（药物分析学专业论文）白芍化学成分研究与主要成分含量测定.pdf

f 删川1 1 1 1 1 l ljli ii l l l y 18 9 2 5 1 “4 目录 一、摘要 中文论著摘要1 英文论著摘要3 二、英文缩略语5 三、论文 ( 一) 白芍化学成分研究 前言6 实验材料与方法7 实验结果1 0 讨论：2 ：! 结论3 2 ( 二) r p - h p l c 测定当归芍药散中芍药苷、白芍苷的含量 前言3 3 实验试剂与仪器。3 3 实验方法与结果。3 4 讨论：4 0 结论。4 0 四、参考文献4 1 五、本研究创新性得自我评4 3 六、附录 i 蒙! t 盎z z i 化合物图谱。5 7 在学期间科研成绩7 3 1 改谢7 4 个人简介7 5 中文论著摘要 白芍化学成分研究与主要成分含量测定 目的 白芍为毛莨科植物芍药p a e o m al a ct i f o r ap a ll 的去外皮干燥根。芍药性 微寒、味苦酸，有养血柔肝、缓中止痛、敛阴收汗的功能。我国民间用于治疗胸 腹腰肋疼痛、自汗盗汗、阴虚发热、月经不调、崩漏、带下等n 3 。现代药理学研 究表明白药具有免疫调节、镇痛、保肝、保肾、抗抑郁等作用，芍药苷等单萜苷 类化合物是这些生物活性的主要物质基础。 本论文对白芍的化学成分进行研究，旨在阐明白芍中的有效成分，累计足够 的生物量，为白芍的生物活性研究提供物质基础。同时采用高效液相色谱法建立 测定当归芍药散( d s s ) 及白芍中两种主要成分( 白芍苷和芍药苷) 的含量方法， 为d s s 及白芍的质量控制提供方法和依据。 方法 本论文采用溶剂法和多种色谱方法，包括正相硅胶柱色谱，反相硅胶柱色谱， 葡聚糖凝胶( s e p h a d e xl h 2 0 ) 柱色谱，硅胶薄层色谱等方法分离纯化得到单体化 合物。采用波谱学技术确定化合物的结构。采用高效液相色谱法建立芍药苷和白 芍苷的含量测定方法。 结果 从白芍的乙酸乙酯提取部分中，分离鉴定了2 0 个单体化合物。建立了测定 当归芍药散和白芍药材中芍药苷和白芍苷含量的r p - h p l c 方法。 结论 通过理化性质和波谱学数据分析，结合与文献中报道的已知化合物波谱学数 据比较，鉴定了2 0 个化合物的结构，分别为l ，2 ，6 一苯三酚一1 oad 一葡萄糖 苷( 1 ) 、芍药苷( 2 ) 、4 一甲氧基芍药苷( 3 ) 、白芍苷( 4 ) 、p a e o n i d a n i n ( 5 ) 、苯 甲酰基芍药苷( 6 ) 、4 一甲氧基苯甲酰基芍药苷( 7 ) 、苯甲酰基白芍苷( 8 ) 、 p a c o n i d a n i na ( 9 ) 、没食子酰基白芍苷( 1 0 ) 、去苯甲酰基白芍苷( 1 1 ) 、4 - 5 - 二羟基二氢黄酮一7 o b d 葡萄糖苷( 1 2 ) 、5 ，7 一二羟基二羟黄酮一4 o b d 葡萄 糖苷( 1 3 ) 、( + ) 一儿茶素( 1 4 ) 、没食子酸( 1 5 ) 、香草酸( 1 6 ) 、1 ，2 ，3 一苯三 酚( 1 7 ) 、没食子酸乙酯( 1 8 ) 、b 一谷甾醇( 1 9 ) 、胡萝卜苷( 2 0 ) 。其中化合物 l 为新化合物，1 2 ，1 3 为首次从芍药属植物中分离得到。两种主要成分的线性范 围分别为芍药菅9 9 5 以4 8j c g m l ，白芍苷4 6 4 1 6 2 g l l i l 一，相关系数刀2 均 大于0 9 9 9 ，方法精密度、回收率均符合要求，适用于当归芍药散及白芍中芍药 苷和白芍苷的含量测定。 关键词 白芍；化学成分；白芍苷；芍药苷；含量测定 2 英文论著摘要 s t u d yo nt h ec h e m i c a lc o n s t i t u e n t sa n d d e t e r m i n a t i o no fm a jo rc o n s t i t u e n t s o fp a e o n i a l a c t i f l o r a 肖l l m p a e o n i al a c t i f l o r ap a l lb e l o n gt or a n u n c u l a c e a e p h a r m a c o l o g i c a lr e s e a r c h e s s u g g e s t e dp 1 a c t i f l o r as h o w e dv a r i o u sb i o a c t i v i t i e s i t jsw i d e l yu s ef o rt h et r e a t m e n t o fa u t o i m m u n ed i s e a s e s ，h e p a t i t i s ，n e p h r i