（流行病与卫生统计学专业论文）大理州蔬菜农药残留现状调查.pdf

人理学院2 0 0 5 级硕上研究生学位论文 大理州蔬菜农药残留现状调查 研究生：王赛妮指导教师：李蕴成 摘要 目的：了解目前大理州蔬菜农药残留现状，提出农药管理和使用的科学对策，防止农药污染， 保护生态系统。 方法：在大理州主要蔬菜生产基地( 巍山、宾川、弥渡、洱源) 和非生产基地( 大理市区、 剑川、祥云、宾川、漾濞) 共8 个地区的蔬菜种植地，分别采集叶菜类( 菠菜、香菜、芹菜、 蒜苗、白菜、葱、薄荷、卷心菜、甘蓝、菜花、茴香、韭菜、茼蒿、青菜) 果实类( 西葫芦、 青椒、西红柿、黄瓜、茄子、豆角、苦瓜) 和根茎类( 萝卜、莴笋) 3 类共2 3 种蔬菜样本， 利用农药残毒速测仪r p - 5 0 8 检测农药残留情况，采用行列表资料的x2 检验，比较不同地 区之间及不同种类蔬菜间差异。 结果：大理州各县市区总共检测样本1 5 3 9 份，超标1 2 6 份，超标率8 1 9 。蔬菜生产 基地农药残留超标率为1 0 7 2 ，非蔬菜种植基地的农药残留超标率为5 0 7 ，二者有统计学 差别。8 个地区间蔬菜农药残留超标情况有统计学差异，宾川、巍山和弥渡地区超标率最 高，依次为1 2 5 9 ，1 1 7 3 矛1 j9 2 2 。2 3 种蔬菜农药残留超标情况有统计学差异，白菜、 青菜和韭菜的农药残留超标率最高，依次为2 1 0 5 、1 6 9 5 和1 3 2 5 ，莴笋的农药残留超 标率最低，为1 5 4 。 结论：大理州蔬菜农药残留总体超标率为8 1 9 ，高于大理市植检植保站对大理市主要农 贸市场与大型超市的检测结果( 2 9 8 ) 。大理州主要蔬菜生产基地农药残留超标率高于非 蔬菜生产基地。宾川地区蔬菜农药残留超标率最高。蔬菜农药残留超标率：叶菜类 果 实类 根茎类。白菜、青菜和韭菜农药残留超标率最高，莴笋的农药残留超标率最低。 关键词：农药残留；快速检测；蔬菜；大理州 2 大理学院2 0 0 5 级硕上研究生学位论文 a s t u d yo i lt h ep e s t i c i d er e s i d u e i nv e g e t a b l e si nd a l ic i t y p o s t g r a d u a t e ：w a n gs a i - n is u p e r c v i s o r ：l iy u n - c h e n g a b s t r a c t o b j e c t i v e ：t ok n o wt h ep r e s e n ts i t u a t i o no fp e s t i c i d er e s i d u eo nv e g e t a b l e si nd a l ic i t y , a n dt op u t f o r w a r dt h es c i e n t i f i cc o u n t e r m e a s u r e so fp e s t i c i d ea d m i n i s t r a t i o na n du t i l i z a t i o ni no r d e rt o p r e v e n tc o n t a m i n a t i o na n dp r o t e c tt h ee c o l o g i c a ls y s t e m m e t h o d ：t os a m p l e2 3k i n d s ( s p i n a c h ，p a r s l e y , c e l e r y , g a r l i cs p r o u t s ，c h i n e s ec a b b a g e ，s p r i n g o n i o n ，m i n t ，c a b b a g e ，c u c u r b i t ap e p o ，g r e e np e p p e r , t o m a t o ，c u c u m b e r , e g g p l a n t ，w i l dc a b b a g e ， t u r n i p ，c a u l i f l o w e r , l e t t u c e ，f e n n e l ，p e a ，b i t t e rg o u r d ，g a r l a n dc h r y s a n t h e m u m ，p a k c h o i ) f r o m8 d i s t r i c t si nd a l ic i t yi n c l u d i n gw e i s h a n ，b i n c h u a n ，m i d u ，e r y u a n ，d a l iu r b a n ，j i a n c h u a n ，x i a n g y u n a n dy a n g b i t od e t e c tp e s t i c i d er e s i d u ei nv e g e t a b l e sb yr a p i dd e t e c t i o no fr p 