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(动物营养与饲料科学专业论文)杜仲提取物的防霉效果及其在肉鸡日粮中的应用研究.pdf.pdf 免费下载
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文档简介
摘要 本论文通过一个防霉实验和两个饲养试验, 系统地研究了杜仲提取物的防霉 效果及其对肉鸡抑菌促生长作用的影响。 试验一探讨了在玉米一 豆粕型日粮中添加杜仲提取物和丙酸钙类、复合有机 酸类防霉剂的防霉效果。在两个月的贮存期,观察测试饲料外观、气味、水分、 脂肪、 蛋白 质、 料温和霉菌总数的变化。 试验二和试验三研究了 杜仲提取物对肉 鸡生产性能、 脆体品质、 血液生化指标和肠道微生物等指标的影响, 并探讨了 杜 仲提取物在肉鸡日 粮中的适宜添加量。 试验二选用1 日 龄健康艾维茵肉仔鸡8 2 5 只,随机分为5 组,每组5 个重复, 每个重复3 3 只鸡。 试验分两个阶段 ( 0 - 2 1 d 和2 1 - - 4 2 d ) ,分别饲j喂5 种不同日 粮,试验5 组为对照组,饲喂基础日粮;试验 1 , 2 , 3 , 4 组为 试验组, 在基 础日 粮中 分别 添加1 5 0 0 g / t , 2 0 0 0 g / t , 2 5 0 0 g / t 的 杜 仲提取物或5 0 m g / k g 的 效美素( 1 0 % ) , 试验鸡自 由 采食和饮水。 试验三选用1 日 龄健康三黄鸡1 5 0 只,随机分为5 组,每组3 个重复,每个重复1 0 只鸡,分别 饲喂5 种不同日 粮,第5 组为对照组,饲喂基础日 粮;第 1 , 2 , 3 , 4 组为试验 组, 在基 础日 粮中 分别 添加1 5 0 0 g / t , 2 0 0 0 g / t , 2 5 0 0 幼的 杜仲 提取物或5 0 m g / k g 的 黄霉 素 ( 8 % ) . 试 验分 两 个阶 段( 0 - 4 w k 和5 - 1 0 w k ) , 试鸡自 由 采 食 和 饮 水。 试验结果表明: ( 1 ) 在饲料中添加杜仲提取物能有效地抑制霉菌的生长繁殖,减少营养成 分的损失, 并对饲料外观有着明 显的影响, 具有与复合有机酸类防霉剂相当的防 霉保鲜效果。 ( 2 )添加杜仲提取物能显著提高艾维茵肉 仔鸡成活率,改善胭体品质,且 添加2 5 0 0 g / t 杜仲提取物对提高胸腿肌率有一定促进作用。 血液生化结果表明: 杜仲提取物能提高肝脏合成蛋白 质的能力, 加强脂类代谢和提高机体免疫力, 从 而在一定程度上促进肉仔鸡的生长。 ( 3 )日 粮中添加杜仲提取物能显著提高三黄鸡平均日 增重 ( p 0 .0 5 ) ,提 高饲料转化率,改善三黄鸡胭体品质及肌肉品质,且能显著提高胸肌率 ( p 0 . 0 5 ) . ( 4 )日 粮中添加杜仲提取物,有利于乳酸杆菌和双歧杆菌的增殖,且能明 显 地抑制盲肠中 大肠杆菌的 增殖( p 0 .0 5 ) , 其中以添加2 0 0 0 g / t 和2 5 0 0 g / t 效果 较好。 ( 5 ) 根据以 上结果,建议在肉 鸡日 粮中添加2 0 0 0 - 2 5 0 0 g / t 杜仲提取物。 关键词 杜仲提取物霉菌肉鸡生产性能血液生化指标肠道微生物 a b s t r a c t t h r e e e x p e r i m e n t s w e re c o n d u c t e d t o e v a l u a t e t h e e f f e c t s o f m o l d p r e v e n t i o n o f e u c o m m i a u l m o i d e s e x t r a c t a n d i t s e ff e c t o n t h e g r o w t h p e r f o r m a n c e o f b ro i l e r s . t h e fi r s t e x p e r i m e n t c o m p a re d t h e m o l d - p r e v e n t i n g e ff e c t o f e u c o m m i a u l m o i d e s e x t r a c t a n d p r o p i o n i c , m u l t i p l e o r g a n i c a c i d p re s e r v a ti v e s i n m a i z e - s o y b e a n d i e t . wi t h i n t w o m o n t h s o f s t o r a g e t i m e , t h e a p p e a r a n c e , o d o r , m o i s t u r e , c p , e e , t e m p e r a t u r e a n d m o l d s u m o f f e e d s t u ff w e re o b s e r v e d o r m e a s u re d i n o r d e r t