（发酵工程专业论文）微生物降解聚乙烯醇的条件及降解过程机制研究.pdf

摘要 聚乙烯醇( p v a ) 在纺织工业中被广泛用作上浆剂。经p v a 上浆的棉织物必须 经过退浆处理，以增加棉织物对水的吸收性。目前常用的退浆方法是使用热水在 棉织物表面洗脱p v a ，有时使用氧化剂如n a b 由2 等，这就导致纺织厂排出的废 水中含有大量的p v a 和氧化剂。如果能将p 、缓降解酶运用于纺织工业的退浆工 艺，在退浆工段就实现对p v a 的生物降解，不仅能大大减少p v a 废水的排放， 还能避免化学退浆过程中高温和氧化造成的棉纤维损伤。研究微生物降解p v a 的条件及p v a 生物降解过程机制将有助于p v a 降解高效菌的筛选和实现p v a 降 解酶在退浆工艺上的运用，对于减轻环境污染将具有重大的意义。 本文详细研究了青霉菌株w s h 0 2 2 l ( n 玎f c 沁删s p w s h 0 2 2 1 ) 、委内瑞拉 链霉菌g y l ( 跏印，d m y c e jv e n 踞“p 船g y l ) 以及混合微生物体系( 以下简称混 合体系) 降解p v a 的条件，并用 m l c 、高效凝胶过滤色谱法( h p g f c ) 、红外 光谱( i r ) 和末端限制性酶切片段长度多态性方法( t - r f l p ) 等方法分析 尸e n f c f ? 池ms p w s h 0 2 - 2 1 、勋印f o m y c p sw 臼“e 肠eg y l 、紫色杆菌w s h 0 4 0 1 ( 砌栅b 加0 6 口c 耙r f “朋s p w s h 0 4 一0 1 ) 及其混合体系降解p v a l 7 9 9 的过程，研究不 同微生物降解p v a 的机制。主要研究结果如下： 1 、对菌株p e h f c 册“研s p w s h 0 2 2 1 产p v a 降解酶的营养条件进行了系统研究， 发现该菌株在普通的霉菌培养基中不产p v a 降解酶；以低浓度的可溶性淀粉为 碳源、以酵母作为氮源时，该菌株可以产少量p v a 降解酶；在以p v a 为唯一碳 源的培养基中，该菌产p v a 降解酶酶活及单位质量细胞产酶水平有了明显的提 高。 以n h 4 c l 作为合成培养基的氮源，研究了2 0 种氨基酸和部分维生素对青霉 w s h 0 2 2 l 产p v a 降解酶的影响。结果发现，苏氨酸是p p f c f f f m ms p w s h 0 2 2 l 产生p v a 降解酶的必需氨基酸，培养基中苏氨酸浓度必须高于1 2m 叽该菌株 才能产生p v a 降解酶。 2 、分离得到一株产p v a 降解酶的放线菌g y l ，根据其1 6 sr d n a 全序列、生理 生化特征以及细胞壁化学成分，确定该菌株属于s ：抛p 幻m w p sv p n 口p 肠e 。这是 关于放线菌产生p v a 降解酶的首次报道。 菌株& ，印f 0 疗吵e sv e 月“e 肠pg y l 产生的p v a 降解酶是一种诱导酶。在p v a 培养基中添加微量的葡萄糖有利于该菌株产p v a 降解酶，但高浓度葡萄糖( 3 g l ) 对p v a 降解酶的合成有明显的抑制作用。菌株s 崛d ，吵甜v p ”口“p 肠eg y l 利用p v a l 7 9 9 和p v a l 7 8 8 这两种聚合度相同而醇解度不同的p 、作为底物产生 p v a 降解酶时是有选择性的，醇解度较低的p v a l 7 8 8 不利于菌株j s 阮d 叼，c 曲 w n z “p 肠eg y l 产生p v a 降解酶。 运用中心实验设计和响应面分析方法对泖o 移惦p sv p “p 肠pg y l 的发酵 培养基进行了优化。 3 、用m l c 、m 、h p g f c 等方法分析尸p 一耙f f “ms p w s h 0 2 21 、斯印幻叼圮邸 w ”船“e 肠pg y l 和妇n 砌加d 6 口c 把r f “ms p w s h 0 4 o l 降解p v a l 7 9 9 的过程，发现 这三种微生物降解p v a 过程比较相似。 p p 以把珊f “ms p w s h 0 2 2 1 、& 印向幔 p 5v e 聍鲳“e 肠pg y l 和j a 疗砌加d 6 口c 旭，f “m s p w s h 0 4 一0 1 都不能彻底降解培养体系中的p v a ，p 口 f c f f f f “ms p w s h 0 2 2 1 、 跏印向胸饼jv e n 凹“p 肠pg y l 和妇”肪f ”d 6 卯耙，f “研s p w s h 0 4 0 l 对p v a 的降解基 本是它们分泌到胞外的p v a 降解酶完成的。p p ”耙册姗s p w s h 0 2 2 1 、 & 唧向小弦鲫w 珂口“p 肠eg y l 和妇 捕f h d 6 口c 陀，f “ms p w s h 0 4 0 1 产生的p v a 降解 酶存在底物选择性，只能作用一定聚合度的p v a ：尸p 聆f c f f 7 f “埘s p w s h 0 2 2 1 产 生的p v a 降解酶能作用平均分子量在7 5 7 5 3d a 以上的p v a ，& 诧p f 0 叼，c e s v p ”“p 肠pg y l 产生的p 降解酶能作用平均分子量在6 5 8 5 3d a 以上的p v a ， 如胛曲加d 6 日c 胞，m 埘s p w s h 0 4 一o l 产生的p v a 降解酶能作用平均分子量在7 6 51 1 d a 以上的p v a 。 