（应用化学专业论文）体外消化法应用于含朱砂口服中成药的安全性评价研究.pdf

海 本人郑重声明 除文中已经注明引 对本文的研究做出 承担。 论文作者签名 本人完全了解 关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权海南大学可以将本学 位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和 汇编本学位论文。本人在导师指导下完成的论文成果，知识产权归属海南大学。 保密论文在解密后遵守此规定。 论文作者签名：囊z 宁 日期：卯归年衫月3 日言篓蔷缘；r日期：卯，p 年多月3 日 本人已经认真阅读“c a l i s 高校学位论文全文数据库发布章程”，同意将本人的学位论文提交 “c a l i s 高校学位论文全文数据库”中全文发布，并可按“章程”中规定享受相关权益。旦童途塞 逞銮卮澄卮：旦圭生i 目= 生；旦三生蕉查。 论文作者签名：卉汜守 日期：w 户年z 月；日 7 月3日 海南大学硕士学位论文 摘要 本文发展了含朱砂中成药中汞含量的测定方法一火焰原子吸收光谱法( f a a s ) ， 成功测定了几种含朱砂中成药的总汞含量；应用体外消化法对含朱砂中成药中汞的生物 利用性进行了研究；考察了几种常见植物化学物质源食品( p h y t o c h e m i c a l r i c hf o o d ) 对 汞生物利用性的影响；由朱砂中成药的服用剂量、生物利用性，计算得到汞的每日摄入 量，提出并应用p t w l s 评估模型和汞中毒剂量反推评估模型，对代表性含朱砂中成药 的口服安全性进行了评价。主要研究结果如下： ( 1 ) 以同仁安神丸、小儿至宝丸、柏子养心丸、天王补心丸、儿科七里散、紫雪、 复方芦荟胶囊、仁丹为研究对象，考察高压密封条件下中成药中重金属汞的消解体系， 最终选定h n 0 3 h 2 s o , h c l 0 4 体系；对火焰原子吸收分光光度计的仪器工作条件( 灯电 流、燃烧器高度、乙炔流量等) 进行了优化，发展了含朱砂中成药中汞含量的测定方法 高压密封消解火焰原子吸收法，采用该方法对实验室质控样品( 复方芦荟胶囊) 汞含量的测定结果( 1 1 6 2 o 3 ) 与参考值( 1 1 6 8 + 0 4 ) 一致，表明该方法在准确 度、精密度上均满足测试要求。 f a a s 法对8 种常用含朱砂口服中成药样品的测定结果显示，汞的总含量范围为 2 9 9 1 1 6 2 3 m g g 一，所有样品均超出食品中污染物限量标准( e c ) n o1 8 8 1 2 0 0 6 和中国 商务部的药用植物及制剂进出口绿色行业标准( 僦一2 0 0 1 ) 。 ( 2 ) 采用体外溶出法和体外透析法同时对几种含朱砂口服中成药中汞的生物利用性 进行了研究。对冷原子荧光光谱法( c v - a f s ) 和氢化物发生原子荧光光谱法( h g a f s ) 测汞做了方法学比较，在确定的仪器工作条件下，z y g i i 智能冷原子荧光测汞仪的线 性范围为0 2 0 n g m l 一，a f s 8 2 0 双道原子荧光光度计为0 - - 2 0 0n g m l 1 。考虑到体外 消化法所需测定的样品浓度范围通常较宽，因而采用了h g a f s 。含朱砂中成药试药中 的汞元素在人工胃液的溶出率为0 1 4 1 9 6 ，在小肠阶段的溶出率为0 3 3 2 6 5 、 透析率为0 0 0 3 8 加0 1 1 7 。 ( 3 ) 以复方芦荟胶囊、小儿至宝丸为试药，考察了大豆奶( o 5 2 o m l ) 、燕麦浓浆 ( o 5 2 o m l ) 、玉米浓浆( o 5 - 2 o r a l ) 、红茶( o 5 - 2 o g ) 、绿茶( o 5 2 o g ) 、橙汁( o 5 - 2 o m l ) 6 种植物化学物质源食品对汞元素生物利用性的影响，结果表明：在胃肠模拟消化环境下， 6 种植物化学物质源食品对汞的生物利用性均有不同程度的抑制作用，其中以红茶 ( 1 1 3 和1 7 2 2 ) 、大豆奶( 5 1 2 和2 1 2 9 ) 、绿茶( 1 7 1 8 4 和2 1 6 3 0 ) 的影响最为 显著。 ( 4 ) 提出p t w l s ( p r o v i s i o n a lt o l e r a b l ew e e k l yi n t a k e s ) 评估模型，结果表明：同仁安 神丸的日最大摄入汞量刚刚超过安全剂量，其余试药则要低1 - , 2 个数量级；同时，借鉴 并完善了汞中毒剂量反推模型，采用该模型对含朱砂中成药的安全性评价结果表明：同 海南大学硕士学位论文 仁安神丸的日最大摄入汞量已接近安全剂量，其余试药要低1 2 个数量级。