t i sa n dd e p r e s s i o n i nt h i st h e s i s ，w eh a v e i n v e s t i g a t e dt h ec h e m i c a lc o n s t i t u e n t so fe t o a c e x t r a c to fp 1 a c t i f l o r aa n de s t a b l i s h e d ar p - i - i p l cm e t h o df o rd e t e r m i n a t i o np a e o n i f l o r i na n da l b i f l o r i ni nd s sa n dp l a c t i f l o r a m e t h o d m o d e mc h r o m a t o g r a p h i ct e c h n i q u e s ，i n c l u d i n gs i l i c ag e lc c ，r e v e r s e d - p h a s e s i l i c ag e lc c ，s e p h a d e xl h 一2 0c c ，r p l ca n dt l c ，w e r eu s e di nt h ee x p e r i m e n t t h es t r u c t u r e sw e r ee l u c i d a t e do nt h eb a s i so fs p e c t r a lm e t h o d s r p h p l cm e t h o d w a se s t a b l i s h e dt od e t e r m i n et w om a j o rc o n s t i t u e n t si nd s sa n dp 1 a c t i f l o r a r e s u l t s t w e n t yc o m p o u n d sw e r ei s o l a t e df r o mt h ee t o a c e x t r a c t so fp a e o n i al a c t i f l o r a p a l l e s t a b l i s h e dar p - h p l cm e t h o df o rd e t e r m i n a t i o np a e o n i f l o r i na n da l b i f l o r i n i nd s sa n dp 1 a c t i f l o r a c o n c l u s i o n t h es t r u c t u r eo ft h e s ec o m p o u n d sw e r ei d e n t i f i e do nt h eb a s i so fc h e m i c a la n d p h y s i c a lc h a r a c t e r i s t i c ，a sw e l la ss p e c t r a lm e t h o d s ，t o g e t h e rw i t hc o m p a r i n gs p e c t r a l d a t aw i t ht h ek n o w nc o m p o u n d t w e n t yc o m p o u n d sw e r ee l u c i d a t e d a s 3 1 , 2 ，6 - b e n z e n e t r i o l 1oa - d g l u c o s i d e ( 1 ) ，p a e o n i f l o r i n ( 2 ) ，4 - m e t h y l p a e o n i f l o r i n ( 3 ) ， a l b i f l o r i n ( 4 ) ，p a e o n i d a n i n ( 5 ) ，b e n z o y l p a e o n i f l o r i n ( 6 ) ，4 - m e t h y l b e n z o y l p a e o n i f l o r i n ( 7 ) ，b e n z o y l a l b i f l o r i n( 8 ) ，p a e o n i d a n i n a ( 9 ) ，g a l l o y l a l b i f l o r i n( 1 0 ) ， d e b e n z o y l a l b i f l o r i n( 1 1 ) ，4 ，5 d i h y d r o x y f l a v a n o n e 7 - 0 毋d - g h c o s