（运动人体科学专业论文）山茯方和游泳运动对高脂饮食大鼠体重及部分血清指标的影响.pdf

扬州大学硕士论文 缩略语 a s b m i c h t c a 肝 f a s f f a h d l - - c i n s i r l d l c l e e s 指数 l p n p y t c t g t n f - q u c p w c 删r 5 一h t 符号说明表 英文全称 a t h e r o s c l e r o s i s b o d ym a s si n d e x c o m p o u n dh a w t h o r nt u c k a h o e c y c l i ca d e n o s i n em o n o p h o s p b a t e f a t t ya c i ds y n t h a s e f r e ef a t t ya c i d h i g hd e n s i t yl i p o p r o t e i nc h o l e s t e r o l i n s u l i n i n s u l i nr e s i s t a n c e l o wd e n s i t yl i p o p r o t e i nc h o l e s t e r o l l e e si n d e x l e p t i n n e u r o p e p t i d ey t o t a lc h 0 1 e s t e r o l t r i g a l l o y lg l y c e r o l t u m o rn e c r o s i sf a c t o r q u n c ou p li n gp r o t e i n w a i s tc i r c u m f e r e n c e w a i s tt oh i pr a t i o 5 h y d r o x y t r y p t a m i n e ( 注：按英文字母排序) 中文全称 动脉粥样硬化 体重指数 山茯方 环一磷酸腺苷 脂肪酸合成酶 游离脂肪酸 高密度脂蛋白胆固醇 胰岛素 胰岛素抵抗 低密度脂蛋白胆固醇 李氏指数 瘦素 神经肽y 总胆固醇 甘油三酯 肿瘤坏死因子a 艇偶联蛋白 腰围 腰臀比 5 一羟色胺 4 章海风：山茯方和游泳运动对高脂饮食大鼠体重及相关血清指标的影响! 中文摘要 目的：通过山茯方结合9 0 分钟游泳运动对高脂饮食大鼠部分血清指标及生理 指标的影响，探索山茯方及运动对高脂饮食诱导大鼠的作用。 方法：选用雄性s d 大鼠5 0 只，随机分为基础组、高脂组、药物组、运动组、 运动药物组五组。除基础组外，其它各组均饲喂高脂饲料，建造肥胖模型。运动组、 运动药物组分别进行每周6 次，每次9 0 分钟无负重游泳，持续7 周。药物组、运 动药物组每日以3 3 9 k g b w 剂量灌注山茯方药液，每周6 天，持续7 周，其余三 组按同等剂量标准灌注蒸馏水。实验结束，最后一次游泳后2 4 小时，称取体重， 腹主动脉取血，用于测定总胆固醇、甘油三脂、高密度脂蛋白胆固醇、胰岛素含量； 取完血后立即对大鼠进行解剖，称取睾丸和肾周围脂肪垫重量。 结果：根据采用s p s s l1 5 统计软件对所测数据进行统计分析显示：高脂组李 氏指数与基础组比较达到显著性差异( p 0 0 5 ) 。与高脂组比较，药物组、运动 药物组大鼠体重下降达极显著性差异( p o 0 1 ) ，运动药物组大鼠肾周、睾周脂 肪垫重量及脂肪垫总重量均与高脂组有极显著差异( p 0 0 1 ) 。与高脂组比较， 药物组血清中t c 含量下降显著( p 0 0 5 ) ，运动药物组、运动组下降极显著( p o 0 1 ) ，运动药物组t g 下降极显著( p 0 0 1 ) ，药物组、运动药物组、运动组 三组血清中h d l c 含量均显著性降低( p o 0 5 ) 。 结论：( 1 ) 高脂组l e e s 指数与基础组达显著性差异，高指饮食对s d 大鼠的肥 胖模型建造是成功的。( 2 ) 山茯方能显著降低高脂饲料喂养的肥胖模型大鼠的体重 增量，有预防体重增加的作用。( 3 ) 山茯方与9 0 分钟游泳运动协同能降低大鼠睾丸 周脂肪垫和肾周脂肪垫的重量，有减脂肪的作用。( 4 ) 山茯方能降低血清t c 、t g 水 平，上升h d l - c 水平，改善胰岛素抵抗的作用。 