可见，2 种 模型的评估结果一致，这表明若严格依照说明书标明剂量短期服用，由口服引起的含朱 砂中成药汞暴露的安全风险性比较低。 关键词：含朱砂中成药汞生物利用性体外消化法安全性评价 海南大学硕士学位论文 a b s t r a c t f l a m ea t o m i ca b s o r p t i o ns p e c t r o m e t r i cm e t h o d ( f a a s ) f o rd e t e r m i n a t i o no fm e r c u r yi n c i n n a b a rc o n t a i n i n g c h i n e s ep a t e n tm e d i c i n e s ( c p m s ) w a sd e v e l o p e da n dt o t a lm e r c u r y c o n t e n t si ns o m ec o m m o nc p m sc o n t a i n i n gc i n n a b a rw e r es u c c e s s f u l l ya n a l y z e db yu s i n g f a a si nt h ep a p e r m e r c u r yb i o a c c e s s i b i l i t yf r o mc p m sc o n t a i n i n gc i n n a b a rw a se s t i m a t e d b ym e a s u r i n gt h es o l u b l eo rd i a l y z a b l em e r c u r yf r a c t i o nr e s u l t i n gf r o mi nv i t r od i g e s t i o n m e t h o do fc p m sc o n t a i n i n gc i n n a b a r i na d d i t i o n ，t h ee f f e c t so fp h y t o c h e m i c a l r i c hf o o do n b i o a c c e s s i b l i t yo fm e r c u r yi nc p m sc o n t a i n i n gc i n n a b a rw e r ei n v e s t i g a t e du n d e ri nv i t r o d i g e s t i o n t a k i n gi n t oc o n s i d e r a t i o nm e r c u r yl e v e l s ，i n t a k e so fc p m sa n do n g o i n gr e s e a r c hi n c l i n i c a ls u r v e y i n go fm e r c u r y , t h ep o t e n t i a lh e a l t hr i s ko fm e r c u r yf o rs o m ec o m m o nc p m s c o n t a i n i n gc i n n a b a rw a sa s s e s s e d t h er e s u l t ss h o w e da sf o l l o w s ： ( 1 ) c p m ss a m p l e s ( f u f a n g l u h u i j i a o n a n gc a p s u l e ，t i a n w a n g b u x i n w a n p i l l ， b o z i y a n g x i np i l l ，x i a o e r z h i b a op i l l ，r e n d a np i l l ，z i x u ep o w d e ra n de r k e q i l i s a np o w d e r ) w e r ed i g e s t e db yh n 0 3 一h 2 s 0 4 - h c l 0 4d i g e s t e da c i d i ca n dt h ec l o s e d - p r e s s u r i z e ds y s t e m t h ew o r