（有机化学专业论文）三种南海海洋红树林内生真菌次级代谢产物的研究.pdf

中山大学硕士学位论文 三种南海海洋红树林内生真菌 次级代谢产物的研究 专业：有机化学 硕士生：马欢歌 导师：刘岚副教授 摘要 海洋微生物代谢产物的研究是近年来国际上的热点。海洋微生物由于特殊的 海洋生理环境，能产生结构独特，骨架新颖的各式各样的次级代谢产物。目前， 已经从红树林内生真菌次级代谢产物中分离得到许多结构新颖、具有良好生物活 性的化合物。海洋微生物活性物质开发是新型药物的重要来源，其研究具有非常 重要的意义。本论文主要对三种红树林内生真菌p a e c i l o m y c e ss p t r e e1 - 7 、z h l 8 2 、 b l 3 2 1 进行了大规模培养，并对其次级代谢产物进行了深入的研究，分离纯化 并测定了化合物的结构，对部分化合物进行了初步的生物活性测试。 第一章阐述了海洋真菌的研究背景及意义，对近年来从海洋真菌中分离得到 的具有抗肿瘤活性或细胞毒活性的化合物进行了总结，其中引用了化合物1 3 2 个。海洋微生物活性物质已成为寻找开发新药的来源。 第二章对硕士阶段的实验工作进行了总结。采用普通的液体培养基对三种红 树林内生真菌进行了培养。经薄层层析、柱层析等步骤分离纯化化合物，用1 d 2 d n m r ，m s ，i r 等方法测定化合物结构。分离得到了1 4 个化合物，从真菌b l 3 2 1 的菌液中分离得到了化合物酰化的艾里莫芬烷倍半萜烯化合物( 2 1 ) ， c y t o c h a l a s i nc ( 2 2 ) ，c y t o c h a l a s i nd ( 2 3 ) 以及1 9 ，2 0 - 环氧c y t o c h a l a s i nc ( 2 4 ) ，5 一 羧基蜂蜜曲霉素( 2 5 ) 。从真菌p a e c i l o m y c e ss p t r e e l 7 中分离得到了( + ) 3 ，3 ，7 ， 7 ，8 ，8 一六羟基一5 ，5 一二甲基连二蒽醌( 2 6 ) ，p a e c i l o x a n t h o n e ( 2 7 ) ，p e n i c i l l i d e 中山大学硕士学位论文 系列( 2 8 、2 9 ) ，麦角甾醇( 2 - 1 0 ) ，t e n e l l i ea c i da ( 2 1 1 ) ，1 4 甲基十五碳酸甲酯 ( 2 1 2 ) ，十八碳酸甲酯( 2 1 3 ) ，甘露醇( 2 1 4 ) 。从真菌b l 3 2 1 中分离得到了大量 的2 - 1 ，该化合物具有很好的抗肿瘤活性，对很多肿瘤细胞都具有抑制活性，其 异构体也具有很好的活性，因此可对其进行结构改造，进一步深入研究其构效关 系。c y t o c h a l a s i n s 类化合物具有广泛的药理活性，如抑制哺乳动物细胞在组织培 养时的分裂，抑制h i v 1 蛋白酶活性，抗菌和抗肿瘤活性。该菌还产生了大量的 细胞松弛素类化合物，已鉴定了其中3 个的结构，该菌具有非常重要的价值，需 要对其进行深入的研究。 关键词：海洋真菌，红树林内生真菌，次级代谢产物，抗肿瘤，细胞松弛素 l i 中山大学硕士学位论文 s t u d y i n go nt h es e c o n d a r y m e t a b o l i t e so ft h et h r e e m a n g r o v ee n d o p h y t i cf u n g if r o ms o u t hc h i n a s e a m a j o r ：o r g a n i cc h e m i s t r y a u t h o r ：h u a n g em a s u p e r v i s o r ：p r o f l a nl i u a b s t r a c t i n c r e a s i n g l y , t h ef i e l do f m a r i n em i c r o b e si sb e c o m i n gaf o c a lp o 硫f o rr e s e a r c h a n d r i s i n gn u m b e r so fn o v e lc o m p o u n d sc o n t i n u et ob ei d e n t i f i e d m a r i n em i c r o b e s c a l lp r o d u c ev a r i e ds e c o n d a r ym e t a b o l i t e sw i t hs p e c i a ls t r u c t u r e sa n dn o v e ls k e l e t o n s i ti ss i g n i f i c a n tt os t u d yb i o a c t i v ec o m p o u n d sf r o mm a r i n em i c r o b e s ，b e c a u s et h e ya r e t h ei m p o r t a n ts o u l c 愈3o fn e wm