关键词：山茯方；大鼠；运动；肥胖 扬州大学硕士论文 a b s t r a c t 2 o b j e c t i v et oi n v e s t i g a t et h ee f f e c to fc o m p o u n dr e c i p ec h tc o m b i n e dw i t h 9 0m i n u t e ss w i m m i n ge x e r c i s eo nc o n n e c t e ds e r u mg u i d e l i n ea n dp h y s i 0 1 o g i c a lg u i d e l i n et od i e t i n d u c e dh y p e r c h 0 1 e s t e r e m i ar a t s m e t h o d5 0m a l es dr a t sw e r es e l e c t e da n dd i v i d e di n t o5g r o u p s ：c o n t r o l g r o u p ，h y p e r l i p i d i cd i e tc o n t r a s tg r o u p ( h f ) ，h y p e r l i p i d i cd i e tw i t h9 0 m i n t u e se x e r c i s eg r o u p ( h f e x ) ，h y p e r l i p i d i cd i e tw i t hc o m p o u n dr e c i p ec h t g r o u p ( h f t m ) ，h y p e r l i p i d i cd i e tw i t h9 0m i n t u e se x e r c i s ea n dc o m p o u n dr e c i p e c h tg r o u p ( h f e x t m ) a l lg r o u p sa r ef e dw i t hh y p e r l i p i d i cd i e te x c e p tc o n t r o l g r o u pt oe s t a b l i s ho b e s i t yr a t sm o d l e t h er a t so fh f e xa n dh f e x t mg r o u p s s w a mf o r9 0m i n u t e sw i t h o u tw e i g h te v e r yd a yd u r i n g7w e e k s ，6d a y s e v e r y w e e k t h er a t so fh f f r ma n dh f e x t mg r o u p sa r ef e dw i t hc o m p o u n dr e c i p ec h t e v e r yd a yd u r i n g7w e e k s ，6d a y se v e r yw e e ka ss t a n d a r d3 3 9 k g b we v e r y d a y w eg e tt h el e v e l 3 3 9 k g b w c o n t r o l ，h f ，h f e xg r o u p sa r ef e dw i t h d i s t i l l a t i o nw a t e ra st h es a n l el e v e l a f t e rs e v e nw e e k so ft r e a t m e n t ，t h e r a t sw e r ek i l l e d2 4h o u r sa f t e rt h e l a s te x e r c i s e a f t e r w e i g h i n g ，w ec a nt a k eo u tt h eb l o o ds e u mo ft h er a t sa n dd e t e r m i n et h ea m o u n t o ft c ，t g ，h d l ca n di n s u li n j u s ta f t e rt a k i n go u tb l o e d ，w eb e g i n a n a t o m i z i n g ，w e i g h t i n ge p i d i d y m a lf a tp a da n dk i d n e yf a tp a d r e s u l tu s es p s s1 1 5s t a t i s t i c ss o f t w a r et oc a r r yo nt h es t a t i s t i c a l a n a l y s i s a f t e rc o m p a r i n g ，t h ea u t h e rf i n d sl e e si n d e xo ft h er a t si nh f g r o u pi n c r e a s e sr e m a r k a b l y ( p o 0 5 ) c o m p a r e dw i t ht h er a t so fc o n t r o l g r o u p n e x tr e s u l t sa r ea l lc o m p a r e dw i t hh fg r o u p t h eb o d yw e i g h to ft h e r a t si nh f t mg r o u pa n dh f e x t mg r o u pd e s c e n d ss i g n i f i c a