k i n gc o n d i t i o no ff l a m ea t o m i ca b s o r p t i o ns p e c t r o p h o t o m e t e r ( 1 a m pc u r r e n t ，b u r n e r h e i g h t ，a c e t y l e n ef l o wr a t e , e t c ) w a so p t i m i z e d a tl a s t , h i g hp r e s s u r ed i g e s t i o n a t o m i c a b s o r p t i o ns p e c t r o m e t r yw a sd e v e l o p e d t h em e r c u r yc o n t e n ti nf u f a n g l u h u i j i a o n a n g c a p s u l ew a sd e t e r m i n e d ( 11 6 24 - 0 。3 ) 、玩1t h ea b o v em e t h o da n dtt e s ts h o w e dt h a tt h e r e s u l ti si nc o n s i s t e n tw i t hp r e v i o u s l yr e p o r t e dr e s u l t s ( 11 6 84 - o 4 ) t h u st h ed e v e l o p e d m e t h o d ( h i g hp r e s s u r ed i g e s t i o n - a t o m i ca b s o r p t i o ns p e c t r o m e t r y ) m e e t st h ed e m a n d so f a n a l y s i sp r o c e d u r e t h ec o n c e n t r a t i o n so fm e r c u r yi ne i g h tc o i i l l n o nc p m sw e r ei nt h er a n g e o f2 9 9 - 1 16 2 3m g 岔1 ，t h a tm e a n st h em e r c u r yc o n t e n t si na l l s a m p l e sw e r et h o u s a n d so f t i m e sh i g h e rt h a nt h ef o o ds t a n d a r d s ( h 匹1 0m g 。k 9 1 ) a n dm e d i c i n a lp l a n t sa n dp r e p a r a t i o n i n d u s t r ys t a n d a r d s0 q gs 0 2m g k g 。) ( 2 ) i i l 啊昀d i g e s t i o nm e t h o dw a sa d o p t e dt os i m u l a t et h ec o n d i t i o n so fg a s t r i cc o m p a r t m e n t a n di n t e s t i n a lc o m p a r t m e n t ，b e f o r et h es o l u b l ea n dd i a l y s a t ef r a c t i o n sw e r ec o l l e c t e da n d q u a n t i f i e db yt h em e a n so fh g a f s f i r s t l y , c o l dv a p o ra t o m i cf l u o r e s c e n c es p e c t r o m e t r y ( c v - m s ) a n dh y d r i d eg e n e r a t i o na t o m i cf l u o r e s c e n c es p e c t r o m e t r y ( h g m s ) w e r e c o m p a r e di nm e t h o d o l o g y f o rz y g i ii n t e l l i g e n tc o l da t o m i cf l u o r e s c e n c e ，l i n e a rr a n g