i d e( 1 2 ) ， 5 ，7 - d i h y d r o x y f l a v a n o n e 4 0 母d g h c o s i d e ( 1 3 ) ，( + ) - c a t e c h i n ( 1 4 ) ，g a l l i ca c i d ( 1 5 ) ， v a n i l l i c a c i d ( 1 6 ) ，1 , 2 ，3 - b e n z e n e t r i o l ( 1 7 ) ，e t h y lg a l l a t e ( 1 8 ) ，b - s i t o s t e r o l ( 1 9 ) ， d a u c o s t e r o l ( 2 0 ) c o m p o u n d1w a sa n e w c o m p o u n d ，a n d1 2 ，1 3w e r ef w s t l yo b t a i n e d f r o mg e n u sp a e o n i a t h el i n e a rr a n g e df r o m9 9 5t o3 4 8 g m l - 1f o rp a e o n i f l o r i n = 0 9 9 9 2 ) ，a n d4 6 4t o1 6 2j u g m l 1f o ra l b i f l o r i n = 0 9 9 9 4 ) a l lo ft h e r e c o v e r i e s w e r eb e t w e e n1 0 0 5 一1 0 3 4 t h em e t h o dc a nb e a p p l i e d t od e t e r m i n a t i o n p a e o n i f l o r i na n da l b i f l o r i ni nd a n g g u i s h a o y a os a na n d p a e o n i al a c t i f l o r a k e y w o r d s p a e o n i al a c t i f l o r a ；c h e m i c a lc o n s t i t u e n t s ；p a e o n i f l o r i n ；a l b i f l o r i n ；d e t e r m i n a t i o n o fc o n t e n t 4 英文缩略语 5 白芍的化学成分研究 刖昌 白芍为毛莨科植物芍药p a e o n i al a c t i f l o r ap a l l 的去外皮干燥根。在我国，白 芍主要分布在浙江、安徽、四川等地。此外，山东、贵州、湖南、湖北、 甘肃、陕西、河南、云南等地亦产。浙江产者，商品称为杭白芍，品质最 佳；安徽产者称为毫白芍，产量最大；四川产者名川白芍，又名中江芍。芍 药性微寒、味苦酸，有养血柔肝、缓中止痛、敛阴收汗的功能。 白芍作为一种传统中药，很早就受到人们的关注。我国民间用于治疗胸腹腰 肋疼痛、自汗盗汗、阴虚发热、月经不调、崩漏、带下等1 1 1 。现代药理学研究表 明白药具有免疫调节、镇痛、保肝、保肾、抗抑郁等作用，芍药苷等单萜类化合 物是这些生物活性的主要物质基础。 研究表明，白芍中主要化学成分为单萜及单萜苷类化合物，此外，还含有三 萜及三萜苷类化合物，黄酮类化合物，及多糖，鞣质，挥发油等成分。本科题研 究旨在研究白芍中特有的化学成分，为白芍现代化研究提供物质基础。 本实验运用硅胶柱色谱，葡聚糖凝胶柱色谱，硅胶薄层色谱，活性炭色谱等 分离手段，从其9 5 乙醇提取物中分离得到了2 0 个化合物。通过1 h n m r 、 ”c n m r 波谱数据分析及与文献数据对照确定它们的结构为1 ，2 ，6 一苯三酚 1 - o a - d 葡萄糖苷( 1 ) 、芍药苷( 2 ) 、4 甲氧基芍药苷( 3 ) 、白芍苷( 4 ) 、p a e o n i d a n i n ( 5 ) 、苯甲酰基芍药苷( 6 ) 、4 甲氧基苯甲酰基芍药苷( 7 ) 、苯甲酰基白芍苷( 8 ) 、 p a e o n i d a n i n a ( 9 ) 、没食子酰基白芍苷( 1 0 ) 、去苯甲酰基白芍苷( 1 1 ) 、4 ，5 二羟基二氢黄酮7o 伊d 葡萄糖苷( 1 2 ) 、5 ，7 二羟基二氢黄酮4 o 伊d 葡萄 糖苷( 1 3 ) 、( + ) 儿茶素( 1 4 ) 、没食子酸( 1 5 ) 、香草酸( 1 6 ) 、1 ，2 ，3 苯三 酚( 1 7 ) 、没食子酸乙酯( 1 8 ) 、b 谷甾醇( 1 9 ) 、胡萝卜苷( 2 0 ) 。其中化合物1 为新化合物，1 2 ，1 3 为首次从芍药属植物中分离得到。 