o c o m p a r e t h e m o l d - p r e v e n t i n g e ff e c t a m o n g t h e t h r e e p re s e r v a t i v e s .t h e o t h e r t w o e x p e r i m e n t s s t u d i e d t h e e ff e c t o f e u c o m m i a u h n o i d e s e x t r a c t o n t h e g r o w th p e r f o r m a n c e ,c a r c a s s q u a l i t y b i o c h e m i c a l p a r a m e t e r s a n d i n t e s t i n a l m i c r o fl o r a o f b r o i l e r s , a n d a p p r o a c h t o i t s o p t i m a l s u p p l e m e n t i n b ro i l e r d i e t s .i n t h e s e c o n d e x p e r i m e n t , 8 2 5 o n e - d a y - o l d a v i n e b r o i l e r s w e re r a n d o m ly a s s i g n e d t o f i v e tr e a t m e n t s w i t h fi v e d u p l i c a t e s . t h e r e w e re 3 3 b roi l e r s p e r d u p l i c a t e . f e e d a n d w a t e r w e r e p r o v i d e d a d 2 1 - 4 2 d ) . t h e l i b i t u m . t h e w h o l e e x p e r iw a s d i v i d e d i n t o t w o p h a s e s ( 0 - 2 1 d a n d b i r d s r e c e i v e d t h e mp n t c 月 们eb a s i c d i e t , o rwi t h l 5 0 0 g / t ,2 0 0 0 幼,2 5 o o g / t e u c o m m i a u l m o i d e s e x t r a c t o r 5 0 m g / k g ma x u s ( 1 0 % ) . i n t h e t h i r d e x p e r i m e n t , 1 5 0 o n e - d a y - o l d b roi l e r s w e re r a n d o m l y a s s i g n e d t o fi v e w it h t h r e e d u p l i c a t e s . t h e re w e r e 1 0 b r o i l e r s p e r d u p l i c a t e . f e e d a n d w a t e r w e r e p ro v i d e d a d l i b it u m . t h e w h o l e e x p e r i m e n t w a s d i v i d e d i n t o t w o p h a s e s ( 0 .4 w k a n d 5 - i o w k ) .t h e g r o 即s r e c e i v e d t h e s a m e b a s i c d i e t , o r wi t h 1 5 0 0 g / t , 2 0 0 0 g / t , 2 5 0 0 g / t e u c o m m i a u l m o i d e s e x t r a c t o r 5 0 m g / k g f l a v o m y c i n ( 8 % ) . t h e res u l t s s h o we d让 ia t : ( 1 ) e u c o m m i a u l m o i d e s e x t r a c t c o u l d e ff e c t i v e l y i n h ib i t t h e g r o w th a n d r e p r o d u c t io n o f m o l d , d e c re a s e n u t r i e n t s l o s s o f f e e d s t u ff , h o l d a n s i g n i fi c a n t e ff e c t o n t h e a p p e a r a n c e o f f e e d s t u ff , a n d s h a re a p a r a l l e l e ff e c t o f m o l d - p re v e n t i n g a n d f r e