eo f m 之0n g m l w a so b t a i n e d ，w h i l el i n e a rr a n g eo fo 一2 0 o n g - m l 1f o ra f s - 8 2 0d o u b l e c h a n n e la t o m i cf l u o r e s c e n c es p e c t r o m e t e r , a n dt h e r ew a sl i t t l ed i f f e r e n c ei nt h ed e t e c t i o n l i m i tb e t w e e nt h e m t h u sa f sw a ss e l e c t e df o ri t sw i d e rl i n e a rr a n g e m o r e o v e rt h e b i o a c c e s s i b i l i t yd a t aa r ev e r yd i f f e r e n tf o l l o w i n gi nv i t r od i s s o l u t i o na n di nv i t r od i g e s t i o n 海南大学硕士学位论文 d i a l y s i s ，0 3 3 一2 6 5 f o rt h ef o r m e ra n do 0 0 3 8 一o 0 117 f o rt h el a t t e r , w i t hm e r c u r y b i o a v a i l a b i l i t yo f8 5 6 0 a n d2 3 0 9 f r o mh g c l c o m p a r e dw i t hi nv i t r os o l u b i l i t y p r o c e d u r e ，i n 啊仃0d i g e s t i o na n dd i a l y s i sc a nn o to n l ys i m u l a t ep h y s i o l o g i c a lp h ，b u ta l s o r e f l e c tt h ep a s s i v ed i f f u s i o np r o c e s si nt h ei n t e s t i n a lc o m p a r t m e n t ，t h e r e f o r ed a t ac o u l db e m o r ec o n v i n c i n gu n d e ri nv i t r od i g e s t i o na n dd i a l y s i s ( 3 ) m e r c u r yb i o a c c e s s i b i l i t yw e r em e a s u r e df o l l o w i n gas i m u l a t e dd i g e s t i o no fc p m sw i t h a d d e dp h y t o c h e m i c a l r i c hf o o dt r e a t m e n t s ( b l a c kt e a , g r e e nt e a , al a r g es o ym i l k ，o a tt h i c k p a s t e ，仳c kc o ms y r u p ，o r a n g ej u i c e ) t h er e s u l ts h o w e dt h a ta l lt h ep h y t o c h e m i e a l - r i c hf o o d t r e a t m e n t sr e d u c e dm e r c u r yb i o a c c e s s i b i l i t yt os o m ee x t e n t ，w i t hb l a c kt e a ( 1 - 1 3 ，1 7 - 2 2 ) ， b i gs o ym i l k ( 5 - 1 2 ，2 1 - 2 9 ) a n dg r e e nt e a ( 1 7 1 8 4 ，2 1 6 3 0 ) h a v i n g t h em o s t s i g n i f i c a n tr e d u c t i o no fm e r c u r yb i o a c c e s s i b i l i t y ( 4 ) o n er i s ka s s e s s