还原糖测定.doc

4.2 总糖（以葡萄糖计）4.2.1 直接滴定法4.2.1.1 原理利用费林溶液与还原糖共沸，生成氧化亚铜沉淀的反应，以次甲基蓝为指示液，以样品或经水解后的样品滴定煮沸的费林溶液，达到终点时，稍微过量的还原糖将蓝色的次甲基蓝还原为无色，以示终点。根据样品消耗量求得总糖或还原糖的含量。4.2.1.2 试剂和材料4.2.1.2.1 盐酸溶液（11）。4.2.1.2.2 氢氧化钠溶液：200 gL。5.2.1.2.3 标准葡萄糖溶液 2.5 gL：精确称取 2.5g（称准至0.0001g）在105110烘箱内烘干3h并在干燥器中冷却的葡萄糖，用水溶解并定容至1 000 mL。4.2.1.2.4 次甲基蓝指示液 10gL：称取 1.0 g次甲基蓝，溶解于水中，稀释至 100mL。4.2.1.2.5 费林溶液a) 配制：按GB/T 603配制。b) 标定预备试验：吸取费林溶液、 各 5.00 mL于 250 mL三角瓶中，加 50 mL水，摇匀，在电炉上加热至沸，在沸腾状态下用制备好的葡萄糖标准溶液滴定，当溶液的蓝色将消失呈红色时，加2滴次甲基蓝指示液，继续滴至蓝色消失，记录消耗的葡萄糖标准溶液的体积。c) 正式试验：吸取费林溶液、各 5.00 mL于 250 mL三角瓶中，加 50 mL水和比预备试验少 1 mL的葡萄糖标准溶液，加热至沸，并保持 2 min，加 2滴次甲基蓝指示液，在沸腾状态下于 1 min内用葡萄糖标准溶液滴至终点，记录消耗的葡萄糖标准溶液的总体积。d）计算 式中： F费林溶液、各 5 mL相当于葡萄糖的克数，g；m称取葡萄糖的质量，g；V消耗葡萄糖标准溶液的总体积，mL。4.2.1.3 试样的制备4.2.1.3.1 测总糖用试样：准确吸取一定量的样品（V1）于100mL容量瓶中，使之所含总糖量为 0.20.4 g，加 5 mL盐酸溶液（11）.加水至 20 mL，摇匀。于 681水浴上水解 15 min，取出，冷却。用200 gL氢氧化钠溶液中和至中性，调温至 20，加水定容至刻度（V2）。5.2.1.3.2 测还原糖用试样：准确吸取一定量的样品（V1）于 100 mL容量瓶中，使之所含还原糖量为 0.20.4g，加水定容至刻度。4.2.1.4 分析步骤以试样代替葡萄糖标准溶液，按4.2.1.2.5b同样操作，记录消耗试样的体积（V3），结果按式（4）计算。测定干葡萄酒样品按4.2.1.2.5b操作时，正式滴定需用葡萄糖标准溶液滴定至终点。结果按式（5）计算。4.2.1.5 结果计算 式中：X总糖或还原糖的含量，gL；F费林溶液、各 5 mL相当于葡萄糖的克数，g；V1吸取的样品体积，mL；V2样品稀释后或水解定容的体积，mL；V3消耗试样的体积，mL；G葡萄糖标准溶液的准确浓度，gmL；V消耗葡萄糖标准溶液的体积，mL。所得结果应表示至一位小数。4.2.1.6精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的2 。费林甲液：硫酸铜35.0 g，1%次甲基兰5 mL，定容至1 000 mL。费林乙液：氢氧化钠126.4 g，酒石酸甲钠117.0 g，亚铁氰化钾9.4 g，定容到1 000 mL。1.空白试验：取费林林甲乙液各5 mL于250 mL三角瓶中加水10 mL，并预先加入20 mL 0.1%标葡萄糖溶液，混合后于电炉上加热，使溶液在2 min 内沸腾，以每分钟20滴的速度滴定至兰色刚好消失，记录体积 。 2.样品滴定：取费林试液各5 mL，加入样品及适量0.