（茶学专业论文）茶叶提取物对采后桃果防腐保鲜效果研究.pdf

华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书 i i i f lllf l lrp frl rr i iiif 17 9 9 9 6 2 学位论文 足 如需保密，解密时间 加旺年6 月馋日 是否保密 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发 表或撰写过的研究成果，也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位或证书 而使用过的材料，指导教师对此进行了审定与我一同工作的同志对本研究所做的任 何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意 研究生签名：多艮绍鳓 时闻：如f o 年6 月f 7 日 学位论文使用授权书 本人完全了解华中农业大学关于保存、使用学位论文的规定，即学生必须按照学 校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存提交论文的印刷版和电子版， 并提供日录检索和阅览服务，可以采用影印缩印或扫描等复制手段保存，汇编学位 论文本人同意华中农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全 部或部分内容，同时本人保留在其他媒体发表论文的权力 注：保密学位论文( 印涉及技术秘密商业秘密或申请专利等潜在番要提交保密的论 文) 在解密后适用子本授权书 糊黼叛狄踢础撇名：拓张蘑 签名日期：d 年月f7 r 日 签名日期：五加年f 月学日 注：请将本表直接装订在学位论文的扉页和目录之问 茶叶提取物对采后桃果防腐保鲜效果研究 目录 摘要i a b s t r a c t i i 缩略词表 第一章文献综述1 l 采后桃果保鲜技术研究进展1 1 1 采后桃果的生理生化变化1 1 2 采后桃果防腐保鲜技术3 2 茶叶提取物抑菌保鲜研究进展7 2 1 茶多酚7 2 2 茶皂素。9 3 本课题研究的内容1 1 3 1 水果保鲜试验初步研究1 1 3 2 离体抑菌试验11 3 3 活体抑菌试验1 1 3 4 复合保鲜剂效果的探测1 1 4 本课题研究的目的及意义1 1 第二章茶多酚对蟠桃保鲜效果的初步研究1 3 1 材料与方法1 3 1 1 材料一13 1 2 试验方法1 4 2 结果与分析1 6 2 1 茶多酚对蟠桃硬度的影响1 6 2 2 茶多酚对蟠桃褐变指数的影响1 7 2 3 茶多酚对蟠桃失重率的影响1 7 2 4 茶多酚对蟠桃s s c 的影响1 8 2 5 茶多酚对蟠桃v e 含量的影响1 8 2 6 茶多酚对蟠桃m d a 含量的影响1 9 2 7 茶多酚对蟠桃p p o 活性的影响2 0 3 结论与讨论2 1 第三章茶叶提取物对桃采后致腐真菌的离体( i nv i t r o ) 抑菌试验2 3 l 材料与方法2 3 1 1 材料一2 3 1 2 方法2 5 2 结果与分析2 7 华中农业大学2 0 1 0 届硕士研究生学位论文 2 1 病原菌分离、纯化2 7 2 2 致病菌的形态学鉴定。2 8 2 3 茶叶提取物单剂对桃病原菌菌丝生长的抑制作用。2 8 2 4 茶叶提取物复配对抑制病原菌菌丝生长的增效作用3 0 2 5 添加v c 或者n a c l 对复配剂的影响3 0 2 6m i c 和m f c 的测定结果3 2 2 7 复配剂对菌丝形态的影响3 3 3 结论与讨论3 3 3 1 茶叶提取物单剂对桃病原菌的影响3 3 3 2 茶叶提取物复配对抑制菌丝生长的增效作用及添加剂的增效效果3 3 3 3m i c 和m f c 的测定结果3 4 3 4 复配剂对菌丝形态的影响3 4 附图及说明3 5 第四章茶叶提取物对水果采后致腐真菌的活体( i nv i v o ) 抑菌试验3 7 l 材料和方法3 7 1 1 材料3 7 1 2 方法3 7 1 3 统计方法3 8 2 结果与分析3 8 2 1 茶叶提取物对采后桃褐腐病菌的防治效果3 8 2 2 茶叶提取物对采后桃软腐病菌的防治效果3 9 3 结论与讨论4 1 3 1 茶叶提取物对采后桃褐腐病菌的防治效果4 1 3 2 茶叶提取物对采后桃软腐病菌的防治效果4 1 附图及说明4 2 第五章茶叶提取物处理对采后桃果实p a l 、p p o 、p o d 活性的诱导4 3 l 材料与方法4 3 1 1 材料4 3 1 2 方法4 3 1 3 统计方法4 4 2 结果与分析4 5 2 1 不同处理对采后桃p a