（分析化学专业论文）含酚配体的合成及其在近生理条件下对锌离子的识别.pdf

硕士学位论文摘要 摘要 本文研究合成了一种新型含酚基团的锌离子荧光探针2 ，6 - 二 【( 2 羟苯基) ( 2 羟乙基) 氨基】甲基) 4 甲基苯酚( l ) ，用傅立叶红外光谱 ( f 1 1 r ) ，电喷雾离子化质谱( e s i m s ) 春d l 核磁共振波谱( 1 hn m r ) 对化合 物的结构进行了表征。采用紫外可见吸收光谱法( u v - v i s ) 和荧光光谱 法研究了配体( l ) 在近生理条件下对z n 2 + 的识别性质。 ( 1 ) 配体( l ) 的合成 实验采用自制的2 ，6 - - - 氯甲基对甲酚和还原席夫碱2 - 【( 2 羟甲基) 氨基】甲基】苯酚在弱碱性条件下反应，产物采用溶剂萃取法和硅胶 柱层析法分离纯化得到了配体( l ) 。采用f t l r ，e s i m s 和1 hn m r 确 定了配体( l ) 的结构。 ( 2 ) 在近生理条件下研究了p h 、温度对配体( l ) 和l z n 2 + 配合物 的紫外吸收光谱和荧光光谱的影响。 在较宽的p h 范围内配体( l ) 的紫外吸收光谱几乎没有改变。而在 碱性条件下l 窈2 + 配合物的紫外吸收光谱的最大吸收波长红移。温度 对配体( l ) 和l _ z n 2 + 配合物的紫外吸收光谱没有影响。 微量配体( l ) 与毫摩尔的z n 2 + 配位后诱导荧光增强了近2 5 倍。温 度和p h 对l z n 2 + 配合物的荧光光谱都有影响。采用j o b 法确定了配 体( l ) 和z n 2 + 的配合比为l ：2 。 ( 3 ) 溶剂效应对配体( l ) 和l - z r l 2 + 配合物的荧光影响显著。实验表 明：配体( l ) 在极性质子性溶剂中比在极性非质子性溶剂中对z n 2 + 的 识别更灵敏。 ( 4 ) 采用荧光光谱法研究了配体( l ) 对1 2 种金属离子的选择性识 别能力。实验表明：在近生理条件下配体( l ) 对z n 2 + 的选择性最好。 关键词荧光探针，苯酚，锌离子 硕士学位论文a b s t r a c t a b s t r a c t an e wm u l t i d e n t a t e p h e n o l c o n t a i n i n g f l u o r e s c e n t l i g a n d 2 ，6 一b i s ( 2 一h y d r o x y b e n z y l ) ( 2 一h y d r o x y e t h y l ) a m i n o m e t h y l 一4 一m e t h y l p h e n o l ( l ) a sap r o b ef o rz i n ci o nw a ss y n t h e s i z e da n dc h a r a c t e r i z e db yf t i r e s i m sa n d1 hn 瓜u v v i sa n df l u o r e s c e n c es p e c t r aw e r eu s e dt o s t u d yt h er e s p o n s eo f lt o w a r d sz 1 、s y n t h e s i so fl i g a n dl l i g a n dlw a ss y n t h e s i z e db y2 ，6 - b i s ( h y d r o x y m e t h y l 胁c r e s o la n d 2 一【( 2 一h y d r o x y e t h y l a m i n o ) m e t h y l 一p h e n o l ，t h e np u r i f i e db y s o l v e n t e x t r a c t i o na n dc o l u m nc h r o m a t o g r a p h y c o m p o u n d sw e r ec h a r a c t e r i z e d b yf t i & e s i m sa n d1 hn m r 2 1n l ei n f l u e n c eo ft e m p e r a t u r ea n dp nt o w a r d su v j v i sa n d f l u o r e s c e n c es p e c t r ao f la n dl z n ”c o m p l e xh a db e e ns t u d i e d u p o na d d i t i o no fz n z + i n t ot h els o l u t i o n ，t h e r ew a sag r a d u a l d e c r e a s eo fa b s o r b a n c e ，a n dt h em a x i m u ma b s o r b a n c ew a v e l e n g t h r e d s h i f t e d t h e r ew a sh a r d l ya b s o