n t l y ( p o 0 1 ) t h e e p i d i d y m a lf a tp a da n dk i d n e yf a tp a do ft h er a t si nh f e x t mg r o u pd e s c e n d s s i g n i f i c a n t l y ( p o 0 1 ) h f t mg r o u ph a v ea nd e s c e n d i n ge f f e c to nt c ( p o 0 5 ) ， 章海风：山茯方和游泳运动对高脂饮食大鼠体重及相关血清指标的影响 三 h f e xa n dh f e x t mg r o u p sh a v eo b v i o u sd e s c e n d i n ge f f e c to nt c ( p o 0 1 ) h f e x t m h a v ea no b v i o u sd e s c e n d i n ge f f e c to nt g ( p 0 8 5 为中心性肥胖。 皮褶厚度 皮褶厚度是皮下脂肪的厚度。由于身体脂肪总量的一半储存在皮下，因而皮褶 厚度的测量结果可以用来评定身体成分，推算全身脂肪重量和瘦体重。必须使用特 章海风：山茯方和游泳运动对高脂饮食大鼠体重及相关血清指标的影响 ! 制的皮褶卡钳。一般测量右侧，常测的皮褶部位为以下几处：上臂部、肩胛下部、 腹部、髂部、大腿部。此方法简单易测，但测量结果受测量者熟练程度的影响，也 受所测得皮肤坚实度的影响，也明显存在民族和地区间的差异，与饮食习惯、营养 结构和身体活动等诸多因素有关，还受年龄和性别的影响等“。因此，如果经皮褶 厚度筛查的肥胖对象再能借助仪器，如b 超、双能x 线吸收法诊断，将大大提高其实 用性和准确度“”。 计算机断层扫描( c t ) 肥胖的多种并发症与腹内或内脏的脂肪组织分布量之间有非常密切的联系。对 肥胖的研究重点已从单纯的脂肪量和肥胖程度转移到脂肪组织分布上。采用c t 方法 可直接对全身脂肪组织或皮下、腹内等区域性脂肪组织分布进行准确定量测量。特 别是近年来出现的多层螺旋c t ，可以通过其容积扫描直接实现人体某区段脂肪组织 容积的定量测量，缩短了测量时间，提高了测量的准确性1 。 2 4 肥胖的药物治疗 肥胖是一种慢性、反复发作、需要长期治疗的疾病。临床研究表明：在短时间 内大量减轻体重既不利于健康，又容易反弹。肥胖的治疗应是一个以饮食控制、适 当运动和安全的药物结合治疗的过程。目前肥胖在治疗上强调以行为、饮食治疗为 主的综合治疗，饮食控制和运动仍是最佳的减肥方法，无效的患者可采用适当的药 物辅助治疗。理想的减肥药同时能减少能量摄取，增加能量消耗，并改善与肥胖症 相关情况的危险因素。目前治疗肥胖的药物主要有作用于中枢的食欲抑制剂、作用 与胃肠道的减肥药和增加能量消耗的减肥药。 2 4 1 作用于中枢的食欲抑制剂 作用于儿茶酚胺( c a ) 途径的食欲抑制剂 其代表药物有苯丙醇胺和芬特明，其它还包括甲苯丙胺、苄甲苯丙胺、安非拉 酮、右苯丙胺等。作用机制是促进中枢释放去甲肾上腺素，阻断神经末梢对去甲肾 上腺素的再摄取，增加突触间隙的去甲肾上腺素含量，从而产生拟去甲肾上腺素的 作用。此外，中枢多巴胺的释放也有增加。由于中枢交感神经系统的兴奋，导致食 欲抑制，从而减少食物摄取，达到减肥的目的。不良反应为恶心、呕吐、腹泻、大 汗，可产生欣快感，使用这类药物时应慎与中枢神经系统兴奋药合用。此类药物多 具有明显的成瘾性，其发生可能与作用于多巴胺能神经通路有关，现在多数已经禁 止或很少使用“1 。 扬州大学硕士论文 i o 作用于5 一羟色胺途径的食欲抑制剂 代表药物有芬氟拉明、右旋芬氟拉明和氟西汀。主要作用于中枢神经系统的5 一羟色胺( 5 一h t ) 受体，刺激5 一h t 生成增加或阻断其再摄取，增加饱腹感而抑制食 欲。据美国f d a l 9 9 7 年7 月报告，长期大剂量服用含芬氟拉明的减肥复方制剂的减肥 者，有3 3 例出现肺动脉高压和心脏瓣膜损害”1 。为此，该类药物当年就被美国全面 禁止使用，并要求已服用此类药物的患者到医院接受医师检查。但有不少学者对 此持有异议，认为尚需更细致的临床观察才能做出最终评价。 5 一h t 及去甲肾上腺素再摄取抑制药 盐酸西布曲明( s i b u t r a m i n e ) 和马吲哚( m a z i n d o ) 是该类药的代表。盐酸西布曲 明最早用于治疗抑郁症，人们在其临床试验中观察到其减轻体重的作用明显强于其 抗抑郁作用，并具有双重作用：一方面通过抑制5 一h t 重摄取，使人体减少饥饿感， 有效控制热量摄入。降低碳水化合物的吸收；另一方面通过抑制去甲肾上腺素重摄 取，激活肾上腺素b3 受体，使脂肪组织能量消耗增加，脂肪代谢速率增快，以产 热的形式分解多余脂肪，促进能量消耗。这类药最常见的不良反应有头痛、口干、 厌食、失眠等，一般均可耐受，但缺点是停止服药后体重可能回升。由于盐酸西布 曲明可增加中枢神经系统的去甲肾上腺素、5 一h t 、多巴胺等神经递质释放，故不 能与抗抑郁药合用。