真菌学概述课件PPT课件.ppt

1,真菌学,.,2,3,真菌（fungus）：是一类具有细胞壁和典型细胞核结构，缺乏叶绿素，不分根、茎、叶，能进行无性或有性繁殖的真核细胞型微生物,真菌概念,4,包括：单细胞真菌多细胞真菌双相型真菌（dimorphicfungus）多数腐生，少数寄生或共生。种类繁多：10万余种，自成一界。,5,与人类的关系密切,1、有利：食用真菌医药工业正常菌群,蘑菇,松茸,银耳,6,具有药用的真菌种类,冬虫夏草,灵芝,猪苓,7,青霉素、灰黄曲霉、头孢霉素等,8,2、少数有害,霉变感染、中毒和超敏反应。肿瘤发生,9,真菌的特点,1、细胞核高级分化，有核膜核仁，胞质内有完整细胞器，能进行有丝分裂。,10,2、细胞壁由几丁质和纤维素组成，不含有肽聚糖。故常用的青霉素和头孢菌素对真菌没有作用。3、胞膜中含固醇对两性霉素B、制霉菌素（与固醇结合）、酮康唑（抑制固醇合成）敏感。,真菌的特点,11,12,第一节、生物学性状,形态与结构两类：(一)单细胞真菌(二)多细胞真菌,13,双相性真菌,肖克孢子丝菌、马尔菲尼青霉等在营养、温度、理化因素等不同环境因素下发生单细胞与多细胞的可逆转化。,14,一.单细胞真菌,形态：圆形或卵圆形，如酵母型和类酵母型真菌。1.酵母型真菌菌丝：无繁殖方式：从母细胞芽生菌落：与细菌相似2.类酵母型真菌菌丝：假菌丝(pseudohypha)假菌丝：长的芽体可伸进培养基内繁殖方式：从母细胞芽生菌落：与酵母型相似，由假菌丝联结成假菌丝体，称为类酵母型菌落,酵母菌的出芽繁殖,假丝酵母菌（白色念珠菌）,15,二.多细胞真菌,由菌丝和孢子两大部分组成1.菌丝(hypha)2.孢子(spore),16,多细胞真菌,17,1.菌丝(hypha),由孢子在合适的条件下发芽形成牙管伸长呈丝状分枝交织成团称菌丝体（1）按结构分为：有隔菌丝（septatehypha），分隔成多个细胞。(多数致病真菌属之）无隔菌丝（nonseptatehypha），整条菌丝就是一个多核单细胞。,18,（2）按功能分：营养菌丝体（vegetativemycelium）：吸取营养气生菌丝体（aerialmycelium）：向空中生长生殖菌丝体（reproductivemycelium）：产生孢子,19,20,（3）按形状分球拍状菌丝菌丝在隔膜部位一端膨大呈球拍状，排列规整。破梳状菌丝菌丝一侧有不规则的梳齿状凸起，梳齿参差不齐如破梳状。螺旋状菌丝菌丝呈弹簧状，有规律性旋转状生长。结节状菌丝稍膨大的侧枝细胞、菌丝端细胞或中间性细胞弯曲成团，互缠成结。鹿角状菌丝菌丝顶端呈不规则分枝，状如鹿角。,21,22,2.孢子(spore),孢子是生殖结构，由生殖菌丝产生。是鉴定和分类的依据。据繁殖方式可分：(1)无性孢子由菌丝上的细胞分化或出芽形成，不经过两性细胞的配合。病原真菌多有无性孢子。(2)有性孢子由同一菌体或不同菌体上的2个细胞配合(质配和核配)后产生：绝大多数为非致病性真菌所具有。,23,无性孢子据其形态可分为：,1)叶状孢子(thallospore)由菌丝内细胞直接形成芽生孢子(blastospore)通过发芽方式形成圆形或卵形的细胞关节孢子(arthrospore)由菌丝分化成长方形的几个节段，胞壁稍厚厚膜孢子(chlamydospore)由菌丝内细胞浆浓缩和细胞壁增厚而成，是一种休眠细胞，条件适宜可再发芽,24,25,2)分生孢子(conidia)由生殖菌丝末端细胞分裂或收缩形成，也可在菌丝侧面出芽形成。