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文档简介
高中生物选修3现代生物科技专题,专题1基因工程,基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术,是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞内,定向的改造生物的遗传性状。,基因工程的定义:,理论基础:,基本原理:,1.不同生物的基因结构上具有一定的相似性:(1)基因的基本单位相同(2)具有相同的碱基互补配对原则(3)都是双螺旋结构,2.不同生物共用一套密码子。,基因重组,基因拼接技术或DNA重组技术,生物体外,基因,DNA分子水平,剪切重组导入表达,定向改造生物性状,一、DNA重组技术的基本工具,基本工具:限制性核酸内切酶“分子手术刀”DNA连接酶“分子缝合针”基因进入受体细胞的载体“分子运输车”,3.作用结果:切割DNA分子产生两种类型的末端:黏性末端或平末端,2.作用:识别特定的核苷酸序列并水解特定的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。因此具有专一性。大多数限制酶能够识别的序列均为6个核苷酸(个别4、5、8),1.来源:主要来自于原核生物,如:大肠杆菌细胞内可分离出E.coRI限制酶,(一)“分子手术刀”限制性核酸内切酶,4.举例:大肠杆菌的一种限制酶(EcoR)能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开形成黏性末端,Sma能识别CCCGGG序列,并在C和G之间切割形成平末端。,切割DNA分子时产生的两种不同末端,限制性核酸内切酶“分子手术刀”,要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口?可产生几个黏性末端?,要切两个切口,产生四个黏性末端。,如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割,会怎样呢?,会产生相同的黏性末端,然后让两者的黏性末端黏合起来,就似乎可以合成重组的DNA分子了。,DNA分子的切割和连接,EcoliDNA连接酶T4DNA连接酶,(二)DNA连接酶“分子缝合针”,区别:EcoliDNA连接酶只能将双链DNA片段互补的粘性末端之间连接起来,不能将双链DNA片段平末端之间进行连接T4DNA连接酶既可“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端,又可“缝合”双链DNA片段的平末端,但连接平末端之间的效率比较低,DNA连接酶“分子缝合针”,“分子缝合针”DNA连接酶,大肠杆菌,T4噬菌体,只能连接黏性末端形成磷酸二酯键,既能连接黏性末端也能连接平末端形成磷酸二酯键,DNA连接酶和DNA聚合酶的异同:,基因工程中所用的连接酶有两种:从大肠杆菌中分离得到的Ecoli连接酶、从T4噬菌体中分离得到的T4连接酶。这两种酶的催化反应基本相同,都是连接双链DNA的缺口,不能连接单链DNA。连接酶和聚合酶的作用都是形成磷酸二酯键。DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的3末端的羟基上,形成磷酸二酯键;而连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键。DNA聚合酶是以一条DNA链为模板,将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成子链;而连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来,因此连接酶不需要模板。两者都是由蛋白质构成的酶,但组成和性质各不相同。,(三)“分子运输车”基因进入受体细胞的载体,1.常用载体:,2.载体需要具备的条件,(1)能够自我复制,(2)有一个或多个切割位点,(3)有标记基因,(4)对受体细胞无害,(5)大小要合适,3.其他载体:,噬菌体的衍生物、动植物病毒,质粒(存在于许多细菌以及酵母菌等生物中,是拟核DNA(染色体DNA)以外能够自我复制的小型环状DNA分子),基因进入受体细胞的载体“分子运输车”,大肠杆菌及质粒载体结构模式图,1.以下说法正确的是()A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列B、质粒是基因工程中唯一的运载体C、运载体必须具备的条件之一是:具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接D、DNA连接酶使黏性末段的碱基之间形成氢键,C,巩固练习,2.不属于质粒被选为基因运载体的理由是A、能复制()B、有多个限制酶切点C、具有标记基因D、它是环状DNA,D,巩固练习,3.有关基因工程的叙述中,错误的是()A、基因工程技术能定向地改造生物的遗传性状,培育生物新品种B、重组DNA的形成在细胞内完成C、目的基因须由运载体导入受体细胞D、质粒都可作为运载体,BD,巩固练习,4.科学家通过基因工程,需要从苏云金芽孢杆菌中提取抗虫基因,放入棉花细胞中发挥作用
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