s h - k e e p i n g w i t h p r o p a n i c p re s e r v a t i v e . ( 2 ) t h e a d d i t i o n o f e u c o m m i a u l m o i d e s e x t r a c t i n c re a s e d a v i a n b ro i l e r s s u r v i v a l r a t i o , i m p r o v e d t h e c a r c a s s q u a l i t y o f b r o i l e r s , a n d t h e re w a s a n u p w a r d t e n d e n c y o n t h e p e r c e n ta g e o f b re a s t m u s c l e y i e l d .t h e a d d i t i o n o f e u c o m m i a u h n o i d e s i m p r o v e d t h e i m m u n e c o m p e t e n c e a n d m e t a b o l i c l e v e l o f l i p i d a n d p r o t e i n o f b r o i l e r s . ( 3 ) t h e a d d i t i o n o f e u c o m m ia u l m o i d e si n c r e a s e d a d g 口 0 .0 5 ) a n d s u r v i v a l r a t i o , i m p r o v e d f c r ( p 0 . 0 5 ) a n d e l e v a t e d t h e p e r c e n t a g e o f b re a s t m u s c l e y i e ld s i g n i fi c a n t l y ( p 0 . 0 5 ) . ( 4 ) 2 0 0 0 g / t a n d 2 5 0 0 g /t e u c o m m i a u l m o i d e s e x t r a c t le v e l o f t h e d ie t c o u l d i n c re a s e t h e g r o w t h o f l a c t o b a c i l l u s a n d b if i d o b a c t e r i u m , a n d i n h i b i t e d t h e g r o w t h o f e s c h e r i c h i a c o l i i n c e c u m s i g n i f i c a n t l y ( p 0 .0 5 ) . ( 5 ) b a s e d o n t h e a b o v e r e s u l t s , i t i s s u g g e s t e d t h a t t h e o p t i m a l l e v e l o f e u c o m m i a u l m o i d e s e x t r a c t i n t h e d i e t o f b r o i l e r s i s 2 0 0 0 - 2 5 0 0 g / t . ke y w o r d s : e u c o mmi a u l mo i d e s e x t r a c t mo l d gr o wt b p e r f o r m a n c e b i o c h e mi c a l p a r a me t e rs i n t e s t i n a l mi c r o fl o r a 名词缩写说明 a d c -a v e r a g e d a i l y g a i n : 平均日 增重 a d f i -a v e r a g e d a i l y f e e d i n t a k e :平均日 采食量 f c r -f e e d c o n v e r s i o n r a t e :饲料转化率 l d h -l a c t i c d e h y d r o g e n a s e :乳酸脱氢酶: a l p -a l k a l i n e p h o s p h a t a s e :碱性磷酸酶 g p t -g l u t a m i c - p y r u v i c t r a n s a m i n a s e :谷丙转氨酶: t c -t o t a l c h o l e s t e r o l :总胆固醇: t p -t o t a l p r o t e i n -总蛋白; g l o b -g l o b u l i n :球蛋白; e e -e t h e r e x t r a c t :粗脂肪: c p -c r u d e p r o t e i n :粗蛋白; c f u - c o l o n y f o r m i n g u n i t s :菌落形成单位; s e m -s t a n d a r d e r r o r o f m e a n s :平均数标准误。 