另外，盐酸西布曲明可能导致血压上升、脉搏明显加快以及心 电图异常等，因此高血压伴有心血管疾病的患者应慎用”“。由于临床上肥胖症患 者多伴有高血压，因此该药的使用大大受限。马吲哚是三环咪唑类吲哚结构，主要 是抑制去甲肾上腺素的再摄取，同时影响5 一羟色胺的代谢，抑制5 一羟色胺的再摄取， 刺激下丘脑的饱食中枢，产生饱食感，减少进食。另外，马哼哚还可刺激b 受体， 促进肌肉、脂肪组织利用葡萄糖，降低血脂。“。但可致烦燥、口干等不良反应，且 严重心血管疾病和重度高血压患者不宜使用”1 。同时，单用这类减肥药疗效不够理 想，体脂消耗慢，部分有停药后体重回升现象。 2 4 2 作用于外周的食欲抑制剂 奥利司他( o r l i s t a t ) 是该类药物的代表，目前为止是唯一一种被批准用于减肥 的非中枢作用减肥药。可用于单纯性肥胖和肥胖伴有糖尿病、高脂血症患者减轻体 重，改善胰岛素抵抗，改善血糖控制，改善血脂异常，减低心血管的危险因素”1 。 其作用机制是在胃中和小肠中与脂肪酶的活性部位结合，抑制胰腺、胃肠道中的脂 肪酶活性，减慢胃肠道中食物脂肪水解为氨基酸及单酸甘油酯的速度，从而减少膳 章海风：山茯方和游泳运动对高脂饮食大鼠体重及相关血清指标的影响旦 食中脂肪吸收量( 约3 0 ) ，降低体内脂肪贮存从而减轻体重1 。同时，较单纯饮食 控制，它能更显著改善超重或肥胖2 型d m 患者的血糖水平，降低血中t c 、l d l - c 的水 平。本品主要不良反应多是与奥利司他使胃肠道脂肪排泄增多的作用机制直接相 关，使大便脂肪含量升高导致胃肠胀气、水样便、脂肪泻等，发生率为8 2 7 ， 但随着用药时间延长可逐渐耐受并有较好安全性。长期用药可影响脂溶性维生素 的吸收，故宜及时补充维生素。患慢性吸收不良综合征、胆汁郁积症及对本品过敏 者禁用，哺乳期妇女也不应服用。 2 4 3 正在研制开发中的新药 目前，已有1 0 0 多种减肥药正在研制中，主要包括瘦素、胰岛素、中枢神经系 统通路因子，如瘦素类似物、瘦素转运和( 或) 瘦素受体促进因子、睫状神经营养因 子( 阿素开) 、神经肽y 抑制剂、阿黑皮素和可卡因及安非他命调节转录促进因子、 黑皮质素一4 受体激动剂以及影响胰岛素代谢的因子如酪氨酸磷酸酯酶、生长抑素 激动剂( 善得定) 、脂联素等；中枢神经系统因子，如抗抑郁药丁氨苯丙酮、选择性 5 - h t 2 c 受体激动剂、抗癫痫药托吡酯和唑尼沙胺、一些多巴胺拮抗剂、大麻素受体 拈抗药利莫那班等。”；胃肠道神经通路媒介物，如胆囊收缩素( c c k ) 、胰高血糖素 和胰高血糖素样肽( g l p ) 、增加蛋白y y 3 3 6 活性药物等；增加静息代谢率的药物， 如解耦联蛋白同系物、甲状腺受体激动剂、选择性1 33 肾上腺素能受体( b3 一a r ) 激动剂等”。1 。 2 5 肥胖与运动 目前运动减肥的研究主要集中于运动对胰岛素抵抗、高胰岛素血症及肥胖基 因蛋白表达的影响，此外，运动可增加能量消耗，抑制脂肪积累，减小脂肪细胞体 积，降低体脂，保持合理的身体成分，对人体具有重塑作用，也成为人们健身娱乐 的首先“1 。其减肥的机制主要为：调节代谢功能，促进脂肪分解；提高胰岛素敏 感性；增加能量消耗，提高机体的适用性和耐受性等。 2 4 1 可提高机体脂肪的供能比例，改善脂质代谢，抑制脂肪酸的合成 运动能改变脂肪代谢酶活性，促进脂肪分解，抑制脂肪合成”“。脂肪酸、t g 的合成与分解受多种酶的控制，首先取决于t g 脂肪酶的活性。运动可以加强儿茶酚 胺的效应，提高脂肪细胞内c a m p 的水平，从而激活t g 脂肪酶的活性，促进脂肪分解。 同时，运动时肾上腺素、去甲肾上腺素分泌量增加，可提高脂蛋白酶的活性，加速 甘油三酯和低密度脂蛋白的分解，降低血脂。 扬州大学硕士论文 1 2 2 4 2 有利于运动后的静息代谢率提高 适度的运动不仅可以增加过剩热量的消耗，提高静息代谢率，减少体内脂肪， 还可以改善心血管功能。对于单纯性肥胖症，有氧运动疗法优于其它疗法，且条件 简单，效果明显，具有一定的优越性。目前治疗肥胖已不仅限于降体重、降体脂、 降b m i ，而且提出了m e t a b o l i cf i t n e s s 概念，是指改善与肥胖有关的生化危险因子， 如空腹血清t c 、t g 、g l u 、i n s 增加，糖耐量异常等。研究表明，长期有氧运动可以 使肥胖机体体脂重量和百分比降低，瘦体重增加，空腹t c 、l d l - c 、i n s 下降， 在运动中骨骼肌仅将2 5 左右化学能转变为机械功，其余都变为热能散发掉，因此 在能量平衡中散热是增加能量流出的主要因素。 3 肥胖与中医学 中医学对肥胖症的认识源远流长。素问痿论中说：脾主身之肌肉。这是由 于脾胃为气血生化之源，全身的肌肉，都需要依靠脾胃所运化的水谷精微来营养，才 能使发达丰满。人体肌肉的壮实与否，与脾胃的运化功能相关。祖国医学将肥胖症 称为“肥人”、“肥满”，饮食不节是肥胖形成的重要原因。脾胃论说：脾胃俱旺 则能食而肥。五谷入胃，须依靠脾胃的健运才能转化为精微物质，若脾胃虚损则运化 失职，水谷肥甘之物无以化生气血精微，转变为痰浊聚集体内，导致体态肥胖。 