r b a l i c es p e c t r ac h a n g eo flw h e nt h e p hc h a n g e df r o m2t o1 2 ，b u tt h em a x i m u ma b s o r b a n c ew a v e l e n g t ho f l 2 + c o m p l e xr e d - s h i f t e dw h e nt h es o l u t i o nb e c a m ea l k a l e s c e n t t h e a b s o r b a n c es p e c t r ao fla n dl - z n z + c o m p l e xm a k e dn od i f f e r e n c ew h e n t h et e m p e r a t u r eo fs o l u t i o nc h a n g e d ls h o w e dz n 2 + c h e l a t i o n e n h a n c e df l u o r e s c e n c ep r o p e r t yi na q u e o u s m e t h a n o ls o l u t i o nu n d e rp s e u d o b i o l o g j i c a lc o n d i t i o n s t h ef l u o r e s c e n c e i n t e n s i t yo flw a si n c r e a s e db ya b o u t2 5 0 u p o nt h ea d d i t i 0 1 1o fa m i c r o m o l a rr a g eo fz + as t o i c h i o m e t r yo fl ：2f o rt h ef o r m e dc o m p l e x o fla n dz n ”w a sd e t e r m i n e db yj o b sm e t h o df r o mt h eo b t a i n e d s p e c t r o s c o p i cd a t a t e m p e r a t u r ea n dp rw e r eo fi n f l u e n c e t ot h e f l u o r e s c e n c es p e c t r ao f t h el z n z + c o m p l e x 3 、t h ef l u o r e s c e n tr e s p o n s eo flt o w a r dz + w a sm o r es e n s i t i v ei n p o l a rp r o t i cs o l v e n tt h a ni np o l a ra p r o t i cs o l v e n t 4 、ah i g hs e l e c t i v i t yf o rz 一+ o v e ro t h e rt e s t e dm e t a li o n sw a s o b s e r v e db yf l u o r e s c e n c es p e c t r a k e yw o r d sf l u o r e s c e n c ep r o b e ，p h e n o l ，z i n ci o n 原创性声明 本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究 工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢 的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不 包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我 共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。 作者签名： 关于学位论文使用授权说明 本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校 有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位 论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论 文；学校可根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文。 作者签名：导师签名日期：年一月一日 硕士学位论文 第一章绪论 1 i 概述 第一章绪论 锌位于元素周期表d s 区i i b 族，价层电子构型为( n - 1 ) d 1 0 璐2 ，由于( n - 1 ) d 电 子未参与成键，故锌元素的性质与典型过渡元素有较大差别，如锌离子无色，氧 化数主要为+ 2 ，金属键较弱而硬度，熔点较低等。