（食品科学专业论文）麦胚蛋白酶解物的制备、结构及其生物活性功能的研究.pdf

摘要 摘要 小麦是我国主要粮食作物之一，其年加工量达1 亿吨左右，作为面粉工业副产品的 麦胚年蕴藏量达2 0 0 4 0 0 万吨，实际提胚量也有2 0 万吨以上。合理开发利用麦胚不仅可 为人类提供优质的营养素，消除麦胚混入面粉而产生的各种不良影响，而且提升了随麸 皮作为廉价饲料出售的麦胚的经济价值，具有较大的社会效益和经济效益。 麦胚含有3 0 左右的蛋白质，是一种潜在的植物蛋白资源，目前国内外对麦胚蛋白 的研究与开发尚停留在营养源水平上。麦胚是具有生命活力的植物胚胎，麦胚蛋白中蕴 涵着许多具有生物活性的氨基酸序列，用特异的蛋白酶水解就有可能释放出有活性的肽 段，利用麦胚蛋白研究和开发具有某种确切功能的生物活性肽不失为进一步开发麦胚蛋 白的有效途径。 论文首先研究了麦胚蛋白酶解工艺，以体外抗氧化活性及抗肿瘤活性为考察指标， 从5 种商品蛋白酶中确定了酶解的最适水解酶为碱性蛋白酶p r o l e a n l e r f g f ；通过单因 素试验和响应面分析优化确定麦胚蛋白酶解物( w h e a tg e h np r o t e i nh y d r 0 1 y s a t e s w g p h s ) 的最佳酶解条件为： s 】5 0 0 、 e s 4 8 5 4 9 5 、p h 9 5 、5 2 2 5 5 4 0 0 、4 0 0 h ：最佳酶解条件下制备的w g p h s 对0 2 - 的清除率和人小细胞肺癌株h 4 4 6 的增殖抑制 率分别为5 5 8 5 ( 1 5 0m g m l ) 和6 0 6 5 ( o 2 5m g m l ) ，其相对分子质量主要分布在i i 5 6 3 1 3 0 之间，其中相对分子质量小于30 0 0 的组分比例为8 3 3 0 ，小于10 0 0 的组分 比例为5 3 0 1 ，峰值分子量为2 1 0 的组分含量最高，约占3 0 6 5 。 尽管可以通过酶解工艺的优化而获得分子质量相对较为集中的组分，但蛋白质酶解 液的成分仍然复杂多样，鉴于目前国内外热点研究的活性肽的相对分子质量( 打) 都在 30 0 0 以下，所以有必要对w g p h s 进行超滤分离。本研究采用的脱脂麦胚蛋白系碱提酸 沉法制备，且水解过程不可避免地带入了一些盐分，这些盐分的存在不仅会影响最终产 品的品质，且会干扰麦胚蛋白酶解物生理活性的分析，因此，论文研究了大孔吸附树脂 对w g p h s 的吸附性能和脱盐效果。结果表明：采用相对分子质量为30 0 0 的聚砜膜对 w g p h s 进行超滤分离的最适工艺条件为：操作压力0 3 0m p a ，操作温度2 0 ，w g p h s 浓度3 5 叽，超滤有效地除去了料液中相对分子质量较大的组分，清除0 2 。的i c 5 0 由超 滤前的1 6 4m g m l 1 降至超滤后的1 2 9m g m l 一。d a 2 0 1 一c 大孔吸附树脂对w g p h s 的静 态吸附与解吸的效果优于其它8 种树脂；动态吸附解吸试验表明：5 0m g m l 的w g p h s 以0 5b v 1 1 流速上样、1b v h 的流速水洗、1 5m l 1 1 1 i n 的7 5 的乙醇解吸后，其脱盐率 和回收率分别为9 2 2 5 、7 8 5 5 ；大孔吸附树脂处理后w g p h s 中疏水性氨基酸的摩尔 百分比从3 2 6 4 提高至3 9 - 2 1 ，清除0 2 i c 5 0 由1 2 9 m g _ m l - 1 降至0 6 6 m g m l 。 为了充分了解w g p h s 作为抗氧化功能因子的潜力，采用8 种体外抗氧化模型和不同 剂量w g p h s 灌胃小鼠试验对w g p h s 的体内外抗氧化活性进行了研究。实验结果表明： w g p h s 是良好的电子供体和氢供体；能明显抑制亚油酸体系的过氧化作用；能有效地 抑制细胞膜的氧化损伤，使小鼠红细胞溶血率降低；具有清除0 2 、o h 、d p p h 及 江南大学博士学位论文 活性氧h 2 0 2 的能力，其清除自由基的机制可能是通过肽类对过渡金属离子的螫合来实 现的；当w g p h s 的浓度为g s h 的3 5 倍时，可达到与g s h 相当的抗氧化效率，且有较 显著的量效关系；w g p h s 在显著提高小鼠血清s o d 和g s h p x 活性的同时也能显著降低 血清m d a 含量，其作用效果随着w g p h s 剂量的增加而增大。 论文利用大孔吸附树脂色谱、凝胶色谱、半制备r p h p l c 、r p h p l c 分离纯化， 从w g p h s 中得到一个具有较强抗氧化活性的组分w g p h s b 5 一n ，运用r p 一唧l c 、氨 基酸组成分析和二级质谱分析鉴定其氨基酸序列为m g g l u t 印( r e w ) ，其清除0 2 和 螯合f e 2 + 的i c 5 0 分别为1 0 3 邮0 1 l 1 和6 2 岬0 1 l _ j 。