光吸收总和。,A(a+b+c)=Aa+Bb+Cc,小结,药品的鉴别光谱鉴别方法紫外法,吸光（收）系数：,1、摩尔吸光系数：在波长一定时，溶液浓度为1mol/L,液层厚度为1cm时，的吸收度，用“”表示。,比尔-朗伯定律：A=ELC,小结,各药物吸收系数不同，在标准中给出。系数大，表示吸收强。,药品的鉴别光谱鉴别方法紫外法,仪器结构示意图：,吸收池,信号,光源,单色器,检测器,信号处理及显示器,小结,药品的鉴别光谱鉴别方法紫外法,紫外法用于鉴别药物,（1）供试品与对照品吸收光谱对照一致性,吸收光谱（吸收曲线）：以波长为横坐标，吸光度大小为纵坐标，绘出之曲线。（仪器描绘或人工描绘）,各药物有不同的吸收曲线而鉴别。,小结,药品的鉴别光谱鉴别方法紫外法,药品的鉴别光谱鉴别方法紫外法,鉴别方法：分别测定样品吸收曲线和对照品吸收曲线，两者对照，是否一致。,结果判断：曲线一致，两者可能为同一种物。,曲线不一致，两都肯定不为同一物。,小结,药品的鉴别光谱鉴别方法紫外法,（2）供试品与对照品吸收特征（或规定）比较一致性。,吸收特征：max、min、E、A1/A2等。仪器可直接给出。,小结,药品的鉴别光谱鉴别方法紫外法,维生素B12注射液鉴别：取含量测定项下的溶液，照紫外-可见分光光度法测定，在361nm与550nm的波长处有最大吸收；361nm波长处的吸光度与550nm波长处的吸光度的比值应为3.153.45。,例,药品的鉴别光谱鉴别方法紫外法,（1）试验中所用的量瓶和移液管均应经检定校正、洗净后使用。（2）使用的石英吸收池必须洁净。当吸收池中装入同一溶剂，在规定波长测定各吸收池的透光率，如透光率相差在0.3%以下者可配对使用，否则必须加以校正。,紫外光度计使用注意,药品的鉴别光谱鉴别方法紫外法,（3）取吸收池时，手指拿毛玻璃面的两侧。装样品溶液的体积以池体积的4/5为度，使用挥发性溶液时应加盖，透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净。,药品的鉴别光谱鉴别方法紫外法,（4）称量应按药典规定要求,配制测定溶液时稀释转移次数应尽可能少，转移稀释时所取容积一般应不少于5ml。,（5）供试品溶液的浓度，除各品种项下已有注明者外，供试品溶液的吸光度以在0.30.7之间为宜.,药品的鉴别光谱鉴别方法紫外法,（6）测定时除另有规定者外，应在规定的吸收峰2nm处，再测几点的吸光度，以核对供试品的吸收峰位置是否正确，并以吸光度最大的波长作为测定波长，除另有规定外吸光度最大波长应在该品种项下规定的波长2nm以内。,VitB12：最大吸收波长为361nm,药品的鉴别光谱鉴别方法紫外法,二、红外分光光度法谱图对照法，专属性强，是原料药最常用方法。制剂在ChP中未应用，USP有应用（分离出纯药物后再测定）。,药品的鉴别光谱鉴别方法红外法,方法概况：一种仪器分析方法，利用红外光作工具进行，主要用于鉴别有机化合物。（也可用于结构分析、检查杂质、定量分析等）,应用对象：几乎所有有机化合物。,红外分光光度计,要求：纯度高（98%),药品的鉴别光谱鉴别方法红外法,实验结果：红外吸收图谱,药品的鉴别光谱鉴别方法红外法,鉴别方法：供试品红外图谱与对照品红外图谱或该物质标准图谱对照一致性。,供试品图谱,对照品图谱或标准图谱,药品的鉴别光谱鉴别方法红外法,结构分析：吸收峰代表某基团，根据峰情况，推导该化合物具有何种基团，再结合其它方法共同确定其结构。,药品的鉴别光谱鉴别方法红外法,红外分光光度法检验药物特点,1.专属性好，基本上只用本单一法即可鉴别某药物真伪。2.受“杂质”影响较大，只用于原料药鉴别，不用于制剂鉴别。（检验标准中，基本所有原料药鉴别都有此法）,药品的鉴别光谱鉴别方法红外法,一、红外线及红外光谱,可见光近红外中红外远红外微波,0.762.5501000,um,1、红外线,产生原因分子中原子的振动及转动能级跃迁引起的。