e d i c i n e s t h em a j o rw o r ko ft h ep a p e rw a st oc u l t u r e t h em a n g r o v ee n d o p h y t i cf u n g ip a e c i l o m y c e ss p t r e e1 - 7 ，z h l8 2 ，b l 3 - 2 - 1f r o m s o u t h c h i n as e at h r o u g hl a r g es c a l e ，a n dt or e s e a r c ht h es e c o n d a r ym e t a b o l i t e so ft h e f u n g id e e p l y s e v e r a lc o m p o u n d sw e r es e p a r a t e da n dt h es t r u c t u r e sw e r ed e t e r m i n e d t h ec o m p o u n d sw e r es t u d i e do nt h ec r u d y b i o a c t i v i t y t h ef i r s tc h a p t e ro ft h ep a p e rs u m m a r i z e dt h ec o m p o u n d sw h i c hw e r es e p a r a t e d f r o mm a r i n ef u n g iw i t hn o v e ls t r u c t u r e so rf i n ea n t i t u m o u ro re y t o t o x i cb i o a c t i v i t y a n d13 2c o m p o u n d sw e r ec i t e dt o t a l l y t h em a r i n eh a sb e c o m et h es o u r c eo ft h e n o v e ld r u g s i nt h es e c o n dc h a p t e r , t h ee x p e r i m e n ta n dt h er e s u l tw e r es u m m a r i z e do nt h e w o r k f u n g iw e r ec u l t u r e di nl a b o r a t o r yc o n d i t i o nw i t hu s u a lc u l t u r em e d i u m , g a t h e r e da n ds e p a r a t e da f t e ro n em o n t h t h e nt h ec o m p o u n d sw e r es p e r a t e db yt l c ， c o l u m nc h r o m a t o g r a p h y t h es t r u c t u r e so ft h ec o m p o u n d sw h i c hs e p a r a t e df r o mt h e f u n g iw e r ed e t e r m i n e db yt h em e t h o d so f1d 2 dn m r ，m s ，i r f o u r t e e nc o m p o u n d s i n 中山大学硕士学位论文 w e r e s e p a r a t e d f r o mt h e f u n g i t h ea c y le r e m o p h i l a n es e s q u i t e r p e n e ( 2 - 1 ) ， c y t o c h a l a s i nc ( 2 2 ) ，c y t o c h a l a s i nd ( 2 3 ) a n d19 ，2 0 - e p o x y c y t o c h a l a s i nc ( 2 4 ) ，a n d 5 - c a r b o x y m e n e i n ( 2 5 ) w e r eg o tf r o mt h ef u n g u sb l 3 2 1 t h ec o m p o u n d s ，s u c ha s ( + ) 一3 ，3 ，7 ，7 ，8 ，8 h e x a h y d r o x y - 5 ，5 一d i m e t h y lb i s d i t h i a n o n ( 2 6 ) ， p a e c i l o - x a n t h o n e ( 2 7 ) ，p e n i c i l l i d es e r i e s ( 2 8 ，2 9 ) ，e r g o s t e r o l ( 2 10 ) ，t e n e l l i c a c i d a ( 2 - 11 ) ，m e t h y lp a l m i t a t e ( 2 1 2 ) ，m e t h y ls t