采用量子化学方法对r e w 和g s h 的化学结构进行了分子模拟，得到了优势构象和优势构象的能量，研究了分子的电荷分 布、前线轨道能量等。借助量子化学计算结果解释了r e w 的构效关系，r e w 中的g l u 以。一c 0 0 h 与t r p 的a n h 2 形成肽键：r e w 和g s h 的量子化学计算结果与抗氧化活 性大小的一致性表明可以采用前线轨道能级差来表征多肽分子的生物活性大小；从自然 键轨道法得到的净电荷分布推测确定了i 礓w 分子中自由基反应的活性位点及 f e ”一r e w 螯合物的结构。 从天然抗氧化剂抗氧化作用与抗肿瘤作用之间的密切关系得到启示，论文借助于体 外细胞培养技术，通过m t t 比色法测定了w g p h s 对人小细胞肺癌株h 4 4 6 生长增殖的抑 制作用，通过荧光显微镜、流式细胞术观察了凋亡细胞的形态结构及其对h 4 4 6 细胞诱 导凋亡的效应。实验结果表明：w g p h s 对体外培养的人小细胞肺癌株h 4 4 6 有明显的增 殖抑制作用，并有一定的剂量效应和时间效应：w g p h s 能诱导h 4 4 6 细胞凋亡；荧光显 微镜可见h 4 4 6 细胞出现典型的凋亡细胞形态学改变；流式细胞仪检测出现典型的亚二 倍体凋亡峰。w g p h s 在体外可显著抑制人小细胞肺癌株h 4 4 6 的生长增殖，其抗肿瘤机 制主要是诱导肿瘤细胞凋亡，将细胞阻滞在g o ，g l 期，使细胞不能进入s 期进行d n a 合 成，从而使h 4 4 6 细胞的体外增殖受到抑制。利用大孔吸附树脂色谱、凝胶色谱、半制 各r p h p l c 分离纯化，从w g p h s 中得到一个具有较强抗肿瘤活性的组分 w g p h s a 2 一c 4 ，运用r p h p l c 、氢基酸组成分析和二级质谱分析鉴定其氨基酸序列为 a r g v a l p h e 限v f ) ，其体外抑制人小细胞肺癌株h 4 4 6 增殖的i c 5 0 为3 5 1 5 岬1 0 1 l 。 关键词：麦胚；麦胚蛋白酶解物；酶水解；抗氧化；抗肿瘤；活性肽；结构；量子化学 i l a b s t i 毽c t w h e a ti so n eo fm em a i nf o o dc r o p si nc h i n a ，t h ep r o c e s s e dp r u d u c t 矗o mw h i c hi su pt o 1 0 0m i l l i o nt o n s o n l yo v e r2 0 0t h o u s a n dt o n so f t h ep o s s i b l e2 4m i l l i o nt o n so f t h ew h e a t g e 肌a r er e c o v e r e de v e r ) ry c 札a sab y p m d u c to fn o u ri n d u s “yr e a s o n a b l ed e v e l o p m e n ta n d u t i l i z a t i o no fw h e a tg e 姗w i l ln o to n l yp r o v i d em a n k i n df i r s t r a t en u t r i e n t s ，b u ta l s or e m o v e t l l es i d ee f r e c t sc a u s e db y 、h e a tg e h nb e i n gm i n g l e dw i t hn o u r i tw i l lr a i s et i l ee c o n o m i c v a l u eo f w h e a tg e n nw h i c hu s e dt ob eu s e da sac h e e pf e e d s t 山t w h e a tg e 舯c o n t a i n sa p p r o x i m a t e l y3 0 p r o t e i na 【1 di sap o t e m i a ls o u r c eo fp l a n t p r o t e i n t h ep r e s e n ts t u d ya i l dd e v e l o p m e n to fw h e a tg e mp r o t e mh o m ea 1 1 da b r o a di ss t i l l o nt 1 1 es t a g eo fn u t r i m e n t w h e a tg e mi sap l a j l t2 e r r no fb i o a c t i v i t y ，t h em a i ni 1 1 t e g r a lp a r to f w l l i c h ，t 1 1 ew h e a tg e mp m t e i i l ，i ni t so r i g i n a lf o 肌，h a ss o m e 幽o w nb i o a c t i v i t ) rp 印t i d e s ， w m c hu p o ne n z y m a t i ch y d 】i y s i sw i l ll i b e r a t ean 啪b e ro fb i o a c t i v ep e p t i d e s as e r i e so f r e s e a r c h e sh a v es h o w e dt 1 1 a tw ed o n ta b s o r be n o u g h 锄o u n tp e p t j d e so ft h ev 撕o u s b i o a c t i v ep e p t i d e sa v a i l a b l ei no u re v e r y d a yd i e t s oi ti sn e c e s s a n 7t om a i l u f a c t u r et l l en e e d e d p 印t i d e s ht 1 1 i sd i s s e n a t i o n ，am e t h o do fp r 印a r a t i o no fw h e a tg e 肌p r o t e i nh y d r o l y s a t e s ( w g p h s ) ，a n dt h ea 1 1 t i o x i d a t i v ea c t i v 时a 1 1 da n t i t 啪o ra c t i v i t vo fw g p h sh a v eb e e n r e s e a r c h e d ，w l l i c hw o u l dp r o v i d e sm et h e o r e t i c a lf o u i l d a t i o n sf o rt h eu t i l i z a t i o no f w g p h s 1 1 1 i t i m l mt 1 1 ep r e p a r a t i o nc o n d i t i o n so fw g p h sw e r er e s e a r c h e d 5t y p e so fp r o t e a s e s 、v e r cs e l e c t e dt h r o u g l lc o m p 撕n ga f l t i o x i d a n ta c t i v i t y ，a n t i t u m o ra c t i v i t ymv 加oa i l dt | l e m o l e c u l a rw e i g h td i s t r i b u t i o no fw g p h s ，w e 行n dt h eo p t i m 啪p r o t e a s ei sp r 0 1 e a t t l e rf g f t h eo p t i m 啪e 1 1 z y m a t i ch y d r 0 1 y s i sp a r 锄e t e r sw a sd e t e n n i n e db ys i n e f a c t o rt e s t sa j l d r e s p o n s es u r f a c ea n a l y s i s i tw a ss h o w l lt h a tt l l eo p t i i l l 岫h y d r 0 1 v t i cc o n d i t i o nf o rp r e p a r i l l 2 w g p h s 、i t ha 1 1 t i o x i d a n tp m p e n i e s 如da n t i c a i l c e ra c t i v i t ymv f 护dw a s s 5 0 0 ， e 】 s 】 4 8 5 4 9 5 ，p h 9 5 ，t e m p e m t u r e5 2 2 5 5 4 0 0 ，a i l dt i m e4 0 0 h f u r 山e 册o r e ，w g p h s p r e p a r e do nm i sc o n d i t i o nh a ds t r o n ga n t i o x i d a t i v ea c t i v i t ya 1 1 da n t i c a n c e ra c t i v i t y ，w i t l lt h e s u p e r o x i d ea n j o n 一a d i c a js c a v e n g i n gr a l ea n dt h ep r o l i f e f a t i o ni n h i b i t i n gr a t er e a c h i n g 5 5 8 5 ( 1 5 0m m l ) a