引 附件 独 创 性 声 明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。 尽我所知, 除了文中特别加以标注和致谢的地方外, 论文中不包含其他 人己 经发表或撰写过的研究成果, 也不包含为获得湖南农业大学或其它教育机构 的学位或证书而使用过的材料。 与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均 己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。 研 究 生 签 名 : b 武兴 时 间 : 多 a s* g 月; 日 关于论文使用授权的说明 本人完全了解湖南农业大学有关保留、 使用学位论文的规定, 即: 学校有权 保留 送交论文的复印件和磁盘, 允许论文被查阅和借阅, 可以 采用影印、 缩印或 扫描等复制手段保存、 汇编学位论文。 同意湖南农业大学可以用不同方式在不同 媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。 ( 保密的学位论文在解密后应遵守此协议) 研究生签名: 导师签名: a 武 兴 袱色 时间: 时间: moo ( 年乙 月了 日 年月日 前 省 . 二 刁 1研究背景 在现代肉鸡生产中,由于育种工作的进步、 饲养技术的完善、 疫病防制制度 的健全以及环境条件的优越, 使得肉鸡的生产性能有了大幅度的提高, 但鸡肉的 产品质量却不能满足市场, 特别是国际市场的的需求。 导致这一问 题的根本原因 之一就是在饲料中大量使用化学合成类添加剂, 这些化学合成类添加剂虽可使畜 禽单位产量和畜禽产品数量大幅度提高, 并获得较为可观的经济效益, 但也存在 种种弊端。 如抗生素引 起动物内 源性感染和二重感染, 细菌产生耐药性, 一些大 肠杆菌、 沙门氏菌、 葡萄球菌过去并不严重或较少发生的细菌病, 现已成为严重 的传染病之一, 并造成畜禽免疫力下降、畜禽产品和环境的残留。 人食了这类添 加剂饲喂的畜禽产品后某些化学药物及激素会在人体内 蓄积, 危害人体健康, 而 且还有 “ 三致” 致癌、 致畸、致突变) 作用发生的可能。随着科学技术的进步 和人们健康、 环保意识的加强以及从动物养殖、 食品安全和医学( 包括动物医学) 实践中, 逐渐发现应用抗生素和化学药物作为饲料添加剂的种种弊端后, 人们对 抗生素使用的科学性和可靠性提出了争议。目 前, 在欧盟仍被允许使用的饲料添 加剂黄霉素、卑霉素、盐霉素和莫能霉素,到2 0 0 6 年 1 月前也必须停止使用。 我国也己 经公布了在食品动物饲料中禁用药物清单 高振川,2 0 0 3 ) 。 在此背景 下势必要求安全、 绿色、 无公害观念全面进入养殖业的各个环节, 以 真正生产出 安全、 无公害的绿色食品, 真正把当前的畜禽产品市场由过去的数量、 价格型竞 争转变为安全、 绿色、 环保型的以质量品质为中心的市场竞争上来, 绿色安全动 物产品的生产已成为世界性动物食品生产中的主题。 因而, 寻找一类有类似作用, 但又不对人体造成危害的天然添加剂来替代化学合成类添加剂, 早已 成为许多专 家、 学者研究的热点问 题。 中 草药以其特有的纯天然性、 多功能性、 毒副作用小、 无耐药性等优点, 作为饲料添加剂不易在肉、 蛋、 奶等食用畜禽产品中产生有害 残留, 并以 其独特的药理作用而日 益受到人们的重视( g u o 等, 2 0 0 4 : 贾玉山等, 1 9 9 2 :魏凤仙等,2 0 0 3 :刘璐等,2 0 0 3 ) . 2中 草药( 提取物) 饲料添加剂的 特点 及在畜牧业生产中的 优势 中草药 ( 提取物) 饲料添加剂, 是以天然中草药物质 ( 阴阳、 湿热、 寒凉) 、 物味 ( 酸、甜、苦、辣、咸)、 物间相互关系等的传统中医理论为主导,辅以动 物营养和饲料工业的现代科学理论技术而制成的纯天然的绿色饲料添加剂( 刘忠 深等,2 0 0 3 )。 2 . 1 天然性 天然物中草药取自自 然界动、 植物, 并保持了它们的自 然结构和活性, 即使 需要加工炮制, 亦取自 然法 ( 水、 火或水火法), 仍未破坏其自 然性, 故在被利 用后, 其废弃物亦不会形成公害和污染环境, 它被弃也能回归自 然, 重新参与生 态平衡。 2 . 2 多功能性 每一种天然物中草药均含有几十种, 甚至上百种有机成分, 按照药物的“ 构 效学说”,每一种成分结构起一种功效作用,即“ 一构一效”, 天然物中草药有 多种成分结构, 故具有多种功效。 如杜仲的化学成分达七十种之多, 其用作饲料 添加剂具有抗菌、抗病毒,增强动物免疫力,提高畜禽生产性能,改善肉、蛋、 _ 奶品质等功效。 2 . 3 双向调节性 在机体及脏腑不同功能状态时, 天然物中草药能对其不平衡的病理产生不同 的作用, 即对同一器宫组织的不同功能起到双向 调节作用, 即兴奋时起抑制作用, 抑制时起兴奋作用, 直到调节到正常态为止。 近年的研究认为杜仲对血压具有化 学降压药无法比拟的“ 双向调节” 功能 ( 王俊丽等,1 9 9 3 ),即高血压患者服后 可降压,低血压患者服后可升压。 