大分生孢子(macroconidia)体积较大，多细胞性。孢子呈纺锤形，棍棒状等。小分生孢子(microconidia)体积小，单细胞性，外壁薄，球形、卵形、梨形等。3)孢子囊孢子(sporangiospore)由菌丝末端形成一种囊状结构（孢子囊），内有许多孢囊孢子。,26,孢子囊孢子,27,第二节真菌的繁殖与培养,真菌的繁殖方式两个异性细胞融合形成新个体:有性繁殖无性繁殖无性繁殖(1)芽生:酵母菌及酵母样真菌(2)裂殖:以二分裂法进行繁殖(3)菌丝断裂:菌丝断裂成许多小片段(4)隔殖:在分生孢子梗某一段落形成一隔膜，随之原生质浓缩而形成一个新的孢子。孢子可再独立繁殖。,28,真菌的培养特性,真菌的营养要求不高常用沙保弱培养基(Sabouraudsmedium)：蛋白胨、葡萄糖、氯化钠和琼脂。温度：2228，但某些深部感染的真菌为37。pH：4.06.0生长速度:较慢乳酸酚棉兰染色,29,在沙保弱培养基上，3种类型的菌落及特点：(1)酵母型菌落(yeasttypecolony)：菌落柔软、光滑、湿润。镜下可见单细胞真菌菌落，无菌丝，类似普通细菌菌落，无假菌丝。隐球菌菌落(2)类酵母型菌落（酵母样菌落）(yeast-liketypecolony)：和酵母型菌落相似，但有假菌丝伸入培养基中。白色念珠菌菌落(3)丝状型菌落(filamentoustypecolony)：多细胞真菌菌落，表面呈絮状、粉状、绒毛状(菌落较大),30,类酵母型菌落,酵母型菌落,31,丝状菌落（曲霉菌）,丝状菌落（青霉菌）,32,抵抗力与变异（1）抗干燥、紫外线、日光和消毒剂（2）常用的抗生素及磺胺药不敏感（3）对热、2.5%碘酒、10%酒精、2%结晶紫、制霉菌素、酮康唑、5-氟胞嘧啶敏感容易变异【形态、菌落性状、色素以及毒力】,33,真菌的耐药机制,对咪唑类药物的耐药性：细胞膜上出现药物抑制蛋白，阻止药物进入细胞外排机制将药物排出细胞外通过基因改变结合靶位分子结构，使药物不能结合。,34,2.对两性霉素B的耐药性：两性霉素可与细胞质膜上的麦角固醇结合，形成小孔改变细胞膜的通透性；真菌用其他固醇替代麦角固醇，使其丧失结合的靶位。,35,3.对氟胞嘧啶的耐药性：通过改变胞嘧啶脱氢酶活性，抑制了氟胞嘧啶进入细胞脱氨基形成活性的5-氟尿嘧啶。,36,真菌的致病性和免疫,37,真菌致病机制,白假丝酵母具有粘附人体细胞的能力，其细胞壁上的C3b受体有抗吞噬的功能；新生隐球菌的荚膜有抗吞噬的功能；烟曲霉的毒素可直接造成机体损害。,38,1.致病性真菌感染：外源性真菌感染，如皮肤癣真菌病2.条件致病性真菌感染：内源性真菌感染,机体免疫力低下如白假丝酵母菌、曲霉、毛霉等引起,一、真菌的致病性,原发性感染：球孢子菌(Coccidiodes)、皮炎芽生菌(Blastomyoesdermatitidis)、组织胞浆菌(Histoplasma)等继发性感染：机体防御机能显著低下时。,39,3、真菌性超敏反应由吸入曲霉菌、青霉菌、镰刀菌的菌丝或孢子。引起呼吸道过敏性反应（哮喘、过敏性鼻炎、荨麻疹）、接触性皮炎,40,4.真菌性中毒症：有些产毒真菌污染粮食油料作物，食入后引起急性或慢性中毒，称为真菌性中毒症。