尸p f c f 胁删s p w s h 0 2 2 1 、j s h 印f 0 ，c e sv 阴盯“e 肠pg y l 和j a ”抽f 0 6 口c 把r f “ s d w s h 0 4 0 l 在降解p v a 的过程中p v a 不进入细胞；在降解过程中有乙酸生 成。 p p 胛f c f 胁“矾s p w s h 0 2 2 1 、& m p 向叼，c 船v p 胛凹甜p 肠eg y l 和止巩腩f 胛d 6 盯c 耙r f 删 s p w s h 0 4 0 1 在降解p v a 的过程中培养体系中都发现有甲基酮类物质生成。 4 、提出了p e n f c f f f f “ms p w s h 0 2 2 1 、r e p f o m e sv e n e z “e k eg y l和 如h 珐f 0 6 口c 把r f “删s p w s h 0 4 0 1降解p v a 的可能途径：p p ”f c f f “棚s p w s h 0 2 2 1 、肼印加叼，c g jw 韶“p 肠pg y l 和妇n 胁加d 6 口c 阳，m ms p w s h 0 4 0 1 产生 的p v a 降解酶有可能是一系列酶，其中包括内切酶和外切酶，在降解p v a 的过 程中，内切酶将大分子量的p v a 切割成稍小p v a ，并在这些p v a 片段末段产 生外切酶能够作用的羧基或者甲基酮，外切酶再进一步对这些p v a 片段进行切 割，每次切割p v a 的一个结构单元，切割下来的结构单元形成乙酸，降解产生 的乙酸可以作为碳源物质供微生物进行生长。但是p p 胛f c f f f “s p w s h 0 2 2 1 、 舰p m ，c p jv p 胛p z “p 肠pg y l 和如 捕加d 6 d c 把r f “ms p w s h 0 4 0 1 产生的这些内切 酶和外切酶都有一定的底物特异性，当p v a 聚合度小于某一数值时，酶和p v a 结合不能形成足够稳定的结合物而导致降解过程的停止。 5 、用末端限制性酶切片段长度多态性( t - r f l p ) 方法在d n a 水平分析了一个 能够彻底降解1g lp v a l 7 9 9 的混合体系在降解过程中微生物种类和数量的变 化：混合体系中含有胁e “面m o 麟s p 、劬 咖p m d 麟s p 、胄 d 面c c 驸s p 、眈c f f f 埘 s p 、b 陀v f 6 口c 胞r f 材ms p 、，z m 6 口c 把，f “聊s p 、肋i j c ，d c c 埘s p 、跏印r o c d 淞s p 、 三甲向腑r 投s p 和p 口e 栅 口c 肼淞s p 等细菌。在降解过程中n p “面m o 嬲s p 、 月删d 6 叩耙，f “珊s p 、唧f d c c s p 和 纰m c c ms p 在数量上呈现一直增长趋势， 在降解结束时，a e z f 幽m o 阳ss p 、6 口c 研f “ms p 和埘c m c c s p 分别占了混 合体系的3 0 6 、1 7 2 和1 9 7 ，成为混合体系中的优势菌群。肋c f f f 螂s p 、 r 肋面c o c c 淞s p 在混合体系中的数量百分比在降解过程中一直减少。 s 砷觇p m o n s p 、尸臼p ”曲口c 打，螂s p 呈现先多后少的趋势。 用h p l c 、瓜、h p g f c 等方法分析了该混合体系降解p v a 的过程：该混合 体系可以将培养体系中初始平均分子量为1 1 2 9 8 1d a 的1g i 。p v a l 7 9 9 彻底降解。 混合体系在降解p v a 的过程中，除了分泌到发酵液中的p v a 降解酶之外，细胞 也在起作用。在降解过程中有小分子量的p v a 进入细胞中并能够进一步被降解 掉。混合体系在降解过程中有乙酸和甲基酮类物质生成。 6 、从混合体系中没有分离出能够单独彻底降解p v a 的纯菌株。在纯化出来的7 个菌株中，1 号菌和7 号菌均可以部分降解p 、恰1 7 9 9 ，1 号菌基本不降解p v a l 2 4 ， 7 号菌可以稍微降解p v a l 2 4 。不产胞外酶的4 号菌能够在p v a l 7 9 9 和p v a l 2 4 培养基中生长，2 号菌和6 号菌只能在p v a l 2 4 培养基中生长。 7 、提出了混合体系降解p v a 的可能途径：该混合体系对p v a 的降解是一个协 同作用的过程，在降解过程刚开始时，一些能够利用高聚合度p v a 的细菌先生 长起来，大分子量的p v a 被这些细菌产生的p v a 降解酶( 胞外酶或膜上酶) 降 解为稍小分子量的聚合物。随着降解过程的不断进行，培养体系中p v a 的平均 聚合度不断下降，这时能够利用较低聚合度p v a 进行生长的细菌就开始在混合 体系中占据优势，这些细菌产生的胞外酶、膜上酶可以切割较小分子量的p v a ， 混合体系在降解过程中产生的乙酸就可能是这些胞外酶、膜上酶的作用产物。同 时小分子量p v a 可以透过细胞膜进入另外一些产生胞内降解酶的细菌细胞内， 在胞内被进一步降解。 