l 活性的影响4 5 2 2 不同处理对采后桃p p o 活性的影响4 7 2 3 不同处理对采后桃p o d 活性的影响4 8 3 结论与讨论5 0 3 1 茶叶提取物对采后桃p a l 和p p o 活性诱导5 0 3 2 茶叶提取物对采后桃p o d 活性诱导51 第六章茶叶提取物复合保鲜液效果研究5 3 1 材料方法5 3 1 1 材料5 3 1 2 方法5 3 2 结果与分析5 5 2 1 桃保鲜试验结果5 5 2 2 复合保鲜液对桃呼吸强度的影响5 7 2 3 复合保鲜液对桃干物质量的影响5 7 2 4 复合保鲜液对桃失重率的影响5 8 2 5 复合保鲜液对桃腐烂指数的影响5 9 2 6 复合保鲜液对桃硬度的影响6 0 2 7 复合保鲜液对桃s s c 和t a 含量的影响6 0 2 8 复合保鲜液对桃v c 含量的影响6 1 2 9 复合保鲜液对桃果膜渗透性的影响6 2 2 1 0 复合保鲜液对桃m d a 含量的影响6 3 2 1 1 复合保鲜液对桃p p o 活性的影响6 4 2 1 2 复合保鲜液对桃p a l 活性的影响6 5 3 结论与讨论6 5 参考文献6 7 致谢7 5 作者简介7 6 茶叶提取物对采后桃果防腐保鲜效果研究 摘要 病原菌侵蚀及自身代谢导致的衰老劣变是造成果品腐烂变质的主要原因。本文 以桃为研究试材，以抑制采后桃果病原菌侵蚀，延缓衰老劣变为目的，研究了茶叶 提取物对桃果防腐保鲜效果，并对其保鲜机理进行了初步探讨。主要结论如下： 1 、一定浓度茶多酚能有效抑制蟠桃褐变、失水及可溶性固形物( s s c ) 的消耗， 延缓蟠桃硬度降低与维生素c ( v c ) 的消耗，降低蟠桃丙二醛( m d a ) 的产生，调 节蟠桃多酚氧化酶( p p o ) 的活性，从而延缓蟠桃的衰老变质。 2 、离体抑菌试验以桃褐腐病菌( mf r u c t i c o l a ) 和软腐病菌( 兄s t o l o n i f e ，) 为 供试病原菌，采用生长速率法研究了茶叶提取物a 、b 的离体( i nv i t r o ) 抑菌效果， 结果表明茶叶提取物a 对这两种病原菌的最小抑菌浓度( m i c ) 分别为2 0 0g r 、 6 0 0g r ，e c s o 为1 0 4g l 、7 8g l ；提取物b 对这两种病原菌的m i c 分别为4 0 o g l 、 4 0 0g l ，e c s o 为7 4g l 、1 5g l ；共毒系数判定茶叶提取物a 、b 组合配比无增效 作用，只有相加效果，理想配比组合为3 5 ：4 9 ，按该配比配制的茶叶提取物复配液 能明显诱导m f r u c t i c o l a 和r s t o l o n i f e r 的形态变化。上述结果表明茶叶提取物a 、b 对mf r u c t i c o l a 和r s t o l o n i f e ，均有明显抑菌作用，其抑菌机理为影响病原菌正常生 长。 3 、活体( i nv i v o ) 抑菌试验结果表明茶叶提取物复配剂能推迟m f r u c t i c o l a 对 桃果的浸染，显著减小果实发病率，抑制病菌在果实上的蔓延；该复配剂也能在一 定程度上推迟r s t o l o n i f e r 对桃果的浸染，显著抑制病菌在果实上的蔓延：活体抑菌 试验结果还表明无论是用茶叶提取物复配剂处理健康桃果还是处理接种m f r u c t i c o l a 的患病桃果，均能明显诱导桃果中抗病相关酶苯丙氨酸解氨酶( p a l ) 、多酚氧化酶 ( p p o ) 活性的升高，提高桃果抗病能力，过氧化物酶( p o d ) 活性变化没有呈现 规律性。总的来说，茶叶提取物a ，b 能抑制m f r u c t i c o l a 和r s t o l o n i f e ，对桃果实的 侵蚀，其机理除其对病原菌本身生长有抑制外，还可能与它诱导抗病酶活性，提高 果实自然防御能力有关。 4 、茶叶提取物复配液防腐保鲜试验结果表明该复配液能明显抑制桃果s s c 、可 滴定酸( t a ) 和v c 的消耗；降低桃果贮藏期的呼吸强度，推延第2 次呼吸高峰的 来临；降低桃果膜渗透率和m d a 含量，调节桃果p p o 、p a l 活性。上述研究结果 表明该复配液能维持桃果贮藏期细胞膜的完整性，调节相关抗病酶活性，延缓采后 果实的衰老，从而达到较好保鲜效果。 