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文档简介

实验九抗酸染色,临床病原生物学教研室,一、实验目的：掌握抗酸染色的原理和方法掌握结核分枝杆菌痰涂片的结果报告,分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质，包围在肽聚糖的外面，一般水溶性染料不易进入，所以分枝杆菌一般不易着色且一旦染色后不易脱色，所以要经过加热和延长染色时间来促使其着色。因分枝菌酸与染料结合后，很难被酸性脱色剂脱色，故分枝杆菌又称抗酸杆菌。,二、实验原理：,三、实验材料：细菌：结核杆菌染液：石炭酸复红液、3%盐酸酒精、碱性美兰溶液其它：接种环、酒精灯、载玻片等,四、实验方法1、细菌涂片的制备1）涂片：20mm*15mm厚涂片，竹签挑取，涂2-3遍2）干燥：自然干燥，或火焰3）固定：火焰固定，必须,2、染色1）初染：滴加石炭酸复红适量，在火焰高处徐徐加热，切勿沸腾，出现蒸汽暂时离开火焰；若染液蒸发减少，应再加染液，以免干涸，加热5min（可延长），待标本冷却后用水冲洗。2）脱色：3%盐酸酒精脱色30sec1min至无红色液体流下，再用水冲洗。3）复染：用碱性美兰溶液复染1min，用水冲洗后用吸水纸吸干。3、油镜观察,五、实验结果：,1.结核杆菌呈红色，常堆积成团，排列无序，偶呈分枝状生长。2.背景及非抗酸性细菌呈兰色。,六、注意事项：,1、涂片要充分研磨，防止细菌成团2、涂片大小、厚度要适中3、固
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