e a r a t e ( 2 - 1 3 ) ，m a n n i t o l ( 2 1 4 ) w e r eg o tf r o m t h ef u n g u sp a e c i l o m y c e ss p t r e e1 - 7 t h el a r g ea m o u n to fc o m p o u n d2 - 1w a sg o t f r o mf u n g u sb l 3 - 2 - 1 c m p o u n d2 - 1e x h i b i t sa n t i t u m o u ra c t i v i t ya n di tc a ni n h i b i t m a n yk i n d so fc a n c e rc e l l s i t si s o m e r sa l s or e p r e s e n ts t r o n ga c t i v i t y s oi t ss t r u c t u r e s h o u l db ec h a n g e da n ds t u d i e do i lt h er e l a t i o no fs t r u c t u r ea n da c t i v i t y c y t o c h a l a s i n s e x h i b i ts e v e r a lb i o l o g i c a la c t i v i t i e si n c l u d i n gm a r k e dc y t o s t a t i ce f f e c t so nm a m m a l i a n c e l l si nt i s s u ec u l t u r e ，i n h i b i t i o no fh i v - 1p r o t e a s e ，a n t i b i o t i ca n da n t i t u m o u ra c t i v i t y , e t c al a r g ea m o u n to fc y t o e h a l a s i n sw e r ei s o l a t e df r o mt h ef u n g u sa n dt h r e e s t r u c t u r e so f t h e r nw e r ei d e n t i f i e d t h ef u n g iw e r ew o r t ht or e s e a r c hd e e p l y k e yw o r d s ：m a r i l l e d e r i v e df u n g u s , m a n g r o v ef u n g u s ，s e c o n d a r ym e t a b o l i t e ， a n t i t u o u r , c y t o c h a l a s i n s 论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究 工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人 或集体己经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集 体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者签名：马掀 日期：d 7 年月9 日 学位论文使用授权声明 本人完全了解中山大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留 学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版，有权将学 位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆、院系资料室被查 阅，有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索，可以采用复印、缩印或其 他方法保存学位论文。 学位论文作者签名：马或砀k导师签名：办i 沁 日期：叼年月夕日 日期：。1 年6 月7 日 知识产权保护声明 本人郑重声明：我所提交答辩的学位论文，是本人在导师指导下完成的成果， 该成果属于中山大学化学与化学工程学院，受国家知识产权法保护。在学期间与 毕业后以任何形式公开发表论文或申请专利，均需由导师作为通讯联系人，未经 导师的书面许可，本人不得以任何方式，以任何其它单位作全部和局部署名公布 学位论文成果。本人完全意识到本声明的法律责任由本人承担。 学位论文作者签名：与西嗽 导师签名：荔i 彘 日期：。? 年易月9 日 日期：。1 年占月7 日 中山大学硕士学位论文 第一章海洋真菌及其次级代谢产物的抗肿 瘤活性研究进展 1 1 引言 近年来，科研工作者已经把海洋作为开发和寻找新药的来源，越来越多的人 投入到了对海洋的研究当中。海洋占地球表面积的7 0 ，蕴含了丰富的生物资源。 