关键词：桃；茶叶提取物；褐腐病菌；软腐病菌；抑菌作用；防腐保鲜 华中农业大学2 0 1 0 届硕士研究生学位论文 a b s t r a c t t h ep a t h o g e n si n f e c t i o na n do x i d a t i v ea g i n gf o rm e t a b o l i s ma r et h em a i nr e a s o n so f f r u i td e c a y i no r d e rt oi n h i b i tp o s t h a r v e s tp e a c hf r o mp a t h o g e n si n f e c t i o na n do x i d a t i v e a g i n g ，t h ee f f e c to ft e ae x t r a c t s0 1 1p o s t - h a r v e s tp e a c hp r e s e r v a t i o na n di t sm e c h a n i s m w e r ei n v e s t i g a t e d t h em a i nr e s u l t sa r ea sf o l l o w s ： 1 、c e r t a i nc o n c e n t r a t i o no ft e ap o l y p h e n o l s ( t p ) c o u l da p p a r e n t l yr e s t r a i np e a c h e s f r o mb r o w n i n ga n dd e h y d r a t i n g ，d e l a yt h el o s so fs o l u b l es o l i d sc o n t e n t s ( s s c ) ， s i g n i f i c a n t l yp o s t p o n ef r u i ts o f t e n i n ga n dt h e l o s so fv i t a m i nc c ) ，r e d u c et h e p r o d u c t i o no fm a l o n d i a l d e h y d e ( m d a ) a n dr e g u l a t et h ea c t i v i t yo fp o l y p h e n o lo x i d a s e ( p p o ) t h u s ，t pt r e a t m e n tc o u l dd e l a ya g i n ga n dd e c a yo f p o s t h a r v e s tp e a c h 2 、t h ei n h i b i t i o ne f f e c t so ft e ae x t r a c t saa n dbo nm o n i l i n i a f r u c t i c o l aa n dr h i z o p u s s t o l o n i f e ，w e r es t u d i e db yp l a t eg r o w t hr a t em e t h o di nv i t r o t h er e s u l t ss h o w e dt h a tt h e m i n i m a li n h i b i t o r yc o n c e n t r a t i o n s ( m i c ) o ft e ae x t r a c tao nt h ea b o v et w of u n g iw e r e r e s p e c t i v e l y2 0 0e d l 、6 0 0g l ，a n dt h em e d i a ne f f e c t i v ec o n c e n t r a t i o n s ( e c 5 0 ) w e r e 10 4g l 、7 8g l t h em i co ft e ae x t r a c tbo na b o v et w of u n g iw e r er e s p e c t i v e l y 4 0 0 e e l 、4 0 0g l ，a n dt h ee c s ow e r e7 4g l 、1 5g l t h em i x t u r eo f t e ae x t r a c ta a n d bh a do n l ya na d d i t i v ea c t i o nt h r o u g hc o t o x i c i t yc o e f f i c i e n tm e t h o d t h e i rm i x t u r ew i t h ar a t i oo f3 5 ：4 9o