6 一、试剂及仪器 实验材料与方法 ( 一) 药材： 白芍饮片5k g , 鉴定为毛茛科植物芍药p a e o n i al a c t i f l o r ap a l l 的干燥根。 ( 二) 仪器： b r u k e ra v 6 0 0 型核磁共振波谱仪，b r u k e ra r x 3 0 0 型核磁共振波谱仪： 瑞士b r u k e r 公司 t s q 型液相色谱一串联质谱联用仪：美国f i n i l 适a i l 公司 a r 2 1 4 0 型分析天平：美国奥斯通 r e 5 2 型旋转蒸发仪：上海博通 b s z 1 6 0 自动部分收集器：上海沪西分析仪器厂有限公司 2 6 9 5 分析型高效液相：w a t e r s 2 9 9 6 紫外检测器：w a t e r s z f - 1 型紫外分析仪：江苏海门市齐林贝尔仪器制造有限公司 s h b i i i s 型循环水多用真空泵：郑州长城科工贸有限公司 s g w 1 自动旋光仪g 上海精科 ( 三) 试剂： 9 5 乙醇：沈阳市富康消毒药剂厂 分析纯甲醇，乙酸乙酯，二氯甲烷，丙酮，石油醚，氯仿：国药集团化学试剂 有限公司 ( 四) 材料： 硅胶薄层板：硅胶g f 2 5 4 加o 5 c m c 调制 硅胶柱层析：试剂级硅胶1 0 0 2 0 0 目，2 0 0 3 0 0 目 硅胶h 以上均由青岛海洋化工有限公司提供 葡聚糖凝胶s e p h a d e al h 2 0 ：上海法马西亚有限公司 o d s 硅胶( s 5 0 z m ，1 2 n m ) ：y m c c o ，l t d ，j a p a n 高效薄层板：m e r c k 公司 7 ( 五) 显色剂： l 茴香醛一硫酸显色剂 二、实验方法： ( 一) 提取 干燥白芍饮片5 k g ，粉碎，用9 5 乙醇回流提取三次，合并提取液，减压浓 缩，得棕褐色粘稠状浸膏。粗浸膏水溶液用乙酸乙酯萃取，得到乙酸乙酯提取部 分1 4 0g 。 ( 二) 分离 乙酸乙酯部分经硅胶柱色谱分离，二氯甲烷甲醇系统梯度洗脱，得到f r 1 - 1 2 共1 2 个部分。f r 3 经s e p h a d e xl h - 2 0 ( m e o h ) 柱色谱和硅胶柱色谱分离， 得化合物1 6 ( 1 0m g ) ，1 7 ( 4 5r a g ) 。f r 4 经正相硅胶柱色谱和反相c 1 8 柱色 谱分离，得化合物6 ( 6 0 0m g ) ，7 ( 7 0r a g ) ，8 ( 6 0 0m g ) ，9 ( 1 3m g ) 和 1 8 ( 7 m g ) 。f r 6 经s e p h a d e xl h - 2 0 ( m e o h ) 柱色谱分离，得化合物1 4 ( 1 1 3m g ) 。 f r 7 经硅胶柱色谱分离，得化合物1 5 ( 2 5 0g ) 和1 ( 1 2m g ) 。f r 8 经s e p h a d e x l h - 2 0 ( m e o h ) 柱色谱和反相c 一1 8 硅胶柱色谱分离得化合物2 ( 2 7 5g ) ，3 ( 1 2 0 m g ) ，4 ( 1 4 7g ) ，5 ( 8m g ) ，1 0 ( 1 1m g ) ，1 2 ( 1 4m g ) ，1 3 ( 9m g ) 。f r 1 0 经 反相c - 1 8 柱色谱分离，得化合物1 1 ( 1 0m g ) 。f r 2 经硅胶柱色谱分离后抽虑得 1 9 ( 5 0 0 m g ) 。f r 5 抽虑得2 0 ( m g ) 。 8 _ - _ 、提取分离流程图 白芍饮片 l加一热回流，ffi浓缩 白芍租提物 f r 1f r 2f t 3f r 45 抽滤 c o m p 2 0 1 0 0 m g s i l g e l c c c ：m 1 5 ：1 c o m p 1 7c o m p 1 6 c o m p 66 0 0 m gc o m p 77 0 m gc o m p 1 8 4 5 m g1 0 m g c o m p 86 0 0 r a gc o m p 91 3 r a g7 m g 白芍饮片 i 熬嚣豢茹 白芍粗提物 f r 7f r 8f r 9f r 1 0f r 1 l f r 1 2 l 僦胃 c o m p 1 i 1 0 m g 1 89 1 0 ，1 11 2l 一456 91 01 11 21 3 c 刚i s i l g e l c c c 堂h lo 麓d sm ：h c i o d s 4 m 噬：h l蛩sephadexl h - 2 0 1 4 0 ：6 0 糕c cc ：嚣m8 ：。 il 8 0 ：2 0 io d s m ：h5 5 ：4 5l ：翼! 粤! ：删婴 c 唧1c 孟1 5 jp 。