从海洋中发现了许多具有新结构、独特生理活性的化合物，这些发现进一步刺激 和加速了人们对海洋资源的开发和利用。海洋真菌及其次级代谢产物的研究已成 为热点，目前有超过1 5 种次级代谢产物应用于临床试验【心】。 海洋微生物具有生长周期短、代谢易于调控，菌种易采集和可以人工发酵大 规模培养的特点，因此，从海洋微生物中筛选生物活性物质具有广阔的前景。海 洋生物活性物质的研究开始于2 0 世纪6 0 年代，在美国r h o d ei s l a n d 科学家召开了 专题讨论会，主题为“海洋药物 【3 】。随后，至l j 2 0 世纪8 0 年代至现在，对海洋 细菌活性天然产物的研究有了较快的发展，引起了各国科学家的重视。 美国加州大学的f a u k l n e rd j 教授把从1 9 8 4 年至2 0 0 2 年( 1 9 8 5 年和1 9 8 9 年除 外) 在( n a t u r ep r o d u c t sr e p o r t s ) ) 上发表关于海洋天然产物的综述报告m 】；j w b l u n t 教授等人【& l l j l , k 2 0 0 3 年接手f a u k l n ed j 教授发表这一系列的综述性文章。 海洋真菌天然产物的研究在1 9 8 7 年以前的报道很少，从1 9 9 6 年起，研究报道大大 增多；至u 2 0 0 0 年以后，海洋真菌天然产物的研究达到一个高潮；到2 0 0 4 年，海洋 真菌天然产物的研究已经成为海洋天然产物研究的热点之一。 随着人类寿命的延长和环境污染的加剧，心脑血管疾病、肿瘤、艾滋病、糖 尿病、老年性痴呆等疑难疾病对人类健康的威胁日益严重，人类迫切需要寻找新 的、特效的药物来治疗这些疾病。特别是肿瘤，人体的各个组织器官都可能发生 癌变，已成为隐形杀手。目前还没有特效的药物来治疗这些癌变的组织，因此从 海洋微生物次级代谢产物中寻找抗肿瘤药物已成为当今的重大课题。建立了快速 的高通量筛选的方法，缩短了药物发现的时间【l2 1 。a l e j a n d r om s m a y e r 对具有 中山大学硕士学位论文 细胞毒活性的化合物以及其作用机制进行了总结，并对各个国家的研究情况进行 了说明 1 3 - 1 6 】。从数据上可以看出，化合物数量在不断增加，具有抗肿瘤活性的 化合物的发现速度呈上升趋势。 1 2 抗肿瘤活性海洋天然产物研究新进展 丁玲等【1 7 】研究了一株分离自条斑紫菜( p o r p h y r ay e z o e n s i s ) 丝状体上的真菌， 经过电镜观察到的真菌形态，判断该菌属于曲霉( a s p e r g i l l u ss p ) 属。对其次级代 谢产物进行分离得到了两个化合物c y c l o ( l t r p - l p h e ) ( 1 ) 【1 8 1 和w i n6 4 8 2 1 ( 2 ) 1 9 - 2 0 并第一次报道了其抗肿瘤活性。利用m t t 法测定了其抗肿瘤活性， c y c l o ( l t r p - l p h c ) ( 1 ) 和w i n6 4 8 2 1 ( 2 ) 对3 7 株人体肿瘤细胞株都具有中等的细胞 毒活性，平均i c 5 0 分别为3 - 3 、5 8i t g m l o 6 高宗华等【2 1 1 研究了一株从海藻中分离得到的海洋真菌b z y t - 2 1 ，其次级代谢 产物具有抗肿瘤活性。a s p e r p h n a m a t e ( 3 ) 2 2 1 对n u g c 3 f f ；f l h o n e 1 肿瘤细胞的i c 5 0 分别为1 7 1 2 、8 6 8 弘g m l ，( 2 2 e ，2 4 r ) 6 p 甲氧基麦角甾一7 ，2 2 二烯3 p ，5 a - 二醇 ( 4 ) 、( 2 2 e ，2 4 r ) 3 p ，5 a ，9 a 三羟基麦角甾2 7 ，2 2 二烯6 酮( 5 ) 【2 3 】抑制人宫颈癌 h e l a 细胞生长的最低浓度分别为1 6 、8i t g m l 。 2 o 上 。洲 中山大学硕士学位论文 陈劲平等【2 4 彩1 从海洋红树林真菌p h o m o p s i ss p a 12 3 的次级代谢产物中分离 得到了一个新的化合物南强菌素( d e a c e t ym y c o e p o x y d i e n e ) ( 6 ) ，属于环氧二烯聚 酮类，该化合物具有良好的抗肿瘤活性。 韩小贤等【2 6 】对海洋真菌烟曲霉h 1 0 4 ( a s p e r g i l l u s f u m i g a t u sh 1 0 4 ) 1 拘代谢产 物进行研究。 分离得到了7 个生物碱( 7 1 3 ) ，f u m i q u i n a z o l i n ej ( 7 ) 、f u m i q u i n - a z o l i n ef ( 8 ) 、f u m i q u i n a z o l i n eg ( 9 ) 、f u m i q u i n a z o l i n ec ( 1 0 ) 、f u m i q u i n a z o l i n e n 11 ) 、t r y p t o q u i v a l i n ej ( 1 2 ) 和p s e u r o t i na ( 1 3 ) ，对小鼠乳腺癌t s f t2 1 0 细胞均 具有抑制活性。