m e n tm o d e l s ( p t w l se v a l u a t i o nm o d e l ) w a sp r o p o s e dt oe v a l u a t et h e p o t e n t i a lr i s ko fc p m s f o rp t w i se v a l u a t i o nm o d e l ，d a i l yb i o a c c e s s i b l em e r c u r yf r o m t o n g r e n a n s s h e n g w a np i l li sj u s ta b o v et h el i m i tv a l u e ，w h i l et h eo t h e rf i v ek i n d so fc p m s a leo n et ot w oo r d e r so fm a g n i t u d el e s st h a nt h et h r e s h o l dv a l u e ；r e f e r r i n gt om e r c u r y p o i s o n i n gd o s em o d e lp r o p o s e db yp a n g j i n g t u a n ，t h em a x i m a lb i o a c c e s s i b l em e r c u r yi sv e r y c l o s et ot h et h r e s h o l dv a l u e ，w h i l et h e o t h e rf i v ek i n d so fc p m sa le1t 02o r d e r so f m a g n i t u d el e s st h a nt h et h r e s h o l dv a l u e t h et w os a f e t ye v a l u a t i o nm o d e l sr e a c ht h es a m e c o n c l u s i o nt h a ts h o r t - t e r mo r a la d m i n i s t r a t i o no fc p m sc o n t a i n i n gc i n n a b a rp o s e sl i t t l er i s k t oh u m a nh e a l t h k e yw o r d s ：c i n n a b a r - c o n t a i n i n gt r a d i t i o n a lm e d i c i n e s ；m e r c u r y ；i nv i t r od i g e s t i o nm e t h o d ； b i o a c c e s s i b i l i t y ；s a f e t ye v a l u a t i o n 海南大学硕士学位论文 目录 摘要i a b s t r a c t i i i 第一章引言。1 1 1 研究背景及意义1 1 2 文献综述1 1 2 1 矿物药的历史沿革、现状和问题一2 1 2 2 传统中医理论对朱砂的认识3 1 2 2 1 药典对含朱砂药物的说明3 1 2 2 2 含朱砂中成药中硫化汞的含量测定方法3 1 2 3 朱砂的毒性研究5 1 2 3 1 中毒表现5 1 2 3 2 朱砂中汞的化学形态5 1 2 3 3h g 元素限量标准6 1 2 4 对含朱砂中成药制剂质量标准研究的思考6 1 2 5 体外消化法概述：j 8 1 2 6 重金属健康风险性评价概述1 0 1 3 本文研究内容1 1 第二章含朱砂中成药中汞的火焰原子吸收光谱法测定1 3 2 1 实验部分13 2 1 1 材料、试剂与仪器1 3 2 1 1 1 实验材料13 2 1 1 2 药品及试剂13 2 1 1 3 主要仪器1 4 2 1 2 样品处理1 4 2 1 3 测定方法1 4 2 1 3 1 容量分析法1 4 2 1 3 2 火焰原子吸收光谱法15 2 1 4t a s 9 9 0 火焰原子吸收分光光度计工作条件的选择1 6 2 1 4 1 灯电流的选择16 2 1 4 2 乙炔流量的选择1 7 2 1 4 3 燃烧器高度的选择1 7 2 1 4 4 仪器工作条件18 2 1 5 火焰原子吸收光谱方法学考察1 8 2 1 5 1 标准曲线绘制1 8 海南大学硕士学位论文 2 1 5 2 方法检出限( l o d ) 和定量限( l o q ) 1 8 2 1 5 3 火焰原子吸收光谱法和容量分析法对照实验1 8 2 2 结果。