（化学工程专业论文）hegf在化妆品中美白延缓衰老功效的探索.pdf

摘要 摘要 通过文献调研，综述了生物功能性化妆品添加剂一人表皮生长因子( h 啪a i le p i d e m a l g r o w t hf a c t o r ，简称：l l e g f ) 的发现史、来源、结构与生物学效应。 本文还介绍了从细胞层次营养肌肤的生物美肤理念：加快表皮组织的更新速度，使年轻 的表皮细胞代谢更旺盛，更富有生命活力，促进老化的角质层被新生细胞所代替，使皮肤变 得细嫩；配合酪氨酸酶抑制剂，让新生的含较少黑色素的细胞层换老的含有较多黑色素的细 胞层，使皮肤健康美白；还能促进成纤维细胞的增殖和生长，增加皮肤的紧实度和弹性；通 过促进细胞分泌细胞外基质( 如透明质酸，纤维状的胶原蛋白和弹性蛋白) ，保持皮肤水分。 本课题研究了护肤霜基本配方及工艺，以及用破坏性试验考查配方的稳定性；重点研究 了利用h e g f 生物美容护肤霜配方及其制作方法，h e g f 护肽霜配方是由护肤霜基质及功能添 加剂混合而成；以重量百分计，该护肤霜基组份为7 0 9 0 ，功能添加剂为1 0 3 0 ； 其中功能添加剂是以甘草提取物、小麦蛋白、深海鱼的原蛋白、溶角蛋白酶、透明质酸、辅 酶q 1 0 、g gh e g f 、噻酮、去离子水混合而成；其通过选用特定成分的护肤霜基和功能添加 剂进行复配，产品具有了极好的保湿性，使肌肤皱纹减少，回复肌肤弹性，延缓衰老并美白 肌肤。本课题的研究，旨在进一步指导实践，更好地应用到开发系列h e g f 功能性化妆品中。 关键词：护肤霜；人表皮生长因子；生物美容；延缓衰老；美白；应用 a b s 仃a c t a b s t r a c t t h i sp 印e rm a d eat e x t u a lr e s e a r c ho nh 眦a i le p i d e r m a lg r o w t hf a c t o r ( 址! g f ) sd i s c o v e r y ， o r i g i n ，s t 九j c t u r eb i o a c t i v i 锣 m e a l l w h i l e ，i n t r o d u c e dt h ei d e a io fb i o b e a u 锣6 o mt h el e v e lo fs “nc e l l s ：t oa c c e i e r a t e 印i d e m a lc e l lm 撕b o l i s m 锄dt l l ee p i d e n l l a lr e n e w a l ，t op r o m o t ea g i n gc u t i c l ew 嬲r e p l a c e db yt h e n e w c e l l s ，s ot h a tt h es k i nb e c o m e st e n d e r ；w i t h 勺肛o s i n a s ei n h i b i t o r s ，m en e wm e l a i l i n c o r l t a i l l i n g l e s sl a y e rc e l lr e p l a c eo ft h e0 1 d m e l a n i n - c o n t a i n i n gm o r ec e l ll a y e r ，s h ng e t 、v h i t e n i n g 锄dh e a l m ； i tc a i la l s op r o m o t e 助r o b l a s t p r o l i f e r a t i o na n dg r o 讯h ，i n c r e a s es k i nf i 珊a 1 1 de l a s t i c 时；t h r o u 曲t h e p r o m o t i o no fc e l l ss e c r e t i n ge x 订a c e l l u l a rm a t r i x ( s u c ha sh y a l u r o l l i ca c i d ，t h ef i b r o u sp r o t e i n c o l l a g e na 1 1 de l a s t i n ) ，m a i n t a j n i n gs k i nm o i s t u r e t l l i sp a p e rr e s e a r c h e ss k i nc a r eb a s ec r e a mf o n n u l a t i o na i l dm eb a s i cp r o c e s s ，a i l dt e s tt h e f o m u l a ss t a b i l i t yb yd e s t l l j c t i v et e s t ；f o c u so nr e s e a r c h e ss k i nc a r ec r e 锄f o m u l ai n c l u d i n gh e g f b i o b e a u _ t ) ，f a c t o ra