一5 0 8t y p e t o c o m p a r ew h e t h e rt h e r ei sa n yd i f f e r e n c ea m o n gd i f f e r e n td i s t r i c t sa n dd i f f e r e n tv e g e t a b l e so rn o t b yu s i n gc h i - s q u a r et e s t r e s u l t ：i nd a l ic i t yt o t a l l y1 5 3 9s a m p l e sw e r et e s t e da n dt h et o t a le x c e e dr a t ei s8 1 9 w h i c h i sh i g h e rt h a nt h er e s u l to fm a i nv e g e t a b l em a r k e t sa n ds u p e r m a r k e t s t h ee x c e e dq u o t a so f v e g e t a b l e sw h i c hf r o mw e i s h a n ，b i n c h u a n ，m i d ua n de r y u a ni s1 0 7 2 ，a n dt h ee x c e e dq u o t a so f v e g e t a b l e sw h i c hf r o md a l iu r b a n ，j i a n c h u a n ，x i a n g y u na n dy a n g b ii s5 0 7 t h e r ei ss t a t i s t i c a l d i f f e r e n c eb e t w e e nt h e m t h e r ei ss t a t i s t i c a ld i f f e r e n c ea b o u tt h ep e s t i c i d er e s i d u ei nv e g e t a b l e s a m o n g8d i s t r i c t s t h ee x c e e dq u o t a so fb i n c h u a n ，w e i s h a na n dm i d ua r et h et o p3 ，r e s p e c t i v e l y r e a c h i n gt o1 2 5 9 ，1 1 7 3 a n d9 2 2 t h e r ei ss t a t i s t i c a ld i f f e r e n c ea b o u t t h ep e s t i c i d er e s i d u e a m o n g2 3k i n d so fv e g e t a b l e s t h ee x c e e dq u o t a so fc h i n e s ec a b b a g e ，p a k c h o ia n dc h i n e s ec h i v e a r et h et o p3 ，r e s p e c t i v e l yr e a c h i n gt o2 1 0 5 ，1 6 9 5 a n d1 3 2 5 t h el a s tr a n kv e g e t a b l ei s l e t t u c ew i t he x c e e dq u o t ai s1 5 4 c o n c l u s i o n ：i nd a l ic i t yt h et o t a le x c e e dr a t ei s8 1 9 t h ee x c e e dq u o t ao fv e g e t a b l e s w h i c hf r o mw e i s h a n ，b i n c h u a n ，m i d ua n de r y u a ni sh i g h e rt h a nt h o s ef r o md a l iu r b a n ，j i a n c h u a n ， x i a n g y u na n dy a n g b i t h ee x c e e dq u o t ao fv e g e t a b l e sf r o mb i n c h u a ni st o p1 t h e r a n ko f e x c e e dq u o t a so fv e g e t a b l e si sl e a fv e g e t a b l e s ，f r u i tv e g e t a b l e sa n dt u b e r s t h ee x c e e dq u o t a so f c h i n e s ec a b b a g e ，p e k c h o ia n dc h i n e s ec h i v ea r et h et o p3 ，a n dt h el a s tr a n ki sl e t t u c e k e y w o r d s ：p e s t i c i d er e s i d u e ；r a p i dd e t e c t i o n ；v e g e t a b l e s ；d a l ic i t y 3 扉页： 声明尸明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他 个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大理学院或其他教育 机构的学位或证明而使用过的材料。