4 个硫代二酮哌嗪类( 1 4 1 7 ) 1 2 7 1 ，胶霉毒素( g l i o t o x i i l ，1 4 ) 、b i s d e t h i o - b i s ( m e t h y l t h i o ) g l i o t o x i n ( 15 ) 、b i s - - n - n o r g l i o v i c t i n ( 16 ) 、d i d e h y d r o b i s d e t h i o b i s ( m e t h y l t h i o ) g l i o t o x i n ( 1 7 ) 。化合物1 4 在浓度为o 1 肛g m l 能完全抑制小鼠白血 病p 3 8 8 细胞和人肺癌a 5 4 9 细胞的增殖。对小鼠乳腺癌t s f t2 1 0 细胞显示出不 同程度的抑制活性。 7 8 9 o o ho 1 4 4 2 1 3 1 5 中山大学硕士学位论文 s 毗n s 【2 8 】从海洋青藻菌s y m p l o c as p 中分离并鉴定了化合物b e l a m i d e a ( 1 8 ) ，其结构为高度甲基化的线性四肽。该化合物具有抗有丝分裂的特征，温 和的细胞毒活性( i c 5 0 0 7 4 “m ，h c t 1 1 6 结肠癌细胞系) 。其结构类似于d o l a s t a t i n 10 ( 19 ) 和1 5 ( 2 0 ) 。从f i j i a nl y n g b y am a j u s c u l a 中得到了d e s m e t h o x y m a j u s c u l a m i d e c ( d m m c ) ( 2 1 ) ，具有很好的抗肿瘤的活性( i c 5 01 9n m ，h c t 1 1 6 人类结肠癌细 胞系) 。其水解产物l i n e a rd m m c ( 2 2 ) 对肿瘤细胞也具有活性，可杀死细胞。 丫 y 1 8 x ；j i 吕入 再望再啤啤再涉义 o c h p 1 9 崎衬以x 以再 科懈p 0 鸽v f 0 。h 御 的研究，得到了8 个聚g e n t i s y la l c o h o l 类化合物( 2 3 3 0 ) ，对h l 6 0 、m o l l 4 、 6 1 、5 8 、1 8 3 、6 2 3p e d m l ) ，2 4 ( i c s o 分别为5 5 、5 6 、1 8 2 、5 7 3i _ t e , r n l ) ，2 5 ( i c 5 0 4 中山大学硕士学位论文 分别为5 3 、5 5 、1 4 3 、3 8 5 肛g m l ) ，2 6 ( i c 5 0 分别为5 4 7 、6 4 、9 6 、5 9 0j l ，咖i ，) ， 2 7 的活性最低，其中化合物2 8 对四种癌细胞的活性都较强( i c 5 0 分别为5 1 、6 5 、 5 7 、6 0 肛g m l ) 。化合物3 1 ，3 2 对h l 一6 0 有较弱的抑制活性( i c 5 0 分别为9 2 、 3 7 8 嵋m i ，) 。 o ho ho ho h o o ho h 2 3 o h o o h 2 6 o ho h h 瓯 hc i r h h o h 2 4 o h o ho h o h o o h 2 5 o ho h o ho h o ho h 2 7 2 8 o ho ho h o ho ho h 3 0 o h o h o h 王发左【3 0 】对4 种海洋真菌的次级代谢产物进行了研究，得到了5 个杂螺环 f u m i t r e m o r g i n 类生物碱( 3 3 3 7 ) 【3 ，2 个细胞松弛素( 3 8 3 9 ) 。其中3 6 3 7 对 m o l t 4 、a - 5 4 9 、h l - 6 0 和b e l 7 4 0 2 四株细胞株都表现出较好的抗肿瘤活性， 细胞松弛素3 8 和3 9 对a 5 4 9 细胞显示较强的抗肿瘤活性( i c 5 0 分别为8 2 、3 1 p 峋。 闰 ：。h l 三三 o t l j _ v 3 8 中山大学硕士学位论文 m e o k u s u l n i ，t 研究组圈对海洋真菌a s p m g i l l u so s t i a n u ss t r a i n0 1f 313 进一步 研究时，在其发酵培养基中加入了溴元素，虽然他们没能得到溴代的次生代谢产 物，但是发现由含溴培养基培养产生了与之前完全不同的物质，从中分离得到了 三个新的十四元大环内酯类化合物a s p o g i l l i d e s a - c ( 4 0 4 2 ) 。细胞毒活性试验表 明，a s p c r g i l l i d e sa c 对l 1 2 0 1 有细胞毒活性，l d s o 分别为2 1 ，7 1 0 和2 0 “g m l 。 