2 . 4 无毒副残留 及环境污染性 天然中草药, 源于自 然界, 既是人和动物最易接受的物质, 也是人类环境生 态系统循环的组成部分, 因而在长期进化发展中, 人和动物体内以 及环境中都有 能转化它们的酶, 且中草药属纯天然物质, 具有与食物同源、 同体、 同用的 特点, 故从整体上讲,天然物中草药不会形成毒副残留和公害。 2 . 5 无抗药性 天然物中草药的抗菌作用, 少数是含有抗菌有效成分直接作用于菌体, 而大 多数抗菌作用机理是激发和调动动物机体内在的抗菌因子,如细胞吞噬、屏障、 非特异性的血清杀菌素、溶酶素、备解素、补体、干扰素等的功能活性和数量, 以 及降低菌毒力和消除菌对组织的破坏作用, 促进康复, 增强非特异性免疫功能 等途径, 全方位地消灭病菌, 使菌无法变异而被消灭, 故天然物中草药无抗药性。 2 . 6 整体调节 物质对动物机体的作用, 分为直接和间接作用两类。 化学合成物质, 因其结 构成分单一, 因而主要为对局部的选择直接作用, 几乎无间接作用, 更无多功能、 双向和整体调节作用。 天然物中草药, 均为有机复合物, 且每一种物质含有数十 种成分, 故其作用不仅有直接作用, 而且还具有间接作用和整体调节作用。 如山 植含有 7 0 余种成分,还有未知因子和生物活性成分,这些成分除单个成分起应 有的作用外, 还有它们间的复合作用, 这是化学合成物质无法比拟的。因此, 天 然物中草药的每个复合体, 其结合成分在作用机制上是以整体调节为主, 突出对 动物机体的相应作用,调节平衡。 2 . 7 有利于充分利用自 然资源和保护环境 人类在发展中利用特有的智慧和创造力创造人类文明的同时又起到破坏自 然的作用,其结果是当今世界性的环境污染、粮食缺乏、人口 膨胀和能源贫乏。 其中环境污染之因, 主要是人工制造的化学有毒物、 气、 液, 而化学合成药物和 添加剂制剂污染占 有相当的比例。 由于化学合成药物大量地替代天然物, 因而人 类淡化了对自 然的合理开发利用, 使自 然资源长期沉睡于自 然中。 据近年的调查, 我国中草药资源近2 万种, 而我们现在常用的仅6 0 0 余种, 且在利用上也只用传 统的药用部分, 余者弃之回归自 然了。 由此可以 看出, 天然物中草药添加剂的资 源大有开发潜力。 此外,即使取完药用后的余者部分, 亦可作添加剂用。 如杜仲 药用树皮,不用叶,但其叶却是优良的增鲜剂和促生长物质。 3国内外研究进展 3 . 1 杜仲的化学成分 杜仲 ( e u c o m m i a u l m o id e s o fi v ) 是一种雌雄异株的 独特树种,为药用落叶 乔木, 杜仲干燥树皮入药, 己 有2 0 0 0 多年的历史, 神农本草经 将其列为上品, 名为 “ 思仙”( 杨澄等,1 9 9 5 ;李容辉,1 9 9 3 :彭密军,2 0 0 0 ) 。近年来, 许多专 家学者对杜仲的化学成分进行了 大量的研究。 经研究分析, 杜仲的化学成分达七 3 十种之多。 杜仲叶中含有蛋白 质、 脂肪、维生素、 矿物元素等营养成分以及绿原 酸、 桃叶珊瑚贰和松脂醇二葡萄糖试等药用成分( 汤诗杰等, 1 9 9 9 ; 魏鲁霞, 2 0 0 0 : 于学玲,1 9 9 6 ) 。张军民等 ( 2 0 0 2 )针对不同产地和不同收获季节的杜仲叶中的 常规营养成分分析后指出, 杜仲叶风干样品中的c p 含盘高于玉米、 稻谷、高粱 和薯类,与大麦、 小麦、麦数相当:而赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸, 无论是风干样 中 还是蛋白 质中其含量均高于麦类。 杜仲叶与皮的药学成分基本相同, 药效类似 ( 马希汉,1 9 9 7 ;高致明等,1 9 9 7 ) 0 3 . 2 杜仲 ( 提取物)的主要作用及作用机理 3 . 2 . 1 提高机体免疫力,防治畜禽疾病 杜仲中含有的多酚类化合物及其衍生物如原儿茶酸、 香豆酸、 绿原酸、 桃叶 珊瑚试. 榭皮素、 木脂素、 环烯醚菇类等, 能 通过提供质子氢而具有抗氧化和清 除自 由 基的 功能, 同 时 还可以 鳌 合某些金属离子, 抑制由f e 3 + 和c u + 诱导的 有害 自由基产生,从而保护生物膜脂质和d n a大分子,使其免受伤害。据报道,杜 仲水提物具有抗生物分子氧化的作用 ( h s i e h等, 2 0 0 0 ; y e n等,2 0 0 3 ) ,抑制 f e 3 , e d t a . h z o z 等对脱氧核糖、 d n a造成的氧化损伤。 y e n 等 ( 1 9 9 8 ) 实验 发现,杜仲水提物能有效抑制低密度脂蛋白的氧化修饰。杜仲还能通过抑制。 - 麦芽糖酶的活性而抑制有害病原微生物 ( 如细菌、 真菌和病毒等) 细胞表面多糖 蛋白 的 形 成。 此外, 杜 仲中 含有的 桃叶 珊瑚贰具 有明 显的 保肝活性和抑菌作用, 能明 显抑制乙 型肝炎病毒d n a 的复制, 其本身并不具抗病毒作用, 但当 它与葡萄 糖贰酶一起预培养后会产生明显的抗病毒作用。 同时, 杜仲中含有的绿原酸也具 有 较强 的 抗 病原 微生 物的 作 用。 