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已 在文中以明确方式标明，并表示了谢意。本人完全意识到本声明的法律结果由本 人承担。 研究生签名：王整暨 日期：塑墨：垒：兰7 论文使用和授权说明 本人完全了解大理学院有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留 并向国家有关部门或机构送交学位论文复印件和论文电子版；允许论文被查阅 或借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复 制手段保存论文；授权学校将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行 检索。 ( 保密的论文在解密后应遵循此规定) 研究生签名：导师签名堪空日期： 迦业习 大理学院2 0 0 5 级硕上研究生学位论文 日 j青 据统计，目前世界上生产和使用的农药有几千种。中国每年用量达5 0 万 - 6 0 万吨，其 中约8 0 的农药直接进入环境，每年使用农药的面积在2 8 亿h m 2 以上n 1 。全世界每年的农 药产量按有效成分统计，约在5 0 0 万吨以上陋1 。这是一个令人触目惊心的数字。 20 世纪80 年代以来，温室、大棚等蔬菜种植面积迅速增加，重茬，连作导致蔬菜病 虫害加重，每年因此造成的损失达2 0 以上d 1 。我国农药生产主要集中在江苏、浙江、天津、 山东等地，使用量较大的是上海、浙江、山东、江苏和广东。以小麦为主要农作物的北方干 旱地区施药量小于南方水稻产区，蔬菜、水果的用药量明显高于其他农作物。近年来农药使 用量有增大的趋势，如1 9 9 0 年为7 3 3 xi 0 8 k g ，1 9 9 5 年为i 0 9 1 0 9 k g ，2 0 0 0 年达到1 2 8 1 0 9k g ，2 0 0 3 年达到1 3 3x1 0 9 k g 。其中，上海和浙江用药量最高，分别达1 0 8 和 1 0 4 1 k g h m 2 h 1 。更为严重的是，由于农药的大量使用，害虫的天敌或其他益虫迅速减少，造 成追加施用农药的恶性循环。而这些农药的利用率只有3 0 左右，随着使用量和使用年数的 增加，农药残留逐渐增加，残留地域逐渐扩大，产生了立体式污染。由此，对农药使用和依 赖程度呈现出恶性循环现象。农药的大量使用，使得蔬菜中农药残留量超标问题同益突出， 研究农药残留的现状及防治对策显得尤为重要阳刊。 1 蔬菜中农药残留污染现状 1 1 我国农药残留污染现状 六六六、d d t 禁用以后，蔬菜上主要使用有机磷、有机氮和菊酯类农药等替代品种。目 前，六六六、d d t 在蔬菜和水果上的残留极低，已不成为主要问题，有机磷、拟除虫菊酯类 等农药品种在蔬菜上的残留则同趋严重盯1 。 1 9 9 1 年天津市韭菜中毒，仅南开医院就收治i 0 0 多人；1 9 9 1 年山东博兴县湖滨乡“1 6 0 5 污染韭菜，造成1 2 0 人中毒；1 9 9 7 年夏季高温期间，江苏省因食用农药残留超标的蔬菜而中 毒的事件，见诸报端的达7 0 多起；1 9 9 8 年山东省宁津县一菜农违反国家农药安全使用规定 在韭菜上使用“1 6 0 5 ”，造成l o 余人中毒，1 人死亡。1 9 9 9 年我国由于农药残留引起的蔬菜 食物中毒事件共有3 7 起。2 0 0 0 年5 月份农业部农药检定所组织北京、上海、重庆、山东和 浙江5 省市的农药检定所，对5 0 个蔬菜品种，1 2 9 3 个样品的农药残留进行抽样检测，农药 4 大理学院2 0 0 5 级硕士研究生学位论文 残留超标率达3 0 ，残留浓度高者为允许残留量的几倍甚至几十倍盯咱3 。 湖南省农药检定所自2 0 0 0 年开始，对湖南省部分城市农贸市场、超市、蔬菜生产基地 进行跟踪采样监测，2 0 0 0 年1 1 1 2 月，共抽检1 0 个蔬菜品种1 4 3 批样品，检出率3 4 3 ， 超标率2 0 3 ，2 0 0 1 年，对长沙、株洲、湘潭、益阳、浏阳等地的蔬菜生产基地与农贸市场 的蔬菜进行采样检测，共抽样9 8 3 批，检出率2 8 0 ，超标率为2 1 3 ，2 0 0 2 年共采样2 1 2 1 批，其中检出率2 0 1 ，超标率1 2 0 。检测出的农药品种主要是有机磷和菊酯类农药。10 1 2 。1 引。 