由于锌离子具有1 8 电子构型 外壳，其极化能力和变形性较强，能与许多配体( 如：n h 3 ，c n ，o h 等) 形成 较稳定的配合物。 锌是人体内含量仅次于铁的金属元素。据研究表明，锌在许多生理、生化过 程中发挥着极为重要的作用，例如：锌离子是组成三百多种生物酶活性催化中心 的重要金属离子之一；它可作为金属蛋白酶的结构因子或转录因子；可以和许多 调控酶相互作用，作为第二信使触发或阻断诸如细胞凋亡等重要生理过程；具有 调控大量离子通道的能力，参与神经传导的过程；同时，锌离子在中枢神经系统 ( c n s ) 中还扮演着非常重要的角色【l l 。新近研究还表明，锌离子的浓度大小与 多种疾病的发生紧密相关【2 l 。因此，若能实时跟踪、监测生物体中的锌离子，就 有可能使人们在细胞层次或者组织层次上进行锌离子的生理、生化行为的研究。 这对揭开生物体系中锌离子与生物体内许多重要生理、生化功能之间的关系之谜 具有极其重要的科学价值。 在各种探测锌离子的方法中，光分析方法具有许多优势，尤其是荧光检测以 其高灵敏度和高选择性的特点而得到了广泛应用。通过与配体相互作用前后的荧 光信号变化进行实时跟踪与监测生物体系中的锌离子，已经成为国内外化学和分 子生物学家们关注的热点。美国n i h 、n s f 以及日本文部科学省等将该问题作 为重大跨学科项目进行研究。 在锌离子的荧光检测中，最关键的是荧光选择性配体的设计。目前报道的荧 光选择性配体的基本结构可分为：发光团一桥联基团一离子接受基团三部分( 如 图1 1 所示) ，其设计大多基于光致电荷迁移( p c t ) 和电子迁移( p e t ) 两种荧 光机理。也有将两种机理结合起来设计的荧光配体。但无论基于何种机理，荧光 配体中的发光团和离子接受基团的选择均极为重要。至今，喹啉类中的t s q 作 为发光团已经被科学家广泛应用于神经科学实验，日本k i m u r a 小组的c y c l e n 系 列，日本n a g a n o 小组的z n a c f 、z n a f 系列，美国l i p p e d 小组的z i n p y r 系列， 以及一些新兴的基于生物配体( 如锌指蛋白、碳酸酐酶等) 的荧光探针也相继被 报道。但这些探针在检测灵敏度，应对复杂的生理环境等许多方面还都存在着不 硕士学位论文 第一章绪论 同程度的不足，研究新的具有更高荧光选择性和灵敏度且可以定量检测锌离子的 探针仍是项极具挑战性但十分重要的研究工作。 因此，在国内外现有研究的基础上，本研究拟设计、合成对游离锌离子具有 荧光选择性识别作用的配体，为标记和跟踪细胞及组织层次的锌离子行为打下孥 实的化学基础，进而使用已有的和新开发的探针研究锌离子在各种神经细胞及神 经组织中的动态分布，为揭示神经退行性疾病与锌离子的关系打下基础。 s i g n a l ：f l u o r e s c e n c eq u e r w h t n go r e n h a n c e r n e n tm i d o fc o , o u rc h a n g e e 8 u b s t r a t e s i g n a l t l n gb i n d i n gs i 驴柚h 叼s u l m n rb i n d i n g s u b u n l tiuhnit0bl聃雏 图l l 荧光选择性配体及其对离子识别的工作原理示意图 f i 晷卜ls k e t c hd r a w i n go f i o n - s e l e c t i v ef l u o r e s c e n c el i g a n da n di t sw o r k i n gp r o c e s s 1 2 锌与人体生理活动的关系 1 2 1 锌与大脑 与其他器官相比，大脑中含有大量的锌。估计脑细胞中锌的平均浓度约为 1 5 0l a n o l l ，约为人体中锌平均含量的l o 倍。研究显示，锌离子主要通过锌转 运蛋白从细胞外被转运到神经元和神经胶质细胞中；也可被转运到多种细胞器内 来调节生物功能。在衰老的大脑中，锌的这些功能均减退。例如锌有利于脑组织 中的相关转录因子【激活蛋白r a p 1 ) 、核因子k b ( n f k b ) 、特异性蛋白1 ( s p 1 ) 】 的d n a 结合活性，也参与抗氧化反应，但在缺锌的c 6 大鼠的胶质细胞中，a p 1 和n f k b 的结合活性下降，同样的现象在衰老的大鼠的海马也能见到。 在认知能力形成过程中，锌缺乏引起的症状表现在注意力、活动度、神经心 理行为和运动发育等方面。行为方面的改变，特别是活性和反应性下降，锌调节 系统能够对锌供给状况提供灵敏的指示。快速生长期( 如妊娠期和婴儿发育期) 对锌缺乏很敏感，可产生一些类似蛋白质营养不良的反应。动物实验证明，在出 生6 2 天内的小鼠，锌缺乏会对其记忆产生重要的影响。在青春期伴有锌缺乏的 恒河猴，其随意运动能力下降、视觉注意力不集中、短期记忆差【3 j 。 2 硕士学位论文第一章绪论 1 2 2 锌与免疫系统 锌缺乏可严重影响b 淋巴细胞在骨髓中的发育。研究表明，缺锌使小鼠骨 髓细胞( 含发育中的淋巴细胞) 数量显著下降。中度、严重缺锌使年轻和成年小 鼠骨髓b 2 2 0 + 的有核细胞( 骨髓b 系统的所有细胞) 的百分比分别降低4 3 和9 l 【4 l 。