i l dp r o c e s sm e t h o d s 1 l e g f 幽nc r e 锄sm a d eu po fs l ( i nc r c a mb a s ea n d f u n c t i o n a la d d i t i v e sm i x t u r e ；t om e 、i g h tp e r c e n t a g e ，t h es k i nb a s ec r e a m7 0 9 0 ，f h c t i o n a l a d d i t i v e s1o - 3 0 ；w h i c hi s 向n c t i o n a la d d i t i v e si n c l u d i n gl i c o r i c ee x t r a c t ，w h e a tp r o t e i n ，t h e d e e p s e af i s hc o l l a g e n ，k e r a t i n a s e ，h y a l u r o l l i ca c i d ，c o e n 刁椰eq10 ，g gh e g f ，n l i a z o n e ，d e i o n i z e d 眦n e r ；t 1 1 r o u 曲s p e c i f i cc o m p o n e m s s l 【i nb a s ec r e 锄sa n d 缸1 c t i o n a la d d i t i v e s ，c o m p l e xp r o d u c t s h a v et h ee f f e c tw i t he x c e l l e mm o i s t u r e ，m a k i n gt h es k i nt or e d u c ew r i n “e s ，r e s t o r es k i ne l a s t i c i t y ， s l o wd o 、v 1 1a g i n ga 1 1 d 、h i t e i l i n g n es t u d yo fs u b j e c ta i m e da t 如r t h e rg u i d a l l c ep r a c t i c e ，b e t t e r a p p l i c a t i o n st od e v e l o pas e r i e so fh e g f - c o n t a i n i n gm n c t i o n a lc o s m e t i c s k e yw o r d s ：c o s m e t i c ；h u m a ne p i d e m a lg t o w t hf a c t o r ( h e g f ) ； b i o b e a u t y ；a n t i a g i n g ； w h i t e n i n g ； a p p l i c a t i o n i l 独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工 作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地 方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含 本人为获得江南大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。 与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明 确的说明并表示谢意。 签名：堑：坌兰塾 日期年月日 关于论文使用授权的说明 本学位论文作者完全了解江南大学有关保留、使用学位论文的规 定：江南大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和 磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以将学位论文的全部或部分内容编 入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制于段保存、 汇编学位论文，并且本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。 保密的学位论文在解密后也遵守此规定。 签名：雠导师签名： 日期：年月 日 第一章选题的依据与意义 第一章选题的依据与意义 传统的皮肤护理仅局限于油膜履盖与保持水份等物理的方法。如今，随着生命科学的发 展，人们已经掌握了表皮细胞衰老及其生化过程。随着化妆品工业的发展，美容护肤理念开始 转向细胞水平的护理，第四代化妆品仿生化妆品( 用生物技术制造与人体结构相仿，且含有 高亲和力的生物精华物质的仿生化妆品) 已应云而生 e g f 白1 9 6 2 年发现以来，已经成功应用在医学上；作为化妆品功能性添加剂，仍处在深 入研究阶段。本集团公司已能利用基因重组技术生产r h e g f ( 检验报告见附录1 ) ，将其应用 在化妆品中，此研究能为公司h e g f 化妆品提供理论支持以及临床试验数据，提高公司仿生化 妆品的研究开发水平并可投入生产，产生良好的经济效益。 