2 0 0 1 年辽宁省对沈阳、大连、鞍山、锦州、辽阳等5 市的韭菜、芹菜、甘蓝、菜花、油 菜、黄瓜和云豆7 种蔬菜中甲胺磷、乙酞甲胺磷、甲拌磷、氧化乐果、敌敌畏、对硫磷、甲 基对硫磷等1 0 种农药进行农药残留抽检，结果发现：9 7 个样品中超标率达5 7 7 n 。2 0 0 3 年夏季泰安市对蔬菜中，有机氯、有机磷等1 1 种化学污染物残留量进行了测定，结果表明， 所检查的1 0 8 分蔬菜中有机磷农药残留超标现象比较严重，甲胺磷超标率为1 2 9 6 n 引。中山 市2 0 0 2 年检测上市蔬菜1 8 2 份，有机磷农药超标率为4 4 0 n 引。2 0 0 2 年1 0 月2 9 日，国家 质量监督检验检疫总局公布了当年秋季产品质量抽查结果，其中蔬菜农药残留量的抽查结果 最为引人关注。共抽查了2 3 个大中城市的大型蔬菜批发市场，发现有4 7 5 的蔬菜农药残留 量超标，也就是说，在我国有将近一半的蔬菜都是按国家规定属于不能食用的“农药蔬菜” 1 6 o 同年我国部分省市利用速测法检测蔬菜中的农药残留量超标情况：其中北京蔬菜超标率 为1 0 ，天津蔬菜超标率为9 2 ，内蒙古蔬菜超标率为1 2 9 ，河北蔬菜超标率为1 4 ，山 西蔬菜超标率为8 9 7 ，辽宁为6 9 0 ，黑龙江为8 5 7 ，吉林省为1 0 3 。上述研究结果表 明，我国说明蔬菜种农药残留情况相当普遍也十分严重。 1 2 其他国家农药残留污染现状 表1 其他国家农药残留情况 5 人理学院2 0 0 5 级硕十研究生学位论文 从上述资料看，国外蔬菜农药残留超标率在上世纪末就远远低于我国。 2 农药的分类及农药残留的危害 2 i 常用的农药分类 迄今为止，在世界上各国注册的农药已有1 5 0 0 多种，其中常用的有5 0 0 余种。按来源 可分为矿物源、化学合成及生物源三大类；按其化学结构可分为：无机类、有机类、抗生素 和生物农药，其中有机类包括有机磷类、有机氯类、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类和有机金 属类农药等；按主要防治对象可分为杀虫剂、杀螨剂、杀菌剂、除草剂和植物生长调节剂心旷2 。 2 2 农药残留的危害 农药是一类生物活性物质，可能会对特定环境中生物群落的组成和变化引起某种冲击； 同时农药又是一类化学活性物质，能够同环境中的其他物质或物体发生相互作用，或在特定 的环境中扩散分布，最后也表现为对生物的影响。因农药残留引起的中毒事件在食物中毒总 数中1 9 9 8 年占2 2 5 ，1 9 9 9 年占3 9 7 ，2 0 0 0 年占3 7 3 3 。 2 1 1 农药残留对生态系统的危害。农药在使用时，一般只有1 0 左右黏附在作物上，其余 9 0 的农药通过各种方式向环境扩散。农药对环境的污染取决于其各自不同的化学组成和化 学稳定性。动植物吸收了残留与环境中微量的农药会在体内蓄积，然后通过生物链作用使残 留农药多次转移，多次蓄积，残留量逐渐增大。也就是说，通过食物链的生物富集作用，越 靠近食物链终端的生物，体内农药含量越高，由于人类处于食物链的最高位，受害最为严重。 此外，自然界的各种生物存在着彼此依赖、相互制约大体生态平衡的关系会因此而破坏乜引。 6 人理学院2 0 0 5 级硕上研究生学位论义 2 2 2 农药对人类健康的危害。农药残留超标成为餐桌上的隐形杀手，影响着人类饮食安全 和身体健康。研究表明：农药对人体的危害不仅表现在干扰人体化学信息的传递，破坏体内 某些重要的酶，而且还阻碍器官发挥正常的生理功能，如导致神经系统功能失调等。虽然少 量的农药残留不会对人体造成立即、直接的毒害，但是农药的分子结构比较稳定，绝大多数 在生物体内很难被代谢分解、排泄。 癌症、不孕症、内分泌紊乱等疾病均与农药污染有关。并且有报道认为农药污染对月经 期、孕期、哺乳期的妇女危害性更大，中枢神经抑制剂类农药可能导致神经行为紊乱，如焦 虑、抑郁、狂躁等，并且在年轻劳动者和女性劳动者中，因农药接触造成的神经系统紊乱与 死亡率之间的相关性大于其他人群。蔬菜农药残留超标，会直接危及人体的神经系统和肝、 肾等重要器官心引。例如：d d t 、敌百虫、d d v 、乐果对实验动物有致突变作用；内吸磷、西维 因有致畸作用；杀虫脒、灭草隆等有致癌性。d d v 、马拉硫磷等还能损害精子，使受孕能力 降低。有机磷农药对多种三磷酸腺苷酶具有抑制作用，可导致性周期失调、胚胎发育障碍、 子代发育不良甚至死亡。二澳氛丙烷可导致男性不育。 2 2 3 农药对害虫天敌的危害。在自然环境中，害虫与天敌之问保持着生态平衡的关系，使 用农药对害虫和田地都有不同程度的杀伤作用。当农药使用以后，残存的害虫仍可依赖作物 为食料，重新迅速繁衍起来。而以捕食害虫为生的天敌，在施药后，当害虫为恢复大量繁殖 以前，由于食物短缺，生长受到抑制，同时在施药后的一段时间内，在天敌与害虫之间为建 立新的生态平衡之前，有可能发生害虫的再次猖獗。此外，长期使用同种农药防治害虫，还 会导致主要害虫被控制，而次要害虫上升为主要害虫，甚至可使原来不是害虫的种类转为害 虫，产生新的害虫群体。 2 2 4 对土壤微生物和土壤动物的危害。土壤微生物和土壤动物是调节土壤肥力的重要因 素。