n d6 0 6 5 ( o 2 5m g m l ) ，r e s p e c t i v e l y t h er e l a t i v em o l e c u l a r w e i g h to fw g p h sw a si nt h er a j l g eo f1 3 0 1 l5 6 3 ，a n dm ec o m p o n e n tw i t hr e l a t i v e m 0 1 e c u l a rw e i 曲tu i l d e r1o o ow a so f 5 3 叭 i nt h i sd i s s e r t a t i o n 、w eu l t r a f n t r a t e dw g p h sb e c a u s et h ed r e s e n tr e s e a r c hf o c u s e so n p e p t i d ew i t hr e l a t i v em o l e c u l a rw e i g h tu n d e r3o o o ，w er e m o v e dt l l es a l t sf r o mw g p h s b e c a u s et h ep r o c e s so fh y d r o l y s i si n e v i t a b l yb r i n2 i n gs o m es a l tw m c hw i l li n f l u e n c et h e q u a l i t yo ft 王l eu l t i r i l a t ep r o d u c t ，a i l dw h i c hm a vi n f l u e n c et h ea i l a l y s i so fm eb i o a c “v i t yo f w g p h s t 1 l ee f b c t so fc o n c e m r a l i o n so fw g p h s， p r e s s u r ea 1 1 dt e m p e r a f u r eo n u l t r a 丘l t r a t i o np e m e a t ew e r ei n v e s t i 球l t e d t h er e s u l t ss h o w e dt h a tt h eo p t i m u mc o n d i t i o n so f u l t r a f l l t r a t i o nw e r ec o n c e n t r a t i o n so fw g p h s3 5 2 l ，p r e s s u r eo fo 3 0 m p a ，t e m p e r a t u r eo f2 0 ，a 1 1 dt h a tt l l es c a v e n g i n ga c t i v i t yo f w g p h sa 2 a i n s ts u p e m x i d er a d i c a lw a se n h a l l c e da r e r u l t r a 6 l t r a t i o n ，w i t hi c 5 0f r o m16 4m g m l 。t o1 2 9m g m l - 。9t y p e so fm a c r o p o r o u sr e s i n w e r es e l e c t e db yc o m p a r i n gt h e i rp e 一 o 丌1 1 a 1 1 c e si na d s o r b i n ga 1 1 dd e s o r b 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h y c l e ( m d a ) ，t h ea c t i v i t yo fs u p e r o x i d ed i s m u t a s e ( s o d ) a n dt h ea c t i v i “o f g l u t a t | 1 i o n ep e r o x i d a s e ( g s h p x ) i ns e r u i i lb e f o r ea n da r e ra d m i n j s 订a t i n 2w g p h s t h e r e s u l t ss h o w e dt h a tt 1 1 ec o n t e n to fm d ai ns e m mr e d u c e d ( p 0 0 1 1 ，t l l ea c t i v i t vo fg s h p x a j l dt h ea c t i v i t yo fs o di n c r e a s e d ( p o 0 1 ) s i g l l i f i c a j l t l yi ns e m m t h e