关键词：聚乙烯醇，生物降解酶，降解条件，降解机制 a b s t r a c t p o l y ( v i n y la l c o h 0 1 )( p v a ) i s 讪d e l ya p p l i e di 1 1t h ct e x t i l ea sas i z i l l ga g e m b u t 廿1 e c o t t o nf a b r i c sn e a t e db yp v am u s tb ed e s i z e dt oe n h a n c et 1 1 e i rw a t e ra b s o r b e n c y i n c o n v e n t i o n a ld e s i z i n gm e 也o d ，也ec o t t o nf 曲r i c sa r ew a s h e dw i 也h o tw a t e ra n d s o m e t i i 工1 e so x i d a l 】ts u c ha sn a b r 0 2 ，e t c i su s e dt or e m o v ep v a t h l l s ，t 1 1 ew a s t e w a f e r 勘mt 1 1 et e x t i l ep l a i l tc o n t a i l l sa b l l n d a n tp v aa n do x i d 锄ta g e n t s i fp v a d e 掣a d i l l g e n z y m e sw e r el l s e di nm ed e s i z i n gp m c e s s ，m ep v ac o n c e n 位l t i o ni nt t l ew a s t e w a t e r c o l l l db ed e c r e a s e d ，a t l es a m et i m e ，恤d a m a g eo fc o 怕nf a b r i c sb yh i g h t e m p e m t l l r ea n dc h e m i c a l sc o u l db ea v o i d e d t h ei n v e s t i g a t i o no fp v am i c r o b i a l d e g r a d a t i o nc o n d i t i o n sa 1 1 d 1 em e c h a i l i s mo ft h ed e g r a d a t i o np r o c e s sc a nb eh e l p 如l f o r 吐l es c r e e n i n go fe 肫c t i v es t m i n sf o rp v ad e 孕a d i n g ，t h u se n h a l l c e 印p l i c a t i o no f p v a - d e 铲a d i n ge n z y m e si nm ed e s i 五n gp r o c e s s i ti sv e r yi m p o n a l l tt o r e l i e v e e n v i r o m e n tp o u u t i o ni n 血et e x t i l ei i l d u s 缸y i nt h i ss t i l d y ，血ec o n d i t i o n sf o rb i o d e g m d a t i o no fp v ab y 尸8 玎把订，f 甜脚s p w s h 0 2 2l ，s h 印d 以”g jw 胛船“p 肠eg y la n dam i x e dc u l t u r ew e r ei n v e s t i g a t e d ， r e s p e c t i v e ly t h cp r o c e s s e s 姐dm e c b a n j s mo fp v ad e 伊a d a t i o nb yt h e s es t r a i n s 、v e r e s 砌i e dv i al l i 曲p e r f b r i l l a n c el i q u i dc h r o m a t o g r a p h y ( h p l c ) ，l l i 曲p e r f b 彻a i l c eg e l n l 僦i o nc h m m a t o g r a p h y( h p g f c ) ，i n 丘a r e d s p e c 劬m e t e r( i r ) a 1 1 dt e r i n i n a l r e s 伍c t i o n 疳a g m e n tp o l y m o r p h i s m ( t _ r f l p ) t h em a j o rr e s u l t sa r es 啪m a r i z e da s f o l 】o w s ： 1 ) 1 1 l en u 缸t i o n a lc o n d i t i o n sf o rm ep m d u c t i o no fp 、，a d e g r a d i n ge i l z y m eb y j p 阴f c 肼m 肌s p w s h 0 2 2 1w e r ei n v e s t i g a t e da n dt h er e s u l t ss h o w e dt h a tt h es 仃a i l ld i d n o tp m d u c ep v a - d e g r a d i n ge n z y m ei nt l en o m a l 劬g a lm e d i a w h e nl g lo f s o i u b l es t a i 。