o 4 04 1 o a m a l ，h a 等【3 3 1 对一株从植物中分离得到的内生真菌彳，印e 肠删s p 的代 谢产物进行了生物活性的研究，在液体和固体培养基不同的条件下得到的代谢产 物也不同，并对得到的产物进行了细胞毒活性的测试，其中有3 个化合物显示了 较强的细胞毒活性( 4 3 4 5 ) ，其e c 5 0 值在0 2 - 7 3p g m l 之i 猗- ( l 5 1 7 8 y 细胞) 。 h o h o ho 4 3 h h o hoo h o 4 4 oo h o ho 4 5 o h t a o ，k j 等【3 4 1 从源于海洋的丝状真菌a s p e r g i l l u sg l a u c u s 中得到了一个次 级代谢产物a s p e r g i o l i d ea ( 4 6 ) ，是一种新的抗肿瘤药物。通过加入同位素1 3 c 标 6 中山大学硕士学位论文 记物来跟踪其代谢的生物合成途径，实验表明其代谢过程是通过聚酮途径获得 的。c a i , m h 等【3 5 】对其培养基的组成进行了优化，采用曲面响应法得到最佳的 培养条件。 o h o h oo h 4 6 m a m e e l a m , c 等阴从一株海洋内生真菌h y p o r c r e a l e s 中分离得到了单端孢 霉烯类化合物，b r e f e l d i na ( 4 7 ) ，8 - d e o x y - t r i c h o t h e c i n ( 4 8 ) ，t r i v h o t h e c o l o n e ( 4 9 ) ， 7 a h y d r o x y t r i c h o d e r m 0 1 ( 5 0 ) 和7 a - h y d r o x y s c i r i ：i e n e ( 5 1 ) 。5 1 是第一次从天然产物中 分离得到。对其进行了细胞毒活性测试，4 7 对人口腔鳞状细胞癌( k b ) ，人乳腺 癌( b c 1 ) ，人小室肺癌细胞( n c i - h 1 8 7 ) 显示了很高的活性，i c s o 值分别为o 1 8 、 o 0 4 、o 1 1p g m l 。4 8 和5 0 对b c - l 、n c i - h 1 8 7 具有选择性，i c s o 值分别为0 8 8 、 1 4 8 ( 4 8 ) ，2 3 7 、1 3 7 肛g m l ( 5 0 ) 。4 9 和5 1 对这三种癌细胞具有中等的活性。 ：l o h 乙h ：l 。l c 心 4 9 5 0 5 1 c h a i m t ，i c 等【3 7 】对源自海洋的真菌d 幽却d 一“ms p 及c 砌2 4 7 0 1 的代谢产 物进行了研究，得到了3 个具有细胞毒活性的化合物( 5 2 5 5 ) ，5 3 和5 4 是5 2 的 衍生物。5 3 5 5 对1 1 种癌细胞显示了较强的细胞毒活性，其i c 5 0 值在o 1 2 5 肛g m l 之间。 7 中山大学硕士学位论文 r e e i s o m e r 5 3 r = m e z - i s o m e r 5 4 r = b n 5 5 z - i s o m e r l i ，l d 等【3 8 】从红树林植物h i b i s c u 匹t i l i a c e u s 的茎部组织中分离到了一株内 生真菌e u r o t i u mr u b r u m ，通过对其培养得到了一系列的二氧哌嗪类生物碱，其 中有2 个新的结构d e h y d r o v a r i e c o l o r i nl ( 5 6 ) 、d e h y d r o e c h i n u l i n ( 5 7 ) ，对其进行 了活性测试，该化合物具有清除自由基的活性，对p 3 8 8 、h l 6 0 、a 5 4 9 均显示 有细胞毒活性。 o g u o ，l 等1 3 9 】对地钱s c a p a n i av e r r u c o s a 及其内生真菌c h a e t o m i u m f u d i f o r m e 的乙醚提取物进行了g c m s 分析，并研究了其粗提物的抗肿瘤活性， 其中cf u d i f o r m e 的粗提物有较强的抗肿瘤活性，对l o v o ，h l 6 0 的i c s o 值 分别为9 1 l 、4 0 6p g m l 。 g e ，h m 等【4 0 】从内生真菌c h a e t o m i u mg l o b o s u m 的培养物中得到了化合物 c h a e t o g l o b i n sa ( 5 8 ) 和b ( 5 9 ) ，具有全新的骨架，对其进行了抗肿瘤活性的研究， 具有非常强的活性，可以影响癌细胞的基因表达，可作为肿瘤生长的抑制剂。 中山大学硕士学位论文 a l e x a n d e r ，p 掣4 1 1 从海洋藻类真菌m o m o 班c t y sp u t r e d i n i s 代谢产物中分离得 到了化合物m o n o d i c t y o c h r o m e sa ( 6 0 ) 和b ( 6 1 ) ，新的二聚体结构。对其进行了抗 肿瘤活性的研究，结果表明其对细胞色素p 4 5 01 a 的i c 5 0 值分别为5 3 、7 5 i t g m l 。 