血栓与止血PPT课件.ppt

本节内容,1、血栓与止血的筛选试验（1）一期止血缺陷筛选试验（2）二期止血缺陷筛选试验（重点）（3）纤溶活性增强的筛选试验2、血管壁（内皮）细胞检验3、血小板检验,一期止血缺陷：血管壁和血小板异常引起的止血功能缺陷常见疾病：血管性紫癜（过敏性紫癜、单纯性紫癜等）血小板减少症（ITP、TTP等）血小板功能异常（血小板无力症、巨血小板症、贮存池病等）,血栓与止血的筛选试验,过敏性紫癜,ITP,肘关节广泛出血，大鱼际皮下出血,注射部位出血,血小板无力症,一、一期止血缺陷的筛选检验（一）出血时间（bleedingtime,BT)原理：皮肤毛细血管刺破，出血自然停止所需的时间。主要受血小板数量和功能影响，其次受血管壁完整性和收缩功能影响，凝血因子影响较小参考值：标准化出血时间测定器法（templatebleedingtime,TBT)：6.92.1min,超过9min为异常,临床意义：延长见于：1血小板明显减少：原发或继发性血小板减少性紫癜；2血小板功能异常：血小板无力症；3严重缺乏血浆有关因子：vWD、DIC；4血管异常：遗传性出血性毛细血管扩张症；5药物影响：乙酰水杨酸,标准化出血时间测定器法测定BT,（二）毛细血管抵抗力试验(束臂试验）原理：对毛细血管施加压力，观察血管壁、血管内皮细胞、血小板综合止血作用参考值：5cm直径圆圈内，男性5个出血点，女性及儿童10个出血点临床意义：抵抗力减弱：血管病变；血小板减少；血小板功能异常；血管性血友病,（三）血小板计数参考值：（100-300）109/L检测方法：显微镜计数血细胞分析仪,1减少：100109/L（1）生成障碍：再障、放射线损伤、白血病、骨髓纤维化等（2）破坏或消耗增加：a免疫破坏：血小板自身抗体、过敏性药物损伤b消耗亢进：DIC；c血小板自身异常：先天性血小板减少症2增加：400109/L（1）原发增多：慢粒、真红细胞增多症、原发血小板增多症（2）反应性增多：急慢性炎症、缺铁性贫血、肿瘤,临床意义：,（四）血块收缩试验（clotretractiontest，CRT）原理：血液凝固后，血小板释放血栓退缩蛋白，使纤维蛋白网退缩，挤出血清。与血小板质、量，纤维蛋白原的质、量，其他凝血因子的质、量，纤溶功能有关参考值：血块收缩率=析出血清量/全血量（100%-Hct%）100%参考值：65.811.0%,临床意义：退缩率下降见于1血小板减少：Plt50109/L；2血小板功能异常：血小板无力症；3严重凝血因子异常：VIII缺乏；4纤维蛋白原或凝血酶原显著降低,二期止血缺陷：血液凝固和纤溶异常引起的止血功能缺陷常见疾病：遗传性血液凝固缺陷（VIII、IX缺陷；血管性血友病等）获得性血液凝固缺陷（VitK缺乏、肝病、抗凝物质增多、DIC等）,血友病,IIaCa2+VIII-VIIIaIIIPlt-PF3Ca2+IIaXaVVaCa2+,正常凝血过程（瀑布学说）,内源性途径,胶原等带负电荷表面,PKaPK蛋白激酶,XIIXIIaHMWK高分子激肽,外源性途径,组织损伤释放,组织因子（III）,XIXIa,IIa,IXIXa,VIIaVII,XIIIXIIIa,所需时间：,XXa,（凝血旁路）,VIII、IX、XI、XIIV、X、II、IIII、VII,Ca2+、PF3、磷脂,38min,PF3磷脂凝血酶原(II)凝血酶(IIa)纤维蛋白原(I)可溶性纤维蛋白稳固性纤维蛋白,参加因子：,二、二期止血缺陷的筛选检验（一）外源性凝血途径的综合检查血浆凝血酶原时间（ProthrombinTime,PT）,PT试验原理,1、PT实验结果报告形式PT时间：11-13s，超过3s为异常PT比值（PTR）：10.05国际标准化比值（INR）：PTRISI，10.12、临床意义：PT延长见于外源及共同途径凝血因子异常先天性或获得性（DIC、VitK缺乏，肝病等）PT缩短见于高凝状态、多发性骨髓瘤等,3、PT试验的临床应用口服抗凝剂的监测（INR最好在2.0-3.0）肝疾患严重程度的分类维生素K缺乏DIC诊断标准外源性途径出血筛选手术前常规检查,（二）内源性凝血途径的综合检查活化部分凝血活酶时间（ActivatedPartialThromboplastinTime,APTT）,APTT试验原理,1、APTT试剂组成磷脂：经氯仿或乙醚浸提的组织凝血活酶(部分凝血活酶）接