s ea i l t i o x i d a l l t a c t i v i t i e si n c r e a s ew i t hi i l c r e a s eo fc o n c e n t r a t i o nf 以v f f ，口a n d 加v f v d e x d e r i m e n t a lr e s u l t s s u g g e s tt l l a tw g p h sc a nb eas u i t a b l en a t l 叫a n t i o x i d a n tr i c hi nn u t r i t i o na n dn o n t o x i c 1 1 1 ec o m p o n e m ，w g p h s b 5 一f 1 ，w i mh i 曲e rs c a v e 吨i n ga c t i v i t i e sa g a i n s ts u p e r o x i d e r a d i c a lw a si s o l a t e d 行o mw g p h sb ys e c ，m a c m p o 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c h a n i c sa n dq u a l l m mc h e m i s t r y t h em o l e c u l a r3 ds t m c t u r e sw e r eo p t i m i z e d t h e d o m i n a n tc o n f b m l a t i o n sa n dt h ee n e r 窟i e so fd o m i n a n tc o n f b r n l a t i o n sw e r eo b t a i n e d t h e p o p u l a t i o no fc h a r g e sa n dt h ee n e rg i e so ff r o n t i e ro r b i t a lw e r es t u d i e d i tw a sc o n i e c t u r e d 山a t t h es i t u so fr e a c t i v i t ys c a v e n g i n gr a d i c a li sl o c a t e da tt h en 1 6 一h 2 3o ft h ei n d 0 1 er i n ga n dt h e s t m c t u r eo ff e 口一r e wc h e l a t ec o m d l e x t h ea n t n u m o ra c t j v j r yo fw g p h sw a ss m d i e d 加v 加臼i nt h j sd j s s e n a t i o nt or e a l i z et b e p o t e n t i a le 髓c to fw g p h st h eh u l l l a ng a s t “cc a r c i n o m ah 4 4 6c e l l sw e r et r e a t e dw i t h w g p h sa tv a r i o u sc o n c e n t r a t i o n s m t l la s s a vw a su s e dt oe x a m i n e2 r o w t ha n dp r o i i f e r a t i o n o fh 4 4 6c e l l sa r e rt | l et r e a t m e n to fw g p h s f l u o r e s c e n c em i c r o s c o d vw a su s e dt oo b s e r v e t | l em o r p h 0 1 0 9 yo fa p o p t o t i cc e l l s ，a n df l o wc y t o m e t r yw e r ea l s ou s e dt oa n a l y z et h eh 4 4 6 c e l i sa p o p t o s i s t h er e s u l t ss h o w e dt h a tw g p h ss i 2 n m c a l l t l vi 1 1 | 1 i b i t e dl h e 盯。