但是，由于田间喷洒农药时的药液流失、土壤药剂处理或化学灌溉、以及使用后所抛撒 的废弃农药所造成的农药残留破坏了土壤微生物的繁殖，使敏感性的菌种受到抑制，土壤微 生物的种群趋于单一化，引起原有的平衡紊乱，功能失调，从而影响土壤物质和能量的循环， 影响土壤微生物的氨化硝化和呼吸作用等，由此破坏土壤结构和理化性质，影响着作物生长， 造成了土壤污染位4 j 。 7 大理学院2 0 0 5 级硕上研究生学位论义 2 2 5 对水环境的危害。水体中的农药污染主要来源有：农药生产、加工企业废水的排放及 水体施药；施用于农田的农药随雨水或灌溉水向水体的迁移；大气中的残留农药和农药使用 过程中的漂移沉降，以及施药工具和器械的清沈等。其中农田农药流失为最主要来源。水体 被农药污染后，会使其中的水生生物大量减少，破坏生态平衡；由于水生生物对农药具有富 集作用，造成对生物的污染，导致鱼类和其他水生生物的死亡乜5 1 ；地下水受到农药污染后极 难降解，已造成持久性污染，若被当作饮用水源，将会严重危害人体健康乜制。 2 2 6 对昆虫的危害。目前使用的多数杀虫剂具有广谱杀虫活性，据观察，长期使用杀虫剂 或除草剂的农田，各类昆虫及土坡表层的微生物，特别是栖息在特殊落叶、落枝上的昆虫及 微生物几乎完全被消灭，加速了农林生态系统中生物相的贫乏化，要恢复到从前的状态也需 要较长的时间。另据报道，昆虫减少已危及到植物的生长，因为很多植物生长时需要昆虫传 花授粉乜7 1 。并且，长期使用同一种农药可使害虫产生耐药性，抗药性的产生使防治效果降低， 不但需要增加药剂的处理次数，而且还会不断提高用药剂量，或者应用新的活性更强的杀虫 剂，这样必然加剧了对生态环境的污染和对生态系统的危害。 2 2 7 对社会经济效益造成的影响。农产品农药污染不仅影响了我国农产品出口，造成了很 大的经济损失，而且直接制约了我国农产品在国际市场上的竞争能力。农药残留已经成为制 约农业和农村经济发展的重要因素之一。我国出口的农产品由于农药残留量超过国际标准， 达不到进口国卫生技术标准的要求使产品被拒绝进口，并失去产品的原有价值心8 | 。以苹果为 例，我国苹果产量居世界第1 位，而目前我国苹果出口量仅占生产总量的1 左右，出口受阻 的主要原因是农药残留超标例。中国橙优质率为3 左右，而美国、巴西等柑桔大国橙类的优 质品率达9 0 以上，原因是中国橙的农药残留量等超标。美国f d a 2 0 0 3 年的检测报告显示： 在1 5 3 7 份进口水果中，检出违禁农药的比例为5 3 ，2 4 9 4 份进口蔬菜样品的违禁农药检出 率为6 7 ，抽检的样品来自许多不同的国家，其中从中国进口的产品被抽样的数量排到了第 2 位拈町而近年来，我国与日本因蔬菜中农药残留严重超过日本国规定的标准而多次出现贸易 纠纷，最终导致日本采取了禁止进口中国蔬菜的措施。 3 当前国内外农药残留快速技术研究概况 国外农药残留检测技术研究源自对农药的登记管理，即当一个新品种农药投入使用前， 8 大理学院2 0 0 5 级硕上研究生学位论文 须了解其在土壤和果实中的残留、代谢和分解情况，并据此制定容许量。由于它不受时间的 限制，侧重强调灵敏度，所以一般都采用高精度的气相色谱法或气质联用法。加之在英、美、 日、欧洲等发达国家，蔬菜生产主要以大规模的集约化生产为主，生产过程管理严格，违禁 使用农药现象较少，果蔬流通模式是先经贮藏、加工后再分销各地，其间有充裕的时间抽样 检测，所以发达国家大多仍采用色谱法对蔬菜中农药多组分同时测定。但这种方法成本高， 耗费时间长。在发展中国家特别是亚太地区，蔬菜在流通市场停留时间极短，色谱分析法无 法在蔬菜销售之前完成检测，从而形成“监而不控”的局面，虽然每年耗费大量经费与人力 检测农药残留，但不能及时防止有毒蔬菜上市。免疫分析是9 0 年代开发的一种较简便的农 药残留快速检测新技术，世界粮农组织( f a o ) 已向许多国家推荐此项技术口。它是基于抗 原抗体、特异组织识别和结合反应为基础的分析方法。生物传感器法也是一种针对较强的农 药残留速测技术2 l ，是有一种生物敏感部件与转换器紧密结合，对特定种类化学物质或生物 活性物质具有选择性和可逆影响的分析，包括酶传感器、组织传感器、微生物传感器等，但 目前这些技术在国内还未正式商品化。 1 9 8 5 年台湾农业研究室首先推出“杀虫剂快速检测 技术，利用由感性品系家蝇纯化的 乙酰胆碱酯酶，直接检测剧毒的有机磷及氨基甲酸酯类农药。1 9 8 9 年再开发“杀菌剂快速检 验”方法，以安全性较高的苏立菌检测有机硫磺等杀菌剂的残毒。以上两项检验技术整合后， 可在3 5 - 4 小时内完成5 0 个样品的检测副。 胆碱酯酶抑制法测定蔬菜的农药残留研究在我国已有十多年的历史，它是根据有机磷和 氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢神经系统中乙酰胆碱酶的活性，造成神经传递质乙酰胆碱 的积累，影响正常传导，使昆虫中毒致死，利用这一昆虫毒理学原理，样品只需要经过简单 处理，与底物和酶液反应后，加入显色剂，通过分光光度计吸光值变化，可计算出胆碱酯酶 被抑制的程度，抑制率与农药残留成正比口4 l 。 9 0 年代初，华南农业大学系统研究了不同动物胆碱酯酶活性及其对有机磷的敏感性，并 且非常成功地解决了酶固定这一技术难题，使产品在常温条件下，长期贮存成为可能，并建 立了国内第一条农药速测卡生产线。