fa ：bc o u l ds i g n i f i c a n t l yi n d u c et h em o r p h o l o g i c a lc h a n g e so f m f r u c t i c o l aa n dr s t o l o n i f e ，t h es t u d ys t a t e dt h a tt e ae x t r a c t sa a n dbh a ds i g n i f i c a n t i n h i b i t i o na g a i n s tt h et w of u n g ia n dt h ea n t i f u n g u sm e c h a n i s mm a yb et h a tt h e yc o u l d a f f e c tp a t h o g e n i cf u n g u sg r o w t h 3 、t h ea n t i f u n g u se x p e r i m e n ti nv i v os h o w e dt h a tt e ae x t r a c t sm i x t u r ec o u l dd e l a ym f r u c t i c o l ai n f e c t i o ni n t op e a c h e sa n dr e d u c ep e a c hs i c k n e s sr a t e t h e ya l s oc o u l d p o s t p o n et h ea p p e a r a n c eo fr s t o l o n i f e rt h er e s u l t sa l s os h o w e dt h a tt h em i x t u r ec o u l d e n h a n c et h ea c t i v i t i e so fp h e n y l a l a n i n ea m m o n i a - l y a s eo a l ) a n dp o l y p h e n o l o x i d a s e ( p p o ) a n de n h a n c e dt h ed i s e a s er e s i s t a n c eo fp e a c hf r u i t s t h er e s u l t ss u g g e s t e dt h a tt e a e x t r a c t sm i x t u r ec o u l di n h i b i tt h ei n f e c t i o no fp a t h o g e n i cf u n g ii n t op e a c h e sa n di t s a n t i f u n g u sm e c h a n i s mm i g h tb er e l a t i v et ot h a tt h e yc o u n di n d u c et h ee n h a n c e m e n to f d e f e n s ee n z y m e s 4 、t h ep r e s e r v a t i v ea n df r e s h - k e e p i n ge x p e r i m e n to np e a c h e ss h o w e dt h a tt e a e x t r a c t sm i x t u r ec o u l dr e d u c et h el o s so fs s c ，t i t r a b l ea c i d ( t a ) a n dv c ，d e l a yt h e s e c o n dr e s p i r a t o r yp e a k , d e c r e a s et h er e s p i r a t o r yi n t e n s i t y , r e d u c em e m b r a n ep e r m e a b i l i t y 【。一 i i i 华中农业大学2 0 1 0 届硕士研究生学位论文 i v 第一章文献综述 1 采后桃果保鲜技术研究进展 桃是蔷薇科( r o s a e e a e ) 8 8 属( a m y g d a l u sl i r m ) 的核果类果实，原产于我国黄河上 游1 2 0 0 2 0 0 0 米海拔地带，距今已有4 0 0 0 多年历史( 王祖华和庄恩吉，2 0 0 1 ) 。桃果 果味甘美，色佳汁多，深得人们的喜爱。