3 1 肥胖症的病因病机 3 1 1 b e , 胖的病因 早在祖国医学的经典黄帝内经中，就有关于肥胖的相关论述。黄帝内经 素问中“肥贵人则膏梁之疾也”。灵枢中“人有肥，有膏，有肉”，说“三者 其血浊，气滑少”。灵枢阴阳二十五人关于肥胖的描述，“土形之人，黄 色，圆面，大头，美肩背、大腹、美股胫、小手足，多肉，上下相称，行安地，举 足浮。 中医学认为，肥胖病的病因有以下几个方面： 饮食不节：嗜食肥甘厚味，水谷精微在人体内堆积成为膏脂。而肥甘厚味既可 滋生湿热，酝酿成痰，又能损伤脾胃功能，致使运化水谷精微功能减弱，水湿不运， 阻滞体内，复聚湿成痰，致使体重增加，使人臃肿肥胖。 情志所伤：中医学认为，脾在志为思，思伤脾，脾伤则运化失健，水湿痰浊膏 脂内生。情志抑郁，则引起肝气不舒气机失调，津液输布失常，同时，肝郁“木不 达土”，也影响脾胃“1 。 章海风：山茯方和游泳运动对高脂饮食大鼠体重及相关血清指标的影响旦 年老体衰：肥胖症的发生与年龄密切相关，4 0 岁以后人群的发病率明显升高。 中年以后，人体机能由盛转衰，脾之运化功能减弱，再加过食肥甘，常使脾运化不 及，聚湿生痰；或因肾阳虚衰，不能化气行水，酿生水湿痰浊，故而导致肥胖症的 发生。 劳逸损伤：适当锻炼身体对于心肝脾胃肾的生理功能、气血津液汗液的运行， 以及体重的保持均有良好的促进作用，反之劳逸失度易生他疾。中医学认为“久坐 伤气”，“久卧伤肉”，好坐久卧，缺乏运动。则神疲气乏，气血运行不畅，导致脾 胃运化失司，水谷精微输布失常，化为膏脂和水湿而致肥胖。 3 1 1 肥胖的病机 从古代文献记载来看，历代医家多从“痰湿”、“气虚”等角度论述肥胖的病机。 肥胖症患者表面形体壮实，为实证，实际上引起肥胖的主要原因是正气虚衰。气机 失常，不但影响脏腑的正常功能，并且还影响津液的输布和代谢，气不行津不化， 则形成内生之水湿痰饮。肥胖多发于中老年人、妇女产后、更年期，亦即肾虚为本， 而痰、湿浊、脂为标，在肾气虚的基础上，因生活安逸、进食过量、好坐喜卧等 均可诱发或增加肥胖。在病位上多责之脾胃肝胆肾，特别是强调脾脏与肥胖的密切 关系。历代不同医家治病着重点不同，有肥人多气虚、肥人多痰、肥人多湿等 不同提法。 3 2 临床治疗 近年来，有关减肥中药的研究不断深入，涉及单味中药、中药有效部位及中药 复方减肥作用临床研究。但是，对中药减肥作用的机理尚缺乏深入系统的基础实验 研究。 3 2 1 单味中药及中药活性成分治疗肥胖 根据研究报道，单味中药大黄、何首乌、山楂、泽泻、草决明、生地、益母草、 三七、女贞子、当归、山茱萸、枸杞予等均有不同程度的减肥作用；减肥活性成分 研究主要涉及大黄蒽醌、枸杞多糖、山楂黄酮、人参皂甙、茶多酚、荷叶生物碱、 植物固醇、决明子大黄酚、灵芝多糖等。 3 2 2 辩证论治 辩证论治治疗肥胖症，临床运用最多，但标准不一。郭义然”1 等将肥胖分为3 型：痰阻气滞型、肝郁气滞型、血瘀气滞型，分别用薤白、胆南星、瓜萎、陈皮等、 胡、枳实、香附、白芍、决明子等、血府逐瘀汤加丹参治疗。俞娜珍”将肥分为4 扬州大学硕士论文 1 4 型：痰湿壅阻型、胃热滞脾性、脾虚湿阻型、气滞血瘀型。根据1 9 9 7 年在北京召开 的全国第五届肥胖病研究学术会议制定的标准，单纯性肥胖症应分为5 种类型治疗， 即脾虚痰湿型、胃热湿阻型、肝郁气滞型、脾肾两虚型、阴虚内热型1 。 3 2 3 辨病论治 罗熙财用降脂散( 防风、荆芥、连翘、川芎、滑石、麻黄等) 治疗单纯性肥 胖症1 5 0 例，有效者1 3 2 例，平均减重3 0 5 千克，其中以中年妇女效果最为显著。刘 卫卫1 用减肥降脂灵胶囊( 含人参、虎杖、番泻叶、海藻酸钠等) 治疗单纯性肥胖 症9 9 例，3 个月后体重及甘油三脂下降显著( p o 0 1 ) ，有效率9 0 9 9 6 。谭达全等嗍 运用芙蓉降脂减肥灵治疗高脂血症并发肥胖症，治疗方法为口服芙蓉降脂减肥灵袋 泡剂( 由山楂、神曲、法夏、茯苓、萝卜子、荷叶、陈皮、白术、人参组成) ，每 次l 包，每天3 次。结果显示，该药调脂临床有效率9 0 0 9 6 ，且能使体重、体重指数 下降，肥胖症临床疗效好转率8 6 7 。李春生1 应用“自拟消补减肥片”治疗单纯 性肥胖病患者1 2 4 例，结果表明，其疗效和降低体重指数效果显著。不仅能降低单 纯性肥胖病患者的实际体重，减少体内脂肪存储，还能改善肥胖相关症状积分值。 3 2 4 实验研究 大黄是减肥降脂中常用的一味中药，金多靶的主要成分即是从大黄中提取得大 黄酸、d 一儿茶素及没食子酸等，陈愉”1 等研究显示金多靶灌服1 个月对单纯性肥胖 大鼠有明显的减肥作用，并有降低血清胆固醇的作用，肥胖合并高血糖时适当加大 金多靶剂量有降血糖效果，认为金多靶减肥疗效可能与提高血清瘦素水平有关。王 巍”“等观察了参( 庶虫) 减肥粉( 由党参、土鳖虫、昆布等组成) 对营养性肥胖小 鼠的影响。实验研究表明，参( 庶虫) 减肥粉可降低肥胖小鼠的l e e s 指数、脂肪垫 重量和脂肪系数，降低血清总胆固醇、甘油三脂和血糖含量，而小鼠摄食量无明显 改变。山楂黄酮类具有的降血脂作用已为外许多研究所证实。