脂代谢检验PPT课件.ppt

脂代谢及脂代谢紊乱检验,第一节概述,血脂：,TGPLFCCEFFA,TC,血浆脂蛋白：,血脂+载脂蛋白,CM、VLDL、LDL、HDL,CM、Lp、前Lp、Lp,ApoAApoBApoCApoDApoE,分类,载体、运输联系、配体激活,功能,合成部位,肝小肠,受体,LDL受体残粒受体清道夫受体,乳糜微粒,CM,TG（外源）,ApoB48,转运外源性TG,功能：转运TG合成部位：小肠,VLDL,LDL,ApoB100,功能：转运TG、TC识别LDL受体合成部位：肝、小肠,TG（内源性）,TC,HDL,高密度脂蛋白,TCApoA,逆向转运胆固醇到肝,功能：HDL的主要结构蛋白LCAT的激活剂合成部位：肝、小肠,脂蛋白受体,糖蛋白调节细胞外脂蛋白的水平,LDL受体残粒受体清道夫受体,运送及清除,LDL受体：识别ApoB100（ApoE）对维持细胞和全身胆固醇平衡起重要作用,识别ApoE，清除血液循环中CM残粒和-VLDL残粒,巨噬细胞表面,介导修饰LDL从血液循环中清除,HDL代谢：胆固醇逆转运(RCT),VLDL-IDL-LDL代谢：由肝合成VLDL,释放入血后转变为IDL和LDL,并被肝或其它器官代谢的过程,CM代谢：饮食摄入的胆固醇和TG在小肠中合成CM及其代谢过程,外源性代谢,内源性代谢,LP代谢,高脂血症:TC或/和TG,高脂蛋白血症:CM、VLDL、LDL、HDL,高脂血症的分类,临床表型,是否继发其他,基因分型法,Fredrickson,血清(血浆)外观：在4冰箱放置16-24h后的血清外观(2)血脂浓度：血清TG、TC含量(3)各种血浆脂蛋白升高程度,依据,型高脂蛋白血症a型高脂蛋白血症b型高脂蛋白血症型高脂蛋白血症型高脂蛋白血症型高脂蛋白血症,4静置过夜，表面奶油状，下层澄清血清TG，血清TC正常或轻度血清脂蛋白电泳，CM,型高脂蛋白血症,家族性高乳糜微粒血症脂蛋白酶缺乏症,生化特征,基因突变LPLCM,a高脂蛋白血症,高-脂蛋白血症高胆固醇血症,生化特征,4冷置试验血浆外观澄清血清TC尤其LDLTG正常血清脂蛋白电泳-LP,LDLR缺乏或异常,b型高脂蛋白血症,生化特征,4冷置试验血清外观澄清或微混血清TC，TGVLDL和LDL均血清脂蛋白电泳-LP，pre-LP,多基因突变LPLLCAT,型高脂蛋白血症,宽-脂蛋白血症,4冷置试验，血清外观混浊可见一模糊奶油样薄膜。血清TC，TG。血清脂蛋白电泳，-LP，pre-LP融合形成宽区带。,生化特征,ApoE异常VLDL转化和清除缺陷,型高脂蛋白血症,4冷置试验，血清外观可以是澄清也可呈混浊。血清TG，TC正常或稍，VLDL血清脂蛋白电泳，pre-LP,内源性高三脂酰甘油血症,生化特征,临床表现，多见于中青年，较常见,型高脂蛋白血症,混合性高三酰甘油血症,4冷置试验，血清上层为奶油状，下层混浊。血浆中TG，TC，VLDL。血清脂蛋白电泳，CM，pre-LP。,内源性和外源性TG清除功能缺陷,生化特征,动脉粥样硬化(AS)是指动脉内膜因脂质、血液成分的沉积、平滑肌细胞及胶原纤维增生，并伴有不同程度坏死及钙化等一类慢性进行性的病理改变。,最终导致血管壁呈增厚、狭窄，使某些脏器(尤其是心、脑)供血不足而损伤，甚至危及生命。,AS主要的危险因素,高脂血症（高脂蛋白血症）高血压吸烟,性别遗传因素内分泌因素,引起动脉粥样硬化的脂蛋白,CM颗粒大，一般不致AS,但易诱发胰腺炎,LDL相对较小,是首要的致AS性脂蛋白,VLDL升高已被确认为CHD的危险因子。,IDL具有致AS作用,LP（a)As的独立危险因子。,动脉粥样硬化,第二节血脂、脂蛋白及载脂蛋白测定,常规测定项目：,TC、TG、HDL-C、LDL-C,分析前的准备：,受试者的准备标本采集合格的试剂校准物的选用检测方法选择,是否空腹采血体位血液浓缩抗凝剂标本处理存储条件,一、血清（浆）静置试验,空腹血清,清澈,混浊TG,均匀混浊,奶油层,TC正常,TC增高,下层混浊,下层清澈,一、血清（浆）静置试验,二、血清（浆）总胆固醇测定,COD-PAP法,胆固醇酯+H2O胆固醇游离脂肪酸胆固醇O24-胆甾烯酮H2O22H2O24-AAP酚醌亚胺（红色化合物）4H2O,方法学评价,简便,快速,无腐蚀性,高，好，宽,Ch水解不全，CHE活性受影响，易受干扰,常规方法,三、血清（浆）三酰甘油测定,检测方法,同位素稀释-质谱法,化学法,酶法（GPO-PAP）,磷酸甘油氧化酶法乳酸脱氢酶法甘油氧化酶法,化学法,1.