目前酶抑制法已成为国内外公认的农药残留快速测定 法，还被列入国家标准作为快速筛测的手段。 9 大理学院2 0 0 5 级硕士研究生学位论文 4 本课题的目的和意义 大理州具有丰富的气候资源和品种资源，使蔬菜生产得到了较快发展，逐步成为全州继 粮、烟之后的又一主要产业，是目前农民增收的一个主要来源。同时不可忽视的是，大理州 良好的地理气候条件，使农作物的病、虫、草害种类繁多，相当大部分的农民尚缺乏必备的 安全使用农药知识，导致农药使用的生态环境问题比较突出。因此加强农药残留检测，规范 合理使用农药，是非常必要的事情。目前，对于大理州市区及周边县区种植销售的蔬菜的农 药残留现状总体的研究还处于空白阶段，对于大理市及周围县区不同农药对蔬菜的污染评价 研究还未见报道。 本课题选区的8 个地区分别是大理市区、巍山、祥云、宾川、漾濞、弥渡、剑川及洱源， 地理分布均匀，并且覆盖了大理州蔬菜重要生产基地，具有很好的代表性。2 3 种蔬菜包括了 日常生活中常见的叶菜类、果实类和根茎类，与人们生活关系密切。本研究是在调查和实验 研究的基础上，对大理州市区及其各县种植待售蔬菜的农药残留现状进行了分析和研究，并 对不同蔬菜的农药残留情况进行了评价，提出了今后农药管理的科学对策。该项研究有利于 了解目f j 大理州市区及其各县蔬菜农药污染现状，提出今后农药管理的科学对策，为当地政 府制定防止农药残留的法规、准则及制定今后的农药发展规划提供理论依据，为更好的防治 大理市农药污染，对保护生态系统和人类的生存健康有积极贡献。 1 0 大理学院2 0 0 5 级硕十研究生学位论文 材料与方法 1 材料 1 1 蔬菜样品 采集大理州8 个地区( 市区、巍山、祥云、宾川、漾濞、弥渡、剑川及洱源) 的2 3 种 蔬菜( 菠菜、香菜、芹菜、蒜苗、白菜、葱、薄荷、卷心菜、西葫芦、青椒、西红柿、黄瓜、 茄子、甘蓝、萝卜、菜花、莴笋、茴香、豆角、苦瓜、韭菜、茼蒿、青菜) 。 1 2 实验仪器与试剂 1 2 1 农药残留快速检测仪器室r p - 5 0 8 农药残毒速测仪 1 2 2 常量天平 1 2 3 恒温水域箱 1 2 4 “同泰”牌农药残留速测酶试剂 2 实验原理与方法 2 1 实验原理 有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酶的活性，造成 神经传导介质乙酰胆碱的积累，影响正常传导，使昆虫中毒致死，根据这一昆虫毒理学原理， 用在对农药残留的检测中。加入反应试剂后，用分光光度计测定吸光值随时间的变化值，计 算出抑制率，判断蔬菜中含有机磷或氨基甲酸酯类农药的残毒情况。即： 乙酰胆碱酯酶+ 有机磷或氨基甲酸酯类农药一酶活性被抑制 乙酰胆碱酯酶 + 样本提取液 活性被抑制叶样本中含有机磷或氨基甲酸酯类农药 活性正常_ 样本中不含有机磷或氨基甲酸酯类农药 如以乙酰硫代胆碱( a s c h ) 为底物，在乙酰胆碱酯酶( a c h e ) 的作用下乙酰硫代胆碱( a s c h ) 水解成硫代胆碱和乙酸，硫代胆碱s n - - 硫双对硝基苯甲酸( d t n b ) 产生显色反应，使反应液 呈黄色，在分光光度计4 1 0 n m 处有最大吸收峰，用分光光度计可测得酶活性被抑制程度( 用 大理学院2 0 0 5 级顾仁研究生学位论文 抑制率表示) 。根据抑制率的不同，判断农药是否超标，当抑制率7 0 ，说明农药残留超标。 若5 0 4 抑制率4 7 0 ，说明蔬菜中可能有农药残留5 棚1 。 2 2 试剂的配制 2 2 1p h 8 0 缓冲溶液：即提取试剂( 未溶前为白色固体) ，磷酸氢二钠1 1 9 克，磷酸二氢 钾称取3 2 克，用1 0 0 0 m l 蒸馏水溶解。 2 2 2 用乙酰胆碱酯酶，每瓶酶粉用l o m l 缓冲液( 即提取试剂) 溶解。用时溶解，溶解后 分装成3 4 个小瓶，暂时不用的酶液保存在冰箱的冷冻层内，使用时解冻，解冻后的酶液贮 存在冰箱的冷藏层( 0 - 5 。c ) 内，拿出冰箱使用时，装酶的容器内放一些冰块，以保障酶一 直在低温状态下，解冻的酶一周内用完。如用后还需重新冷冻，反复解冻不要超过2 次，否 则会影响酶的活性d 7 j 。 2 2 3 底物( 碘化乙酰硫代胆碱) ，用l o m l 缓冲液溶解，保存在冰箱的冷藏室内( o 一5 ) 。 2 2 4 显色剂( 二硫二硝基苯甲酸) ，用l o m l 缓冲液溶解，保存在冰箱的冷藏室内( 0 5 c ) 。 3 蔬菜样品采集 分别对大理州市区，巍山、祥云、宾川、漾濞、弥渡、剑川、洱源等8 个蔬菜种植地， 用随机抽样的方法采集了人们日常食用的主要蔬菜：菠菜、香菜、芹菜、蒜苗、白菜、葱、 薄荷、卷心菜、西葫芦、青椒、西红柿、黄瓜、茄子、甘蓝、萝卜、花菜、莴笋、茴香、豆 角、苦瓜、韭菜、茼蒿、青菜等2 3 种。蔬菜样品的采集以1 5 4 5 亩为一采样单元，在采 样单元内选取5 - 2 0 个植株( 避免病虫害和其它特殊的植株) 。其中小型植株的叶菜类，如白 菜、韭菜等去根整株采集，大型植株的叶菜类可用辐射型切割法采样，根茎类蔬菜采集根部 和茎部，大型根茎可用辐射型切割采样。 