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文档简介

实验四外周血单个核细胞的分离,1,外周血单个核细胞的分离（Ficoll密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞）,原理：外周血各种血细胞的密度不尽相同，利用淋巴细胞分离液（Ficoll）作密度梯度离心，使一定比重的细胞群按相应密度梯度分布，从而将各种血细胞加以分离。,2,血液成分红细胞T细胞血液血小板淋巴细胞B细胞白细胞单个核细胞NK细胞（PBMC）单核细胞多形核细胞嗜酸性粒细胞嗜碱性粒细胞中性粒细胞,3,血液中各个成分密度红细胞1.093g/ml多形核细胞1.092g/ml单个核细胞1.076g/ml（1.0751.090）血小板1.0301.035g/mlFicoll液1.0770.001聚蔗糖+泛影葡胺,4,方法：1、抽取外周血1ml+等量Hanks液混匀放入A管,5,2、取Ficoll液2ml加入B管,6,3、吸管吸取A管内血沿倾斜的B管管壁缓慢加入,7,4、水平离心，室温，2000rpm，20min,8,5、吸取PBMC层移入另一试管,9,6、加足量稀释液充分洗涤，弃上清,10,注意：1、在Ficoll液上加稀释外周血时，应缓慢加，两者之间要形成一个清晰的界面2、水平离心，室温，缓升缓降3、吸取单个核细胞层时，应避免吸出过多的
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