扛南大学t 程硕士学位论文 2 1h 印f 的介绍 第二章国内外文献资料综述 2 1 1h 印f 的发现厦其分子结构 1 9 6 0 年，c o h e n 用羧甲基纤维素从小鼠颌下腺分离纯化神经生长因子( n g f ) 时，发现另 一类小分子蛋白一e p i d e 瑚mg r o w t hf a c 叫e g f ) ，1 9 7 5 年，在人尿，大白鼠猪等中均发现 了各种各样的表皮生氏因子h e g f 、r 1 1 e g f 、g - p e g f 。1 9 7 9 年，c a r p e n t e r g 等报道了h e g f 的氨基酸残基组成，如图2 1 所示。同年，g | e g o f y 从人尿中发现了能抑制胃酸分泌的胃抑素 ( u r o g a s ”0 n e ) ，其实与h e g f 为同一物质。1 9 8 6 年，c o h e n 由于在h e g f 的杰出贡献而荣获 诺贝尔医学与生理学奖”j 。 不同来源的e g f 的结构有略微的差异，一般同源性在7 0 左右。天然h e g f 是人生长 因子中的一种，是由5 3 个氨基酸组成的分子量为6 0 4 5 的小分子多肽。多肽链上n 一端为天冬 酰酸，c 一端为精氨酸等电点42 。h e g f 分子具有较高稳定性，二硫键是h e g f 生物活性所 必须结构。h e g f 级结构只有b 一折叠，构成残基1 3 3 的n 一端结构域和3 4 5 3 的c 一端 结构域。多肽链上几乎所有残基的芳香侧链都在分子表面成簇存在，形成疏水的袋。 。i p ：鬟氅_ 赎。 ”l 镂露 “谚蜘 嘧商萌一” “ 图2 - lh e g f 分千的一缴结构 f i g u r e2 - 1p r i i i l 8 r ya m i n oa c i d8 e q u e n c eo f h 啪柚e q i d e 兀n m 舯w 山f a d o r 212h e g f 理化特性 第二章国内外文献资料综述 在功能上，h e g f 分子的n 结构域可能对受体结合是重要的，而c 结构域可能对促细胞生 长的活性是重要的。e g f 对蛋白酶水解敏感，而在一2 0 中能保持长期稳定：在中性p h 中 1 0 0 煮沸3 0 m i n 仍保持稳定，但在1 0 0 的o 1 nn a 0 h 或o 2 nh c l 中失活【3 1 。 2 1 3e g f 受体的性质 e g f 受体( e g f r ) 是具有配体介导的酪氨酸激酶活性的多功能跨膜蛋白。e g f r 广泛分布 于哺乳动物的上皮细胞中，每个上皮细胞平均约有5 1 0 万个受体。e g f 是与靶细胞膜上 e g f r 结合后发挥生物学效应的，二者结合具有高亲和力，e g f r 表达广泛，在人类和啮齿 类除内胚层壁层、成熟骨骼肌和造血组织以外的各种组织中表达p j 。h e g f 与细胞膜上的 h e g f 受体的结合具有高度的敏感性和可饱和性，即少量的h e g f 就可以作用于细胞，而且 同一细胞不能同时结合二个以上的e g f 分子，表现在临床试验中，e g f 虽然可很快诱导皮 肤细胞中多角形细胞增殖，但经过一段时间后便达到生理平衡，细胞不再无限增殖，即e g f 具有既使皮肤细胞更新又不导致细胞畸形的特性，保证了e g f 应用的安全性1 4 j 。 2 1 4e g f 生物学效应及作用 现在发现e g f 能刺激外胚层和内胚层起源的各种细胞如角膜、上皮等，使其增殖。它的 生物学效应包括：曲促进低分子量化合物从细胞外主动运至细胞内，增加细胞的营养物质。 b ) 活化糖酵解作用以增加呼吸代谢，能激活磷酸果糖激酶。c ) 刺激细胞外大分子的合成，如透 明质酸和糖蛋白。d ) 活化i 斟a 和蛋白质合成。e ) 促进d n a 的合成例。f ) 促进细胞增殖促进机 体一些物质如果酸、前列腺素等的合成。这些生物效应表明，e g f 可通过传导信号，引起细 胞内一系列生化变化，启动与细胞分裂有关的基因，使静止细胞进入细胞分裂期，从而使细 胞增殖。e g f 在烧伤、创伤、角膜、消化性溃疡等方面都取得了良好的效果1 3 j 。现就其在皮 肤中的作用作一综述：e g f 细胞增殖及调控与细胞衰老密切相关。e g f 能有效地促进和调节表 皮细胞的生长和增殖。可促进皮肤细胞的产生，同时增加其他内源性生长因子的含摄，促进 细胞分泌透明质酸和糖蛋白，合理调整皮肤结构，延缓皮肤衰老，减少皱纹对保护皮肤、黏 膜具有十分独特的功效。 表皮生长因子是人体内一个重要的多肽生长因子，具有广泛的生物学功能，试验证明极 少量的e g f 能促进皮肤、眼角膜及人体器官的上皮细胞生长，对维持改善和修复器官的功能 起到重要作用。由于e g e 在临床上试用取得明显的效果和诱人的应用前景，国际上已经有许 多实验室和公司相继开展基因工程研究并取得成功，我国在七五和八五期间已将此项研究列 入重点攻关项目。重组l 正g f 目前在市场上是最为活跃的细胞因子之一，随着不断深入的研 究和进一步的临床实验，e g f 具有广阔的市场潜力必然会更加引人注目。 