《药物分析》芳酸及其酯类.ppt

第六章芳酸及其酯类药物的分析,Chemicalstructure&featureIdentificationDetectionofspecificimpuritiesin,AnalysisofAromaticcarboxylicacids&esters,Assay,Aspirin,Sodiumaminosalicylate&Clofibrate,Aromaticcarboxylicacids,水杨酸类,水杨酸SAsalicylicacid,阿司匹林aspirin,对氨基水杨酸钠PAS-Na,贝诺酯benorilate,双水杨酯salsalate,苯甲酸类,羟苯乙酯ethylparoben,丙磺舒probenecid,苯甲酸benzoicacid,甲芬那酸mefenamicacid,sodiumbenzoate,其他芳酸类,氯贝丁酯clofibrate,布洛芬ibuprofen,特点,均有苯环、羧酸或其酯水杨酸类和苯甲酸类结构中的羧基直接与苯环相连除了酸性基团外，各自具有本身的官能团分子中苯环、羧酸和取代基的相互影响，使芳酸的酸性强度各有不同,紫堇色,赭色,米黄色,鉴别,三氯化铁反应,碱式苯甲酸铁盐（赭色沉淀）加稀HCl，沉淀分解，生成游离,白色,布洛芬,重氮化偶合反应,具体方法见芳香胺类药物的鉴别氧化反应,异羟肟酸铁反应,甲芬那酸H2SO4深蓝色,随即变为棕绿色,水解产物的反应,分解产物的反应,UV特征吸收IR吸收光谱,特殊杂质的由来与方法检查,AcetylSalicylicAcid,副产物,SA,ASA,Aspirin,生产工艺,SA,溶液的澄清度酚类和酯类,其他副反应产生酯类,易碳化物,炽灼残渣重金属,PAS-Na,间氨基酚Ch.P样品3.0g用乙醚提取，加入H2O，用HCl滴定液（0.02mol/L)滴定，生成杂质HCl（转溶入H2O相，甲基橙指示剂）。滴定液不得过0.30mlUSPHPLC法C18NaH2PO4(0.05mol/L)-Na2HPO4(0.05mol/L)-CH3OH(含氢氧化四丁基铵1.9g)(425：425：150)254nm检测内标：磺胺,羟苯乙酯供试品自身对照法BP（1998）反相TLC高低浓度对比法取羟苯乙酯丙酮液1.0%和0.01%，2ul，254nm查荧光，前一个任何第二个斑点的大小和强度不应超过后一个。,a.杂质对照品法,方法：供试品供试品溶液杂质对照品对照品溶液,供试品,对照品,判断：供试品中所含杂质斑点不得超过相应的杂质对照斑点。优点：同一物质，同一Rf值比较，准确度高、直观性强。缺点：需要杂质对照品。,b.高低浓度对比法,方法：,判断：,供试品溶液所显杂质斑点不得深于对照溶液的主斑点（或荧光强度）,控制杂质斑点个数，控制杂质种类,氯贝丁酯,对氯酚（0.0025%）挥发性杂质（0.5%）GC法5%SE-302m160，N2FID杂质以归一化法求得,含量测定,酸碱滴定法Acid-basetitrationmethod以ASA及其制剂为例苯甲酸pKa4.20水杨酸pKa2.98酸性较强,羧酸邻位-OH，吸电子基团，使酸性增加；并有氢键，更增加了其极性,因此，可采取直接滴定法,直接滴定法,pKa36的药物溶于中性醇,可直接用NaOH滴定pKa69的药物要用非水溶液滴定法,中性乙醇：对指示剂(酚酞)而言为中性，可消除滴定误差,乙醇作用：溶解ASA；防止ASA在水溶液中滴定过程易水解,本法特点：简单,注意点：若SA不合格，不宜采用本法,Aspirin丙磺舒(Ch.P.BP.JP等)苯甲酸(Ch.P等)均采用本法,水解后剩余滴定法Residualtitrationafterhydrolysis,USP23方法：取本品约1.5g，精密称定，准确加NaOH液(0.5mol/L)50.0ml，水浴上煮沸15min，放冷，以酚酞为指示剂，用H2SO4液(0.25mol/L)滴定剩余的NaOH，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的NaOH液(0.5ml/L)相当于45.04mg的C9H9O4,剩余滴定时消耗酸量V(ml)同时做空白试验，消耗酸量V0(ml)Ch.P00羟苯乙酯的Assay亦采用,反应物质之间的化学计量关系,滴定度计算,0.5,两步滴定法Two-steptitration,用于Aspirin片测定片剂中有稳定剂,水解产物水杨酸SAHAc,枸橼酸Citricacid,酒石酸Trataricacid,为了避免这些酸类的干扰，采用两步滴定法,Ch.P.