触因子激活物：白陶土、鞣花酸等2、参考值32-43s，延长10秒以上为异常,3、临床意义APTT延长见于内源性及共同通路凝血因子缺乏1先天性凝血因子异常：甲、乙型血友病等2后天性多种凝血因子缺乏：严重肝病、DIC等3循环抗凝物增加：SLEAPTT缩短见于DIC、妊高征等高凝状态,4、APTT测定的临床应用*肝素治疗的监测的理想实验APTT比(1.5-2.5)*血友病的筛选：血友病甲、乙，APTT明显延长*DIC的诊断*内源凝血因子异常的筛选*血栓倾向的诊断*手术前常规(代替凝血时间)*抗凝物质的检测,二、凝血酶时间及其纠正试验1、凝血酶时间（thrombintime,TT),参考值：16-18s，超过3s以上为延长临床意义：（1）反映纤维蛋白原质和量；（2）反映是否存在抗凝物质。临床应用：（1）TT延长：DIC、先天性低（无）纤维蛋白原血症、原发性纤溶、肝病；肝素或类肝素物质增多、FDP增多等（2）TT缩短：异常蛋白血症或巨球蛋白血症、标本4放置过久、组织液混入血浆等,2、凝血酶时间纠正试验（甲苯胺蓝纠正试验)原理：能被甲苯胺蓝纠正的TT延长，提示为肝素或类肝素物质增多引起的抗凝作用；否则，为其他抗凝物质或纤维蛋白原缺陷引起参考值：加入甲苯胺蓝后TT缩短5s以上临床评价：（1）最好与正常血浆、硫酸鱼精蛋白等纠正物同时检测；（2）类肝素物质增多，见于过敏性休克、严重肝病、肝叶切除、肝移植、DIC等,三、纤溶活性增强的筛选试验（一）纤维蛋白原检测(Claussmethod),参考值：2-4g/L临床应用:(1)纤维蛋白原含量增高：判定血栓前状态或血栓性疾病的必查项目，如脑血栓形成、心肌梗塞、结核、风湿病、肺炎、恶性肿瘤等(2)纤维蛋白原含量减少：1/肝脏疾病：慢性肝炎、肝硬化2/DIC诊断的重要筛选实验3/溶栓治疗的监测4/原发性纤维蛋白原缺乏症、原发性纤溶活性亢进、恶性贫血及肺、甲状腺、子宫、前列腺手术等,非交叉连接纤维蛋白,交叉连接纤维蛋白,纤溶酶,纤溶酶,FPA116,FPB114,凝血酶,因子XIIIa,纤维蛋白原,纤溶酶,纤维蛋白生成和降解,被降解的纤维蛋白（原）产物统称为FDP,（二）血清纤维蛋白（原）降解产物检测(FDP)原理：乳胶凝集法：受检血清中加入抗纤维蛋白（原）D、E片段抗体标记的乳胶颗粒，若出现凝集则为阳性参考值：血清FDP10mg/L临床意义：血清FDP轻度增高10-40mg/L：急性静脉血栓、急性心肌梗死、严重肺炎、大手术后、恶性肿瘤、休克血清FDP明显增高40mg/L：原发纤溶、DIC、急性早幼粒白血病、溶栓治疗等,（二）血浆D-二聚体检测（D-Dimer）原理：乳胶凝集法、ELISA参考值：乳胶凝集法：阴性ELISA：400g/L临床意义：1、D-Dimer阳性：DIC、深静脉血栓、心肌梗死、肺栓塞、重症肝炎2、D-Dimer阴性：原发性纤溶；基本排除DIC,全自动凝血分析仪,一、分析原理二、SYSMEX系列凝血仪简介,凝血仪工作原理,半自动凝血仪全自动凝血仪,凝血因子检查方法,试管法挑丝法,比浊法电流法粘度法,生物学法生物化学法免疫学法,仪器法,手工法,凝血仪工作原理,生物学方法,血浆中凝血因子激活，纤维蛋白原变为纤维蛋白，发生物理特性变化,透射比浊法散射比浊法,光学法：血浆透明度的改变电流法：纤维蛋白的导电性：钩方法粘度法：纤维蛋白的产生，血浆粘度增加；磁珠法,仪器设计基础仪器设计原理(凝固法),凝血仪工作原理,37,生物化学方法,激活的凝血因子皆为酶，可激活特异的分解底物而显色,对酶的检测：即在含酶的样品中直接加入产色底物。对酶的检测：即在某种酶原进行测定，必须先用激活剂将其激活使其位点暴露,再加入基质,使酶将产色物质上的显色物质(PNA)裂解下来对酶抑制物检测：首先往加入待测样品加入过量对应酶，中和该抑制物剩余的酶可裂解基质产生PNA,凝血酶（血浆）产色物质量多肽+PNA,加过量的激活剂蛋白C活化蛋白C产色底物多肽+PNA,AT-（血浆）+过量肝素+过量凝血酶（待测物）加入样品中AT-肝素-凝血酶剩余凝血酶(中和的抑制物)产色底物多肽+PNA,仪器设计原理,仪器设计基础,产色底物法,凝血仪工作原理,免疫学方法,利用抗凝（凝血）因子与抗体结合反应，血浆发生浊度变化,透射比浊法散射比浊法,直接浊度分析乳胶比浊分析,仪器设计基础:仪器设计原理(免疫比浊法),提供全面广泛的测试项目菜单,