此外，采集样品时对植物根、茎、叶和果实，现场分类包装，同一采集点的作物使用统 一编号以避免混杂。新鲜样品采集后，立即装入聚乙烯塑料袋中并扎紧袋口以免水分蒸发。 一般每种样品取l 公斤左右，剔除损坏部分，检测部位为蔬菜的可食部分。 4 样品处理步骤 4 1 取样：样品不可用水冲洗，应擦去表面泥土等杂物后取样。称取切碎或剪碎至1 厘米 见方左右的样本2 0 克于小烧杯中。 1 2 大理学院2 0 0 5 级硕上研究生学位论文 4 2 提取：加入1 0 毫升提取试剂，震荡1 - 2 分钟或静置3 分钟，过滤或静置取上清液。 4 3 抑制反应：依次在小试管内分别加入2 5 毫升样本提取液，5 0 - t l 显色剂，2 0 t l 酶。 4 4 培养：在3 7 一3 8 。c 下培养1 5 分钟，同时用p h 8 0 缓冲溶液做样品空白。 4 5 显色反应：1 5 分钟后再加入5 0 p 1 底物。 4 6 仪器测定：迅速将反应物倒入比色皿中，放入r p 一5 0 8 仪器进行测定。 检测结果计算公式： 抑岛l 率( ) = 型紫久 由此可决定样品中农残是否超标。 式中：a r 对照溶液反应3 m i n 吸光度的变化值。 心样品溶液反应3 m i n 吸光度的变化值。 3 静铷磊羰党傻 空臼壤焘俊 咎攀暖毙蕴 獬铡率 3 势铮蜃缀兜嬗 大理学院2 0 0 5 级硕上研究生学位论文 5 、检测流程图 抑制率大于5 0 为不合格， 大于7 0 为严重超标 剪成l e n a 左右见方的样品， 2 o g 放入取样瓶中 加入l o m l 缓冲溶液，室 温放置3 m i n 小时摇晃 吸取2 5 m 1 i ：液，加入 5 吮l 硅色荆，2 0 , u l 酶液 摇匀后于3 7 下于培养 1 5 r a i n 快速加入5 0 【t 1 底物摇匀 倒入比色皿比色 6 注意事项 6 1采样。采集即将收获作为商品上市销售流通的蔬菜。应选无风、晴朗天气，雨后不采 样。采摘后的样品一般应即采即检。如需保存，应按样品类别分层放入冰箱或冰柜里，以防 止残留农药代谢降解导致检测发生误差。在室温下保存一般不应超过2 4 小时。 6 2 提取。蔬菜取样剪碎阶段，需要注意对萝b 、韭菜、芹菜、蒜苗、葱、香菜及西红柿 汁液中，含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性。处理这类样品时，可采取整株 ( 体) 蔬菜浸提或采用表面测定法。对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可采用上述方法以减少 1 4 人理学院2 0 0 5 级硕士研究生学位论文 色素的干扰。另外，由于同一株( 个) 待测样品，其不同部位的农药含量不同，因此，进行 重复性测试时，最好是用同一个待测液进行不同次数测定。 6 3 试剂及仪器。使用试剂时坚持“只进不出”的原则以防止试剂被污染。所有用于转移试 剂或样品的器具都要专用并贴上标志，以免混用而造成交叉污染。 6 4 结果判定。待测样品三倍取样，其中一份作检验，一分作复检，一份做备查。对于抑制 率7 0 的样品要重复测量，以保证不发生结果的误判。 7 统计方法 超标率( ) = 抑制率 1 7 0 的样品数参加测定的样本总数1 0 0 地区间总体差异，不同种类蔬菜间的差异采用行列表资料的x2 检验。 1 5 人理学院2 0 0 5 级硕上研究生学位论文 结果 1 大理市及其各县检测结果与分析 利用r p - 5 0 8 型农药残毒速测的大理州市区及其各县蔬菜种植地的人们日常食用的2 3 种 蔬菜，结果如下。 表2 大理州市区及7 个县区检测结果 洱、源巨e 三三三三三三三三震亲 剑川困二二二二二二二二二二二二二二二二 ! 型一世 弥渡江二二二二二二二二二二二二二二 漾濞图二二二二二二二二二二二二二二二 划i 区 二二二二二二二二二二二二二 祥云随二二二二二二二二二二二二二二二 巍山蕊 二二二二二二二二二二二二二二 市区圈 二二二二= 二二二二二三二二 图1 大理州市区及各县检测结果 采样大理州8 个县市区2 3 种蔬菜共计1 5 3 9 个，其中超标1 2 6 个，总体超标率为8 1 9 。 其中主要蔬菜生产基地8 4 9 个，超标率为1 0 7 2 ( 9 1 8 4 9 ) ，非生产基地6 9 0 个，超标率5 0 7 ( 3 5 6 9 0 ) ，经四格表x2 检验得二者农药残留超标情况有统计学差异( x2 = 1 6 1 4 3 ，p = o 0 0 0 ) 。 1 6 大理学院2 0 0 5 级硕上研究生学位论文 大理州市区、巍山、祥云、宾川、漾濞、弥渡、剑川和洱源各采样1 7 6 、1 6 2 、1 9 0 、2 7 8 、1 1 2 、 2 1 7 、2 1 2 和1 9 2 个，检测出超标样品分别为1 2 、1 9 、8 、3 5 、5 、2 0 、l o 和1 7 个，超标率 从高到底依次为宾川1 2 5 9 ，巍山1 1 7 3 ，弥渡9 2 2 ，洱源8 8 5 ，市区6 8 2 ，剑川 4 7 2 ，漾濞4 4 6 和祥云4 2 1 。