2 1 5h e g f 的安全性 江南大学工程硕士学位论文 h e g f 经过一系列安全性试验：急性毒性试验；动物皮肤刺激与过敏试验；致突变试验等， 结果均呈阴性，表明h e g f 为非遗传性毒物，不是致突变物质，从对h e g f 进行的安全检测 与评定表明，h e g f 作为化妆品( 医药) 原料，它是安全的【7 1 。 2 2e g f 目前在国内外化妆品中的应用综述 二十一世纪，以基因工程、细胞工程、发酵工程和酶工程为主体的现代生物高新技术， 已被国际上看作是新技术革命的重要标志之一，生物工程产品细胞因子，引入美容护肤 品，是医学生物技术渗透人美容业的典型开端，它改变了过去护肤品单纯为皮肤添加营养的 护肤思路，应用生物活性因子对皮肤细胞功能进行调节，因而在细胞及分子水平上解决美容 护肤问题，全方位赋予细胞新的活力。 细胞生长因子，它们在体内含量极微，但生物活性极高，对多种细胞生理功能和代谢活 动发挥生物调节作用，直接或间接地影响多种类型细胞的生长、分裂、分化、增殖和迁移， 在美容护肤、整形外科、烧伤溃疡以及各种皮肤病的伤口修复与愈合中有重要作用瞵j 。 e g f 是人体内固有的一种小分子多肽，极微量即能强烈促进皮肤细胞的分裂和生长，还 能刺激细胞外一些大分子如透明质酸和糖蛋白等的合成和分泌，这种在细胞层次的仿生护理 给表皮细胞额外的营养或刺激，通过细胞本身新陈代谢从根本上保持肌肤自然健康。几十年 前，生长因子对皮肤的维护作用已经被研究人员所认识。但是，生长因子为什么迟迟未进入 护肤品市场呢? 这是因为，虽然生长因子具有极高的生物学活性，几微克，甚至几毫微克就 能产生神奇的护肤效果，但是，它们的天然产量也是十分的少，而且提纯也相当困难，这使 得它们的成本高居不下，难以让普通消费者承受。但是，今天，有了生物界最先进的基因工 程技术，已经能够生产出充足的生长因子。这为生长因子进入护肤品市场提供了有力的支持。 过去的十余年，美国、西欧、韩国等广泛研究了人体表皮生长因子及其在化妆品中作为 功能性添加剂的应用，生产出含h e g f 的美容化妆品，如： 韩国：c o r e a j l a 公司于2 0 0 2 年开发了c o r e a n at i m er e c o v e r ys e r i e s 品牌 美国：b a y sb r o 、硼l a b s 公司于1 9 9 7 年开发了r e v i v e 品牌 现在e g f 也被我国美容领域研发应用，如j 香港：领前基因有限公司约2 0 0 0 年开发了e g fp l u s 品牌 4 第三章基本配方试验 第三章基本配方试验 目的和意义：研究基本配方及基本工艺，为下一步研究含e g f 等功效成分的化妆品提供 配方及工艺支持。 3 1 试验材料与设备 ( 1 ) 主要试验材料 表3 1 试验材料 m l b l e3 11 、e s tm a t e r i a l 原料名称原料提供商 f o n t a n o v6 8 a r l a c e l1 6 5 十六十八混合醇 s e p c i d eh b 蜂蜡 异硬脂酸异丙酯 异壬酸异壬酯 二甲基硅油 天然角鲨烷 合成角鲨烷 乳木果油 霍霍巴油 白矿油 生育酚醋酸酯 红没药醇 卡波尔 去离子水 1 ，3 丁二醇 乙二胺四乙酸二钠 三乙醇胺 咪唑烷基脲 香精 s e p p i c 上海办事处 上海高维 上海高维 s e p p i c 上海办事处 上海高维 上海高维 德之馨上海办事处 道康宁上海办事处 上海高维 广州进新 科宁广州办事处 广州科友 杭州炼油厂 帝斯曼广州办事处 德之馨上海办事处 诺誉化工 高宝化妆品公司 广州中兆 广州中兆 广州中兆 i s p 广州办事处 i f f 广州办事处 5 江南大学工程硕士学位论文 ( 2 ) 主要仪器设备 表3 2 仪器设备表 t a b i e3 - 2i n s t n h n e n ta n de q u i p m e n t 3 2 试验方法与步骤 乳化产品工艺，试验操作过程为： 第一步：将下面配方中( a ) 物料加入洁净的烧杯内并加热至8 0 ，保温灭菌1 0 m i n ； 第二步：将( b ) 物料加入另一烧杯中，先将卡波波分散在水中，再加入其余物料，加热 至少8 0 度保温1 0 m i n ；将( b ) 物料先抽入乳化锅，保持温度在7 5 8 0 ； 第三步：在搅拌下，将( a ) 物料加入到( b ) 物料中，乳化温度7 5 8 0 ，均质乳化5 m i n ； 降温； 第四步：6 0 6 5 ，将( c ) 物料加入，搅匀，搅拌降温至4 0 5 时加入( d ) 物料混合 物，当温度降至3 5 2 时加入( e ) 物料搅匀，得到护肤霜半成品，待用。 3 3 试验配方 配方如表3 3 所示。 