与细菌性及病毒性感染引起的中毒不同：（1）有明显的地区性和季节性（2）不传染不流行（3）可引起肝、肾、神经、造血器官等病变。,41,如霉变甘蔗节菱孢菌含有神经毒素3-硝基丙酸，脑为主要靶器官（食后2-8h出现抽搐、昏迷、死亡率20%，目前尚无特效解毒药）。,42,5、真菌毒素与肿瘤研究最多的是黄曲霉毒素（aflatoxin）B1肝癌。赭曲霉的黄褐毒素肝癌。镰刀菌产生的T-2毒素可使实验大鼠胃癌、胰腺癌。,43,二、免疫性,1、非特异性免疫：皮肤黏膜发挥重要作用。（儿童易患头癣，成人易患手足癣）特殊的抗菌物质：促癣吞噬肽提高吞噬杀伤活性。转铁蛋白由淋巴细胞合成，分布于皮肤角质层，抑制真菌。,44,2、特异性免疫免疫力不强，不能形成稳固的病后免疫1.抗体的作用2.细胞免疫及超敏反应,45,46,真菌感染的实验室诊断和防治,显微镜检查分离培养和鉴定血清学检查分子生物学检查,47,一、标本的采集,采取合适的标本：潜部采取鳞屑、毛发和甲屑；深部采集分泌物、体液和排泄物送检要及时，冷冻保存标本采集注意：量足；新鲜；尿、便用氯石灰处理；无菌操作,48,二、病原菌检查和鉴定,（1）直接镜检浅部感染的标本：制备10%KOH标本片，镜下观察菌丝、孢子。深部感染标本：制备染色标本片（隐球菌负染），镜下观察菌体特征。,49,（2）分离培养：用于直接镜检不能确定真菌感染时，或需确定感染真菌的种类时标本经70%乙醇处理接种沙氏培养基观察菌落特征载玻片小培养观察镜下菌丝孢子特征。必要时做动物感染实验。,50,真菌感染的防治无特效疗法，以预防为主浅部感染：注意清洁卫生，避免接触，可用达克宁霜剂、斯皮仁诺、克霉唑等。深部真菌病：去除诱因，提高抵抗力，两性霉素B，制霉菌素和酮康唑。,51,主要病原性真菌,52,主要病原性真菌,浅部感染真菌:皮肤癣真菌；皮下组织感染性真菌深部感染真菌:系统性内脏感染真菌,53,概述:该类真菌具有嗜角质蛋白的特性，侵犯部位仅限于角化的表皮、毛发、指（趾）甲，以手足癣为最多见。,一、皮肤癣真菌,54,分类：毛癣菌（13）：石膏样毛癣菌、红色毛癣菌；感染皮肤、毛发。表皮癣菌（1）：只有絮状表皮癣菌；感染皮肤和甲板小孢子癣菌（20）：奥杜安小孢子癣菌；感染皮肤、毛发和甲板,55,56,脚癣,57,灰指甲,58,59,二、角层癣菌,属多细胞真菌，侵犯皮肤或毛干浅表层。引起皮肤花斑癣（汗斑），影响外观而不影响健康，与脂溢性皮炎有关。,糠秕马拉色菌,60,三、皮下组织感染性真菌,主要有:着色真菌孢子丝菌,61,（一）孢子丝菌属孢子丝菌属于腐生性真菌，自然界分布广泛，从土壤尘埃和植物表面可分离出该菌常因外伤接触带菌的花草、荆棘等引起感染。感染主要病原菌为申克氏孢子丝菌,本菌为双相型真菌,62,致病性人类感染本菌主要是通过有创伤的皮肤接触了染菌土壤或植物，孢子丝菌侵入皮下组织、淋巴管，形成亚急性或慢性肉芽肿，使淋巴管出现链状硬结，称为孢子丝菌性下疳。亦可经口或呼吸道侵入，沿血行扩散至其他器官。任何年龄均可发病，世界各地均有病例报道。我国大部分地区皆已发现，以东北地区为多见,63,（二）着色真菌着色真菌一般由外伤侵入人体，感染多发于颜面、下肢、臀部等暴露部位，潜伏期约一个月，长者数月乃至一年，甚至几十年。开始患处为丘疹、结节、结节融合成疣状或菜花状。病损皮肤呈境界鲜明的暗红色或黑色区，故称着色真菌病。亦侵犯深部组织，呈慢性感染过程。