经过行列表x2 检验，8 个县市区间蔬菜农药残留超标情 况具有统计学差异( x2 ：2 0 1 8 9 ，p ：o 0 0 5 ) 。 2 不同种蔬菜不同地区之间的超标情况 表38 个地区2 3 种蔬菜农药残留的检测结果 市区 巍山 超标构成比未超标构成比超标构成比未超标构成比 ( 个) ( ) ( 个) ( ) ( 个) ( ) ( 个) ( ) 菠菜 oo 0 071 0 0 0 012 0 0 048 0 0 0 香菜 0o 0 0 81 0 0 0 0l1 6 6 758 3 3 3 芹菜 22 0 0 088 0 0 00 o 0 07 1 0 0 0 0 蒜苗 o0 o o91 0 0 0 022 8 5 757 2 4 3 白菜 1 1 4 2 968 5 7 124 0 o o36 0 0 0 葱 0o 0 0 “1 0 0 0 0 l 1 4 2 968 5 7 1 薄荷 0o 0 051 0 0 0 011 4 2 968 5 7 1 卷心菜 oo 0 061 0 0 0 011 6 。6 758 3 3 3 西葫芦00 0 071 0 0 0 000 0 01 11 0 0 0 0 青椒 1 9 0 9l o9 1 9 l11 6 6 758 3 3 3 西红柿 11 1 1 1 8 8 8 8 922 5 0 067 5 0 0 黄瓜 22 0 o o88 0 0 000 0 061 0 0 0 0 茄子 2 2 2 2 277 7 7 8oo 0 061 0 0 0 0 甘蓝 0o 0 0 61 0 0 0 0l8 3 3 1 1 9 l - 6 7 萝卜0 0 0 041 0 0 0 0 11 4 2 9 6 8 5 7 1 菜花0 0 0 061 0 0 0 011 2 5 078 7 5 0 莴笋 0o 0 051 0 0 0 0o0 0 071 0 0 0 0 茴香 o 0 0 061 0 0 0 000 0 051 0 0 0 0 豆角 00 0 05 1 0 0 0 011 4 2 968 5 7 1 苦瓜 0o 0 071 0 0 0 00 0 0 0 5 1 0 0 0 0 韭菜 18 3 31 19 1 6 722 2 2 27 1 0 0 0 0 茼蒿00 0 061 0 0 0 00o 0 071 0 0 0 0 青菜 22 0 o o 88 0 0 011 2 5 078 7 5 0 1 7 人理学院2 0 0 5 级硕：研究生学位论文 表3 续 祥云宾川 超标构成比未超标构成比 超标构成比未超标构成比 ( 个)( )( 个)( )( 个) ( ) ( 个) ( ) 菠菜00 0 0 91 0 0 0 021 5 3 8 1 18 4 6 2 香菜0 0 0 071 0 0 0 011 0 0 0 99 0 0 0 芹菜 2 1 8 1 8 9 8 1 8 2 17 6 91 29 2 3 1 蒜苗 00 o o61 0 0 0 032 7 2 787 2 7 3 白菜0 0 0 0 6 1 0 0 0 0 45 0 0 045 0 0 0 葱0 0 0 09 1 0 0 0 0 21 1 7 61 58 8 2 4 薄荷0 0 0 071 0 0 0 015 8 81 6 9 4 1 2 卷心菜00 0 091 0 0 0 0o0 0 0 1 01 0 0 0 0 西葫芦 o o 0 0 8 1 0 0 0 0 o0 0 091 0 0 0 0 青椒 19 0 91 09 0 9 l43 0 7 79 6 9 2 3 西红柿 00 o o91 0 0 0 02 1 4 2 91 28 5 7 1 黄瓜0 0 0 071 0 0 0 022 0 0 088 0 0 0 茄子0 0 0 01 01 0 0 0 00o 0 01 21 0 0 0 0 甘蓝00 0 081 0 0 0 00o 0 0 91 0 0 0 0 萝卜00 0 071 0 0 0 0l 7 1 41 39 2 8 6 菜花 21 8 1 898 1 - 8 20o 0 081 0 0 0 0 莴笋 oo o o81 0 0 0 016 6 7 1 4 9 3 3 3 茴香0 0 0 071 0 0 0 032 3 0 81 07 6 9 2 豆角0 0 0 081 0 0 0 021 4 2 91 28 5 7 1 苦瓜 1l o 0 099 0 0 000 0 0 9 1 0 0 o o 韭菜 1 9 0 91 09 1 9 l21 3 3 3 1 3 8 6 6 7 苘蒿00 0 061 0 0 0 0 2 1 5 3 8 1 18 6 6 2 青菜 12 0 0 048 0 0 029 0 999 1 9 1 1 8 大理学院2 0 0 5 级硕十研究生学位论文 表3 续 漾濞弥渡 超标构成比未超标构成比 超标构成比未超标构成比 ( 个)( )( 个) ( ) ( 个) ( ) ( 个) ( ) 菠菜0 0 0 041 0 0 0 011 4 2 968 5 7 1 香菜 00 0 031 0 0 0 0o0 0 091 0 0 0 0 芹菜 l 2 0 0 0 58 0 0 000 0 0l o1 0 0 0 0 蒜苗 00 0 041 0 0