腺病毒PPT课件.ppt

腺病毒,具有日程表的病毒,1,是一群分布十分广泛，能引起呼吸道、肠粘膜上皮细胞溶解性感染；可在淋巴样和腺样细胞中引起潜伏感染，在啮齿动物细胞中引起转化感染。少数几种腺病毒对实验动物致癌（12、18型），有潜在致癌性。,因该病毒最初来自腺体，故命名为腺病毒(Adenovirus)。,2,型别多，约110个血清型，根据宿主可分鸟腺病毒属和哺乳类腺病毒,其中至少42个血清型能引起人类疾病。,目前，把人腺病毒的42个血清型分为A-F6个组：A-E组：各型病毒均能在人的组织细胞(如肾细胞)常规培养中增殖，称为普通腺病毒；F组（40和41型）：是从粪便中发现，用常规细胞培养不能增殖的腺病毒，称为肠道腺病毒。,在基因治疗的实验研究中常用腺病毒作为基因载体。,3,腺病毒(adenovirus,Ad)作为基因表达载体的研制起始于20世纪60年代初，当时病毒学家观察到腺病毒基因组可与猴类病毒40（SV40）基因组杂交，说明腺病毒基因组可承载异源性基因。此后腺病毒逐步发展成一种重要的载体系统，并成功地用于基因治疗的体内外实验和临床试验。目前运用最广的腺病毒载体。是血清5型腺病毒。,4,腺病毒载体的特点用它制备成疫苗或表达载体安全性好；对其结构及特性的研究较深入，容易复制，操作简单；重组的腺病毒载体可获得较高的滴度；腺病毒无需整合进宿主细胞基因组中，目的基因在宿主细胞基因组外游离状态下表达，整合突变致癌可能性小，基因毒性低；有较大的宿主范围，可感染分裂期及非分裂期细胞；腺病毒载体可以插入7.5kb的外源基因，容量较大；相对稳定，经得起纯化、浓缩。由于腺病毒载体以上特点，其作为外源基因转染机体细胞的表达载体，广泛应用于各种肿瘤的基因治疗。,5,球形，无包膜，直径70-80nm。,一、生物学性状,6,7,8,二、病毒的复制,核酸：线状dsDNA，不分节段，基因组长约36kb，编码30多种蛋白“调控基因”。衣壳：20面体立体对称，由252个颗粒组成，衣壳含有240个六联体（hexon）、12个五联体（penton）纤维状刺突：12根纤毛（fiber）以五联体蛋白为基底由衣壳表面伸出，纤毛顶端形成头节区（knob）。五联体和纤毛的头节区可与细胞表面的病毒受体结合，在病毒感染细胞过程中起着非常重要的作用。,9,10,（一）粘附和进入细胞腺病毒纤毛的头节区粘附到细胞表面的特异性受体病毒纤毛基底部五邻体与细胞表面结合通过内吞作用将腺病毒内化到细胞质中病毒在含内体的酸性环境中部分降解通过核孔将病毒DNA释放到细胞核内,二、病毒的复制,11,（二）转录与复制,1、腺病毒除了卵细胞以外几乎在所有已知细胞中都不整合到染色体中，不会干扰宿主基因。,病毒基因独立、高效复制“以量取胜”,12,13,置换,14,2、引物病毒复制所用的引物为蛋白质引物。可从任一末端开始,15,16,3、原料（操纵蛋白和核苷酸）腺病毒在感染宿主细胞后即产生一种蛋白（E1A蛋白），使感染细胞从“休息状态”进入到DNA复制周期，为病毒复制储备原料。,综上，腺病毒mRAN的选择传递和翻译都是严格按照时间日程完成的。,17,三、病毒的传播,传播途径：“粪口”途径（胃肠道）感染对象：儿童为主。,所致疾病：胃肠炎与腹泻。,18,1、在病毒感染早期，病毒的两种蛋白阻断激活死亡程序的细胞基因转录。在感染后期，腺病毒合成一种“腺病毒死亡蛋白”使被感染细胞破裂，快速释放出新病毒。2、病毒产生诱捕RNA分子，骗过干扰素系统。3、干扰MHC分子对病毒抗原的提呈。4、能中和天然杀伤细胞中的一种。5、抗原漂移。,四、病毒对宿主防卫的逃逸,19,五、病