入与动物的自然杀伤细胞的数量也与血清锌浓度呈正相关，锌缺乏时其活 性受抑制。锌缺乏对单核细胞和巨噬细胞的功能也有影响，患肠病性肌皮炎病人 的单核细胞趋化能力减弱，缺锌鼠的单核细胞杀伤寄生虫能力降低，在培养液中 加锌后这两种改变均可得到恢复。在动物缺锌的情况下，还发现巨噬细胞对念珠 菌的吞噬作用减弱睁j 。 1 2 3 锌与骨生长代谢 锌离子对矿物质代谢的作用一直是学者们研究的热点。锌是多种酶( 如碱性 磷酸酶、碳酸酐酶等) 的辅助因子，作为骨基质的成分参与骨代谢。体内广泛存 在的锌指蛋白结构中，锌也是重要的结构辅助因子研究表明，锌抑制体外破骨 细胞的分化，低锌组动物的下颌骨骨密度降低，缺锌组动物的下颌骨骨皮质和骨 小梁的密度均降低。实验还表明，锌缺失和锌过量都会影响骨生长和正常代谢。 临床研究表明，男性骨质疏松患者血浆中锌离子浓度低于无骨质疏松的男性。血 浆中低锌浓度患者的股骨、髋部和腕部远端的骨密度远低于高血浆锌组【6 l 。 1 2 4 其他作用 锌参与肝脏及体内的a 还原酶的组成，该酶在主宰视觉物一视黄醛合成 和变构中发挥着关健作用，所以，锌缺乏时将会影响视力和暗适应能力。味觉素 是唾液内一种含两个锌离子的唾液蛋白，对口腔粘膜上皮细胞的结构、功能及代 谢是一个重要的营养因素。缺锌时口腔粘膜上皮细胞增生及角化不全，易于脱落， 掩盖和阻塞舌头味蕾小孔，使食物难以接触味蕾而影响味觉，从而影响食欲。锌 还能增强创伤组织的再生能力，从而促进伤口愈合，治愈皮炎。 1 3 生物体系中锌离子荧光探针研究进展 人们先后研究和建立了多种方法用以检测锌离子，如分光光度法 7 1 ，荧光探 针法，电离质谱法嗍和核磁共振法等。其中荧光探针法是对锌离子进行定性、定 量分析的重要方法，它不仅简便实用，而且在灵敏度、选择性、时间分辨等方面 硕七学位论文第一章绪论 均有突出优点。所应用的探针必须具备以下基本条件：( 1 ) 稳定性高；( 2 ) 与锌 离子具有较强的配合能力；( 3 ) 对锌离子有高选择性，不受或很少受其它金属离 子的干扰；( 4 ) 对锌离子有高的灵敏度等。应用于生物体系中的锌离子探针还应 具有合适的荧光信号性质：( 1 ) 强荧光效率；( 2 ) 激发波长大于3 4 0n m ，以减少 紫外光对细胞造成的伤害；( 3 ) 与锌离子配合后的发射波长比配合前有大于8 0 l l n l 的s t o c k s 位移，以消除激发光对荧光测定的干扰等1 9 1 。目前报道的生物应用 锌离子荧光探针按作用机理可分为以下几类： 1 3 1 基于光诱导电子转移机理的荧光探针 光诱导电子转移( p h o t o i n d u c e de l e c t r o nt r a n s f e r ，p e t ) 是指发光体( 电子受体 或给体) 受到光激发后，与接受体( 电子给体或受体) 之间的电子转移反应【1 0 1 。这 种电子转移反应导致发光体的荧光淬灭，但当受体结合了阳离子后，使受体丧失 了提供或接受电子的能力，从而使发光体的荧光恢复。在这类探针中，荧光团一 般作为电子受体，而阳离子接受体( 如：n h 3 ) 作为电子给体。 6 - 甲氧基8 对甲苯磺酰胺喹啉( t s q ，1 ) l i l 】是第一例用于大脑、心脏及其它 组织切片中搿+ 浓度检测的荧光探针。t s q 可用于在生理条件下较高浓度的c a 2 + 和m 9 2 + 存在时z n 2 + 的检测。t s q z n 勺能以1 ：1 或2 ：1 的形式络合，不同的介质中， 其荧光强度变化较大。为进一步了解t s q 类荧光探针的化学结构，o h a l l o r a n d 、 组研究了2 甲基岳甲氧基8 对甲苯磺酰胺喹啉( 2 ) 【1 2 1 ，结果表明，在中性d m s o 水( 5 0 5 0 ) 的混合溶液中，2 - z n 2 + 的络合形式主要是2 ：l 。其中，脱质子的酰亚胺的 氮原子及喹啉环上的氮原子与z n 2 + 配位。 m e 0m e 0 6 - 甲氧基- 8 _ 对甲苯磺酰胺喹啉( t s q ，1 )2 - 甲基岳甲氧基8 耐甲苯磺酰胺喹椒2 ) c z a m i k d , 组也对基于光诱导电子转移机理的锌离子荧光探针进行了广泛地 研究。在乙腈中，配体3 【b 】与金属离子络合后减d , y 与葸环连接的胺的电子密度， 从而降低了其淬灭葸荧光的能力，使荧光逐渐恢复。后来，该小组又发展了大环 4 社 叭社州 硕士学位论文 第一章绪论 体系配体4 【1 4 1 ，在p h = l o 的水溶液中，配体4 结合了矗2 + 和c d 2 + 后，荧光分别增强 1 4 4 倍和9 倍。但是，苄基氮原子的质子化作用和金属络合作用都会抑制荧光淬 灭过程。p h = 7 时，双质子化的配体4 0 1 _ 2 ) 的荧光强度比p h = 1 2 时未质子化的配 体4 ( n - 2 ) 增大1 2 0 倍，荧光滴定发现，只有在p h = 1 2 的缓冲溶液中才不会有质子 与z n 2 + 发生竞争。所以，这种探针不适合在中性生物体系条件下应用。 图1 - 2 c z a m i k 小组研究的基于光诱导电子转移机理的锌离子荧光探针。 ( 左图：g 沐3 ；右图：9 9 4 ) f i g i - 2f l u o r w , e n c ep r o b ef o rz i n ci o nb a s e d0 1 1p e tm e c h a n i s mf r o mc z a m i kg r o u p ( l e f t , l i g a n d3 ；r i g h t , l i g a r a4 ) n a g a n o b 组将= - 2 一吡啶甲基胺( d p a ) 引入荧光素，合成了6 - 羟基9 - 5 - 0 q ，( n ： n ，二( 2 1 耽啶甲基) - 2 胺乙基) ) 】苯基3 h 氧杂蒽3 酮( z n a r 1 和z n a f 2 ) t 1 4 1 。p h = 7 5 时，加入饱和z n 2 + ，z i l a f 1 和z r l a f 2 的荧光强度分别增大1 7 倍和5 l 倍。但p h 7 5 3 ，配合物的荧光相对p h = 7 0 4 时显著增强， 且发射波长红移了1 5 n m 。而当p h 7 5 3 ，随口h 升高，配合物的荧光显著增强，且发射波长红移了 1 5n m 。而当p h 7 5 3 ，随着p h 降低，荧光强度逐渐减小。温度对配合 物的荧光有影响，当温度升高时荧光强度减小 ( 3 ) 实验表明，溶剂效应对配体( l ) 和配合物的荧光影响显著在质子性溶剂 中，随着溶剂极性的增大，配体( l ) 和配合物的荧光强度依次减小。当用 水作溶剂时，配体( l ) 几乎没有荧光，在加入z n 2 + 后荧光光谱也没有改变。 在甲醇和乙醇中，加入z n 2 + 后，配体( l ) 的荧光强度增大了近3 倍，并分 别有1 1 5n m 和1 9n m 的红移。而在甲醇水( 9 0 1 0 ，v v ) ，含有1 0m m o l l h e p e s ( p h 约为7 4 0 ) 的体系中，荧光强度增强但没有红移现象。在非质 子性溶剂d m s o 和乙腈中，配体( l ) 的荧光光谱出现了一些精细结构，但 加入锌离子后配体( l ) 的荧光光谱几乎没有影响。说明配体( l ) 在极性质子 性溶剂中比在极性非质子性溶剂中对z n 2 的识别更灵敏。 ( 4 ) 采用荧光光谱法研究了配体( l ) 对1 2 种金属离子( k + ，c a 2 + ，c d 2 + ，m 矿， z n 2 + ，m n 2 + ，f e 2 + ，f e 3 + ，c u 2 + ，c 0 2 + ，n i 2 + ，p b 2 + ) 的选择性识别能力。 实验表明：在类生物体系中配体( l ) 对z r l 2 + 的选择性最好。 硕士学位论文 结论及展望 结论及展望 本文设计、合成了一种新型含酚基团的锌离子荧光探针2 ，6 - - - ( 2 羟苯 基) ( 2 羟乙基) 氨基】甲基 - 4 - 甲基苯酚( l ) ，采用傅立叶红外光谱法( f l q r ) ，电 喷雾离子化质谱法( e s i m s ) 和核磁共振波谱法( 1 hn m r ) 确定了( l ) 分子的结 构。用紫外吸收光谱法( u v - v i s ) 和荧光光谱法系统研究了配体( l ) 对z n 2 + 识别 的光学性质。 1 在近生理条件下研究了p h 、温度分别对配体( l ) 和l z l l 2 + 配合物的紫外吸 收光谱和荧光光谱的影响。采用j o b 法确定了配体( l ) 和z n 2 + 的配合比为l ：2 。 2 溶剂效应对配体( l ) 和l , z n 2 + 配合物的荧光影响显著。实验发现配体 在极性质子性溶剂中比在极性菲质子性溶剂中对z n 2 + 的识别更灵敏。 3 采用荧光光谱法研究了配体( l ) 对1 2 种金属离子的选择性识别能力。实验 表明：在近生理条件下配体( l ) 对z n 2 + 选择性最好。 本实验合成的配体( l ) 螯合锌离子后诱导荧光增强，在近生理条件下对锌离 子具有较高的选择性识别能力但实验也存在一些问题： 1 合成实验条件要求苛刻，所用试剂须经无水化处理，否则最终产率很低。 但目前一些国产试剂中或多或少都含有水分和杂质，这给实验带来了许多不必要 的工作。 2 生物体中的锌大多以络合形式存在，细胞内和细胞问的游离态z n 2 + 的浓度 很低。在生物体中游离或以弱相互作用存在的z n 2 十的浓度从分泌囊中的微摩尔级 到普通休眠细胞中的纳摩尔级不等，而配体( l ) 在近生理条件中仅对毫摩尔级浓 度的z n 2 + 识别灵敏度较高。 3 环境的酸碱性对l _ z n 2 + 配合物的荧光有影响，尤其是在强酸性条件下， 荧光可被淬灭，这不利于对病变细胞内z n 2 + 的检测。因此，对配体( l ) 进行必要 的修饰，使其在较宽的v i i 范盈内保持稳定的荧光性质将具有更大的应用价值。 