,应用为中红外，为振动引起,药品的鉴别光谱鉴别方法红外法,2、红外光谱,一般以百分透过率作纵坐标，以波长或波数为横坐标，绘制出之曲线。,吸收峰,鉴别原理：各有机物有各自红外光谱特征。,吸收谷,药品的鉴别光谱鉴别方法红外法,1cm,波长,3、波数：每1cm长度中具有光波的数目。,=,药品的鉴别光谱鉴别方法红外法,基本原理,物质对红外光有吸收，是分子中原子振动能级改变而引起的,一、振动形式：,（一）伸缩振动,对称伸缩振动Vs不对称伸缩振动Vas,药品的鉴别光谱鉴别方法红外法,（二）弯曲振动,1、面内弯曲振动,红外剪式振动红外摇摆振动,药品的鉴别光谱鉴别方法红外法,2、面外弯曲振动,蜷曲振动摇摆振动,3、变形振动：为3键以上振动形式，似花辨开闭。同时开闭对称变形有开有闭不对称变形振动,药品的鉴别光谱鉴别方法红外法,在一个有机化合物中，存在多种基团，每个基团都有相应振动。每一种振动形式，对应一个振动能级，发生跃迁时所需能量不同，故吸收不同能量，产生不同波数下的红外吸收峰。,光能量:E=hv=hc/,药品的鉴别光谱鉴别方法红外法,虎克定律：,K：弹簧力常数；u:两小球折合质量。,(m1、m2为两小球质量）,五、吸收峰位置（大小）,药品的鉴别光谱鉴别方法红外法,虎克定律在红外振动计算：,每1cm中光波数，为伸缩振动产生值,K：化学键常数，N/cm，单键：K=46双键：K=812三键：K=1218,u:双原子折合原子量。,(m1、m2为各原子量）,药品的鉴别光谱鉴别方法红外法,例：求OH及-C=O的波数,O-H：,5,=3000,C=O:,12,=1730,样品制备：,样品要求：1、纯度高（98%）2、使样品透过率在1570%范围。3、样品不含水份及其它有机溶剂。,测定样品处理：1、气体样品（气体装池，光路较长）2、液体样品（大多为纯液体，制为薄膜夹片、涂片、液体装池等）3、固体样品（常用KBr作稀释剂压片、糊剂、薄膜等）,药品的鉴别光谱鉴别方法红外法,研磨混匀压片测定得图,1环境条件红外实验室的室温应控制在1530，相对湿度应小于60%，适当通风换气，以避免积聚过量的二氧化碳和有机溶剂蒸汽。供电电压和接地电阻应符合仪器说明书要求。,红外法注意事项,药品的鉴别光谱鉴别方法红外法,2背景补偿或空白校正记录供试品光谱时，双光束仪器的参比光路中应置相应的空白对照物（空白盐片、溶剂或糊剂等）；单光束仪器（常见的付里叶变换红外仪）应先进行空白背景扫描，扫描供试品后扣除背景吸收，即得供试品光谱。,药品的鉴别光谱鉴别方法红外法,3采用压片法时，以溴化钾最常用。若供试品为盐酸盐，可比较氯化钾压片和溴化钾压片法的光谱，若二者没有区别，则使用溴化钾。所使用的溴化钾或氯化钾在中红区应无明显的干扰吸收；应预先研细，过200目筛，并在120干燥4h后分装并在干燥器中保存备用。若发现结块，则须重新干燥。,药品的鉴别光谱鉴别方法红外法,4供试品研磨应适度，通常以粒度25m为宜。供试品过度研磨有时会导致晶格结构的破坏或晶型的转化。粒度不够细则易引起光散射能量损失，使整个光谱基线倾斜，甚至严重变形。,药品的鉴别光谱鉴别方法红外法,5压片模具及液体吸收池等红外附件，使用完后应及时擦拭干净，必要时清洗，保存在干燥器中，以免锈蚀,药品的鉴别光谱鉴别方法红外法,6.其它（1）样品研磨应在红外灯下进行，以防样品吸水。（2）KBr压片制样要均匀，否则制得样片有麻点，使透光率降低。（3）制样过程中，加压抽气时间不宜过长。要缓缓除去真空，以免样片破裂。,药品的鉴别光谱鉴别方法红外法,一、薄层色谱法（TLC法）利用供试品与对照品在薄层板上展开后，两者比移值（Rf）相近、斑点颜色相同而鉴别。,第三节色谱鉴别法,药品的鉴别色谱鉴别方法薄层法,TLC法是目前中药材及中药制剂最常用方法。2010版中国药典中，收载品种1146种，采用TLC法鉴别的就有1523项。