18 2 3 讨论2 0 2 4 本章小结2 3 第三章体外消化法对含朱砂口服中成药中汞生物利用性的研究2 4 3 1 实验部分2 4 3 1 1 材料、试剂与仪器2 5 3 1 1 1 中成药样品2 5 3 1 1 2 药品及试剂2 5 3 1 1 3 主要仪器2 6 3 1 2 体外消化法( i nv i t r od i g e s t i o nm e t h o d ) 2 6 3 1 2 1 透析法( d i a l y s i sm e t h o d ) 2 6 3 1 2 2 溶出法( s o l u b i l i t ym e t h o d ) 2 6 3 1 2 3 数据处理2 7 3 1 3 体外实验后的样品消解一2 7 3 1 4 汞的测定方法的考察2 9 3 1 4 1 冷原子荧光光谱法( c v a f s ) 2 9 3 1 4 2 氢化物发生原子荧光光谱法( h g a f s ) 3 1 3 1 4 3 测定方法的比较3 2 3 2 结果3 3 3 3 讨论3 4 3 4 本章小结3 4 第四章植物化学物质源食品对含朱砂口服中成药中汞生物利用性的影响3 6 4 1 实验部分3 7 4 1 1 材料、试剂与仪器3 7 4 1 1 1 实验材料3 7 4 1 1 2 药品及试剂3 7 4 1 1 3 主要仪器3 8 4 1 2 实验方法。3 8 4 1 3 样品的消解。3 8 4 2 结果3 9 4 3 讨论4 1 4 4 本章小结4 2 第五章含朱砂口服中成药中汞的健康风险初步评价4 3 海南大学硕士学位论文 5 1p t w i s 评价模型4 3 5 2 汞中毒剂量反推评估模型4 4 5 3 本章小结4 5 第六章论文总结4 6 6 1 结论4 6 6 2 创新点4 6 6 3 问题及展望4 7 参考文献4 8 攻读硕士学位期间参与的科研项目与发表的论文5 2 致谢。5 3 海南大学硕士学位论文 1 1 研究背景及意义 第一章引言 矿物药是祖国医学临床用药的三大来源( 植物药、动物药和矿物药) 之一，在我国已 经有3 0 0 0 多年的应用历史【1 1 。矿物药内普遍存在着多种微量元素，除了人体所必需的 之外，还含有一定的对人体有害的重金属元素( 汞、铅、镉、铜、砷) 。矿物药与植物 药基体性质不同，矿物药主要成分多以朱砂、铅丹、砒石( 由汞、铅、砷等元素所组成) 等无机物为主，稍一过量，即对人体有害，且有害金属( 如铅、汞、镉等) 都具有较长 生物半减期，蓄积性强，对机体产生危害的可能性大。因而，矿物药的使用，比动、植 物药更易导致体内有害因素的蓄积【2 3 】。 目前，我国尚未制定出针对矿物类中药中重金属的限量标准【啦】，而服用含重金属 的矿物类中药是重金属进入人体的重要途径之一，因此矿物类中药重金属及其对人体的 危害问题已经越来越引起人们的重视，国外一些国家对中药采用食品中重金属的限量标 准，如2 0 0 6 年英国药物安全机构声称，中成药复方芦荟胶囊经检测总汞含量超过该国 标准1 1 7 万倍，其配方含有朱砂是导致此次事件发生的重要原因。这一事件引起了国 内、国际社会对含矿物类中药服用安全性的激烈争论【4 】。 矿物药是历经几千年验证有很好疗效的，针对矿物类中药的重金属问题，国内外相 关学者愈来愈清楚地认识到重金属的生物毒害效应与其生物利用性是密切相关的，若在 质量标准中采用重金属总量为质控指标，则难以将可能被人体吸收的重金属与不能被人 体吸收部分区分开来，造成对重金属引起的健康风险性的过高估计，难以准确反映该类 试药中重金属的安全性实际状况【l 捌。因此，对矿物类中药中重金属的人体生物利用性 的研究是非常必要的，此法与食品营养学中营养素效应及环境化学中污染物风险性的主 流评价方法相契合，能够比较合理、客观地评估此类药物中重金属对人体的毒性与潜在 健康风险。 本工作在充分研读了体外实验( i n v i t r ot e s t ) 应用于食品、土壤中目标元素的口服 生物利用性研究成果，以含朱砂中成药中汞的生物利用性为切入点开展研究，拟运用体 外消化法来模拟人体的胃肠道消化过程，以探明重金属汞经试药基体释放进入胃肠消化 道从而发挥其潜在毒性作用的实际状况，综合考虑试药总汞含量水平、生物利用性、服 用剂量等相关数据来评价其安全风险性，本研究成果对正确认识含朱砂中成药中汞的潜 在健康风险及促进此类药物顺利进入国际主流医药市场有帮助，同时，对于其他类型含 矿物药材中成药中重金属安全性评价，具有方法学上的借鉴和应用价值。 