果肉中含有多种糖类、有机酸、蛋白质、 粗纤维、v c 等丰富的营养物质，被喻为人间鲜果，果中皇后。但桃果因其肉质软、 果皮薄，极易受到机械损伤，再加上成熟期正值高温季节，果实采后极易腐败变质。 1 1 采后桃果的生理生化变化 1 1 1 呼吸强度和乙烯释放量 桃属呼吸跃变型果实，采后始终具有较高的呼吸强度和乙烯释放量，并迅速出 现双呼吸高峰和乙烯释放高峰，这可能是桃不耐贮藏的原因之一( 皮玉珍等，2 0 0 1 ) 。 胡小松等研究发现，常温下绿化9 号桃果在第1 次呼吸高峰前保持良好风味和硬度， 随着第1 次呼吸高峰期的结束，果实开始软化，待第2 次呼吸跃变后，果实风味基 本丧失，果肉组织软化腐烂( 胡小松和丁双阳，1 9 9 3 ) 。 1 1 2 软化 对于桃果来说，采后软化是其腐烂变质的主要原因，它将直接影响桃果感官品 质和抗病能力，并造成商品品质的下降。一般认为：在一些水解酶的作用下，鲜桃 果肉细胞壁多糖被降解或解聚至使桃果采后果肉软化( b r u m m e ，2 0 0 6 ) 。 1 1 3 果实内含物 采后桃果呼吸作用较强，果实内的糖、酸、纤维素和v c 不断被作为呼吸底物分 解消耗。桃果主要含苹果酸，随着采后贮藏期的延长，酸含量逐渐下降：内含物变 化较为复杂的是可溶性固形物及糖类，一方面由于桃果采后消耗自身积累的营养物 质维持生命活动，因此在贮藏期间其含量下降，另一方面由于淀粉被淀粉酶分化为 糖使其含量上升，所以可溶性固形物含量在采后并不一定表现为单一的上升或下降 趋势( 皮玉珍等，2 0 0 1 ) ：此外，果肉内蛋白质的含量也随着贮藏期延长而减少。 华中农业大学2 0 1 0 届硕士研究生学位论文 1 1 4 酶类 采后桃果进行着一系列酶活性的变化，酶活性的变化将影响着桃果的软化，絮 败、褐变及衰老等。目前对酶研究比较多的是与桃果褐变有关的多酚氧化酶；与果 实软化相关的果胶脂酶、多糖半乳糖醛缩酶、纤维素酶等；与衰老相关的过氧化氢 酶、超氧化歧化酶等；与桃果抗病菌有关的苯丙氨酸解氨酶、多酚氧化酶、过氧化 物酶等( 皮玉珍等，2 0 0 1 ) 。 1 1 5 桃果的病变 桃果贮藏过程中，易受微生物浸染造成大量腐烂，这是其难以长期贮藏的原因 之一。造成桃果腐烂的主要病害有褐腐病、软腐病、青霉病、桃红粉病、桃炭疽病 和根霉腐烂病等( 田世平，2 0 0 0 ；边卫东，2 0 0 5 ) 。造成这些危害的病原菌对低温 有较强的忍耐力，主要通过伤口入侵，在贮藏期间发病很快，常造成桃果大量的腐 烂，损失惨重( 张维一和毕阳，1 9 9 6 ) 。 桃褐腐病又名桃菌核病。果实自幼期至成熟期都可受害，果实接近成熟期受害 较严重，最初被感染果实在果实表面产生褐色圆形病斑，若环境适宜，病斑数日内 扩及全果，果肉也随之变褐软腐。褐腐病菌( m o n i l i n i af r u c t i c o l a ) 属于子囊菌亚l - j 链 核盘属，不仅引起桃、李、杏、樱桃等核果类果实褐腐病，还引起苹果、梨等仁果 类果实腐烂。通常有分生孢子萌发，经虫伤、皮孔侵入未成熟果实，但保持休眠， 直到果实成熟时才开始发病；也可通过成熟果实健康表皮侵入发病。在贮运过程中， 病健果接触可传至健果( 应铁进，2 0 0 1 ) 。 桃软腐病是核果类水果如桃、杏、李等水果采后主要的、具有毁灭性的病害， 也是引起苹果、梨、葡萄、草莓等水果腐烂的主要病害之一。症状开始呈现水渍状 圆形小斑，后变褐色，随之在受害病斑中心长出白霉，严重时盖住整个果面，肉眼 可见针头状子实体( 孢子囊) ，开始为白色，继而变成黑色。夏季高温霉菌生长很快， 4 8h 可盖住整个果面。在高温、高湿条件下2 3d 即可使整个果实瓦解，甚至蔓延至 相邻果实( 边卫东，2 0 0 5 ) 。软腐病菌( r h i z o p u ss t o l o n i f e r ) 不能直接穿透寄主的表皮 细胞，只能通过伤口进入植物组织，成熟果实对病原茵极为敏感。病菌菌丝发达， 有匍匐菌丝和假根。孢囊梗丛生，从匍匐丝上长出，顶端形成孢子囊，孢子囊球形， 产生大量的孢囊孢子。孢子囊壁易破裂，散出孢囊孢子。孢囊孢子球形或近球形， 表面有饰纹，通过气流传播。有性生殖形成接合孢子，但接合孢子不常见( 邱强， 2 0 0 4 ) 。 2 茶叶提取物对采后桃果防腐保鲜效果研究 1 2 采后桃果防腐保鲜技术 要对水果进行保鲜贮藏，首先必须了解水果腐烂劣变的机理。水果的腐烂损失 主要来自两个方面( 张维一和毕阳，1 9 9 6 ) ：一方面是来自微生物侵染、昆虫伤害、 机械损伤、物理或化学危害、生理病害等引起的腐烂损失。其中以微生物侵染引起 的损失最为普遍和严重。