硕十学位论文 参考文献 参考文献 ( 1 】u e n os ，t s u k a m o t om ，h i r a n ot ，e ta i m o s s yf i b e rz n 2 + s p i l l o v e rm o d u l a t e s h e t e r o s y n a p t i en m e t h y l d a s p a r t a t er e c e p t o ra c t i v i t yi nh i p p o c a m p a lc a 3c i r c u i t s j c e l l b i 0 1 ，2 0 0 2 ，1 5 8 ( 2 ) ：2 1 5 - 2 2 0 【2 】c h o idw ，k o hjyz i n ca n db r a i ni n j u r y a n n a r e v n e u r o s c i ，1 9 9 8 ，( 2 1 ) ： 3 4 7 - 3 7 5 3 】于书，肖丹秦大脑衰老与锌离子活性相关的一些功能损害国外医学 医学地理分册，2 0 0 6 ，2 7 ( 3 ) ：1 1 7 1 1 9 4 1k i n gle ，o s a t iaf f r a k e rpj d e p l e t i o no fc e l l so ft h eb l i n e a g ei nt h e b o n en l a l t o wo f z i n cd e f i c i e n tm o u s e i m m u n o l o g y , 1 9 9 5 ，8 5 ( 1 ) ：6 9 - 7 3 【5 】张传凯锌与感染性疾病的关系中国医学文摘内科学，2 0 0 6 ，2 7 ( 3 ) ： 2 1 0 2 1 2 【6 】李斌斌，于世凤锌离子对牙各矿化成份破骨细胞性吸收的体外调控 北京大学学报( 医学版) ，2 0 0 6 。3 8 ( 6 ) ：6 4 6 - 6 4 7 【7 】魏献军，黄丹峰，王军双硫腙分光光度法测定离子液体q 6 z n 2 + 含量分 析测试学报，2 0 0 6 ，2 5 ( 3 ) ：8 6 8 8 【8 】王军，赵墨田同位素稀释热电离质谱法测定人血清中痕量铜和锌分 析化学研究简报，2 0 0 6 ，3 4 ( 3 ) ：3 5 5 3 5 8 【9 】k i n u r ae ，a o k is c h e m i s t r yo f z i n c ( i i ) f l u o r o p h o r es e n s o r b i o m e t a l s ，2 0 0 1 ， 1 4 ( 1 4 ) ：1 9 1 2 0 4 【l o 】樊美公光化学基本原理与光子材料科学北京：科学出版社，2 0 0 1 3 3 0 - 3 3 l 【1 l 】f r e d e r i c k s o ncj ，k a s a r s k i sej ，r i n g od ，e ta 1 aq u i n o l i n ef l u o r e s c e n c e m e t h o df o rv i s u a l i z i n ga n da s s a y i n gt h eh i s t o c h e m i c a l l y - r e a e t i v ez i n ci nt h eb r a i n j n e u r o s c i m e t h ，1 9 8 7 ，2 0 ( 3 ) ：9 1 1 0 3 【1 2 】f a h m icj ，o h a l l o v a ntv a q u e o u sc o o r d i n a t i o nc h e m i s t r yo f q u i n o l i n e b a s e df l u o r e s c e n c ep r o b e sf o rt h eb i o l o g i c a l c h e m i s t r yo fz i n c j a m c h e m s o c ，1 9 9 9 ，1 2 1 ( 4 9 ) ：11 4 4 8 - 11 4 5 8 硕士学位论文参考文献 【1 3 】h u s t o nmh ，h a i d c rkw c z a m i ka w c h e l a t i o ne n h a n c e df l u o r e s c e n c e i n9 1 0 - b i s ( 2 - ( d i m e t h y l a m i n o ) e t h y l ) m e t h y l a m i n o m e t h y l a n t h r a c e n e j a m c h e m s o c ，1 9 8 8 ，l1 0 ( 1 3 ) ：4 4 6 0 - - 4 4 6 2 1 4 】m i c h a e leh ，c a r le ，a n t h o n ywc c h e l a t o s e l e c t i v ef l u o r e s c e n c e p e r t u r b a t i o n i n a n t h r y l a z a m a c r o c y c l ec o n j u g a t ep r o b e s e l e c t r o p h i l i c a r o m a t i c c a d m i a t i o n j a m c h e m s o c ，1 9 9 0 , 1 1 2 ( 1 9 ) ：7 0 5 4 - - 