1 2 文献综述 海南大学硕士学位论文 1 2 1 矿物药的历史沿革、现状和问题 矿物药作为祖国医学临床用药( 植物药、动物药和矿物药) 的三大来源之一，其临床 应用有着悠久的历史。神农本草经收载3 6 5 种药物中，有矿物药4 6 种。明代李时珍 的药学巨著本草纲目列出1 8 9 2 种药物，矿物药和丹药就有2 2 2 种之多，并将药用 矿物分为金类、玉类、石类、卤石类四大类。中药大辞典共收载中药5 7 6 7 味，矿物 药8 2 味。中国药典( 2 0 0 5 年版一部) 正文中收载了2 3 种矿物质药材( 不含古生物 化石类和贝壳类) 【4 j 。 根据历代本草记载及近代临床应用情况，按中医传统用药经验的分类方法，矿物药 大体可分以下几类i 清热类有石膏、滑石、寒水石等；平肝类有代赭石、礞石、磁石、 龙骨、龙齿等；化瘀类有自然铜、花蒙石、琥珀等；止血类有赤石脂、禹余粮、伏龙等； 通便类有芒硝、硫磺、轻粉；化痰类有海浮石、硼砂、明矾、礞石、砒石等；温肾壮阳 类有阳起石、硫磺等；镇静安神类有朱砂、磁石、龙骨、龙齿等；收敛类有赤石脂、禹 余粮、炉甘石、锻石膏、明矾等；杀虫类有硫磺、轻粉、雄黄、铅丹、砒石等【5 】。 矿物药多是几种矿物的天然混合物，入药时多需用炮制品。影响矿物药质量的因素 很多，产地的地质状况、开采过程、运输及贮存条件、以及炮制方法等直接影响矿物药 材中的各种成分的含量及其各成分之间的比例关系，而其物质基础的变化则是影响疗效 和安全性的关键。地方的有些药检部门常常发现市售的矿物药有的存在诸如品种混乱、 主成分含量达不到要求、药材中掺入杂石或杂质超量等方面的质量问题，如白石英、花 蕊石、赤石脂和阳起石等品种混乱现象还存在；白石英常常与紫石英混用，但前者应基 本为s i 0 2 组成，而后者主含c a f 2 ；有的将硬石膏( 板块、柱状) 、透石膏( 板块、薄片 状) 、红石膏和农用石膏混用作石膏，有的混用石膏品中含砷量较高，并且有引起中毒 死亡的报道。此外还有用人工朱砂代替天然朱砂者，而人工朱砂的游离汞含量较高，易 引起中毒。含矿物药的中成药的质量问题更加突出，不同厂家生产的同一种含矿物药的 中成药产品，其重金属含量却相差很大。据文献报道，分别对上海和北京2 家药厂生产 的牛黄解毒片中的重金属进行测定，发现2 家产品中的砷含量相差高达1 0 余倍，其它 元素如铁、钼、锌等含量也有很大的差别。北京和香港2 家药厂生产的六神丸中的砷、 铁、铜、铝、镍等含量也相差3 1 0 余倍。上述问题的存在在很大程度上与矿物药的安 全与质量标准不够完善和质量控制手段不足有判2 ，3 】。 矿物药中有毒的品种较多。矿物药的使用，比动、植物药更易导致体内有害因素的 蓄积，因为矿物药以无机物为主，某些主要成分即由h g 、p b 、a s 等元素所组成( 如朱 砂、铅丹、砒石等) ，稍一过量，即对人体有害；且有害金属( 都具有较长生物半减期， 蓄积性强，对机体产生危害的可能性大。1 9 8 8 年1 2 月2 7 日国务院令第2 3 号发布的医 疗用毒性药品管理办法中列入毒剧药品管理品种的2 8 种中药中有7 种是矿物药，占 1 4 。由于矿物药的使用不当而造成的中毒事件常常发生，由于某些民间风俗习惯或迷 信不合理地使用矿物药而造成的中毒事件也时有发生。另一方面，矿物药中含有的有毒 2 海南大学硕士学位论文 重金属具有蓄积性，某些毒性成分能通过皮肤吸收，即使是外用或在低剂量下使用时间 过长也会发生慢性中毒。重金属慢性中毒对人造成的危害很大，严重时可使人致残，丧 失劳动力，或造成死亡。因此，需要对矿物药的安全标准进一步规范，确保市场销售的 矿物药的质量，并严格遵照安全标准规定的剂量、使用期限以及用法和注意事项等使用， 才能有效地避免急、慢性中毒事件的发生1 4 , 5 】。 1 2 2 传统中医理论对朱砂的认识 1 2 2 1 药典对含朱砂药物的说明 朱砂为硫化物类矿物辰砂族辰砂，具有清心镇惊，安神解毒的功效。临床上主要用 于心悸易惊、失眠多梦、癫痫发狂、小儿惊风、视物昏花、口疮、喉痹、疮疡肿毒等。 朱砂在临床上应用很广泛，很多中成药制剂包括许多名方中含有朱砂。中国药典) ) ( 2 0 0 5 版) 收录的含朱砂的中成药包括小儿金丹片、保赤散、益元散等4 6 种，约占本版药典 收录的中药成方制剂总数的1 0 。不少儿科成方中也含有朱砂，如一捻金、七珍丸、 d , j l 百寿丸、d , j l 至宝丸、紫雪等。朱砂在历代方剂和中成药中的用药频率相当高，约 为1 0 ，可见其作用为历代医家所肯定。但另一方面，随着对朱砂毒性认识的加深， 以及由于近年来国际上对含重金属中成药的进口限制，我国药政管理部门对朱砂的毒性 相当重视。