眦c 咖1 2 】4 m g p 味怒，c ml 蠹饕阮h 4 0 驯：1 1 2 r a g2 5 9c o m p 22 7 5 9 c o 孟1 39 m a 。 l c o m p 31 2 0 m g 。 c o m d 4 c o 1 0 9 珊兰；缸姒 正帅懈心 阢卜0 l 埒 阢l 实验结果 来源于毛茛科植物芍药p a e o n i al a c t i f l o r ap a l l 根的中药炮制品分为赤芍、白 芍两种，二者功能主治相差甚远。芍药根去外皮水煮后晾干的炮制品为白芍1 1 1 。 白芍具有养血柔肝、缓中止痛、敛阴收汗的功能。民间用于治疗胸腹腰肋疼痛、 自汗盗汗、阴虚发热、月经不调、崩漏、带下【2 1 。研究表明，芍药主要含有单萜 和单萜苷类化合物【3 1 0 本文对白芍的化学成分进行研究，运用多种色谱方法，分 离纯化得到了2 0 个化合物。通过1 h n m r 、1 3 c n m r 波谱数据分析及与文献数 据对照确定它们的结构为1 ，2 ，6 苯三酚10a - d 葡萄糖苷( 1 ) 、芍药苷( 2 ) 、 4 甲氧基芍药苷( 3 ) 、白芍苷( 4 ) 、p a e o n i d a n i n ( 5 ) 、苯甲酰基芍药苷( 6 ) 、4 甲氧基苯甲酰基芍药苷( 7 ) 、苯甲酰基白芍苷( 8 ) 、p a e o n i d a n i n a ( 9 ) 、没食子 酰基白芍苷( 1 0 ) 、去苯甲酰基白芍苷( 1 1 ) 、4 7 ，5 二羟基二氢黄酮7 o 伊d 葡萄糖苷( 1 2 ) 、5 ，7 二羟基二氢黄酮4 o 卢d 葡萄糖苷( 1 3 ) 、( + ) 儿茶素 ( 1 4 ) 、没食子酸( 1 5 ) 、香草酸( 1 6 ) 、1 ，2 ，3 苯三酚( 1 7 ) 、没食子酸乙酯( 1 8 ) 、 b 谷甾醇( 1 9 ) 、胡萝卜苷( 2 0 ) 。其中，化合物1 为新化合物，1 2 ，1 3 为首次从 芍药属植物中分离得到。 1 0 表1 白芍中分离得到的化合物( 为新化合物，为首次从芍药属植物中分离) c o m p n a m es t r u c t u r ei d e nm e t h o d l 1 , 2 ，6 一b c n z c n c t r i o l 一1h r m s 0 a - d - g l u c o s i d c h 瓠 e s l m s 1 h n m r 1 3 c n m r h s q c h m b c 【叫 2 p a e o n i f l o r i n 1 h n m r h 挚k i o 1 3 c - n m r 听占矾 1 h n m r 3 4 - m c t h y l p a e o n i f l o r 听占酏心 1 3 c n m r i n 4a l b i f l o r i n o h 1 h n m r 丁。蛳镭 1 3 c n m r 5 p a c o n i d a n i n oh 。吼 1 h n m r 丁。娥。 ”c n m r 1 h n m r 6 b c n z o y l p a e o n i f l o r i 可占h - c ；h 3 1 3 c n m r n 1 l 1 h n m r 1 3 c n m r 7 4 - m e t h y l b e n z o y l p a e 一藤 可酏吃 o n i f l o r i n 8 b e n z o y l a l b i f l o r i n 1 h n m r 1 3 c n m r 丁。如镭 9 p a e o n i d a n i na 1 h n m r 1 3 c n m r 丁。批乒_ o h 3 蠹 1 0 g a l l o y l a l b i f l o r i n 1 h n m r 1 3 c n m r 舯 可。n 馏 1 1 d e b e n z o y l a l b i f l o r o h chk 0 c h 3 1 h n m r 1 3 c - n m r i n 堪h o 户q 之 1 2 幸掌 4 - 5 - d i h y d r o x y f l a v a n o n e 7 o - p - d o u c h 龆。联炒o n l h n m ro s i d e 1 3 c n m r 1 2 1 3 掌 5 ，7 - d i h y d r o x y f l a v a n 舯一 1 h n m r o n e 一4 一0 - 卢d 一酉u c 0 s i d e 1 3 c n m r 1 4 ( + ) c a t e c h i n 舯一0 n o h l h n m r 1 3 c n m r 1 5 g a l l i ca c i d 玲。