o h a o o 6 0 6 1 y uz g 等1 4 2 从源于海洋海绵t e t h y aa u r a n t i u 的真菌s c o p u l a r i o p s i s b r e v i c a u l i s 进行了研究，得到了化合物s c o p u l a r i d e sa ( 6 2 ) 和b ( 6 3 ) ，是三缩肽 类化合物，其结构为c y c l o - ( 3 h y d r o x y - 4 - m e t h y l d c c a n o y l - g l y - l - v a b d - l e u - l - a l a - l - p h e ) 和c y c l o - ( 3 - h y d r o x y - 4 - m e t h y l o c t a n o y l - g 1 y l - v a l - d l e u l - a 1 a - l p h e ) ， 对其进行了抗肿瘤活性，i c 5 0 值分别在1 0p g m l 左右( c o l 0 3 5 0 、p a n c 8 9 、h t 2 9 ) 。 h n h 9 r o 6 2 r = c 2 h 5 6 3 r = h 中山大学硕士学位论文 g a n g a d e v i , j 等【4 3 】从一株内生真菌b a r t a l i n i ar o b i l l a r d o i d e st a s s i 中分离得 到了紫杉酚( t a x 0 1 6 4 ) ，是一种有效且常用的癌症药物，是全世界癌症药物销售量 最大的药物之一。它被用于治疗子宫癌和乳腺癌，许多乳腺癌治愈者仍服用该药 以预防癌症的复发。用h p l c 对紫杉酚的产量进行测定，其产量为1 8 7 6p l ， 对b t 2 2 0 、h 11 6 、i n t 4 0 7 、h l 2 51 和h l k 2 1 0 有强的细胞毒活性，是一种很有潜 力的菌株。z h a n g ，p 等【删从t a x u sx m e d i a 中分到的真菌a s p e r g i l l u sc a n d i d u s m d 3 中也分到了紫杉酚。c h i ，y 等【4 5 】在n o d u l i s p o r i u ms y l v i f o r m e 中也发现了 该化合物，利用抑制消减杂交法对化合物的生物合成途径进行了研究，探寻产生 该物质的基因。g a n g a d e v i , k 等m 】从一株源于t e r m i n a l i aa r j u n a 的内生真菌 p e s t a l o t i o p s i st e r m i n a l i a e 中也得到了该化合物，其产量为2 1 1 1 “g l 。选取b t 2 2 0 、 h 1 1 6 、i n t 4 0 7 、h l 2 5 1 、h l k 2 1 0 细胞，对其进行了活性测试，该化合物具有较 强的抑制活性。k u m a r a n , r s 等【4 7 】从h i b i s c u sr o s a - s i n e n s i s 中分离到的真菌 p h y l l o s t i c t ad i o s c o r e a e 可以产生t a x o l ，通过改变培养基对其生长条件进行优化， 用h p l c 来定量，最大的产量可达到2 9 8i - t g l 。这一发现可能会为该药提供一个 充足的新来源，也可能使其成本大幅度降低。 o c h a n g , y c 等【4 8 1 从一株p h y t o p a t h o g e n i c 真菌中得到了a s c o f u r a n o n e ( a f ， 6 5 ) ，利用蛋白质展示法研究了其对人骨肉瘤细胞的活性，并采用二维电泳、基 质辅助激光解吸电离质谱法、生物信息学等多种方法研究其作用机制。 c l 6 5 林爱科4 9 1 对一株来源于南极p r y d z 湾海泥的真菌p r l 9 n - l ( p e n i c i l l i u ms p ) 的次级代谢产物进行了研究。该菌株的代谢产物可杀死鱼虾。以a 5 4 9 、h l 6 0 肿瘤细胞为模型，初步对分到的化合物进行了抗肿瘤活性的筛选，得到了两个具 1 0 中山大学硕士学位论文 有活性的化合物6 6 、6 7 和6 8 ，i c 5 0 值分别在( 1 2 2 、1 1 8 ) 、( 5 2 、2 8 3 ) 、( 2 1 5 、 2 4 ) p g m l 。 c i h c i 6 7 6 8 h 谭倪等5 0 】从红树林内源真菌f u s a r i u ms p # z z f 5 1 中分离得到了金属铜络合 物( 6 9 ) ，其结构为二( 5 丁基2 吡啶甲酸- n 1 ，0 2 ) 合铜( i i ) ，首次从自然界中发现。 研究了铜( i i ) 对络合物6 9 的产量和菌株生长的影响5 1 1 。选取了k b 、k b v 2 0 0 、 h e p g 2 肿瘤细胞对其进行了抗肿瘤活性测试，i c 5 0 值分别为3 5 4 、3 6 8 、2 5 1 2 “g m l 。 