州ha n d p r 0 1 i f e r a t i o no fh 4 4 6c e l l si nad o s e d e p e n d e n tm a r u l c ra n dt i m e d e p e n d e n i1 1 1 a i m e r ， v a b s t r a c t f l u o r e s c e n c e1 1 1 i c r o s c o p y e x h i b i t e d 呻i c a lm o i p h o l o g i cc h a n g e so fa p o p t o s i s ，at y p i c a l s u b d i p l o i dp e a kw a so b s e r 、，e db yn o wc y t o m e 时w g p h sm a yi n h i b i th 4 4 6c e l l sg r o w m a n dp r o l i f e r a t j o nt 1 1 r o u g hi n d u c j n ga p o p t o s i s t h ec 锄p o n e n tw g p h s a 2 卅，埘t h d 卫h e r a n t i t u m o ra c t i v i t i e sw a si s o l a t e d 疔o mw g p h sb y s e c ，m a c m p o r o u sa d s o r b e dr e s i n c h r o m a t o 鲫h ya i l ds e m i p r e p a r a t i v er p h p l ct h ei d e n t i f i c a t i o nb yr p 一肿l c ，m s m s a n da m 协oa c i da 1 1 a l y s i ss h o w e dt h a tt l l er e l a t i v em o l e c u l a rw e i g h to fw g p h s a 2 c 4w a s 4 2 0 5 ，a 1 1 dt 1 1 e 锄i n oa c i ds e q u e n c eo fw g p h s - a 2 一c 4w a sa r g v a l p h e ( r v f ) w h o s ei c 舶 、 r i mt l l ep r o l i f e r a t i o ni n l l i b i t i l l gr a t eo nh u m a l lg a s m cc a r c m o m ac e l lh 4 4 6 加v f 抛嘲 3 5 1 5 u m 0 1 l k e y w o r d s ：w h e a tg e h n ：w h e a tg e 珊p r o t e i nh y d m l y s a t e s ； e i l z y m a t i ch y d r o l y s i s ； a n t i o x i d a 工1 t ；a 1 1 t i t u m o r ；b i o a c t i v 时p e p t i d e s ；s t m c t u r e ；q u a n t u mc h e m i s 仃y v 独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工 作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地 方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含 本人为获得江南大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。 与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明 确的说明并表示谢意。 签名：i 塞垒翌竺塾日期：沙埠易月。7 日 关于论文使用授权的说明 本学位论文作者完全了解江南大学有关保留、使用学位论文的规 定：江南大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和 磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以将学位论文的全部或部分内容编 入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、 汇编学位论文，并且本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。 保密的学位论文在解密后也遵守此规定。 签名：丝兰堡导师签名：至垄 日期：伽g 年易月( 日 f 第一章绪论 第一章绪论 1 1 小麦与麦胚 1 1 1 小麦籽粒 小麦是我国主要粮食作物之一，其年加工量达l 亿吨左右。在解剖学意义上小麦籽粒 可分为麦皮、胚乳、胚芽三个主要部分，外层是麦皮，内部是胚乳，根部是胚芽，小麦 籽粒各组成部分的相对含量见表1 1 。约占小麦籽粒重量1 4 3 8 的胚芽是小麦籽粒 的生命源泉，相对于胚乳，麦胚具有更高的营养价值和经济价值，不仅含有生命活动所 必需的丰富而优质的蛋白质、脂肪及多种维生素、矿物质等营养素，而且还蕴藏着谷胱 甘肽、黄酮类物质、麦胚凝集素、二十八烷醇、甾醇及脂多糖等生理活性物质，被营养 学家们誉为“人类天然的营养宝库”【2 】。