h 1 h n m r 1 6 v a n i l l i ca c i d c o o h l e s i m s q 呱 1 h n m r t l c o h 1 7 1 , 2 ，3 - b e n z e n e t r i o l h 舡伽 1 h n m r 1 8 e t h y lg a u a t e 玲c o o c 。h h 2 洲3 1 h n m r 1 9b s i t o s t e r o l i卜 h 加斛 t l c 2 0d a u c o s t e r o l h 瓯加姆 t l c 1 3 化合物的理化性质及波谱数据 化合物1 ：1 ，2 ，6 b e n z e n e t d o l 10a - d g l u c o s i d e 白色粉末，与香草醛硫酸试剂反应显橙红色，紫外2 5 4 n m 下观察有暗斑点。 2 0 【叫d + 2 2 9 3 。p0 5 ，m e o l - i ) 。e s i - m sm z ：3 1 1 【m + n a + ，5 9 9 【2 m + n a + ，2 8 7 【m - h 】，3 2 3 【m + c i 。h r e s i - m sm z ：3 1 1 0 7 3 4 【m + n a + ( c a l e d 3 1 1 0 7 3 7 ， c 1 2 h 1 6 n a 0 8 ) 。1 h - n m r ( 6 0 0m h z ，d m s o - d 6 ) 蠡8 8 1 ( 2 h ，b r s ，2 - o h ，6 - o h ) ，6 7 5 ( 1 h ，t ，= 8 4h z ，h - 4 ) ，6 3 2 ( 2 h ，d ，= 8 4h z ，h - 3 ，h 一5 ) ，5 1 7 ( 1 h ，b r s ，g l u o h ) ， 5 0 4 ( 1 h ，b r s ，g l u - o h ) ，4 8 7 ( 1 h ，d ，= 3 6h z ，h - 1 ) ，4 4 6 ( 1 h ，b r s ，g l u - o 哪，4 0 0 ( 1 h ，d d d ，j = 9 6 ，4 8 ，2 4i - i z ，h - 5 ) ，3 6 3 ( 1 h ，b r d ，= 1 1 4h z ，h - 6 ) ，3 6 2 ( 1 h ，m ， h 一3 ) ，3 5 6 ( 1 h ，b r d ，= 1 1 4h z ，h - 6 7 ) ，3 4 0 ( 1 h ，d d ，- ，= 9 6 ，3 6h z ，h 一2 ) ，3 2 4 ( 1 h ， b r t ，= 9 6h z ，h - 4 ) 。u c - n m r ( 1 5 0m h z ，d m s o - d 6 ) 挽1 3 4 2 ( c 一1 ) ，1 5 0 9 ( c - 2 ) ， 1 0 7 3 ( c - 3 ) ，1 2 4 8 ( c 一4 ) ，1 0 7 3 ( c 5 ) ，1 5 0 9 ( c - 6 ) ，1 0 4 0 ( c 1 ) ，7 1 9 ( c - 2 7 ) ，7 3 3 ( c - 3 ) ，6 9 5 ( c - 4 ) ，7 3 9 ( c - 5 ) ，6 0 4 ( c 一6 ) 。 化合物2 ：p a e o n i f l o r i n 白色粉末，与香草醛硫酸试剂反应显紫色，紫外2 5 4 n m 下观察有暗斑点。 根据1 h n m r 、1 3 c n m r 谱数据特点推测为芍药苷类化合物。1 h n m r ( 3 0 0m h z ， d m s o - , 6 ) 投8 0 1 ( 2 h ，d ，j = 7 8h z ，h - 2 ”，h - 6 ”) ，7 7 0 ( 1 h ，t ，j = 7 8h z ，h - 4 ”) ， 7 5 9 ( 2 h ，t ，j = 7 8h z ，h - 3 ”，h 5 ”) ，7 0 1 ( 1 h ，s ，o h ) ，5 3 6 ( 1 h ，s ，h 一9 ) ，5 1 0 ( 1 h ， d ，= 4 8h z ，o h ) ，4 9 9 ( 1 h ，d ，= 4 5h z ，o h ) ，4 9 5 ( 1 h ，d ，= 4 8h z ，o 岣，4 7 0 ( 1 h ，d ，= 1 2 3h z ，h - 8 ) ，4 6 4 ( 1 h ，d ，j = 1 2 3h z ，h 一8 ) ，4 4 2 ( 1 h ，t ，o h ) ，4 4 2 ( i h ， d ，j = 7 8h z ，h - 1 ) ，3 6 8 ( 1 h ，d d ，j = 1 1 2 ，6 0h z ，h - 6 ) ，3 3 8 ( 1 h ，m ，h - 6 ) ， 3 o o - 3 1 7 ( 4 h ，m ，h - 2 - h 5 ) ，2 4 8 ( 1 h ，d ，j = 6 9h z ，h 一5 ) ，2 4 3 ( 1 h ，d d ，j = 1 2 6 ， 6 9h z ，h 7 ) ，2 0 8 ( 1 h ，d ，= 1 2 0h z ，h 一3 ) ，1 8 4 ( 1 h ，d ，j = 1 2 0h z ，h 一3 ) ，1 6 8 ( 1 h ， d ，j = 1 2 6h z ，h - 7 ) ，1 2 8 ( 3 h ，s ，h 1 0 ) 。”