微生物侵染损失主要是指果实在采收、加工、运输、贮藏、 销售过程中，因病原微生物侵染果实引起的腐烂。另一方面是水果自身代谢所导致 其品质劣变引起的腐烂损失。具体指水果在采前或采后，其自身生命活动，以及外 界不适宜的环境或理化因素造成水果变质、失水、发酵、褐化等生理障碍导致水果 品质劣变而造成的损失。 根据水果腐烂的机理可知，水果保鲜包含两个方面：一是尽量控制采前及采后 微生物的侵蚀；二是想方设法减缓水果的自身代谢。国内外针对这两方面已展开对 桃果保鲜贮藏技术的研究，取得了诸多保鲜方法，具体如下： 1 2 1 调温贮藏技术 1 2 1 1 降温贮藏 降温贮藏又称低温贮藏，是指在0 或略高于水果冰点的适宜低温环境条件下 贮藏水果，以达到抑制微生物的繁殖，并减缓水果代谢和腐败速度的目的，一般认 为在2 左右贮存桃果效果较好( 康明丽和刘坤，2 0 0 8 ) 。冷藏是现代化水果贮藏 的主要方式，它不受自然条件的限制，可在气温较高的季节以及周年进行贮藏，以 保证水果的周年供应，其原因有二：第一、低温延缓水果成熟和衰老，保持其抗性。 温度是影响果实呼吸作用的主要因素，研究表明，在1 条件下贮藏的桃果实呼吸 高峰较l o 下，推迟了4d ( 汪沂等，2 0 0 0 ) 。“明星桃和“大久保”在2 下贮 藏的呼吸高峰明显低于8 的，且分别推迟了l o d 和7d ( 孟雪雁和芩涛，2 0 0 1 ) 。 第二、低温可以有效抑制桃病原菌生长。康明丽等的综述报道表明桃果采后马上在4 以下贮藏，可有效防治桃褐腐和软腐。但在低温环境下桃果容易受到低温伤害， 桃果在1 会遭受冻伤，在0 4 贮藏过久，果实会出现海绵状变化，遭受冷害， 因此低温贮藏一般不宜超过6 周( 康明丽和刘坤，2 0 0 8 ) 。另外，采用冷藏保鲜技术 能耗较高，需要大型的机械设备，一次性投资大，资金回收期长。 1 2 1 2 采后热处理 采后热处理又称为贮前热处理，一般是指用高于果实成熟季节的温度对果实进 行处理的一种保鲜技术，目的在于控制果实病虫害，调节果实生理生化代谢，延缓 果实衰老，延长水果保鲜期等( 王育林等，2 0 0 1 ) 。研究表明，果实采后热处理技 术具有无菌、无残留、无污染等特点。目前尚无学者对热处理技术作过明确、严格 华中农业大学2 0 1 0 届硕士研究生学位论文 的界定。李正国等认为热处理就是在采后以适宜温度( 一般在3 5 c 5 0 c ) 处理水果， 以杀死或抑制病原菌( 李正国等，1 9 9 7 ) 。其主要技术有热水浸渍处理和热水喷淋 处理。其中热水浸渍处理是最简单易行的热处理方式，热水处理对于控制水果的真 菌性病害相当有效，并且很多水果可耐受5 0 - - 6 0 c 的水温长达l o m i n 之久 ( b a r k a i g o l a na n dp h i l i p s ，1 9 9 1 ) ：热水喷淋技术是因为热处理在商业上的应用而 发展起来的，热水喷淋机作为水果分拣线上的一个组成部分，能起到清洗和消毒的 双重作用。采后热处理可抑制桃果发绵，减少腐烂，增加耐藏性。韩涛等报道桃果 实经适宜的热激处理后，再进行冷藏在一定程度上可以保持果实的硬度，降低酸度， 增加耐藏性，其中以3 7 处理2h 的效果为佳( 韩涛和白景云，1 9 9 2 ) 。桃果采后 热处理虽可有效地控制腐烂，保持果实硬度，但所处理的产品易发生伤害是热处理 使用中的严重限制因素。 1 2 1 3 间歇升温 桃果实对温度较为敏感，低温贮藏易造成冷害，桃间歇升温可减轻或避免低温 伤害的发生，并促进了乙酸等物质的挥发，抑制了呼吸作用( 陈巧林，2 0 0 8 ) 。黄 万荣等对大久保桃果实在2 - - l 1 冷藏期f 司( 3 0d ) ，定期将其放回室温下( 2 5 - 2 8 ) 1 2 h 、2 4 h 、3 6h 进行间歇升温处理，结果表明，对照及升温1 2 h 的果实，虽然在贮藏 结束时及货架期保持了较高的硬度，但其冷害较严重；升温2 4 、3 6h 的果实硬度虽 然下降，但几乎没有产生冷害，且风味较浓，保持着较高的商品价值( 黄万荣等， 1 9 9 6 ) 。王淑琴等认为采用间歇升温可有效防止冷害发生，试验认为每1 4d 升温1 次， 能够较好的保持果实的风味与品质( 王淑琴等，2 0 0 3 ) 。邵兴锋等也发现冷藏期间 间歇升温可有效防止桃果冷害的发生( 邵兴锋等，2 0 0 5 ) 。 1 2 2 气调贮藏技术 目前，气调贮藏是当代贮藏方式中被认为是效果最好的贮藏技术之一。气调贮 藏就是利用调整环境气体成分延长食品贮藏寿命和货架寿命。