林秋实1 等指出，山 楂黄酮主要是通过调节大鼠肝脏低密度脂蛋白受体( l d l r ) 转录水平和提高抗氧化 能力，抑制脂质过氧化预防脂质代谢紊乱。余以刚、杜力军1 、许腊英等的研 究表明，荷叶生物碱、黄酮类物质是其具降脂减肥作用的主要成分，对实验性高血 脂症大鼠和小鼠有明显抑制血脂作用。但这些成分对提高激素敏感性脂肪酶活性、 促进脂肪组织释放f f a 所起的作用仍未见相关报道，尚待深入探讨。任爱红等1 观 察大鼠自由饮用决明子水煎剂对营养性肥胖的影响，结果显示：6 0 9 l 浓度的决明子 水煎剂可明显降低营养性肥胖大鼠的体质量( p 0 0 1 ) ，l e es 指数( p 0 0 5 ) 、空 章海风：山茯方和游泳运动对高脂饮食大鼠体重及相关血清指标的影响旦 腹血清甘油三酯、胰岛素和丙二醛( p 0 0 5 ) 含量，游离脂肪酸含量也有下降趋势， 总抗氧化能力水平有升高趋势表明决明子水煎剂能明显抑制营养性肥胖大鼠体质 量的增加，可能改善或纠正胰岛素抵抗，增强抗脂质过氧化作用，其作用机制可能与 其调节葡萄糖及脂肪代谢等有关牛伟等1 研究蒺藜总皂苷( s t t ) 对于营养性肥 胖大鼠糖脂代谢的影响。实验表明：s t t 能够有效控制肥胖大鼠体重增加，显著降 低血脂水平，同时还可以提高肥胖大鼠的胰岛素敏感性，对口服糖耐量的改善效果 与罗格列酮相当。s i t 具有降低血脂，控制肥胖，提高胰岛素敏感性的作用。张艳 荣等通过对玉米活性多糖减肥降脂作用的研究发现玉米活性多糖能明显降低肥 胖小鼠体重、脂肪指数、总胆固醇( t c ) 、甘油三酯( t g ) 、低密度脂蛋白( l d l ) 、血 糖( g l u ) 含量，对肥胖小鼠血清中高密度脂蛋白( h d l ) 有明显的升高作用，证明玉米 活性多糖具有明显减肥降脂作用。 3 3 减肥复方中所用的中药 3 3 1 山楂 药物性质 山楂( c r a t a e g u sp i n n a t i f i d ab g e ) 为蔷薇科植物山里红( c r a t a e g u s p i n n a t i f i d ab g e v a r m a j o rn e b r ) 的干燥成熟果实。有生山楂、炒山楂、焦山 楂、山楂炭。酸、甘，微温，归脾、胃、肝经。消食宜炒焦用，散瘀宜生用。功效： 为消食导滞药，消食化积，善消肉食，消食止泻，活血散瘀。化学成分：含山楂酸、 鞣酸、皂甙、果糖、维生素c 、蛋白质、脂肪油、氨基酸、酒石酸、柠檬酸、黄酮 类等。 药理作用 山楂有降压、强心、增加冠脉流量、抗心肌缺血及降脂作用。对高血压、冠 心病、动脉硬化、高脂血症患者有较好预防作用1 。山楂中的黄酮和三萜类成分是 治疗心血管疾病和抗肿瘤的活性成分。山楂能增加胃中消化酶的分泌，促进消化。 山楂对志贺、福氏、宋氏痢疾杆菌均有较强的抗菌作用。山楂能收缩子宫，使宫腔 内血块易于排出，促进产后子宫复原而起止痛止血的作用。 3 3 2 茯苓 为植物多孔茵科茯苓p o r i ac o c o s ( s c h w ) w o l f 的菌核，多寄生于马尾松或赤松 的根部。又名云苓、松苓、茯灵。药性甘、淡、平、归肺、胃、肾经。食疗上具有 利水渗湿，健脾止泻，宁心安神的功效。化学成分含b 茯苓聚糖、茯苓酸、卵磷脂 扬州大学硕士论文 1 6 及甾醇等。 药理作用 茯苓具有利尿作用、镇静作用，茯苓煎剂对小鼠腹腔注射，可以抑制自发活 动，并能对抗咖啡因所致小鼠兴奋过度，对巴比妥的麻醉有协同作用、乙醇提取物 使心肌收缩力加强，心率增加、茯苓对于四氯化碳所引起的小鼠肝损伤，有明显的 保护作用、茯苓多糖对小鼠肉瘤有抑制作用，其作用与胸腺有关，可激活局部补体。 4 本研究的设计与意义 4 1 本研究的设计原理和意义 肥胖被认为是一种慢性疾病，很难治愈，肥胖症的患病率和发病率无论在发达 国家还是发展中国家都正以惊人的速度激增，并呈低龄化趋势，已成为当今全球性 公共卫生问题。肥胖除了影响身心健康外，还增加了高血压、高脂血症、糖尿病、 动脉粥样硬化性心脑血管疾病的发病率和死亡率，因此开发治疗肥胖的药物或寻求 预防肥胖的方法都具有非常重要的意义。 人们目前研究仍着眼于作用更强、副作用更小的减肥药物，并希望新型减肥药 物可降低肥胖症患者的病死率及并发症的发病率。目前临床上长期用于治疗肥胖的 药物主要有两种。一是中枢作用减肥药，二是非中枢作用减肥药。但这两种药物长 期使用会给患者到来不同程度的不良反应，减肥作用不稳定，从而影响治疗效果， 也给患者带来沉重的经济负担，不能满足广大肥胖患者的需求。中医药在临床上治 疗肥胖的报道由来已久，大多表现为一定的减肥作用，且长期使用负作用小，价格 便宜，因此从中药中选择并开发具有减肥作用或预防肥胖作用的药物具有极为重要 的临床使用价值及广阔的市场前景。 本实验在前人研究的基础上，对中草药减肥降脂方进行了筛选，不仅借助统计 方法进行筛选，还主要以系统中医理论和中医药理论知识为指导，根据辩证施治的 原则来筛选，选出了山楂、茯苓两味中药组成复方，运用高脂性饮食对s d 大鼠进 行肥胖模型的建造，对大鼠血清指标，内脏重量等进行测试，结合有氧运动，观察 单纯运动，单纯使用复方，以及运动和复方共同作用的不同情况下，对高脂饮食大 鼠的预防作用，进行机制分析。 