表3 3 试验配方( w w ，) t a b l e3 - 3t e s t i n gf o 硼u l a t i o n ( w w ，) 6 第三章基本配方试验 异壬酸异壬酯 5 o o5 0 05 o o 二甲基硅油 1 0 01 o o 1 0 0 天然角鲨烷 2 0 02 0 02 0 0 合成角鲨烷 乳木果油 1 5 01 5 01 5 0 霍霍巴油 3 0 03 0 03 o o 白矿油 生育酚醋酸酯 0 5 00 5 00 5 0 红没药醇 0 1 0 o 1 00 1 0 b 组卡波波 o 2 0o 2 00 2 0 去离子水 t 01 0 0 t o1 0 0 t 01 0 0 l ，3 丁二醇 5 0 05 0 05 0 0 乙二胺四乙酸二钠 0 0 5o 0 5o 0 5 c 组 三乙醇胺 0 1 6o 1 6o 1 6 d 组咪唑烷基脲 0 2 5o 2 5o 2 5 e 组香精0 1 0o 1 0o 1 0 5 0 0 1 0 0 2 0 0 1 5 0 3 0 0 0 5 0 0 1 0 0 2 0 t 01 0 0 5 0 0 o 0 5 o 1 6 0 2 5 0 1 0 备注：试验批量为l 公斤批。 3 4 试验样品分析检测 3 4 1 检测材料与设备 ( 1 ) 主要试验材料 去离子水 ( 2 ) 主要仪器设备 数字酸度计( p h s 3 c ) 生化培养箱( l l m 1 5 0 ) 冰箱( k g l 8 v 2 1 t l s ) 3 4 2 检测方法 高宝化妆品公司 上海精密科学仪器公司( 雷磁仪器厂) 上海一恒 西门子 参考行业标准q b t1 8 5 7 ( 1 ) 外观 取样品在室温和非阳光直射条件下进行目测。 ( 2 ) 香气 取样品用嗅觉进行辨别。 ( 3 ) p h 值 7 江南大学工程硕士学位论文 按g b t1 3 5 3 1 1 中规定的方法进行测定( 稀释法) 。 ( 4 )耐寒 预先将冰箱调节到5 1 0 ，把密封好的样品置于冰箱内。2 4 h 后取出，恢复至室温后目 测观察。 ( 5 )耐热 预先将培养箱调节到( 4 0 1 ) ，把密封好的样品置于培养箱内。2 4 h 后取出，恢复至室温 后目测观察。 ( 6 ) 微生物 按卫法监发 2 0 0 2 】第2 2 9 号中规定的方法检验。 3 4 3 检测结果 检测结果如表3 4 所示。 表3 4 样品检测结果 t a b l e3 - 4a n a l y z er e s u l t so fs 锄p l e 3 5 样品稳定性试验 3 5 1 试验材料与设备 试验样品 电热鼓风干燥箱( 1 0 1 1 a ) 冰箱( k g l 8 v 2 l t l s ) 8 上海浦东荣丰 西门子 第三章基本配方试验 3 5 2 试验方法 ( 1 ) 将样品作耐热，耐寒，光照的破坏性实验；分别放置于烘箱，冰箱，窗台，每隔一个 月观察；考察其稳定性。 ( 2 ) 电热鼓风干燥箱设定温度为4 0 4 5 ，冰箱设定温度为- 5 - 1 0 。 3 5 3 试验结果 试验结果如表3 5 所示： 表3 5 样品稳定性试验结果 t a b l e3 - 5s t a b i l i t yt e s t i n gr e s u l t so fs 锄p l e 3 6 分析与讨论 配方的设计是参考了平时积累的经验，配方一、配方二与配方三主要是乳化剂不同；配 方与配方四主要是油酯不同。主要从以下几方面来分析与讨论： 3 6 1 基本配方的稳定性比较 行业标准q b t1 8 5 7 润肤膏霜并没有要求进行破坏性试验，本实验进行此项试验，是 利用行业积累的研发经验，对于考查产品的稳定性有较好的参考价值。配方一在低温下稳定 9 江南大学工程硕士学位论文 性不及配方二好，说明该乳化剂对该配方体系不太适合。配方三由于有天然油脂，长期在较 高温度下可能会变质。若保质期要求二年，则可选择。 3 6 2 基本配方的原料成本比较 基本配方的原料成本大概如表7 所示。 表3 6 配方原料成本 t l b l e3 6f o r m u l a t i o nc o s to fm a t e r i a l 由于原料价格随着市场的变化而波动，以上成本核算也会随着价格的波动而变动。香精、 去离子水在配方成本中影响不大，不计在以上成本内。 3 6 3 基本配方外观及肤感比较 外观总体评价：配方一最好，配方三和配方四次之，配方二较差 l o 第三章基本配方试验 肤感感受：配方一最好，配方三和配方四次之，配方二较差 3 7 小结 从试验结果看，配方三或配方四可以用于下一步添加功能性原料的试验。 因考虑e g f 在化妆品中的活性会随时间而减弱，产品保质期一般2 年：另外含e g f 的化妆品 属高档化妆品，天然或植物来源的油脂护肤品质更优良，而且基质化妆品的成本通常不限制： 所以下一章实验基础配方选用配方三。 江南人学工程硕士学位论文 4 1 概述 第四章e g f 化妆品的美白延缓衰老效果试验 近年来，人们的生活水平不断提高，对r 用消费品的需求也不断加大，特别对日用化妆 品中的功能护肤品的需求发展迅速。很多功能护肤品如防晒、保湿、抗衰老、美白、祛痘、 祛斑、控油、丰胸、减肥等品类繁多，其中美白是亚洲人的向往：抗衰老是人类普遍关注的， 也是人类梦寐以求的。皮肤衰老是机体衰老的重要外在表现之一，随着年龄的增长，皮肤的 老化越来越明显，皮肤衰老表现为皮肤干燥、保湿屏障功能减弱、皮肤弹性减弱、表皮更新 减慢、角质细胞活力下降、表皮受伤后修复能力减弱，甚至出现皮肤萎缩、皱裂和老年斑等。 阳光照射或其它环境因素也能引起皮肤衰老和受损，降低皮肤活性。