在机体全身免疫功能低下时可侵犯中枢神经系统，发生脑内感染（卡氏枝孢霉）,64,凡是侵犯表皮及其附属器以外的组织和器官的病原性真菌或条件致病性真菌，均可称为深部真菌。深部真菌感染的危害比浅部真菌感染更为严重，常可引起重症、致死性疾病。近年来，由于抗生素、皮质类固醇激素、免疫抑制剂及抗肿瘤药物的广泛应用，深部真菌病发病率日益增加。,第二节深部感染真菌,65,属于隐球菌属。隐球菌属种类繁多，在自然界分布广泛，鸽粪中大量存在。人因吸入鸽粪污染的空气而感染，特别是免疫功能低下者主要引起肺脑的急性或亚急性或慢性感染外源性感染为主,新生隐球菌,66,生物学性状:1.形态染色:印度墨汁负染：圆形或卵圆形透亮菌体，外包有厚透明荚膜，夹膜比菌体可大13倍，常见出芽;,新生隐球菌,67,68,2.培养:致病性菌株于25度和37度均能生长，酵母型菌落;可分解尿素，与白念鉴别。3.分布:广泛，人口腔,体表及肠道的正常菌群;鸽粪中尤为多见;,新型隐球菌,69,致病性:是隐球菌属唯一致病的真菌,新型隐球菌,新型隐球菌孢子,呼吸道,肺炎;慢性脑膜炎;皮肤、淋巴结、骨的慢性炎症,70,微生物学检查：1.直接检查:2.抗原检测:ELISA法测脑脊液、血清中的荚膜多糖抗原;,新型隐球菌,脑脊液,离心,沉淀,墨汁负染,镜检,痰、脓,71,3.分离鉴定:酚氧化酶试验尿素酶试验:阳性糖同化及发酵试验:不发酵糖同化葡萄糖半乳糖蔗糖不同化硝酸盐,72,防治:控制鸽子的数量；提高机体免疫力;两性霉素B,5-Fu,大蒜素;,新型隐球菌,73,假丝酵母菌俗称念珠菌，本属中有300个种，其中7个种有致病性。白色念珠菌亦称白色假丝酵母菌，为该属中最常见的致病菌，可引起皮肤、粘膜及内脏的念珠菌病但近年来，白色假丝酵母菌感染逐渐减少，而其他假丝酵母菌逐渐增多，这种流行病学转换现象应引起重视,白假丝酵母菌,74,白假丝酵母菌,生物学性状：1.形态染色:G+，圆形或卵圆形，有假菌丝；2.培养:以出芽方式繁殖;类酵母型菌落;假菌丝；在玉米培养基上常在假菌丝中间或其末端形成厚膜孢子，为本菌特征之一假菌丝和厚膜孢子有助于鉴定白念。,75,76,77,致病性：1.皮肤粘膜感染:皮肤感染多发于皮肤皱褶处，如腋窝、腹股沟等部位。粘膜感染婴儿：鹅口疮妇女：阴道炎,白假丝酵母菌,78,79,致病性：2.内脏感染肺炎、支气管炎;食管炎、肠炎;膀胱炎、肾盂肾炎;败血症;3.中枢神经系统感染脑膜炎、脑膜脑炎；,白假丝酵母菌,80,微生物学检查直接检查直接镜检:革兰染色阳性圆形/卵圆形芽着色不均分离鉴定:芽管形成试验厚壁孢子形成试验动物试验克玛嘉显色培养基上:绿色菌落（可与其它的假丝酵母菌相区别）,81,82,防治:提高机体免疫力;1%龙胆紫,克霉唑,制霉菌素,二性霉素B;,白色念珠菌,83,二曲霉曲霉在自然界广泛分布，生长迅速，种类很多，在沙氏培养基上形成丝状菌落。总数可达300种。其中少数属于条件致病菌，以烟曲霉最为常见。最常见的疾病如下：,84,1.肺曲霉菌病真菌球型肺曲霉菌病是在器官早已有空腔存在(如结核空洞，副鼻窦，扩张的支气管)的基础上发生。在那里曲霉菌不侵犯组织，不播散肺炎型曲霉菌病曲霉菌在肺内播散，引起坏死性肺炎或咯血，并可继发播散到其他器官。本病常见于免疫缺损或免疫受抑制的患者；过敏性支气管肺曲霉菌病是一种超敏反应疾病,85,2.全身性曲霉菌病原发病灶主要在肺，少见于消化道，多数是由败血症引起的全身性感染。本病多发生在某