最 近 又 有报 道 ( r e n - h u a i h u a n g 等, 2 0 0 2 ) , 从 杜 仲中 发 现两 种抗真菌多 肤( e u c o m m i a a n t i f u n g a l p e p t i d e ) , 简称e a f p 1 . e a f p 2 o 这两种多肚可抑制来自 棉花、 小麦、 马铃薯等作物中的8 种致病真菌。 体外抑菌 试验表明, 杜仲对大肠杆菌、 金色葡萄球菌、 肺炎球菌、 炭疽杆菌和白喉杆菌等 均有不同程度的抑制作用 ( 程志斌等, 2 0 0 2 ) 0 杜仲多糖能兴奋网状内皮系统, 增强机体非特异性免疫功能。 杜仲多糖可有 效地抑制h i v - 1 对m t - 4 细胞的粘附和抵抗病毒对t淋巴 细胞的侵害 ( n a k a n o 等, 1 9 9 7 ) . g o n d a 等 ( 1 9 9 0 ) 从杜仲皮中分离出的 酸性聚糖a ( e u c o m m a n a ) 和t o m o d a ( 1 9 9 0 ) 分离出的杜仲糖b ( e u c o m m a n b ) 对网状内皮系统均有激活 4 作用, 可增强机体非特异性免疫功能。 徐诗伦等 ( 1 9 8 5 ) 认为, 杜仲对非特异性 的细胞免疫具有双向 调节作用, 既可抑制2 , 4 一 二硝基氯苯d n c b所致的迟发超 敏反应, 又可使荷瘤小鼠 和使用大剂量氢化可的松造成的细胞免疫水平低下的小 鼠外周血液中t淋巴细胞增殖, t淋巴细胞百分比回升, 增强荷瘤小鼠腹腔巨噬 细胞吞噬功能。 o k a d a 等 ( 1 9 9 4 ) 从杜仲叶氮仿提取物中分离出了具有免疫抑制 活性的单菇类化合物地黄普内醋 ( l o l i o d i d e ) ,其为一种干扰t淋巴细胞功能的 免疫 抑制物质。 薛 程远等( 1 9 9 8 ) 经研究发 现杜仲叶乙 醉提取物同 样能 够增强 细胞 免疫及非特异性免疫功能。 3 . 2 . 2 改善动物对糖、蛋白 质和脂肪的代谢 天然中草药 ( 提取物) 含有多种营养成分和药用成分, 且具有独特的生物活 性。 众多研究表明,中草药添加剂可以 提高机体免疫力, 增强机体代谢水平, 提 高 营养物质的消 化利用率 ( w a n g 等,1 9 9 8 : 祝国 强, 2 0 0 4 ; 万 家余, 2 0 0 3 ; 郑 明学, 2 0 0 0 ) 。 药理作用研究证明, 杜仲可以促进动物蛋白 质的合成( 贾宁, 2 0 0 1 ) , 促进胆固醇和脂质代谢 ( 欧爱明等, 2 0 0 4 ; 徐诗伦等,1 9 8 5 ) 等。 杜仲皮和叶中 的特殊成分京尼平贰酸和桃叶珊瑚贰, 可促进动物皮肤、 骨骼和肌肉中的胶原蛋 白的合成与分解, 维持钙、 磷的正常代谢,防止肌肉衰退。 据报道, 杜仲叶的提 取物能抑制小鼠肝脏和脂肪组织内的脂肪沉积, 通过提高肾上腺皮质和辜丸重以 及抑制肝细胞的 肿大而起到抗衰老的作用 m a 等,1 9 9 5 ; n a k a s a , 1 9 9 5 ) . o g w a 等 ( 1 9 9 4 ) 研究表明,给高脂、高胆固醉大鼠喂含5 9 6 杜仲叶粉的高脂日 粮, 2 w k 后血浆和肝中胆固醇水平降低。 此外, 杜仲对于垂体一肾上腺皮质系统具有兴奋 作用并能增强其功能, 使动物外周血液嗜酸性粒细胞减少, 促进动物皮质醉的分 泌, 使外周血液中淋巴 细胞减少, 肝糖原堆积增加, 血糖含量增加。 3 . 2 . 3 改善动物产品的质f和风味 杜仲 水提 取 液有 抗 脂质 过 氧 化 作用, 能 抑 制f e 2 + 所 致的 丙 二 醛的 生 成, 对 肝脏、 肌肉的脂质过氧化有明显保护作用。 对肉 牛、肉 鸡、 鱼饲喂杜仲, 可使动 物肌肉纤维细嫩, 肌肉脂肪含量适中, 高级不饱和脂肪酸含量较多, 甜香化合物 增加, 可溶性 胶原蛋白 合成 增多 ( s h i n y a 等,1 9 9 3 a 和b ; m u r a m a t s u 等 , 1 9 9 3 ; s h i o y a 等, 1 9 9 6 ) , 所以 显得肉 嫩、 味道鲜美。 据报道, 用杜仲叶饲喂的鳗鱼又 嫩又香; 饲喂杜仲叶的肉 鸡炖汤可与土鸡炖汤的风味相媲美 ( 冀献民, 1 9 9 5 ; 赵 伯涛等,2 0 0 1 ;成至日,2 0 0 2 ) . 3 . 2 . 4 促进消化器官的成熟以及消化液的分泌 杜仲中的绿原酸具有肾 上腺素类作用。 环烯醚菇类中的贰元 ( 如京尼平) 具 有促进胆汁分泌的作用。另据研究杜仲还具有促进消化道器官发育的有效成分, 但其具体成分和机制还不清楚。 3 . 3 杜仲 ( 提取物) 作为饲料添加剂在动物养殖业中的应用 很早以前, 我国四川等地农民就有利用杜仲叶喂养家畜的习惯。 他们将杜仲 叶用水拌料喂猪,猪只不仅生长快,而且不易得病 ( 冀献民,1 9 9 5 ) 。 近年来, 日 本已开展了杜仲叶饲喂动物的研究和开发工作, 饲喂的动物有猪、 鸡、 牛和鱼 等。我国自 上个世纪9 0 年代以来,对杜仲作饲料添加剂也进行了较为深入的研 究 ( 王华朗等, 2 0 0 3 :苏印泉等,1 9 9 6 ;胡佳玲,1 9 9 9 ) ,研究结果表明,杜仲 饲料添加剂具有抗菌、抗病毒、增强机体免疫力,提高畜禽生产性能,改善肉、 蛋、奶品质之功效。 