皮肤的老化不仅影响了 人体的容貌和形象，而且还严重妨碍了人体皮肤的生理功能，甚至还会造成皮肤严重的病理 性改变。生物活性多肽是皮肤护理的最佳活性成分，能够控制或调节皮肤老化进程，保护受 损皮肤，延缓皮肤老化，对保持正常皮肤的结构和功能、维持机体的正常生理活动和代谢具 有重要意义。 人体细胞，从新生到老化是一个自然过程。皮肤细胞也同样有这样一个过程，表现为皮 肤的自然脱屑。当此种自然脱屑功能减退时，肌肤就会显得粗糙、暗淡无光，而且护肤营养 品也无法有效地渗透到皮肤中。皮肤的老化涉及多种代谢活性降低，同时新合成的胶原减少， 真皮的结缔组织脆弱、细胞及皮肤血管减少。e g f 能促进皮肤细胞对营养物质的吸收，加速 皮肤细胞的新陈代谢，促进皮肤细胞的分裂与生长，促进透明质酸和糖蛋白的合成。透明质 酸能使皮肤变得滋润、光滑、柔软，防止皮肤干燥粗糙、延缓皮肤的老化。 e g f 能促进细胞的再生和组织修复。有人曾做过实验研究：在培养基中加入e g f ，使 之作用于人的离体皮肤，发现此种培养基能加速皮肤细胞的繁殖，特别是对成纤维细胞再生 是具有很强的活力作用。e g f 能促进新生细胞的生长，替代受紫外线照伤的细胞，以降低皮 肤中黑色素细胞的数量。补偿外源性e g f ，目的在于恢复衰老细胞e g f 的正常生理水平，阻 遏细胞衰老的进程。人体皮肤随年龄增长，皮肤生长因子水平降低，作用减弱，另一方面， 皮肤对生长因子缺乏更为敏感，导致对外源性e g f 的需求和依赖随年龄增长而相应地增大【4 j 。 本章利用第二章的基本配方及基本工艺针对含e g f 的化妆品进行稳定性试验、功效试验。 4 2 试验材料与设备 4 2 1 主要试验材料 去离子水 g gh e g f 高宝化妆品公司 高宝化妆品公司 1 2 第四章e g f 化妆品的美白延缓衰老效果实验 深海鱼胶原蛋白 辅酶q 1 0 溶角蛋白酶 甘草提取物 噻酮 透明质酸 小麦蛋白 4 2 2 主要仪器设备 广州妙义 深圳长利达 深圳长利达 深圳长利达 广州同一化工 山东福瑞达 上海德之馨 表4 1 试验仪器设备 t a b l e4 一lt e s t i n gi n s t m m e n t 4 3 试验配方 选用第二章的基本配方三作为护肤霜基质，含e g f 的化妆品由此护肤霜基及功能添加剂 混合而成，以重量百分比计，护肤霜基组份为7 0 9 0 ，功能添加剂为1 0 3 0 ，其中： 所述功能添加剂由下列成分构成，其以重量百分计： 去离子水6 1 9 9 9 g gh e g fo 0 0 1 0 深海鱼胶原蛋白1 0 o o 辅酶q 1 01 o o 溶角蛋白酶5 0 0 甘草提取物1 0 o o 噻酮1 0 0 透明质酸1 o o 小麦蛋白1 0 0 0 试验配方如下表所示： 表4 2 含e g f 的化妆品试验配方( w w ，) 4 4 试验工艺 t a b l e4 - 2t e s t i n gf o m u l a t i o n ( w 1 ，) 1 3 江南大学工程硕士学位论文 制作方法，步骤如下： 第一步：先将透明质酸分散溶解于去离子水中，在洁净空间于4 0 下，将功能添加剂( 除 h e g f 外) 各成分混合溶解。 第二步：打开h e g f 的封盖，按l m 曲e g f 用1 m l 无菌蒸馏水溶解的比例，将无菌蒸馏 水加入装h e g f 冻干粉的管里，封好盖后用指力抖至完全溶解，呈透明液。打开封盖，用无 菌针筒吸入配好的溶液，再取掉针头，套上h e g f 专用过滤器，略施力缓慢下推针筒，让h e g f 溶液通过过滤器，于3 5 左右加入功能添加剂组分。 第三步：将3 5 左右的功能添加剂组分按配方比例加入到3 5 左右的护肤霜基质组份， 混合搅匀即可。 第四步：检验合格即可灌装。 4 5 试验样品分析检测 4 5 1 检测材料与设备 ( 1 ) 主要试验材料 去离子水 ( 2 ) 主要仪器设备 数字酸度计( p h s 3 c ) 生化培养箱( l r h 1 5 0 ) 冰箱( k g l 8 v 2 l t l s ) 4 5 2 检测方法 上海精密科学仪器公司( 雷磁仪器厂) 上海一恒 西门子 参考行业标准q b t1 8 5 7 ( 1 ) 外观 取样品在室温和非阳光直射条件下进行目测。 ( 2 ) 香气 取样品用嗅觉进行辨别。 ( 3 ) p h 值 按g b t1 3 5 3 1 1 中规定的方法进行测定( 稀释法) 。 ( 4 ) 耐寒 预先将冰箱调节到5 - l o ，把密封好的样品置于冰箱内。2 4 h 后取出，恢复至室温后目 测观察。 ( 5 ) 耐热 预先将培养箱调节到( 4 0 1 ) ，把密封好的样品置于培养箱内。2 4 h 后取出，恢复至室温 后目测观察。 ( 6 ) 微生物 1 4 第四章e g f 化妆晶的美白延缓衰老效果实验 4 6 人体试用评价 从产品在保湿性，提高皮肤弹性，抗皱性，美白( 保持健康肤色) 几方面进行评估，评 估方法采用试用调查评分法。选取2 0 位3 5 4 5 岁年龄段的女性作为试用对象，每天使用2 次， 连续使用5 6 天，由消费者自评，三个配方样品分不同人群试用。