c hw a su s e da ss o l ec a r b o ns o u r c ea i l dy e a s te x t r a c ta sn i t m g e ns o u r c e ， v e r ys m a l l 锄o u mo fp v a d e g r a d i l l ge n z y m ew a sp r o d u c e db ym es t r 面n w h e np v a w a su s e da st h es o l ec a r b o ns o u r c e ，h o w e v e r ，p v a - d e g m d i n ge n z y m ea c t i v i t ya n dm e s p e c m ce n z y m ea c t i v 时i n c r e a s e ds i 卿f i c a n t l y i ti n d i c a t e dt h a t 血ep v a d e 目a d i n g e m 丁m ep r o d u c e db yj p p 门f c f f “卅s p w s h 0 2 2 1w a si n d u c i b l e 1 1 1 ee 脏c t so ft l l e2 0 锄i n oa c i d sa 1 1 ds o m ev i t 锄i n so nm ep r o d u c t i o no f p v a d e g r a d i n ge n z y m eb yw s h 0 2 2 1w e r e 血v e s t i g a t e di 1 1t 1 1 es y i 】t h e t i cm e d i 啪 u s i n gn h 4 c la s 血en i 仃i ) g e ns o u r c e t h er e s u l t ss h o w e dm a tt h r e o n i n ei san e c e s s a r y a m i n oa c i df o rp 1 v a d e g r a d i n ge n z y m ep r o d u c t i o nb yp e 九j c j j n “，玎s p w s h 0 2 2 1 ；v 1jj1 中j 文摘要第i i v i i 贾 1 1 1 r e o n i i l ec o l l l dp r o m o t em ep m d u c t i o no fp 、，a - d e g m d i n ge n 巧m e 、i 也o r 谢t l l o u t p v ai n 血em e d i u m ，w h j l e “h a sn oo b v i o l l se 岱：c to nm eg m w t ho ft l l es 仃血t h e l i e s h o l do ft h r e o n i i l ef o rp v a d e f a d i n ge n z y m ep r o d u c t i o nb y 廿l es t r a i n 、v 骶1 2 m g l 2 ) a na c t i n o m y c e t i cs 仃a j n ，g y l ，砌c hc o u l dd e g r a d ep kp a i t l y ，w a ss c r e e n e df 如m t h ep v a c o n t a m m a t e ds o i ls a m p l e s 1 1 1 i ss 仃a i nw a si d e n t i f i e d 骶al s r 印幻所y c e s w 疗船“p 肠p a c c o r d i n g t oi t sw h o l e s e q u e n c e o f1 6 s r d n a ，p h y s i o l o g i c a l c h a r a c t e r i s t i c sa i l dc h e i l l i c a lc o m p o s i t i o no fi t sc e uw a l l 1 h si s 也e 丘r s tr e i ) o na b o u t a c t i i l o m y c e t i cs t r a i nc a p a b l eo f d e g m d i n gp v a t h ep v a - d e 乒a d i i l ge m 【y m ep m d u c e db y 泐加，9 忙p sv e n e z “e 肠eg y lw a s i i l d u c i b l e s u p p l e m e n to f 们c e 锄o u n to fg l u c o s ec o u l dp m m o t ep m d u c t i o no f p v a d e g r a d i n ge n z y m eb yt h es 订a i n h i g hc o n c e n t r a 血o no fg l u c o s e ( 3g l ) ， h o 、e v e r ，i n i l i b i t e dm ep r o d u c t i o no fp v a d e g r a d i n ge n z y m e p v a l 7 9 9i sp r e f b r r e d a sas u b s t r a t et op m d u c ep v a d e 伊a d i i l ge 1 1 z y m eb ys r 印幻，哆 c 耵w ”船“e 肠pg y l p v a l 7 8 8 ，w l l i c hh a s 也es 锄ep o l y i n e r i 2 a t i o nd e g r e ea sb u tl o w e rs a p o n i f i c a t i o nm 如 p v a l 7 9 9 ，i s n o ts u i 切b l e f o r m e p r o d u c t i o n o f p v a d e g r a d a t i o ne n z y m e 1 1 1 ef e m e n t a t i o nm e d i 啪f o r 跏叫。