7 0 5 6 【1 5 】h i r a n ot ，k i k u c h il ( ，u r a n oy h i g h l yz i n c - s e l e c t i v ef l u o r e s c e n ts g n s o r m o l e c u l e ss u i t a b l ef o rb i o l o g i c a la p p l i c a t i o n s j a m c h e m s o c ，2 0 0 0 ，1 2 2 ( 4 9 ) ： 1 2 3 9 弦1 2 4 0 0 【1 6 】m a r u y a m as ，k i k u c h ik h i r a n ot ，e ta 1 an o v e l , c e l l p e r m e a b l e ， f l u o r e s c e n tp r o b ef o rr a t i om e t r i ci m a g i n go fz i n ci o n j a m c h e m s o a ，2 0 0 2 ， 1 2 4 ( 3 6 ) ：1 0 6 5 睢1 0 6 5 l 【1 7 s p c i 螂s p h o t op h y s i c sa n dm e c h a n i s m so fi n t r a m o l e c u l a re l e c t t o u i c e n e r g yt r a n s f e ri nb i c h r o m o p h o r i em o l e c u l a rs y s t e m ：s o l u t i o na n ds u p e r s o n i cj e t s t l l d i e $ c h e m r e v ，1 9 9 6 ，9 6 ( 6 ) ：1 9 5 3 - 1 9 7 6 【1 8 】g o d w i nha ，b e r gjm af l u o r e s c e n tz i n cp r o b eb a s e do nm e t a l i n d u c e d p e p t i d ef o l d i n g j a m c h e m s o a ，1 9 9 6 ，1 1 8 ( 2 7 ) ：6 5 1 4 , - 6 5 1 5 【1 9 】r a d k ek1 l0g a _ w akr a s m 蚴sc h i g h l yf l u o r e s c e n to l i g o t h i o p h e n e s t h r o u g ht h ei n c o r p o r a t i o no fc e n t r a ld i t h i e n o 3 , 2 - b ：2 , 3 - d p y r r o l eu n i t s o r g l e g ， 2 0 0 5 ，7 ( 2 3 ) ：5 2 5 3 5 2 5 6 【2 0 】k i mj ，b o t tsg ，h o f f m a ndm s y n t h e s i so fi n d i u ma m i d ec o m p o u n d s i n o r g c h e m ，1 9 9 s ，3 7 ( 1 5 ) ：3 8 3 5 - 3 8 4 1 ； 【2 l 】d a lz ，p r o n ig ，m a n c h e n od ，e ta 1 d e t e c t i o no fz i n ci o n sb yd i f f e r e n t i a l c i r c u l a r l yp o l a r i z e df l u o r e s c e n c ee x c i t a t i o n j a m c h e m s ，2 0 0 4 ，1 2 6 ( 3 8 ) ： 11 7 6 0 11 7 6 1 【2 2 】r o y z e nm ，d u r a n d i n 凡y o u n gvj ，e ta 1 as e n s i t i v ep r o b ef o rt h e d e t e c t i o no fz n ( i i ) b yt i m e - r e s o l v e df l u o r e s c e n c e j a m c h e m s o c ，2 0 0 岷1 2 8 ( 1 2 ) ：3 8 5 和3 8 5 5 【2 3 】s h u l t smd ，p e a r c ed i m p o r i a ub m o d u l a ra n dt u n a b l ec h e m o s e n s o r s c a f f o l df o rd i v a l e n tz i n c j a 虬c h e m s o c ，2 0 0 3 ，1 2 5 ( 3 5 ) ：1 0 5 9 1 1 0 5 9 7 【2 4 】p e a r e ed 八j o t t e r a n dn ，c a r r i c ois ，e ta 1 d e