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文档简介
第2章组成细胞的分子,第1节细胞中的元素和化合物,(第2课时),1,检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质,实验,2,实验:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质实验原理:某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。如:1.还原糖+斐林试剂砖红色沉淀2.脂肪+苏丹或()染液橘黄色(红色)3.蛋白质+双缩脲试剂紫色4.淀粉+碘蓝色,3,1、实验原理:,还原性糖+斐林试剂砖红色沉淀还原性糖:葡萄糖、麦芽糖、果糖非还原性糖:蔗糖、淀粉等,实验一:还原性糖的鉴定,4,2、选材:,苹果和梨是比较理想的实验材料。,选择白色或近于白色的组织,5,斐林试剂:,A液、0.1g/mlNaOHB液、0.05g/mlCuSO4,使用方法:A、B等量混合均匀使用(现配现用),无色蓝色,6,7,4、实验步骤:,取2ml苹果的组织样液。,取1ml新配制好的斐林试剂。,8,取一只试管,将量好的苹果组织样液倒入试管中,然后将量好的斐林试剂倒入试管中,震荡试管使溶液混合均匀,我们可以看到此时溶液呈蓝色。,水浴加热(55-60C),溶液的颜色(蓝色-棕色-砖红色。,9,10,5、实验现象:,溶液的颜色从蓝色变成砖红色。,6、结论:,苹果中含有还原性的糖。,()水浴加热的温度应为5065度(2)斐林试剂是甲、乙两液等量混匀后立即使用,即现配现用(原因:斐林试剂不稳定,易变性)。(3)材料选择的要求:还原性糖含量多,颜色淡,方便易取。,7、注意事项:,11,实验二:脂肪的鉴定,1、实验原理:,脂肪+苏丹橘黄色脂肪+苏丹红色,取少量脂肪样液,加入苏丹,震荡,可看到溶液呈了橘黄色,本实验我们用苏丹做染液。,12,2、材料用具:,芝麻,脂肪含量丰富,但种子颗粒太小,不利于切片制作。玉米,脂肪含量较少,种子颗粒也较小,因此也不适合做实验材料。,花生是比较理想的实验材料我们选用花生,13,50%的酒精、苏丹、清水,14,(2)脂肪的鉴定取材:花生种子浸泡34h,将子叶削成薄片观察:在低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒然后用高倍镜观察结论:脂肪能被苏丹染液染成橘黄色,取最理想的薄片在薄片上滴23滴苏丹染色23min去浮色(体积分数为50%的酒精)制成临时装片,制片,15,4、实验现象:,5、结论:,显微镜下观察到橘黄色的颗粒。,花生种子细胞中含有脂肪。,(1)检测脂肪时,切片要薄(如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰,有的地方模糊);(2)用苏丹染色时间不宜过长;(3)需用显微镜观察.(4)酒精的作用是:洗去浮色(5)材料选择:脂肪含量多,颜色淡,方便易取,6、注意事项:,16,实验三:蛋白质的鉴定,1、实验原理:,蛋白质+双缩脲试剂紫色络合物,2、材料用具:,豆浆、蛋清、牛奶都是很好的实验材料。,注意:蛋清稀释,如果稀释不够,反应后的产物会粘固在试管内壁上,使反应不容易彻底。,17,双缩脲试剂:,A液、0.1g/mlNaOHB液、0.01g/mlCuSO4,使用方法:先加A液1ml,再滴加B液3-4滴,18,(3)蛋白质的鉴定,19,4、实验现象:,蛋清液呈紫色。,5、结论:,蛋清液中含有蛋白质。,(1)双缩脲试剂是先加入A液1ml,摇匀,再加入B液4滴,摇匀(原因:主要利用碱性环境).(2)用鸡蛋清检验蛋白质时,要将鸡蛋清高倍稀释(10倍以上)。(否则反应不彻底,与双缩脲试剂反应后凝结在试管壁上)(3)材料选择:蛋白质含量多,颜色淡,方便易取,6、注意事项:,20,(4)淀粉的检测与观察,21,斐林试剂,苏丹(或苏丹),碘液,双缩脲试剂,砖红色沉淀,橘黄色(或红色),蓝色,紫色,甲、乙液等量混合均匀,水浴加热,显微镜观察,先加A液1ml,摇匀,后B液4滴,斐林试剂,双缩脲试剂,甲0.
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