厅吵p sv 鲫凹p 肠pg y lw a so p t i i l l i z e d 1 1 s i n gl l 玎i f o n i l i t yd e s i 驴a i l dr e s p o l l s e s l l r f a c ea i l a l y s i s 3 ) t h ep v ad e g r a d a t i o np m c e s s e so f 凡玎f c 讲f “历s p w s h 0 2 2 1 ，j s ，r 咧d ，砂船 v p e z “8 肠8g y la n d 。尼 抽f n d 6 a c 把r f z 删s p w s h 0 4 一0 1w e r ei n v e s t i g a f e db yu s i n g h p l c ，i ra n dh p g f c 1 1 1 er e s m t ss h o w c d 恤tm ed e 孕a d a t i o np r o c e s s e sb ym e s e 廿l r e es n _ a i l l sw e r em o r eo rl e s ss i i l l i l a l p v ad e g r a d a t i o nb yp p 玎耙川f “坍s p w s h 0 2 2 1 ，脚r 0 幔旧p sv p 胛g z “p 妇g y l o r 妇胛肪加0 6 口c 把r f “川s p w s h 0 4 0 1w a sf l l l f i l l e db yt 1 1 ee x 仃a c e l l l l l a re r l z y m e so f t h e s es t r a i n s b u tp v ai nt h em e d i 衄c o u l dn o tb ed e f a d e dc o m p l e t e l yb ym e s e s t r a i l l s 1 1 1 e yc a l l0 1 1 l yd e 伊a d ep v a 、i mc e r t a i l lp o l y i n e r i 2 a t i o nd e g r c e 1 1 1 ee 哟m e 丘o mn h 耙川f “ms p w s h 0 2 - 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c u n 吨e n 巧m e s ( e c e ) n e l o n gc h a i no fp v a w a sf i r s t l yc u tb ym ei c ei n t os h o r tc h 血s 谢t l le n d so fc a r b o x y l o rm e t l l y lk e t o n eg m u p t h e nm e s es h o r t c h a i np v aw a sd e g r a d e db yt 1 1 ee c ea n d c u to n eu n i to f fe a c ht i r r 托f 如m 也ec h a i ne n dt of o r i i la c e t i ca c i d t h ea c e t i ca c i d c o u l db eu s e da sc a r b o ns o u r c eb yt 1 1 es 廿a i l l s t h ei c e 锄de c e 行o mm e s e st l l r e e s 仃a i n sh a v es u b s 们t es p e c i f i c 时1 1 1 e yc o u l dn o ta c to np v am 0 1 e c u l e s 埘t hl e s s 恤a i lac e r t a i np o l y m e r i z a t i o nd e 目e e t h e r e f o r e ，t l l ed e g r a d a t i o no fp v aw a sn o t c o m d l e t e 5 ) t h ed y n 锄i cc o m p o s i t i o no fs p e c i e sa i l dq u a n t 时i 1 1am i x e dc u l t u r e ，w l l i c hw a s c a p a b l eo fc o m p l e t e l yd e f a d i n g 1 叽p v a ，w a si n v e s t i g a t e du s i n gt r f l p t e c h n o l o g yd u r i n g m e d e 乒a d a t i o np m c e s s t h e r ew e r e ，0 p “如m d 甩哪 s p ， s p h i n g o m o n 8 