各项使用效果总分为5 分， 5 分为最高分，表示极好，非常满意；4 分为很好；3 分为可以接受；3 分以下为不好，不能 接受。以下为各项平均得分。结果见下表： 表4 4 试用调查汇总表 t a b l e 4 - 4s 1 l h l m a r i z i n go fi n v e s t i g a t e 1 5 扛南人学t 程硕士学位论文 以下数据来自于法国的专业美容产品测试中心。 g 8 0 l ： i 5 0 i ： i 2 0 宣 10 星 o c o m p e t o r t e s t 【n g 1w e e k2 e e k sw e e k s 日r p 2 0 0 0 ”1 13 6 口r p 2 叩0 川13 7 口r 朗0 0 0 ，”1 0 日口r p 2 0 0 0 川1 3 9 警：盎鉴竺譬f 篡：i 普： ! 激：盏燃篙嚣絮兰嚣嚣墨：翟 伸，c ed 棚，b l o - d 咖a t l n d i | k m p2 予c m l h u 盟4 5 * 非c 绿也：配方二样品紫色：配方! 样品粉乜：配方一样品蔽色：空白对照样品 图4 1 光滑肌肤测试 f i g u m 4 - ls m o o t t i r i e s sc o m 州t o r 把s 吐n g 第四章e o f 化妆品的美白，延缓衰老效果实验 _ ，、i 一- 1 j c o m p e t i t o r t e s t i n g 2 w e e k s4 w e e i 荡 口r p 2 口1 3 6口删1 1 1 3 7 口1 1 1 3 日口哪1 3 9 ：品咒总嚣譬篡：翟：翟：= 黼= 嚣：= ：譬篇嚣；篙第箸：僦! 制：捻 州c d l yb l o - c i m 州n d r m p2 十c ，r ih u m 拈 备注；绿色配方二样8 紫色：配方= 样8粉色：配方一样s 旋也：窄扫对m 样日 图4 - 2 减少皱纹测试 f i g u 陀4 - 2f o l dc o u n tc o m p 甜t o r t e s t m g r a d l a n c e c o m p e t l t o r t e s t l n g 8 i i 号 f 曼 搴 茁 ； 垩 r a d 1 w 8 e k2 w 聃k s4 w o e k 口r p 2 0 d “1 1 1 3 6 口r p 2 口d 口1 1 1 3 7 口r 0 2 0 0 0 1 1 1 3 8 口r p 2 0 0 。，1 1 1 3 9 ：臻溢嚣舅离：翟嚣篙湍艘盛：茹徽高孙黜躲嚣嚣恐a r f n ，t e m p2 铲c r “h u m 删 蔷注：绿色：配冉一样晶紫色：配a 二样 糟色：配自一样品衄色：空白刈麒样品 图4 _ 3 肌肤亮泽测试 f i g u r c 4 - 3 r a d i 拍咖p e n t o f t c s t i n g l7 o与恤惦加篮s；弱柏 一墨#no善藿葛=ggpa一董拿磊 江南大学t 程硕士学位论文 8 f e ? e 兽 蔷 ； 垩 s u p p l e n e s s c o m p e t i t o r t e s t i n g 锄。d b n e s s1v i 。e k 口阳2 0 0 w 1 1 1 3 6 口睁0 。0 “1 ”3 7 口斧2 。0 口1 1 1 3 8 口r p 2 0 0 口1 1 1 3 9 嬲淼尝湍：黜黜刿? 端勰翟黜躲豁僦一 r0 f n r h m p2 c ，r ih u m4 5 需汁：绿色；配方一样b 紫乜：配方二样b 耪也：配方一样品 蓝色：空白对照样品 图4 4 柔软肌肤钡4 试 f i g u r e4 4s ”p p l e n c s sc o m p c t l t o r 把砒i n g 4 8 试验配方 因功能添加剂组除h e g f 外，还含有别的延缓衰老阻及美白的活性成分，上述试验的结果 代表的是h e g f 与其它组分共同作用的结果：如果上述实验取消h e g f ，其结果又如何呢? 仍然选用第二章的基本配方三作为护肤霜基质，不含e g f 的化妆品由此护肤霜基及功能 添加剂混合而成，以重量百分比计，护肤霜基组份为7 0 9 6 9 0 ，功能添加剂为1 0 3 0 ， 其中： 所述功能添加剂由下列成分构成，其以重量百分计： 去离子水6 19 9 9 g gh e g f0 深海鱼胶原蛋白1 00 0 辅酶0 1 0 1o o 溶角蛋白酶50 0 甘草提取物1 00 0 噻酮10 0 透明质酸10 0 小麦蛋白1 0o o 试验配方如下表所示： 第四章e g f 化妆品的美白延缓衰老效果实验 4 9 试验工艺 表4 5 不含e g f 的化妆品试验配方( w w ，) 1 a b l e4 5t e s t i n gf o m u l a t i o n ( w 厂w ，) 制作方法，步骤如下： 第一步：先将透明质酸分散溶解于去离子水中，在洁净空间于4 0 下，将功能添加剂各 成分混合溶解。 第二步：将3 5 左右的功能添加剂组分按配方比例加入到3 5 左右的护肤霜基质组份， 混合搅匀即可。 第三步：检验合格即可灌装。 