阿司匹林片,取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于阿司匹林0.3g)，置锥形瓶中，加中性乙醇(对酚酞指示剂显中性)20ml，振摇使ASA溶解，加酚酞指示液3滴，滴加NaOH液(0.1mol/L)至显粉红色，再精密加NaOH液(0.1mol/L)40ml，置水浴上加热15min，并时时振摇，迅速放冷至室温，用H2SO4液(0.05mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正每1ml的NaOH液(0.1mol/L)相当于18.02mg的C9H8O4,第一步：NaOH滴定所有的酸：ASA，CA，TA，SA，HAc,第二步,放冷后，用H2SO4滴定液滴定剩余的NaOHV；空白滴定消耗H2SO4V0；,(V0-V)H2SO4则为用于中和水解ASA所需的NaOH,计算：称取10片重1.8240g,CNaOH0.1032mol/L,片粉重0.5312g,C0.05120mol/L,标示量0.1gV3.02mlV020.18ml,直接水解后两步滴定法剩余滴定法滴定法,优点操作简便水杨酸干扰少结果准确，避免了游离SA以及片剂中稳定剂的干扰,缺点游离水杨酸不能完全不合格时结排除干扰果偏高,Ch.P氯贝丁酯的Assay采用两步滴定法,双相滴定法Titrimetryintwophases,Ch.P2005用于苯甲酸钠的测定苯甲酸钠为芳酸碱金属盐，易溶于水；苯甲酸不溶于水，不利于终点的正确判断因此，利用苯甲酸能溶于有机溶剂的性质，采用双相滴定法,分出H2O层，置具塞锥形瓶，乙醚层用H2O5ml洗涤，洗液并入锥形瓶，加乙醚20ml，继续用HCl滴定，至水层显持续的橙红色,柱分配色谱-紫外分光光度法ColumnPartitionChromatogr.,ASAcapsule等制剂除用上述两步滴定法外，最好用色谱法，可以分离酸性杂质和辅料以及稳定剂等，经分离后同时测定ASA与SA如USP用柱分配色谱-UV测定ASACapsule,ColumnPartitionChromatography,CPC担体：硅藻土(Celite545)固定相：一定pH的缓冲水溶液流动相：与水不相混溶的有机溶剂(洗脱前必须先用水饱和),CPC-UV法测定ASACapsule,SA测定供试液制备用CHCl350ml洗涤，弃去(洗去ASA)10ml冰HAc-水饱和乙醚液(110)(使紫色配位化合物被分解，SA析出)洗脱液收集于已盛有10ml甲醇和2滴HCl的50ml量瓶中，继用30mlCHCl3洗，并稀释至刻度SA对照品溶液：75g/ml，取10ml50ml量瓶中盛有：10ml甲醇，2滴HCl和10ml冰HAc-水饱和乙醚液(110)，CHCl3至刻度,测定：306nm测定供试液和SA对照品液,SA与试剂生成紫色水杨酸铁配位化合物，在柱上移动慢，带窄，色泽较深若有Fe3+洗下，黄色影响测定结果消除干扰方法：迂底部拌有磷酸的硅藻土，生成不溶解的FePO4,A供试液A对照品液,ASA+SA测定供试液制备洗脱5,25mlCHCl3，弃去CHCl3洗脱10ml冰HAc-CHCl3(110)*；85ml冰HAc-CHCl3(1100)，并稀释至100ml对照品溶液50g/ml冰HAc-CHCl3(1100),CPC-UV法测定ASACapsule,测定：280nm空白：CHCl3,NaHCO3使ASA和SA成盐保留于柱上用CHCl3洗脱的目的：去除中性或碱性杂质冰HAc酸化的目的：使ASA游离，易被CHCl3洗脱,含量测定计算公式,所取胶囊细粉中ASA(mg),CPC技术的类型,利用固定相酸碱性的不同进行分离利用药物和固定相起化学反应而进行分离利用生成离子对进行层析分离单纯靠选择流动相进行分离,阿司匹林栓Aspirinsuppositories,测定法咖啡因乙醇溶液4mg/ml,2.0ml,HPLC,血清中ASA&SA的测定,色谱条件C185m1504.6mm甲醇-水-正丁醇(30:20:1)经0.5m滤膜减压过滤后5lH3PO4超声脱气237nm内标：苯甲酸血清样品的处理血清样品100l加入HClO4(30%)50l、不同浓度ASA&SA对照品稀释液、内标(各浓度均为10g/ml混合2min离心进样,血清ASA，SA和内标物对照品色谱图,0.溶剂峰1.ASA2.内