在近几版的中国药典修订中，对朱砂的剂量进行了大幅度下调，1 9 9 5 版以后的中国药典将朱砂日用剂量由1 9 7 7 、1 9 8 5 、1 9 9 0 年版的每天o 3 1 5 9 大幅下调 至o 1 0 5 9 ，其目的是为了保证朱砂用药的安全。 朱砂在历版中国药典中的剂量、用法见表1 1 ，1 2 。 药物的毒性作用和剂量密切相关，由表1 2 中不难看出，中国药典中对朱砂的 剂量均有严格的规定，并且随着时间的推移日趋减小，特别是1 9 9 5 年版中国药典 中朱砂的剂量大大减少，这正说明了经过长期的临床实践人们对于朱砂的毒性作用有了 较深刻的认识。 1 2 2 2 含朱砂中成药中硫化汞的含量测定方法 传统中医界认为在处方中加入矿物药可以起到治疗的目的，在中国药典( 2 0 0 5 年版一部) 中朱砂作为安神药( 主含h g s ) ，采用汞量法对其所含h g s 含量进行测定并 规定了质量合格中药制剂中h g s 应该达到的含量指标( 见表1 3 ) 1 6 】。 汞量法原理【7 】是：h 矿+ 与s c n 。能形成一种无色稳定的化合物h g ( s c n ) 2 ，由于 h g ( s c n ) 2 的离解度远小于f e ( s c n ) 3 的离解度，所以待溶液中全部的h 孑+ 生成h g ( s c n ) 2 后，微过量的s c n 即与f e 3 + 作用生成f e ( s c n ) 2 + 配离子( 红色) 为终点。 药典收载汞量法测定h g s 之前，需要将中药制剂消解完全，中国药典( 2 0 0 5 年版一部) 中收载的样品消解方法如下：用h 2 s 0 4 k n 0 3 分解试样，滴加高锰酸钾，两 分钟内粉红色不消失( 除去试样分解时产生的亚硫酸) ，最后滴加硫酸亚铁至粉红色退 3 海南大学硕士学位论文 去( 除去过量的高锰酸钾) 。整个实验过程所用仪器简单、实验条件易普及等，但也存 在不足之处，如费时、费力、环境污染大。此外，药典中对h 2 s 0 4 k n 0 3 消解过程的记 述不够清楚( 例如：加热使溶解或者加热使成乳白色等词语) ，值得进一步完善。高宇 源等就报道过这样的问题，他们在实验过程中发现，中国药典在对朱砂加热使溶解 时未注明加热方式( 暗火、明火) 和加热时间，因此在具体操作中由于对加热方式和加 热时间掌握的不同而对朱砂的含量测定结果有所影响，用明火加热( 电炉上直接加热) 不同时间所测得朱砂中h g s 含量结果也存在差异【8 以2 1 。 表1 1 中国药典收藏含朱砂制剂情况 t a b l e1 - 1p r e p a r a t i o nc o n t a i n i n gc i n n a b a ri nc h i n e s ep h a r m a c o p o e i a 表1 2 朱砂在历版中国药典中的剂量、用法 t a b l e1 - 2d o s ea n du s a g eo fc i n n a b a ri nc h i n e s ep h a r m a c o p o e i a 另外，在中成药中，含有朱砂的品种占1 0 ；在儿科中成药中，含朱砂的品种占到 了2 0 3 2 。中国药典( 2 0 0 5 年版一部) 正文中收载含朱砂的内服成方制剂4 4 种，仅 占含朱砂制剂的- - d , 部分，其它未被药典收录的含朱砂中成药的h g s 含量测定至今尚 无方法依据。而且，2 0 0 5 年版的中国药典只规定了万氏牛黄清心丸、, b j l 金丹片、 冰硼散( 为外用药) 、保赤散、益元散、琥珀抱龙丸、暑症片中h g s 含量测定方法及其 指标，余3 9 种未作h g s 的测定，占8 5 。即使是这仅有的7 种制剂，中国药典记 载它们在消解试剂的用量、样品加入量、消解时间、反应容器、洗液介质、硫氰酸铵滴 定液浓度等等许多方面都有很大区别( 见表1 3 ) 。含朱砂中成药的h g s 含量测定方法 4 海南大学硕士学位论文 至今仍然没有统一标准，因而，如何运用现代分析方法建立含朱砂中成药h g s 含量测 定的统一规范已成为摆在我们面前的一道难题。 1 2 3 朱砂的毒性研究 1 2 3 1 中毒表现 朱砂主含硫化汞( h g s ) ，h g s 可致毒性反应。古代医家对此早有阐述，如本草 衍义云：“此物镇养心神，但宜生使，炼服少有不作疾者 ，“一旦大热，数夕而毙。 因火力所变，遂能杀人，不可不慎也。据现代宋广舜等【7 】研究结果显示：朱砂内服过 量有毒是肯定的，无机汞在人体内的吸收率为5 ，甲基汞吸收率可达1 0 0 ，