然而，堪称优秀的人类营养素来源的小麦胚芽 却是面粉工业的副产品，麦胚的提取消除了麦胚混入面粉而产生的各种不良影响，如纤 维素和色素物质造成的灰分的提高及白度的降低；脂肪水解酶和脂肪氧化酶促使脂肪氧 化、酸价提高而造成的贮藏期缩短；谷胱甘肽等还原性物质激活蛋白酶导致面筋筋力下 降而造成的面团烘焙特性的改变等。因此，提取麦胚不仅为人类提供了优质的营养素， 而且提升了随麸皮作为廉价饲料出售的麦胚的经济价值。 表1 。i 小麦籽粒各组成部分的重量比例( 以干物质计) f 1 t a b 1 1p r o p o r t i o no f t h ec o n s t i t u e n tp a r t so f w h e a ts e e d 1 1 2 麦胚的提取 麦胚位于麦粒的基部，部分嵌入胚乳中，在胚芽与胚乳和种皮间有条天然的分离线， 经撞击破碎较易从基部脱落。在相同粒度的混合物中，麦胚的悬浮速度最小。完整麦胚 呈扁圆形，长约1 7 2 5m m ，宽约1 0 1 2m m ，厚约o 5 0 7m m 。麦胚含1 0 左右的脂 肪，在研磨中呈塑性变形，被压扁扩展成直径1 5 3 0m m 的片状。 因小麦清理过程中提取的麦胚纯度不高，国内外小麦制粉厂大多选择在制粉过程中 提取麦胚。国外工艺大量使用光辊，以长粉路、轻研细磨为基础，麦胚提取率和纯度分 别在0 5 和9 0 以上，目前国内引进的成套制粉设备皆能实现粉间提胚。而用国产设备 装备的面粉厂不可能采用国外的长粉路光辊提胚工艺，因粉路短，不宜将提胚磨安排得 太靠后，以免缩短流程，影响物料研磨。通常采用齿辊提胚，在清粉机中提纯浓缩，再 配置适当筛网等工艺，麦胚提取率可达入磨小麦重量的o 2 o 3 ，纯度8 5 左右p j 。 目前从国外引进的成套小麦粉生产线有2 0 0 多条，日加工小麦2 0 0 吨以上的面粉厂有 5 0 0 多家，通过引进国外先进的制粉技术与设备或经过改造采用了中路出粉法及使用光辊 江南大学博士学位论文 制粉的全国大中型面粉企业都具备了提胚能力，提取率可达入磨小麦重量的o 2 o 3 ， 纯度可达8 0 9 0 。若按小麦年加工量1 亿吨计算，我国麦胚年蕴藏量达2 0 0 4 0 0 万吨， 实际提胚量也有2 0 万吨以上。但因麦胚不易保存及开发的适销品种较少等原因，麦胚的 利用率一直不高，有些己具备提胚能力的大中型等级粉厂甚至将提取的麦胚又返掺入麸 皮出售，致使商营养高售价的麦胚随麸皮流失( 麦胚的售价是麸皮的十几倍) ，所以合 理开发利用麦胚具有较大的社会效益和经济效益。 1 2 麦胚的研究现状 1 2 1 麦胚主要营养素的研究现状 麦胚含有丰富而优质的蛋白质、脂肪及多种维生素、矿物质等营养素，是优秀的人 类营养素来源。麦胚的营养成分因小麦品种不同而有所差异，其主要的化学成分见表1 2 。 表1 2 麦胚的主要化学成分1 4 1 h b 1 2t h em a i nc h e m i c a lc o m p o s i t i o n so ft h ew h e a tg e r m 1 2 1 1 麦胚蛋白质 麦胚蛋白质的含量高达3 0 左右，8 种必需氨基酸占其总氨基酸的3 4 7 ( 4 j ，其必需氨 基酸的比值与f a o ，w h o 颁布的模式值及大豆、牛肉、鸡蛋的氨基酸构成比例基本接近， 明显优于大米、面粉等谷物蛋白质中必需氨基酸的构成比例。作为一种天然的优质蛋白 质强化剂现已广泛用于增补及强化食品中的氨基酸。 按0 s b o m e 蛋自质溶解度分类法测定，麦胚中清蛋白、球蛋白、麦醇溶蛋白、麦谷蛋 白的含量分别为3 0 2 、1 8 9 、1 4 o 、0 1 3 o 4 ，水不溶性蛋白3 0 2 ，非蛋白态氮 1 1 3 1 5 3 【5 】o 周惠明 6 7 】等从麦胚水溶性提取物中分离出一种具有免疫活性的、相对 分子量为4 0o o o 的均一糖蛋白，并对其化学组成及结构进行了分析鉴定。周显青1 8j 、朱 科学f 9 j 等对麦胚中的球蛋白进行了分离纯化，测定了其氨基酸组成和分子量。但对麦胚 清蛋白和球蛋白的生物活性功能及构效关系还缺乏深入而系统的研究。 工业化制备食品级蛋白质常采用碱提酸沉法。n s ，h e t t i a r a c h c h y ”o j 等首次利用p h9 5 提取、p h 4 o 等电沉降分离制取了一种相对分子量为5 50 0 0 3 50 0 0 的麦胚蛋白。g e y i q i a l l g 等利用与n s h e t l i a r a c h c h y 相似的条件制取了一种考马斯亮蓝r 2 5 0 染色 法和改良银染法分离有2 7 条蛋白区带的脱脂麦胚蛋白。辛志宏【l2 j 等在碱提酸沉法的基础 上，利用a 一淀粉酶水解提取液中的淀粉，脱脂麦胚蛋白含量、得率和纯度皆高于碱提酸 沉法。袁道强【l3 l 等则选用木瓜蛋白酶制备了脱脂麦胚蛋白。 麦胚