制剂中564品种，有499个品种采用TLC法！在化学药品检查中，法除用于鉴别外，更常用用于杂质检查。,药品的鉴别色谱鉴别方法薄层法,操作方法,（一）制板,1、软板,2、硬板,普通薄层板高效薄层板：市售,自制市售,药品的鉴别色谱鉴别方法薄层法,固定相（吸附剂）选择-,硅胶,硅胶H（SiO2，没有粘合剂）硅胶G（含有粘合剂煅石膏）硅胶HF（不含粘合剂，含荧光剂）硅胶GF（含粘合剂，含荧光剂）,制板时要加粘合剂,紫外光下显荧光背景,氧化铝：同硅胶,药品的鉴别色谱鉴别方法薄层法,自制薄层板，一般标准板约2g硅胶+6ml含粘合剂水，同一方向研磨，倒至平板中，晾干，活化（110，30min），置干燥器中，待用。,制板,药品的鉴别色谱鉴别方法薄层法,（二）点样仪器：毛细管、平头微量注射器、点样器等。,原则：少量多次，原点直径宜小（小于3mm)。点样时可吹风、加热。,12cm,1cm,药品的鉴别色谱鉴别方法薄层法,（三）展开,方式,上行展开近水平展开多次展开双向展开,注：1、展开槽密闭2、防边缘效应：预平衡。,药品的鉴别色谱鉴别方法薄层法,（四）显色（斑点定位）,1、物理检出法,被检物本身颜色紫外灯照射,2、化学法：喷以一定化学试剂（显色剂），与待检物反应而显色。,组分有荧光荧光板有荧光,药品的鉴别色谱鉴别方法薄层法,鉴别分析,方法：供试品与对照品斑点位置、色泽相同。,位置用比移值（Rf）表示。,Rf=或等,原点到斑点中心的距离原点到溶剂前沿的距离,结果记录：绘制或拍摄图象，记录相关数据。,药品的鉴别色谱鉴别方法薄层法,TLC法系统适用性试验,系统适用性：正式实验前，通过某些指标试验，确定实验条件是否达到实验要求。,适用性判断指标,检测灵敏度：应达一定检测低量。分离度：斑点完全分离，分离度达1.0以上。重复性：重做，相对标准偏差小于5%。,药品的鉴别色谱鉴别方法薄层法,二气相色谱法或高效液相色谱法：一般系在该药物含量测定项下，要求供试品保留时间与对照品保留时间一致而进行鉴别若含量测定为其它方法，不单独使用本法对药物进行鉴别。,未知物,药品的鉴别色谱鉴别方法气相法,方法概述：一种仪器分析方法。简写为“GC”,属色谱法以气体流动相。,应用对象易于气化，且热稳定性好物质。,二气相色谱鉴别法,中药制剂中薄荷油、桂皮油、冰片、桉油、麝香、樟脑、酊剂中乙醇、农药残留,药品的鉴别色谱鉴别方法气相法,气相色谱仪,气相色谱仪基本组成,信号处理及显示器,载气：H2、N2、He2等进样系统：分流不分流进样口、隔垫吹扫进样口分离柱：填充柱、毛细管柱检测器：热导、氢离子化、氮磷、电子捕获等处理：计算机、数据处理机、记录仪,药品的鉴别色谱鉴别方法气相法,实验结果：流出曲线（色谱图-）,药品的鉴别色谱鉴别方法气相法,色谱峰产生过程：,浓信度号,药品的鉴别色谱鉴别方法气相法,对称因子f：,f=W0.05h/2A=(A+B)/2A,AB,f在0.951.05间，对称峰；1.05拖尾峰,对称峰、前延峰、拖尾峰,药品的鉴别色谱鉴别方法气相法,基线：无组成时情况，反映仪器情况。色谱峰：相应为某组分。峰高：可用于定量（一般不用此值计）。峰面积：为定量的依据。标准差：半峰宽：峰宽：,有关概念,衡量柱效。,时间,信号,药品的鉴别色谱鉴别方法气相法,012345min,保留值,保留时间（tR）：用于鉴别组分。,死时间（tM）：调整保留时间（tR）：保留体积（VR）：死体积（VM）：调整保留（VR）：,药品的鉴别色谱鉴别方法气相法,色谱系统适用性试验,实验前先考察实验条件是否满足分析要求。,考察主要内容：,1、理论塔板数2、分离度除另有规定，须大于1.53、重复性连续5次，相对偏差小于2.0%4、拖尾因子,以规定的对照品试验与调试。,药品的鉴别色谱鉴别方法气相法,鉴别方法,1、已知物对照法,（1）保留时间与已知对照物一致性（外标法）,未知物,测定对照物与供试品流出曲线，分析供试品中