c n m r ( 7 5m i - i z ，d m s o - d 6 ) 文8 7 6 ( c 一1 ) ，8 5 0 ( c 一2 ) ，4 3 7 ( c 一3 ) ，1 0 4 8 ( c 一4 ) ，4 2 4 ( c - 5 ) ，7 0 0 ( c - 6 ) ，2 2 1 ( c - 7 ) ， 6 0 5 ( c 一8 ) ，1 0 0 1 ( c 一9 ) ，1 9 2 ( c - 1 0 ) ，9 8 7 ( c 一1 ) ，7 3 5 ( c 一2 ) ，7 7 o ( c - 3 ) ，7 0 3 ( c 一4 7 ) ，7 7 o ( c 一5 ) ，6 1 3 ( c - 6 ) ，1 2 9 7 ( c 1 ”) ，1 2 9 3 ( c - 2 ”，c 6 ”) ，1 2 8 6 ( c - 3 ”，c 一5 ”) ， 1 3 3 5 ( c 4 ”) ，1 6 5 8 ( c 7 ”) 。以上数据与文献报道【5 】一致，由此确定2 为芍药苷。 1 4 化合物3 ：禾m e t h y l p a e o n i n o r i n 白色粉末，与香草醛硫酸试剂反应显紫色，紫外2 5 4 n m 下观察有暗斑点。 根据1 h n m r 、1 3 c n m r 谱数据特点推测为芍药苷类化合物。1 h n m r ( 3 0 0m h z ， o m s o 瓿) 捩7 9 8 ( 2 h ，d ，j = 7 3h z ，h 2 ”，h - 6 ”) ，7 6 8 ( 1 i - i ，t ，= 7 3h z ，h 一4 ”) ， 7 5 5 ( 2 h ，t ，= 7 3h z ，h - 3 ”，h - 5 ”) ，5 4 2 ( 1 r i ，s ，h 9 ) ，5 0 9 ( 1 h ，d ，- ，= 4 8h z ，0 i - i ) ， 4 9 3 ( 2 r l ，0 r 1 ) ，4 6 8 ( a n ，也j = 1 2 1h z ，h - 8 ) ，4 6 2 ( 1 r i ，d ，- ，= 1 2 1h z ，h - 8 ) ，4 4 0 o i l ，d j = 7 3h z ，h - 1 ) ，4 3 8 ( a l l ，t ，0 i - r ) ，3 6 6 ( a l l ，d d ，= 1 0 6 ，5 9h z ，h - 6 ) ，3 3 9 ( a n ，m ，h - 6 ) ，3 2 7 ( 3 h ，s ，o m e ) ，2 9 7 - 3 1 0 ( a n ，n l ，h 一2 h - 5 ) ，2 6 5 ( a n ，d ，= 6 0 h z ，h 5 ) ，2 4 10 i - i ，d d ，= 1 1 4 ，6 0h z ，h - 7 ) ，2 0 6o i - i ，d ，= 1 2 5h z ，h - 3 ) ，1 8 2 ( 1 1 1 ，d ，j = 1 1 4h z ，h - 7 ) ，1 8 1 ( a n ，d ，j = 1 2 5h z ，h - 3 ) ，1 2 8 ( 3 i - i ，s ，h - 1 0 ) 。 u c - n m r ( 7 5m h z ，d m s o - a 6 ) 最8 7 4 ( c - 1 ) ，8 5 2 ( c 一2 ) ，4 1 0 ( c - 3 ) ，1 0 7 6 ( c - 4 ) ， 4 0 6 ( c 5 ) ，6 9 8 ( c - 6 ) ，2 2 0 ( c - 7 ) ，6 0 4 ( c 8 ) ，1 0 0 5 ( c - 9 ) ，1 9 1 ( c - a o ) ，5 0 6 ( 3 h ， o m e ) ，9 8 7 ( c - 1 ) ，7 3 5 ( c - 2 ) ，7 7 o ( c 3 ) ，7 0 3 ( c - 4 7 ) ，7 7 o ( c 5 ) ，6 1 2 ( c - 6 ) ， 1 2 9 7 ( c 一1 ”) ，1 2 9 3 ( c - 2 ”，c 6 ”) ，1 2 8 9 ( c - 3 ”，c 一5 ”) ，1 3 3 5 ( c - 4 ”) ，1 6 5 8 ( c 一7 ”) 。 以上数据与文献报道【6 l 一致，由此确定3 为4 甲氧基芍药苷。 