本实验采用预防性给药的方式，即在对大鼠喂饲高脂饲料的同时灌胃山茯方， 章海风：山茯方和游泳运动对高脂饮食大鼠体重及相关血清指标的影响旦 从而观察该复方对大鼠的影响。因此首先试图证明山茯方对高脂饮食大鼠有预防肥 胖的作用，并希望可以进一步优化此方。试图丰富和发展减肥理论，并提供详实的 数据。并从生化角度，挖掘此方的作用机制。 4 2 配方原理 结合中医对肥胖的认识，针对中医治疗肥胖的利水渗湿法、健脾消导法，通过 对中草药的筛选，本研究特选择山楂1 5 9 ，茯苓1 0 9 组成复方，此方中山楂性味酸甘、 微温，为消食活血养生食品。日常食之可消食化积，活血散瘀的功效，尤擅消油腻 肉食积滞。近代用于高血压、高血脂等疾病治疗。茯苓性味甘淡，平性，具有健脾、 利水渗湿的功效，用于小便不利，痰饮咳嗽，脾虚食少等。现代药理研究证明，茯 苓具有降血糖、降血压、强心、利尿、预防和治疗消化道溃疡等疾病。 扬州大学硕士论文 1 8 第二部分实验研究 1 材料与方法 1 1 材料 1 1 1 实验动物 健康s d 雄性大鼠，5 0 只，清洁级，体重7 0 _ - 9 0 9 ，由中国科学院上海实验动 物中心提供。分笼饲养，每笼5 只，饲养笼选用塑料制品，并配有不绣钢罩，塑料 吸水瓶和不锈钢吸水管；环境温度2 2 2 7 0 ，自然光照，各组大鼠每天自由饮水。 1 1 2 药膳方组成原料 山楂、茯苓以3 ：2 配制，均由国药控股江苏有限公司中药饮片厂提供，生产 日期为2 0 0 6 年8 月。 1 1 3 主要仪器 日立7 0 6 0 型全自动生化分析仪、k d c 一2 0 4 6 型低温大容量离心机、g c - 9 1 l r 放 射免疫计数器、电子天平、解剖器械。 1 1 4 主要试剂 t g 测定试剂盒( g p o - p a p 酶法) 、h d l _ c 测定试剂盒( 直接法) 、t c 测定试剂 盒( c h o d - p a p 酶法) 和g l u 测定试剂盒( 氧化酶法) ，均由浙江东瓯生物工程有 限公司提供。胰岛素放射免疫试剂盒，由北京科美东雅生物技术有限公司提供。 1 2 实验方法 1 2 1 药液的制备 本复方1 剂中含中药2 5 克，以1 0 剂2 5 0 克药材一同熬制药液，先用自来水浸 泡2 小时，用砂锅煎煮，以水浸过中草药一寸半为度，碳炉子滚后，温水再熬煮 3 0 r a i n ，用纱布倒出药液，依此法进行3 次，最后将3 次的汁液合在一起，小火熬 煮，浓缩为2 5 0 m l ，即得每m 1 药液中含生药1 9 删。分别作为药物组和运动药物组 的灌喂药液。 1 2 2 剂量的确定 大鼠的剂量和人剂量的在做药方面换算公式为：大鼠剂量d i n = 人剂量d h * 折算 常数k m k h ，即d m = d h * k m k h 。但本试验主要选用了两味可药食两用的中药，对人 体毒性较小，所以在剂量的确定上没有过分追求其换算精密度，而采用倍数简表的 换算方式9 ”。按6 0 k g 的人每日摄入一剂中药( 含2 5 9 药材) 熬制的药液。换算得 成人l k g 体重每日摄入含0 4 2 6 9 药材的药液，大鼠8 倍剂量换算得每k g 大鼠体重 塑垦：山茯方和游泳运动对高脂饮食大鼠体重及相关血清指标的影响 一1 9 摄入含3 3 9 药材的药液。按每m 1 药液含原药材0 5 9 计算，折算为每k g 大鼠体重 摄入3 3m 1 药液，即3 3 m l k g b w 。 1 2 3 高脂营养饲料的制各 国家标准固体基础饲料，由南京安立默饲料有限公司提供。每l o o g 高脂营养 饲料中含有基础饲料8 0 9 ，蛋黄粉l o g ，猪油l o g ”1 。 1 3 处理方法 1 3 1 实验分组和处理设计 适应性饲养埘后，按体重随机分为5 组，即基础组( c o n t r 0 1 ) 1 0 只，高脂 组( h f ) 1 0 只，高脂+ 药物组( h f m e ) 1 0 只，高脂+ 运动组( h f e x ) 1 0 只，高脂+ 药物+ 运动组( h f m e e x ) 1 0 只。 表1 实验分组 t a b l e le x p e r i m e n t a lg r o u p 基础对照组( c o n t r 0 1 ) ：不造模、不运动、不用药，饲喂普通饲料，自由饮 水，每天以3 3 9 k g b w 标准灌服纯净水，每周6 天。 高脂组( h i f a tg r o u p ) ：不运动、不禁食、不用药、饲喂高脂营养饲料，自 由饮水。 高脂+ 药物组：不运动、不禁食、饲以高脂饲料，每天灌注3 3 9 k g 体重的药 液，每周6 天。 高脂+ 运动组：不禁食、不用药、饲以高脂营养饲料。适应性游泳训练一周， 运动量从3 0 分钟然逐渐增至9 0 分钟，然后每天游泳一次，每次9 0 分钟，每周6 次。每日以3 3 9 k g b w 标准灌服纯净水，每周6 天。 扬州大学硕士论文 高脂+ 药物+ 运动组( g r o u p ) ：不禁食、饲以高脂营养饲料。