r i v a t i v e so f8 - h y d r o x y - 2 - m e t h y l q u i n o l i n ea r ep o w e r f u lp r o t o t y p e sf o rz i n cs e n s o r si nb i o l o g i c a ls y s t e m s j a m c h e m s o c ，2 0 0 l ，1 2 3 ( 2 1 ) ：5 1 6 0 - 5 1 6 1 硕士学位论文参考文献 【2 5 】j o t t e r a n dn ，p e a r c eda ，i m p e r i a l ib a s y m m e t r i cs y n t h e s i so fan e w 8 - h y d r o x y q u i n o l i n e d e r i v e da l p h a - a m i n o a c i da n di t s i n c o r p o r a t i o n i na p e p t i d y l s e n s o rf o rd i v a l e n tz i n e j o r g c h e m ，2 0 0 1 ，6 6 ( 9 ) ：3 2 2 4 3 2 2 8 【2 6 】t h o m p s o nrb ，p e t e r s o nd ，m a h o n e yw ，e ta 1 f l u o r e s c e n tz i n ci n d i c a t o r s f o rn e u r o b i o l o g y j n e u r o s c i m e t h ，2 0 0 2 ，1 1 8 ( 1 ) ：6 3 7 5 2 7 】k o n d os ，s u z u k it ，y a n oy e f f e c to fh y d r o x y lg r o u pi nr e c e p t o r sb e a r i n g d i s u l f o n a m i d eo na n i o nr e c o g n i t i o ni na c e t o n i t r i l e - d 3 t e t r a h e d r o nl e t t ，2 0 0 2 ，4 3 ( 3 9 ) ：7 0 5 9 - 7 0 6 1 【2 8 】m o t o m u r at ，a o y a m ay a c c u m u l a t i o no fh y d r o g e n - b o n d i n g a n d e l e c t r o s t a t i cb i n d i n gs i t e s ：s t a b i l i z a t i o no f s a l t si nh y d r o x y l i cm e d i av i ai n t r a m o l e c u l a r h y d r o g e nb o n d i n g j o r g c h e m ，1 9 9 1 ，5 6 ( 2 6 ) ：7 2 2 4 7 2 2 8 【2 9 1m a n a b ek ，o k a m u r al ( ，d a t et e ta 1 r e c e p t o rf o rap h o s p h o n i ca c i d m o n o e s t e r ：s a l tf o r m a t i o ns t a b i l i z e db yt h r e eh y d r o g e n - b o n d i n gi n t e r a c t i o n s j a m c h e m s o c ，1 9 9 2 ，11 4 ( 1 7 ) ：6 9 4 0 6 9 4 1 f 3 0 1 陈玉红，丁克强。王庆飞等席夫碱应用研究新进展河北师范大学学 报( 自然科学版) ，2 0 0 3 ，1 ( 2 7 ) ：7 l 7 4 【3 1 c h e njw ，w a n gxy ，z h uyg ，矗a 1 a na s y m m e t r i cd i z i n e p h o s p h o d i e s t e r a s em o d e lw i t l ip h e n o l a t ea n dc a r b o x y l a t eb r i d g e s i n o r g c h e m 2 0 0 5 ，4 4 ( 1 0 ) ：3 4 2 2 3 4 3 0 【3 2 】f a b b r i z z il ，l i c c h e u i 地p a l l a v i c i n ip e ta 1 az i n c ( i i ) - d r i v e n i n t r a m o l e c u l a rp h o t o i n d u e e de l e c t r o nt r a n s f e r i n o r g c h e m ，1 9 9 6 ，3 5 ( 6 ) ： 1 7 3 3 1 7