抽提2.皂化3.氧化4.显色,变色酸显色法,乙酰丙酮显色法,1、磷酸甘油氧化酶法GPO-PAP,三酰甘油+H2O甘油3-脂肪酸甘油ATP3-磷酸甘油ADP3-磷酸甘油O2+2H2O磷酸二羟丙酮+2H2O2H2O24-AAP4-氯酚苯醌亚胺2H2O+HCL,第一步反应,第二步反应,本法酶试剂比较稳定，灵敏度高，线性范围较宽两步法为中华医学会检验分会推荐方法,2乳酸脱氢酶法,【原理】,三酰甘油+H2O甘油3-脂肪酸甘油ATP3-磷酸甘油ADPADP磷酸烯醇式丙酮酸丙酮酸+ATP丙酮酸+NADHNAD+乳酸,3甘油氧化酶法,第一步：FG+O2甘油醛+H2O2H2O2+EMAE无色物质消除游离甘油的影响，3-5min后进行第二步反应：TG+3H2O甘油+3RCOOH甘油+O2甘油醛+H2O2H2O2+4-AAP+EMAE有色物质EMAE作用与酚相似，是还原剂，但灵敏度比酚高。,甘油氧化酶,POD,POD,LPL,甘油氧化酶,血清甘油三酯一般随年龄增加而升高，体重超过标准者往往偏高。合适范围：1.70mmol/L(150mg/dl)，升高：1.70mmol/L(150mg/dl)。,升高：（1）原发性高TG血症，包括家族性高TG血症与家族性高脂（蛋白）血症等。（2）继发性高TG见于糖尿病糖原贮积症、甲状腺功能减退、肾病综合征、妊娠、口服避孕药等降低:甲亢、肾上腺皮质功能减退和肝功能严重损伤。,【参考区间】,【临床意义】,四、血清（浆）脂蛋白测定,高密度脂蛋白胆固醇测定,参考方法:,超速离心分离HDL，然后用化学法（ALKB法）或酶法测定其胆固醇含量，此法需特殊设备，而且不易常握。,沉淀剂：肝素-锰、硫酸葡聚糖-镁、聚乙二醇、磷钨酸-镁,常规方法:,HDL直接测定法,抗体包裹法、酶修饰法、选择性抑制法,HDL-C合适范围：1.04mmol/L(40mg/dl),0.91mmol/L(35mg/dl)为减低。,流行病学与临床研究证明，HDL-C与冠心病发病呈负相关，HDL-C低于0.9mmol/L是冠心病危险因素。HDL-C大于1.55mmol/L被认为是冠心病的“负”危险因素。HDL-C下降还多见于脑血管病、糖尿病、肝炎、肝硬化病人。高TG血症往往伴以低HDL-C，肥胖者的HDL-C也多偏低。吸烟可使HDL-C下降，适量饮酒、长期体力劳动和运动会使HDL-C升高。,【参考值】,【临床意义】,低密度脂蛋白测定,1Friedewald公式法LDL-CTCHDL-CTG/2.2（以mmol/L为单位时）（血清中存在CM、TG4.56时不适用）,2聚乙烯硫酸盐沉淀法本法并非对LDL-C作直接测定，而是用聚乙烯硫酸（PVS）选择性沉淀血清中LDL，再以血清TC减去上清液（含HDL与VLDL）胆固醇即得LDL-C值。,3直接测定法:,目前各类方法测定的LDL-C值都包括IDL和LP(a)的chol在内,3.12mmol/L,升高：3.64mmol/L,【参考值】,【临床意义】,LDL-C增高是动脉粥样硬化发生发展的主要脂类危险因素。由于TC水平同时也受HDL-C水平的影响，所以最好以LDL-C代替TC作为冠心病危险因素指标。,脂蛋白()测定,Lp()测定有两类方法,一是以免疫化学原理测定其所含Apo()，结果以Lp()质量表示，也有以Lp()颗粒数mmol/L表示的。另一类方法测定其所含的胆固醇，结果以Lp()-C表示。目前大都用免疫学方法测定。,正常人群的Lp(a)水平呈明显的正偏态分布，大多在200mg/L以下，平均数在120180mg/L，中位数约100mg/L。Lp(a)水平高于医学决定水平（300mg/L），冠心病危险性明显增高。,【参考值】,【临床意义】,血清Lp(a)水平是动脉粥样硬化性疾病的独立危险因素,与动脉粥样硬化成正相关。,（1）Apo测定的临床意义作为s和心脑血管病的有价值的危险予估指标。目前主要检测项目是ApoA、ApoB100、Apo（a）（2）载脂蛋白异常症的发现和诊断如：ApoA缺乏症（angier症）ApoC缺乏症,血清载脂蛋白测定,免疫化学法：,单向免疫扩散（RID）电免疫分析（如火箭电泳法）放射免疫分析（RIA）酶联免疫吸附分析（ELISA）等,早期,目前：目前比较适合于临床实验室的是免疫浊度法，包括免疫散射比浊法（INA）和免疫透射比浊法（ITA）。,【参考值】,ApoAI：1.001.50g/L；ApoB：0.801.00g/L。,【临床意义】,ApoAI是HDL的主要