较常见的是指采用低 温、低氧和较高浓度的二氧化碳，使水果呼吸作用降低，营养物质消耗减少，抑制 贮藏物的代谢作用和微生物的活动，同时抑制乙烯的产生和其生理作用，从而使后 熟衰老过程减缓，以使水果保持较好的品质并延长贮藏期。气调贮藏技术大致可分 为两类，即人工气调( c o n t r o l l e da t m o s p h e r e ，c a ) 和自发气调( m o d i f i e da t m o s p h e r e ， m a ) 两种( n a n o sa n dr o m a n ij ，1 9 9 4 ) 。c a 贮藏指人为调节环境中气体成分组成 的冷藏方法，一般是降低环境中的0 2 浓度，提高c 0 2 浓度，保持适于所贮水果的最 佳气体组成，这就是我们通常所说的气调库贮藏。m a 贮藏是利用薄膜包装的简易 c a 贮藏，即利用透湿透气性较高的薄膜包装水果，在包装容器内形成比较适宜的气 体组成，以达到保鲜目的。 4 茶叶提取物对采后桃果防腐保鲜效果研究 自1 9 1 8 年k i d d 等首次进行的经典果实气调贮藏实验便拉开了气调贮藏保鲜水果 的帷幕。据报道美国和以色列的柑橘总产量5 0 以上才有气调贮藏；新西兰的苹果 和猕猴桃气调保鲜量为总产量的3 0 以上( 权伍荣等，2 0 0 7 ) 。w r i g h t 研究了气调 保鲜对f a ye l b e r t a 桃切片的品质与类胡萝卜素含量的影响，结果表明与1 2 c 0 2 处理 方法相比，2 0 2 、2 0 2 + 1 2 c 0 2 气体环境下贮藏的桃切片b 胡萝卜素含量更高， 其货架期更长( w r i g h t ，1 9 9 7 ) 。张培正等气调组合实验证明，2 - - - 5 0 2 + 2 5 c 0 2 可以明显抑制果肉衰败、褐变，可以显著延缓果肉软化、v c 和t a 消耗等，以延长货 架寿命( 张培正等，2 0 0 2 ) 。蔡晓东等也研究探讨了自发气调贮藏对水蜜桃采后生 理及相关酶活性的影响等等( 蔡晓东等，2 0 0 6 ) 。但是，k a d e r 等研究发现，核果果 实长期处于高c 0 2 和低0 2 条件下会产生一些不良影响，如不能正常成熟，果肉褐变 等( k a d e r ，1 9 8 2 ) 。 1 2 3 减压贮藏技术 减压贮藏又名低压贮藏，指将水果产品贮藏在一个密闭和冷却的容器内，用真 空泵抽出部分空气，使内部气压降到一定程度，一般降至t j l 1 0 大气压或更低，并在 贮藏期间保持恒定的低压，其压力大小根据物品特性及贮温而定( 马长伟和曾名勇， 2 0 0 4 ) 。当贮藏室中达到所要求的低压时，新鲜空气不断通过压力调节器和加湿器， 使空气的相对湿度接近饱和后进入贮藏室。因此，减压贮藏能够降低水果呼吸强度， 并抑制乙烯的生物合成；同时，低压可推迟叶绿素的分解，抑制类胡罗卜素和番茄 红素的合成，减缓淀粉的水解，从而延缓水果的成熟与衰老。陈文等认为减压贮藏 可以显著地降低水蜜桃贮藏期的呼吸强度，减少v c 损失，有利于保持果实含水量、 硬度和可溶性总糖，显著地延缓果实褐变，其较佳压力为5 0 6 0k p a ( 陈文等，2 0 0 4 ) 。 常军等研究表明：青州蜜桃减压贮藏能有效维持超氧化物歧化酶( s o d ) 、过氧化 氢酶( c a t ) 活性；能有效抑锘l j p p o 活性；延缓了2 次呼吸高峰近1 4d ，极大地抑制 了第2 次呼吸高峰的峰值( 常军等，2 0 0 5 ) 。李文香等对无锡水蜜桃进行减压贮藏保 鲜试验表明，在减压条件下桃果各项生理生化指标明显优于常压冷藏( 李文香等， 2 0 0 5 ) 。此外，由于减压保鲜可形成超低0 2 环境，可抑制微生物的生长发育和孢子 的形成，因而减轻某些微生物浸染。但是，调压贮藏在市场系统运转时，水果开箱 后就处于常态下，调压系统无济于事。 华中农业大学2 0 1 0 届硕士研究生学位论文 1 2 4 钙处理 钙是植物组织的重要组成部分，作为植物体内激素和环境信号传导的第二信使， 对植物组织的结构和功能具有重要的调节作用，能延缓其衰老过程。钙处理一方面 能降低桃的呼吸作用和乙烯的合成，减少底物消耗，提高桃果贮藏品质。李正国等 以白风水蜜桃为材料，用2 c a c h 浸果7m i n ，研究冷藏条件下钙处理对果实成熟和 软化过程的影响，结果表明钙处理果实能推迟第2 次呼吸高峰的来临，且降低两次的 呼吸高峰的强度( 李正国等，2 0 0 0 ) 。据刘坤综述报道采前1 个月对大久保树干注射 0 4 氯化钙可推迟成熟8 d ，果实耐贮性也明显提高( 刘坤，2 0 0 1 ) 。另一方面钙能 维持细胞膜结构和功能的完整性，抑制组织内物质的外渗，从而也推迟果实的软化 过程。