化合物4 ：a l b i f l o r i n 白色粉末，与香草醛硫酸试剂反应显橙黄色，紫外2 5 4 n m 下观察有暗斑点。 根据1 h n m r 、1 3 c n m r 谱数据特点推测为芍药苷类化合物。1 h n m r ( 3 0 0m h z ， d m s o - a 6 ) 菠8 0 1 ( 2 i - x ，d ，j = 7 5h z ，h - 2 ”，h - 6 ”) ，7 6 7 ( a n ，t ，j = 7 8h z ，h - 4 ”) ， 7 5 4 ( 2 h ，t ，= 7 8h z ，h 一3 ”，h - 5 ”) ，5 1 0 ( 2 h ，b r s ，0 i - i ) ，4 9 7 ( 2 i - i ，b r s ，0 i - 1 ) ，4 6 4 ( 1 h ， d ，= 1 2 6h z ，h - 8 ) ，4 5 5 ( n - i ，d ，j = 1 2 6h z ，h - 8 ) ，4 4 5o i - i ，b r s ，0 i - i ) ，4 4 1 ( a l l ，d ， ，= 7 5h z ，h 1 ) ，4 1 2 ( 1 i - i ，t ，= 5 1h z ，h 一4 ) ，3 6 5 ( 1 1 1 ，d ，= 1 1 7h z ，h - 6 ) ，3 3 8 o i - i ，m ，h - 6 ) ，2 9 7 3 1 1 ( 4 h ，m ，h 一2 h 5 ) ，2 7 7o i - i ，d d ，j = 7 0 ，4 8h z ，h 一5 ) ，2 6 8 ( a l l ，d d ，= 1 0 6 ，7 7h z ，h - 7 ) ，2 3 0 ( 1 r i ，d d ，o r = 1 5 4 ，6 6h z ，h - 3 ) ，1 9 1 ( 1 i - i ，d ，= 1 0 6h z ，h - 7 ) ，1 8 5 ( a i - i ，d ，= 1 5 4h z ，h 一3 ) ，1 3 9 ( 3 h ，s ，h l o ) 。d c n m r ( 7 5m h z ， d m s o - 如) & 9 1 1 ( c 一1 ) ，8 5 1 ( c 一2 ) ，4 0 6 ( c - 3 ) ，6 6 1 ( c - 4 ) ，3 9 9 ( c - 5 ) ，5 4 7 ( c 6 ) ， 2 7 o ( c - 7 ) ，6 0 8 ( c - 8 ) ，1 7 4 9 ( c 一9 ) ，2 0 1 ( c 一1 0 ) ，9 8 6 ( c 1 ) ，7 3 4 ( c - 2 ) ，7 7 1 ( c 一37 ) ， 7 0 2 ( c - 4 ) ，7 6 9 ( c - 5 ) ，6 1 2 ( c - 6 ) ，1 2 9 7 ( c 1 ”) ，1 2 9 4 ( c - 2 ”，c 一6 ”) ，1 2 8 8 ( c 一3 ”， 化合物5 ：p a e o n i d a n i n 白色粉末，与香草醛硫酸试剂反应显紫色，紫外2 5 4 n m 下观察有暗斑点。 根据1 h n m r 、1 3 c n m r 谱数据特点推测为芍药苷类化合物。1 h n m r ( 3 0 0m h z ， d m s o - 鳓挽7 9 6 ( 2 h ，d ，j = 8 4h z ，h 一2 ”，h - 6 ”) ，7 6 5 ( 1 h ，t ，j = 8 4h z ，h 一4 ”) ， 7 5 5 ( 2 h ，t ，= 8 4i - i z ，h 一3 ”，h - 5 ”) ，5 1 8 ( 1 h ，d ，= 4 8h z ，o h ) ，5 0 2 ( 1 h ，s ，h - 9 ) ， 5 0 2 ( 1 h ，d ，o 哪，4 9 7 ( 1 h ，d ，= 4 8h z ，o 哪，4 7 0 ( 1 h ，d ，= 1 2 1h z ，h - 8 ) ，4 6 6 ( 1 h ，d ，j = 1 2 1h z ，h 一8 ) ，4 4 4 ( 1 h ，d j = 7 3h z ，h 一1 ) ，4 4 0 ( 1 h ，t ，j = 5 9h z ， 0 田，3 6 5 ( 1 h ，d d ，= 1 1 0 ，6 6h z ，h - 6 ) ，3 3 9 ( 1 h ，m ，h 6 ) ，3 2 0 ( 3 h ，s ，o m e ) ， 2 9 6 - 3 1 6 ( 4 h ，m ，h 2 - h - 5 ) ，2 8 8 ( 1 h ，d ，- ，= 1 8 0h z ，h 一3 ) ，2 8 6 ( 1 h ，d d ，= 1 0 6 ， 7 0h z ，h - 7 ) ，2 7 7 ( 1 h ，d ，= 7 0h z ，h 5 ) ，2 3 5 ( 1 h ，d ，= 1 8 0h z ，h 一3 ) ，2 1 0