6 9 n u t c h a n a t ，p 等吲从真菌c h a e t o m i u mc o c h l i o d e sv n l0 l 和cc o c h l i o d e s c t h 0 5 中得到了1 2 个化合物，其中c h a e t o v i r i d i n e se ( 7 0 ) 和f ( 7 1 ) ，是两个新的结 构。选取了k b 、k b v 2 0 0 、h e p g 2 肿瘤细胞对其进行了抗肿瘤活性测试，均具 有细胞毒活性，i c 5 0 值分别为0 3 6 、0 3 2 、o 2 6i _ , g m l 。 7 07 1 l 氓z j 等从一株- 与a e g i c e r a sc o r n i c u l a t u m 共生的内生真菌p e n i c i l l i u m s p g q 一7 中得到了一系列新的t e t r a m i ca c i d s 衍生物，用m 丌法对其进行了抗肿 中山大学硕士学位论文 瘤活性的研究，筛选到化合物p e n i c i u e n o l sa 1 ( 7 2 ) 和b l ( 7 3 ) 对h l - 6 0 细胞系具有 较好的活性，其i c s o 值分别为0 7 6 、3 2 0 “g m l 。7 2 对a - 5 4 9 、b e l 一7 4 0 2 、p 3 8 8 细胞也有活性。 o h p e n i c i l l e n o la 17 2p e n i c i l l e n o lb 17 3 t a n , n 掣5 4 】从一株产自南海的红树林内生真菌n o 2 2 4 0 的次级代谢产物的 乙酸乙酯提取物中分离得到了4 个化合物，对其进行了抗肿瘤活性的研究，筛选 到化合物a l t e m a r i o l ( 7 4 ) 和a l t e m a r i o l4 - m e t h y le t h e r ( 7 5 ) 对k b 、k b v 2 0 0 细胞系 具有较强的活性，其i c 5 0 值分别为3 1 7 、3 1 2 和4 8 2 、4 9 4r t e g m l 。 o m e 7 4 7 5 r e h m a n , s 等【5 5 】从一株源于n o t h a p o d y t e s f o e t i d a 的内生真菌肫唧d ，口s p 中分离得到了喜树碱( c a m p t o t h e c i n 7 6 ) ，对该菌进行了鉴定，通过色谱和光谱法判 断抗肿瘤物质的存在。该真菌可作为抗肿瘤先导化合物的来源，需要对其进行更 深一步的研究。 ug y 等【5 6 】对真菌c h a e t o m i u mb r a s i f i e n s e 的次级代谢产物进行了研究， 发现了2 个新的d e p s i d o n e s 化合物，m o l l l i c e u i n si ( 7 7 ) 和j ( 7 8 ) ，对其进行了抗肿 瘤活性的研究，7 8 对b r e 0 4 、l u 0 4 、n 0 4 肿瘤细胞有较好的抑制活性，其g 1 5 0 值分别在2 5 8 6r t e , m l 之间。 h h o 1 2 7 8 中山大学硕士学位论文 s u 屯y 等【5 7 】从来源于海洋的真菌t r i c h o d e r m ar e e s e i 的代谢产物中得到了4 个聚酮类衍生物，t r i c h o d e r m a t i d e sa d ( 7 9 8 2 ) ，其中a 具有全新的五元环骨架， 对其生物合成途径进行了研究。选取a 3 7 5 s 2 胎记瘤细胞对其进行抗肿瘤活性 的研究，该系列化合物具有微弱的活性，其i c 5 0 值分别为1 0 2 2 、1 8 7 3 、3 8 3 和 2 2 2 0l _ t g m l 。 hc i r o o 8 1 o 8 0o o o t t m a n n , c 掣5 8 1 从真菌c l a d o s p o r i u ms p 5 0 1 刑的代谢产物中分离得到了 c o t y l c n i na ( 8 3 ) ，具有类似于细胞分裂素作用的生物活性物质，对特定的肿瘤细 胞表现出抗肿瘤活性，把该化合物与1 4 3 3 蛋白质结合在一起形成配合物，研 究其具有特定抗肿瘤活性的研究机制。 h o o c h a p o j t i u m , a 等人【5 9 1 从一株内生真菌n o d u l i s p o r i u m 够中分离得到了一个新 的聚酮类化合物n o d u l i p r e v e n o n e ( 8 4 ) ，包含四个手性中心和一个手性轴。对其进 行可活性测试，化合物8 4 作为细胞色素p 4 5 01 a 的竞争性抑制剂，其i c 5 0 值为 6 5 4 - 1 6p e c m l ，浓度低于2 5p g m l 时没有明显的细胞毒活性。因此具有作为化 学防癌制剂的潜力。 s h i o n o ，y 等f 删从一株真菌n e o n e c t r i ar a m u l a r i a ew o u e n wk s