据肖红梅等报道，用钙液浸泡处理黄肉桃，不仅能抑制桃果腐烂，还能延缓 桃果软化变质( 肖红梅和王薛修，1 9 9 6 ) 。 1 2 5 保鲜剂 保鲜剂是指在采后贮存和运输期间，能够防腐杀菌，延缓植物组织和器官衰老， 保持其原有品质和特性的物质总称。保鲜剂的主要功能为延缓衰老劣变和杀菌防 腐。与其它冷藏保鲜设施相比，水果保鲜剂具有使用方便，能较完整地保留产品的 营养成分和风味特征，且不耗能的特点而被广泛使用。目前我国使用的水果保鲜剂 可分为两大类，即化学合成和生物源水果保鲜剂。 化学保鲜是利用一些化学药剂涂抹或喷施在果蔬表面，或置于果蔬贮藏室中释 放出气体，以达到抑制或杀死果蔬表面、内部和环境中的微生物，以及调节环境中 气体成分等，从而实现果蔬的保鲜，延长水果的贮存期限( 邹东云等，2 0 0 6 ) 。长 期以来，化学保鲜剂在控制采后水果腐烂和延缓采后水果衰老方面发挥着重要作 用。桃果上常用的化学防腐保鲜剂有扑海因、多菌灵、特克多、苯菌灵、二氧化硫 等( 张华云等，2 0 0 0 ) 。刘仲栋研究发现桃、李、樱桃在采前、采后喷施扑海因或 苯来特可降低采后由褐腐病菌和灰霉病菌引起的腐烂，其中扑海因效果最佳，但主 要缺点是易使病菌产生抗药性，并具有一定毒性( 刘仲栋，2 0 0 5 ) 。相对于冷藏、 气调、辐射处理和生物技术等方法，化学保鲜措施具有设备投资小、节能、使用成 本低、简便易行等特点。但是，化学杀菌剂的长期和大量使用，会严重污染环境， 会损害人体健康：高频率地使用单一种类的杀菌剂会使病原菌产生抗药性问题，使 杀菌剂的防治效果大大降低。随着病原菌抗性的增强和人们生活质量的提高，化学 保鲜剂的残留等问题越来越引起人们的重视。在全球提倡绿色化的今天，生物源保 鲜剂因没有化学防腐保鲜剂所带来的环境污染、农药残留及抗药性等问题，并且具 6 茶叶提取物对采后桃果防腐保鲜效果研究 有贮藏条件易控制、处理目标明确等优点而日益受到人们的关注，因此开发安全、 环保的生物源保鲜剂，已成为国内外保鲜剂开发研究的方向和热点。 早在1 9 5 9 年a r k 等就报道了大蒜的提取物对引起桃采后腐烂的褐腐病菌 ( m o n i l i n i a 夕u c t i c o l a ) 有明显的抑制作用( 浙江农业大学主编，1 9 6 5 ) 。国外已经开 发出植酸( p a ) 天然保鲜剂，雪鲜果蔬保鲜剂，森柏保鲜剂等几种天然水果保鲜 剂( 杜传来等，2 0 0 4 ) 。我国对天然防腐保鲜剂的研究起步较晚，应用于桃果防 腐保鲜的材料主要有壳聚糖，虎杖，厚朴，松萝等。关文强等报道，丁香精油对葡 萄、冬枣、桃、蒜苔等果蔬采后主要病原菌具有良好的抑制效果( 关文强和李淑芬， 2 0 0 5 ) 。周春华等报道了壳聚糖能够防治灰霉等病菌引起的水果采后腐烂；并且能 够延长苹果、桃、梨、柑橘等果实贮藏期( 周春华和胡西琴，2 0 0 6 ) 。李美霞用 虎杖、厚朴、松萝对桃进行抑菌实验表明，这三种植物提取物在一定程度上均能抑 制桃果实采后褐腐病菌对其侵染，延缓果实腐烂，并随提取物浓度逐渐升高抑制效 果越明显( 李美霞等，2 0 0 4 ) 。张莉研究也表明厚朴提取物也能推迟桃果实褐腐 病的发生，并且有利于延缓果实衰老，延缓果实褐变及降低褐变程度( 张莉，2 0 0 7 ) 。 1 2 6 其他防腐保鲜技术 除以上技术外，还有辐射贮藏技术、静电场处理技术、磁化处理技术、生物保 鲜技术、运用远红外，超声波等技术等，但是以上技术需要的设备先进，耗资大， 目前还无法在桃果贮藏界普及。 2 茶叶提取物抑菌保鲜研究进展 我国是茶叶的生产与贸易大国，茶叶种植面积2 0 0 8 年达至0 1 6 6 6 7 万h m 2 ，居世 界第一( 张家峰，2 0 0 9 ) 。2 0 0 8 年我国茶叶总产量为1 2 4 万吨，其中除9 0 万吨( 7 2 ) 满足内销，2 9 7 万吨( 2 4 ) 出口外，还有大约4 的库存需要用于其它用途。另外， 在茶叶的生产过程中，会产生大约2 0 左右的低档茶叶和下脚料( 王瑜，2 0 0 9 ) 。因 此开发茶叶新用途，开展茶叶综合利用，尤其是利用积压库存的下脚茶和低档茶及 其提取物质来生产附加值高的精细化学品，是一项意义重大的研究课题。茶叶中很 多有效成分具有抑菌，保鲜的功能，其中关于茶多酚和茶皂素的研究较多。 2 1 茶多酚 2 1 1 茶多酚的组分、性质及功能活性研究 2 1 1 1 茶多酚组分与性质 茶多酚是茶叶中的一种重要提取物质，在茶叶中含量约为1 5 3 0 ，是一种纯 7 低，以酯型儿茶素的抗菌效果最好( 梁文红，2 0 0 4 ) 。同时茶多酚还起化学益生素 的作用，可抑制有害菌增殖的同时促进有益菌菌