4 1 0 试验样品分析检测 4 1 0 1 检测材料与设备 ( 1 ) 主要试验材料 去离子水 ( 2 ) 主要仪器设备 数字酸度计( p h s 3 c ) 生化培养箱( l i m 1 5 0 ) 冰箱( k g l 8 v 2 1 t l s ) 4 1 0 2 检测方法 上海精密科学仪器公司( 雷磁仪器厂) 上海一恒 西门子 参考行业标准q b t1 8 5 7 ( 1 ) 外观 取样品在室温和非阳光直射条件下进行目测。 ( 2 ) 香气 取样品用嗅觉进行辨别。 ( 3 ) p h 值 按g b t1 3 5 3 1 1 中规定的方法进行测定( 稀释法) 。 1 9 江南大学工程硕士学位论文 ( 4 ) 耐寒 预先将冰箱调节到5 1 0 ，把密封好的样品置于冰箱内。2 4 h 后取出，恢复至室温后目 测观察。 ( 5 ) 耐热 预先将培养箱调节到( 4 0 1 ) ，把密封好的样品置于培养箱内。2 4 h 后取出，恢复至室温 后目测观察。 ( 6 ) 微生物 按卫法监发【2 0 0 2 】第2 2 9 号中规定的方法检验。 4 1 0 3 检测结果 检测结果如下表所示。 表4 6 样品检测结果 1 a b l e4 6a n a l y z er e s u l t so fs 锄p l e 4 ”人体试用评价 从产品在保湿性，提高皮肤弹性，抗皱性，美白( 保持健康肤色) 几方面进行评估，评 估方法采用试用调查评分法。选取2 0 位3 5 4 5 岁年龄段的女性作为试用对象，每天使用2 次， 连续使用5 6 天，由消费者自评，三个配方样品分不同人群试用。各项使用效果总分为5 分， 5 分为最高分，表示极好，非常满意；4 分为很好；3 分为可以接受；3 分以下为不好，不能 接受。以下为各项平均得分。结果见下表： 2 0 第四章e g f 化妆品的美白延缓衰老效果实验 表4 7 试用调查汇总表 1 1 a b l e 4 - 7s u m m a r i z i n go fi n v e s t i g a t e 4 12 试验配方 以上试验是对乳化膏霜产品进行的，如果只是h e g f 精华液，结果又怎样呢? 试验配方如下表所示：( 原料来源同4 2 1 ) 表4 8 含e g f 的精华液试验配方( w w ，) 1 孙l e4 8t e s t i n gf o 肌u l a t i o n ( w 厂w ，) 4 13 试验工艺 制作方法，步骤如下： 第一步：先将去离子水升温至9 0 ，保温o 5 小时 第二步：先将透明质酸分散溶解于去离子水中，在洁净空间于4 0 下，将功能添加剂各 成分混合溶解。 第三步：检验合格即可灌装。 4 1 4 试验样品分析检测 4 1 4 1 检测材料与设备 2 l 江南大学工程硕士学位论文 ( 1 ) 主要试验材料 去离子水 ( 2 ) 主要仪器设备 数字酸度计( p h s 3 c ) 生化培养箱( l i m 1 5 0 ) 冰箱( k g l 8 v 2 1 t l s ) 4 1 4 2 检测方法 上海精密科学仪器公司( 雷磁仪器厂) 上海一恒 西门子 参考行业标准q b t1 8 5 7 ( 1 ) 外观 取样品在室温和非阳光直射条件下进行目测。 ( 2 ) p h 值 按g b t1 3 5 3 1 1 中规定的方法进行测定( 直测法) 。 ( 3 ) 耐寒 预先将冰箱调节到5 1 0 ，把密封好的样品置于冰箱内。2 4 h 后取出，恢复至室温后目 测观察。 ( 4 ) 耐热 预先将培养箱调节到( 4 0 1 ) ，把密封好的样品置于培养箱内。2 4 h 后取出，恢复至室温 后目测观察。 ( 5 ) 微生物 按卫法监发【2 0 0 2 】第2 2 9 号中规定的方法检验。 4 1 4 3 检测结果 表4 9 样品检测结果 t a b l e4 9 a n a l y z er e s u l t so fs a n l p l e 第四章e g f 化妆品的美白延缓衰老效果实验 4 15 人体试用评价 从产品在保湿性，提高皮肤弹性，抗皱性，美白( 保持健康肤色) 几方面进行评估，评 估方法采用试用调查评分法。选取2 0 位3 5 4 5 岁年龄段的女性作为试用对象，每天使用2 次， 连续使用5 6 天，由消费者自评，三个配方样品分不同人群试用。各项使用效果总分为5 分， 5 分为最高分，表示极好，非常满意；4 分为很好；3 分为可以接受；3 分以下为不好，不能 接受。以下为各项平均得分。结果见下表： 表4 1 0 试用调查汇总表 t a b l e 4 - 1os u m m a r i z i n go fi n v e s t i g a r t e 4 16 外部机构测试 以下数据来自于韩国c je n p 啪i 公司的测试。 江南人学 。程硕士学位论文 ! 4 1 7 试验配方 主二垦 ；一- - - 一l e o f t u 口州 蚓4 5 促进胶原合成效果测试 t e s th e o fi nc o l l a g e n8 y n t h e s i se 毹c t h e g f 与肽类化合物和透明质酸等保湿因子是否有正协同作用呢? 试验配方如下表所示：( 原料来源同421 ) 表4 1 1 含e g f 的精华液试验配方( w w ，) 1 曲1 e 4 一