3 . 3 . 1 肉鸡 冀献民( 1 9 9 5 ) 用杜仲粉饲喂雏鸡试验, 对5 日 龄雏鸡接种1 1 系新城疫疫苗, 在雏鸡 1 4日 龄时对其抗体效价进行测定。结果显示,杜仲饲料添加剂组雏鸡体 内 抗体效价比对照组雏鸡有所提高。 试验证明, 杜仲饲料添加剂对提高家禽免疫 力, 促进生长有良 好的效果。 王华朗等 ( 2 0 0 3 ) 试验指出, 在肉 鸡日 粮中添加杜 仲纯粉可提高增重, 降低死亡率, 改善饲料报酬: 并且添加杜仲纯粉在一定程度 上可以改善鸡肉 风味。 但也有不同的报道, 王纪亭等 ( 2 0 0 0 ) 试验指出, 在肉 鸡 日 粮中添加3 % 杜仲叶粉后, 试验组和对照组的平均日 增重、平均日 耗料量、饲 料转化率、 成活率及盈利等指标均无明显差异, 但饲料中添加杜仲叶粉能提高机 体的免疫力,可以免除一些药物的添加。 3 . 3 .2 蛋鸡 有关资料报道,杜仲叶粉能使产蛋鸡后期的产蛋率从 6 3 % 提高到 8 6 %,骨 骼肌和肝 脏内的 蛋白 质与r n a含量增加, 所 产“ 杜 仲蛋” 中 每1 0 0 g 含 有3 0 m g 的 胆固醇 ( 普通鸡蛋每1 0 0 g 含有4 7 0 m g 的 胆固 醉) 。 王介庆 ( 1 9 9 8 ) 在a a蛋 鸡饲料中添加 0 . 5 % 杜仲饲料添加剂,试验结果显示,试验组比 对照组蛋鸡开产 期 提前1 0 天, 产蛋 率提商6 % 。 用杜 仲添加剂饲喂 蛋鸡, 不仅显著增强了 免 疫力, 延长了寿命, 提高了 产蛋率, 还能生产出 低胆固醉、 富含高密度脂蛋白 的鸡蛋( 高 密度脂蛋白是血管的 “ 清道夫” ,能抵抗动脉硬化,防止冠心病,故科学家推测 高密度脂蛋白即为 “ 长寿物质” )( 张康健等,1 9 9 6 ) . 3 .3 . 3 蛋鸭 国内 外关于杜仲在养鸭生产上的应用报道较少。 王介庆 ( 1 9 9 8 ) 在麻鸭的饲 料中 添加0 . 5 % 杜仲饲料添加剂,经 1 2 2天的饲养试验,结果表明,试验组比 对 照组开产期提前8 天, 产蛋率提高8 %,蛋个体较对照组大,蛋黄色泽深,而且 使用杜仲饲料添加剂的蛋禽体格健壮,抗病力提高。 3 . 3 . 4 鱼 鱼对添加杜仲叶粉的饲料不仅爱吃, 而且吃了以后能促进消化, 增强鱼肉的 细嫩性, 味道更加鲜美。 罗庆华等 ( 2 0 0 2 ) 试验发现, 杜仲饲料添加剂可显著提 高墨龙睛鱼种的优质率。欧阳庆福 ( 1 9 9 8 ) 试验表明,在草鱼的青饲料中加5 % 碎杜仲嫩叶, 鱼的增重率可提高 8 .5 - 9 .2 %,饲料利用率提高 1 0 . 5 - 1 3 .4 %,饵料 系数降低 6 .2 - 7 .3 %,经济效益提高 1 2 . 71 5 .3 %,而且草鱼的腹脂明显减少, 肌 肉的土腥味降低,香味增浓。日 本长野县产业公司在普通饲料中加入2 - 3 % 的杜 仲叶粉末制成高质量饲料喂养鳗鱼, 鱼食后肉 质嫩滑、 鲜美, 和普通饲料喂 养的 截然不同 ( 刘影秋,1 9 9 6 ) . 3 . 3 . 5 牛 据秘万清 ( 1 9 9 7 ) 报道, 用自 配的增犊散 ( 杜仲、 冤丝籽等) 作母牛精料添 加剂,经试验,5 0头母牛 ( 对照组 5 0 头) ,在同 样胎次,同样生活环境和饲养 方法情况下, 试验组产犊率比对照组提高1 6 .2 %。王于东 ( 1 9 9 7 ) 试验报道, 用 杜仲叶喂育肥牛,日 增重率比 对照组提高 6 . 3 %, 饲料利用率提高 1 0 .2 %, 经济 效益提高1 2 . 8 %。 用适量杜仲叶喂菜牛, 牛增重率提高7 - 8 %, 牛肌肉呈深红色, 色泽鲜艳美观, 肌纤维细嫩, 肉香味加浓。 母牛饲料中添加适量杜仲叶, 可促进 母牛按规律发情; 孕牛饲喂杜仲叶, 有保胎安胎、 提高繁殖率的作用, 同时胎儿 发育健壮, 犊牛成活率提高 ( 孙克年, 2 0 0 0 ) . 3 . 3 . 羊 王于东 ( 1 9 9 8 ) 试验报道,用杜仲叶和皮喂羊,增重率可提高8 .51 2 .3 %, 饲料利用率提高1 2 .31 5 . 7 % , 饲喂杜仲的羊肉 呈深红色,肉 质鲜嫩, 腥味降低, 7 肉香味增浓。绵羊饲料中添加 1 01 5 %新鲜杜仲叶,羊毛产量可提高4 . 5 - 6 .3 %, 毛的优质率提高3 . 5 -4 .2 %,经济效益提高9 . 8 - 1 2 . 6 %o 4研究的目的和意义 本研究是在以上研究的基础上, 初步探讨杜仲提取物的防霉效力和进一步确 定杜仲提取物对肉鸡抑菌促生长作用以及对肉鸡肌肉品质和风味的影响; 评价饲 粮中杜仲提取物的不同添加水平对家禽生产和健康的影响, 为杜仲提取物在禽类 日粮中的应用提供理论依据。 试验一 t r i al o n e 杜仲提取物防霉效果的 研究 a s t u d y o f t h e mo l d - p r e v e n t i n g e f f e c t o f eu c o mmi a u l mo i d e s ex t r a c t 1材料与方法 1 . 1 试验材料 1 . 1 . 1 基质:玉米 6 5 % ,豆粕 1 8 % ,麦数 1 6 % ,石粉 1 % 0 1 . 