ss p ，r h o d o c o c c h ss p ，b d c i l l u ss p ，b r e v i b 8 c i e r i l ms p ，f i m o b n c l e r i t l m s p ，m c 加c o c c 淞s p ，跏印幻c c 淞s p ，上印r o f 矗r 扛s p a i l dp 口p 疗泊d c 洲淞s p ，e t c ，i nm e m i x e dc u i t i l r e 1 1 1 e i rr e l e v a l l ta b u l l d a l l c ec h a i l g e dd 吲咀gt t l ed e g r a d a t i o n t h er e l e v a l l t a b u i l d a l l c eo f 西p 枷o 坍d 玎傩s p ，f 伽0 6 c 把，f “肌s p ，跏印，d c c 埘s p a n d 埘c 阳c d c c 淞 s p i n c r e a s e dd 埘n gt h ep r o c e s s a tt 1 1 ee n do f c u l t i v a t i o n ，a p “咖m o 胛础s p ，f 伽d 6 玎c 御f “m s p a i l dm c r o c o 搬s p h a v ear e l e v a l l ta b u n d a n c e3 0 6 ，1 7 2 a 1 1 d1 9 7 ，r e s p e c t i v e l y i nw h i c h ，蚴删c c 螂s p i n c r e a s e df r o mo 7 a t6 4ht o1 9 7 a t9 6h t h er e l e v 觚t a b u n d a n c eo fb c f f 胁ss p a n dr h d 如c 。c c 淞s p ，h o w e v e r ，d e c r e a s e d d 1 1 r i i l gm e p m c e s s w 1 1 i l e 也er e l e v a l l ta b u l l d a j l c eo f 印柚唱d 研伽珊s p a 1 1 dp 口p 仃f 6 口c f z ，“ss p i n c r e a s e df i r s ta n dt 1 1 e nd e c r e a s e d t h ep r o c e s so fp v a d e g r a d a t i o nb ym em i x e dc u l t i l r ew a si n v e s t i g a t e du s 堍 h p l c ，浓，a n dh p g f c ，e t c t h er e s l i l t ss h o 、v e d t 1 1 a tt h i sm i x e dc u l t u r ec o u l d c o m p l e t e l yd e 掣a d e d1g lo fp v a 1 7 9 9 、v i ma na v e r a g em 0 1 e c u l a rw e i 曲to f1 1 2 8 1 d a b e s i d e st h ee x 仃a c e l l u l a rp v a d e g m d i i l ge n z y m e s ，t 1 1 eb a c t e r i a lc e l l sa l s op l a y e d av e r ) ，i m p o r t a n tr o l ei np v a d e 伊a d a t i o n s m a l lp m o l e c u l e sw e r ef o u n di nt h e c e ue x t r a c t a c e t i ca c i da n dm e t l l y l - k e t o n es u b s t a i l c ew e r ep m d u c e dd u r i n gt h e d e g r a d a t i o np r o c e s s 中英i 抽l 第i i v i i 页 6 ) s e v e ns 缸_ a i n sw e r es c r e e n e d 丘o mt l l em i x e dc u l t u r e ，b u tn o n eo fm e m 、v a sa b l et o c o m p l e t e l yd e g 砌ep v a 1 1 1 es 仃a i l ln o 7c o u l dp a r t l yd e g r a d ep v a17 9 9 ( 丘d m 1 1 2 9 8 1d at o8 3 8 0 3d a ) a n dp v a 1 2 4 ( 6 r o m7 3 7 6 2d a t o6 6 5 6 4d a ) t h es 订a i nn o 1 c o l l l da l s op a r t l yd e g r a d ep v a1 7 9 9 ( f b m1 1 2 9 8 1d at o9 8 8 2 7d a ) ，b u th a r d l y d e g r a d ep v a l 2 4 t h es t r a i nn o 2a i l dn o 6c o l l l do i l l yg r o wi np v a 1 2 4m e d i 啪 t h es 