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文档简介

专题二微生物的培养与应用,课题2土壤中分解尿素细菌的分离与计数,1,课题背景,尿素是一种重要的农业氮肥,尿素并不能直接被农作物吸收。只有当土壤中的细菌将之后,才能被植物利用。土壤中的细菌之所以能分解尿素,是因为他们能合成。,2,研究思路,1、选择培养基:在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称作。2、筛选尿素分解菌的选择性培养基以为唯一氮源。,(一)筛选菌株,3,(二)统计菌落数目,1、测定微生物数量的常用方法有和。,2、稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活细菌。为了保证结果准确,一般设置个平板,选择菌落数在的平板进行计数,并取平均值。统计的菌落数往往比活菌的实际数目。,4,(三)设置对照,设置对照的主要目的是排除实验组中对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。,5,实验设计,1、土壤取样:土壤中的微生物,大约70%90%是细菌,细菌适宜在酸碱度接近的潮湿土壤中生长,绝大多数细菌生活在距地表的土壤层。2、样品的稀释:测定土壤中细菌的数量,一般选用。测定放线菌的数量,一般选用。测定真菌的数量,一般选用。,6,3、微生物的培养与观察,不同种类的微生物,往往需要不同的培养温度和培养时间。细菌。放线菌。霉菌。,每隔统计一次菌落数目,选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这样可以防止因培养时间不足而导致一楼菌落的数目。一般来说,在一定的培养条件下(相同的培养基、温度及培养时间),同种微生物表现出稳定的。这些特征包括。,7,菌落数量的估算:计算每克样品中的菌落数=。其中,C代表,V代表,M代表。,操作提示1、无菌提示:(1)取土样用的小铁铲和盛土样的信封在使用前都需要灭菌。(2)应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中,塞好棉塞。(3)在稀释土壤的过程中,每一步都在火焰旁操作。2、做好标记3、制定计划,8,课题延伸,原理:尿素分解菌合成的可以将尿素分解成,会使培养基的碱性增强。因此,可通过检测培养基变化

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