1 . 2 饲料防霉剂 1 . 1 . 2 . 1 杜仲提取物:由张家界恒兴生物科技有限公司提供 ( 绿原酸含量8 % ) e 1 . 1 . 2 . 2复合有机酸类防霉剂 ( 霉必克) :江西华兴保鲜剂有限公司生产 ( 主要 成分为双乙酸钠、乙酸、苯甲酸和富马酸) 。 1 . 1 . 2 . 3丙酸钙类防霉剂 ( 露保细盐) :德国巴斯夫公司生产( 主要成分为丙酸 钙) 。 1 . 1 . 3 微生物培养基 1 . 1 . 3 . 1 高盐察氏培养基:按国家标准g b 1 3 0 9 2 - 9 1 制作,用于霉菌计数。 1 . 1 . 3 . 2 霉菌稀释液:按国家标准g b 1 3 0 9 2 - 9 1 制作,用于霉菌抱子稀释。 1 . 1 . 4 主要仪器: 无菌工作台 ( h s - 8 4 0 u 型,苏净集团安泰公司制造) 高压灭菌器 ( y x q - s g 4 6 - 2 8 0 s a 型,上海博迅实业有限公司医疗设备厂) 恒温振荡器 ( s h a - b 型, 湖南湘仪科学仪器设备有限公司) 霉菌培养箱 ( m j x - 2 5 0 型,广东省医疗器械厂) 电热恒温干燥箱 ( d h g - 9 1 4 6 a 型,上海精宏实验设备有限公司) 电 热恒温水浴锅 ( d s y - 2 - 4 孔型,北京国华医疗器械厂) 1 . 2 试验分组菊设计 试验分四组即一个对照组 ( 试验1 组) , 三个试验组 ( 试验2 , 3 , 4 组) , 每 组五个重复 见表1 ) t a b l e 1 表 1试验的分组及防霉剂添加量 t r i a l d e s i g n a n d s u p p l e m e n t o f m o l d i n h i b i t o r . . 口 . . . . . 嗯 尸 . . ,-.叫.口州. -. 一-. 曰 一一. -.- . - . .- 防霉剂名称防霉剂添加量 ( %)组别 试验 1 组 试验 2 组 试验 3 组 试验 4 组 基础饲料 杜仲提取物 复合有机酸类防霉剂 丙酸钙类防霉剂 0 0 . 1 5 0 . 1 5 0 . 1 5 试验于2 0 0 3 年7 月至9 月进行; 试验仓为湖南农业大学新兴种猪场饲料厂 的一个小型仓。试验饲料按饲料厂常规包装,内 衬聚乙 烯薄膜袋,外为编织袋, 打包机封口,置于木制的地脚板上,距墙 l m ,以待观察。 1 . 3 饲料储存期观察和测定内容 1 . 3 . 1 室内 温度和相对湿度 采用干湿温度计测定, 每天下午2 : 3 0 进行。 1 . 3 . 2 饲料温度 同时采用5 支温度计测定各组5 包饲料的温度。 1 . 3 . 3 饲料的感官评定 包括饲料气味、 成团、 结块程度、 发霉变质情况,以出现霉味天数为开始霉 变天数。 1 . 3 . 4 饲料常规成分的 变化 包括饲料的水分,蛋白 质,脂肪的变化 ( 测定方法参见杨胜,1 9 9 3 ) 0 1 . 3 . 5 饲料中霉菌总数 每 巧天从各袋中用取样畏按均匀原则取样。 样品放入已 知编号的灭菌塑料 袋带回实验室检测霉菌数量 ( 测定方法见 g b 1 3 0 9 2 - 9 1 饲料中 霉菌检测方法 及周永红等,2 0 0 1 ) 0 1 . 3 . 6 扫 习 中 提取物抑菌率的测定 取对照组发霉饲料约5 0 0 g 用灭菌牛皮纸袋包好带回实验室,在无菌工作台 上用灭菌研钵研磨粉碎, 再用消毒过的1 2 0目 分样筛筛取样品( 温刘发等, 2 0 0 1 ) , 称取2 5 g 。 放入含有2 2 5 m l 灭菌生理盐水的2 5 0 m l 灭菌三角瓶中, 置振荡器上振 荡3 0 m i n ; 用1 0 m 1 灭菌吸管反复吸取l o m l l : 1 0 的上述稀释液于2 5 m l 灭菌试管 中, 用洗耳球及l m l 灭菌吸管反复吹吸5 0 次,使霉菌抱子分散开。取l m l 此稀 释液加入9 m l 灭菌生理盐水,充分混匀得 1 : 1 0 0 稀释液,依次进行1 0 - - 1 0 一 倍 稀释。 取1 0 - - 1 r稀释液l m l 于平皿中( 每个稀释度设2 个重复, 编号) , 取0 . 1 5 % 杜仲提取物溶液l m l , 放置于带有l m l 霉菌抱子溶液的平皿中, 摇匀, 然后将灭 菌后灭菌凉至4 5 左右的高盐察氏 培养荃 1 5 - 2 0 m l 注入平皿中,充分混匀, 待 琼脂凝固后倒置于2 5 - 2 8 的霉菌培养箱中, 培养3 天后开始观察, 培养观察一 周。每一批样品做两个含 l m l 霉菌液不加防霉剂的空白实验。 i i 0 . 巧 % 杜仲提取物溶液配制方法:在超净工作台上称取杜仲提取物0 . 1 5 g 置 于2 5 0 m l 灭菌的三角烧瓶中, 加灭菌的生理盐水l 0 0 m l , 放置振荡器上振荡3 0 m i n 取下, 置电炉上加温至5 0 左右并维持3 - 5 m i n , 使防霉剂的有效成分充分溶解。 高盐察氏培养基的配制方法: 硝酸钠2 g磷酸二氢钾l g硫酸镁 7 %
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