仃a i l ln o 4c o u l d 盯o wi np v a1 7 9 9o rp v a1 2 4m e d i u m 7 ) ap o s s i b l ep a m w a yw a sp m p o s e df o rp v ad e g r a d a t i o nb yt h em i x e dc u l t 眦e t h e d e 掣a d a 廿o no fp v ab yt 1 1 ei i l i x e dc l l l t i l r ew 船as y n e r g i s d cp r o c e s s a tt l l eb e g i i l i 】_ i i l g ， t h eb a c t e r i a c a p a b l eo fd e g m d i n gh i 曲一p o l y m e r i z a t i o n d e g r e ep v a ( g r o u pa ) p r o l i f c r a t c da n d1 1 i g hm 0 1 e c u l a rp w a sd e g r a d e di n t ol o wm o l e c u l a rp v ab ym e e x 廿；l c e l l u l a r 柚dm e m b r 锄e - o r i e n t e de n z ) r m e s 矗d mt l l e s eb a c t e r i a t h e p 0 1 y m e r i z a t i o nd e g r e ed e c r e a s e da l o n g 谢mt h ed e 蓼a d a t i o na i l d 也e nt h eb a c t c r i a c 印a b l eo fu t i l i z i n g1 0 w - p o l y m e r i z a t i o n d e g r e ep v a ( g r o u pb ) p m p a g a t e d t h e e x 雠l c e l l l l l a ra 1 1 dm e m b r a n ee n z y m e so f 孕d u pbb a c t c r i ac o u l dd e 掣_ a d el o w m o l e c u i a rp v a a c e t i ca c i dw a st h e p r o d u c t o fp v a d e g m d a t i o n l o w - m o l e c u l 盯_ w e i g h tp v a w a sa l s ot r a n s f e r r e di n t ot 1 1 ec e l l so fs o m eb a c t e r i aa i l d d e g m d e dc o m p l e t e l yb yi n 仃a c e l l u l a rp v a - d e f a d i n ge i l z y m e s 1 ( e y w o r d s ：p v a ，p v a d e g r a d i n ge n z y m e ，d e g r a d a t i o nc o n d i t i o n s ， d e g m d a t i o n m e c h a n i s m 独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工 作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地 方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含 本人为获得江南大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。 与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明 确的说明并表示谢意。 签名：i 墼量塾 日期：娜箩年f 2 月上口日 关于论文使用授权的说明 本学位论文作者完全了解江南大学有关保留、使用学位论文的规 定：江南大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和 磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以将学位论文的全部或部分内容编 入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、 汇编学位论文，并且本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。 保密的学位论文在解密后也遵守此规定。 签名：童塞塑导师签名： 日期：加口字年2 月加日 1 1 研究背景 第一章绪论 1 1 1 聚乙烯醇的结构、性能与应用 聚乙烯醇，简称p v a ，外观为白色或微黄色纤维状粉末，是一种人工合成 的水溶性高分子化合物，工业上通常由聚醋酸乙烯酯经皂化制得。 p v a 主要以1 ，3 一二醇键的化学结构形式存在，并含有少量( 约2 ) 的l 。2 二醇键以及微量的其它形式的微结构，可以看作是在交替相隔的碳原子上带有 羟基的多元醇，其水溶液具有良好的稳定性【”。 置睁p 一严严严。啪_ 毗p 斗一j o ho ho h 0 h 6 h6 l c h _ c