适应性游泳训练 一周，运动量从3 0 分钟逐渐增至9 0 分钟，然后每天游泳一次，每次9 0 分钟，每 周6 次。第二周开始进行灌注3 3 9 k g 体重天的药液，每周6 天。 1 3 2 给药方式 灌胃，需灌胃的大鼠每日一次经口灌喂药液或蒸馏水。 1 3 3 运动方式 大鼠购进后，先适应性喂养一周，适应性游泳训练1 周，至游泳9 0 m i n d ，然 后运动组、运动药物组大鼠进行七周无负重游泳训练，大鼠每周训练6 天，每周日 休息，每天游泳训练1 次，塑料缸游泳池1 5 0 x 6 0 7 0 c m 3 ，水深为大鼠体长的2 倍， 水温3 0 2 。 1 4 指标测定方法 1 4 1 取材 大鼠喂养7 周后，根据老鼠的恢复规律及机制，在末次游泳及灌胃2 4 h 后， 称体重后腹腔主动脉取血，置于玻璃试管中，并立即低温分离血清( 4 ，3 0 0 0 r m p ， l o m i n ) 用于测定t c 、t o 、h d l c 、g l u 的含量；取血后立即对大鼠进行解剖，观察 主要脏器，剥离肾周及睾周脂肪组织垫，用滤纸吸干组织液后，进行称重；测定体 长，由鼻尖至肛门。 1 4 2 脂肪组织称量方法 用电子分析天平( 称量范围：o - 2 0 0 9 ，读数精度：l m g ，标准偏差：0 0 0 1 9 ) 进行称量，具体操作步骤严格按照说明书进行，结果用“g ”表示。 1 4 3 饮食量测定 饮食量每天记录，饮食量计算方法为：饮食量= 投食量- - $ i j 余量，忽略浪费量。 1 4 4 体重测定 分别于实验前、实验中每周测量小鼠体重2 次。 1 4 5 血液生化指标的测定 t c 、t g 、h d l - c 、g l u 由扬州市中医院测试，采用酶法测定血清t c 、t g 、h d l c 、 g l u 的含量，以上指标测试严格按照说明书，由日立7 0 6 0 型全自动生化分析仪自 动测定。 1 4 5 胰岛素的测定 章海风：山茯方和游泳运动对高脂饮食大鼠体重及相关血清指标的影响型 血清胰岛素的含量由扬州市中医院测试，采用放射免疫分析方法，随i n s 含量 增加，其放射性强度则相应降低。 1 5 统计分析 所有数据均用s p s s l l 5 软件包输入并处理数据，进行方差分析，组间两两比 较，运用p o s th o ct e s t s 进行多重比较t 检验( l s d 法) ，运用o n e - w a ya n o v a 程序进行单因素方差变异系数分析，所得结果以均数标准差c 。j ) 表示，当p o 0 5 时，表示差异有显著性。 2 实验结果 2 1 一般情况 实验期间各组动物活动自如，无异常姿态，毛浓密紧贴于皮肤表面，有光泽， 饮食、饮水正常，大小便正常。实验后，各组大鼠体重均自然增长，解剖观察心、 肾、胃等脏器，未见异常情况。 各组小鼠的饮食量经过数据统计分析后，显示出逐周递增的特点，在第五周开 始增长幅度渐缓，运动组的饮食量与药物组相近，运动药物组大鼠进食量最少，但 都没有显著性差异。由于数据量过大，故没有在此一一列出。 2 2 实验后对大鼠体重的影响 表1 各组大鼠7 周间体重变化( - s ) t a b l e l c h a n g e so fr a t s b o d yw e i g h tw e e k l yd u r i n g7w e e k sa m o n gg r o u p s c o n t r o l 2 9 2 1 8 _ + 9 0 6 2 9 7 8 0 _ + 1 1 3 53 0 1 7 8 _ + 8 3 5 *3 2 0 1 2 + 1 1 6 1 h f 3 0 6 2 0 4 - 1 0 7 5 # 3 1 5 5 8 - + 9 8 8 #3 4 1 3 6 1 9 1 0 #3 7 0 0 0 _ + 1 4 1 2 # h f m e 2 8 1 4 8 _ + 9 8 5 # #2 8 8 0 8 1 5 0 8 # l l3 0 0 4 2 1 5 3 8 # 辩3 1 9 7 0 4 - 1 5 5 9 # # h f e x 2 8 4 8 5 - + 1 1 1 6 嫦2 8 5 7 8 - + 1 3 6 9 # # 3 0 5 1 5 - + 1 8 2 7 蝴3 1 7 8 3 1 1 8 4 | i i 扬州大学硕士论文 2 2 h f e x m e 2 7 4 4 0 _ 4 - 1 7 0 6 # # 2 7 7 5 3 - - + 7 6 8 埔2 8 7 5 5 8 0 2 # #3 0 2 5 8 1 0 2 l # # 注：# c o m p a r e dw i t hc o n t r o lp o 0 1 * c o m p a r e dw i t hh f f x m ep o 0 5 c o m p a r e dw i t hh f e xp o 0 5 3 8 0 3 7 0 3 6 0 3 5 0 3 4 0 宣3 3 0 瓣3 2 0 3 1 0 3 0 0 2 9 0 2 8 0 2 7 0