第16章 浆膜腔积液检验.ppt.ppt

2019/12/18,1,第十六章浆膜腔积液检验,2019/12/18,2,keypoints,1formationoftransudateandexudate2examinationofserouseffusion3identificationoftransudateandexudate4differentialdiagnosisofbenignandmalignanteffusions5differentialdiagnosisoftuberculousandnontuberculouseffusions,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,3,1、熟悉渗出液、漏出液的形成以及临床意义。2、掌握积液的实验室检查方法。3、掌握渗出液、漏出液的实验室鉴别。4、熟悉良、恶性积液的鉴别。5、熟悉结核性与非结核性积液的鉴别。6、了解浆膜腔积液检验的进展。,目的要求,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,4,第一节概述第二节浆膜腔积液理学检验第三节浆膜腔积液化学与免疫学检验第四节浆膜腔积液显微镜检验第五节浆膜腔积液检验的质量控制与临床应用第六节前沿知识及病例分析,主要内容,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,5,一、浆膜腔积液的形成二、标本采集与处理,第一节概述,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,6,一、浆膜腔积液的形成,胸膜腔人体浆膜腔包括腹膜腔心包膜腔0.6可作为渗出液的指标。在各类渗出液中化脓性感染积液ld活性癌性结核性正常。ld同功酶测定如ld3、ld4、ld5或仅ld5增高可疑为恶性肿瘤。2、腺苷脱氢酶（adenosinedeaminase,ada）：ada大于40u/l应考虑为结核性，结核性癌性非炎症性积液，当抗结核药物治疗有效时，其胸腹炎内ada也应随之下降，因此也能作为抗结核治疗效观察指标。,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,26,五、酶类测定,3、溶菌酶（lysozyme,lzm）：结核性积液中溶菌酶含量超过30mg/l，积液和血清中溶菌酶比值1.0，明显高于癌性积液、结缔组织病。因此测定积液中溶菌酶对结核性胸膜炎的诊断有帮助，连续观察可估计预后。而癌细胞不含溶酶体，无lzm产生，故癌性积液lzm无增高。4、淀粉酶（amylase,amy）：大多数胰腺炎患者其胰腺创伤所致腹腔积液中淀粉酶活性/血清淀粉酶1。当食道破裂时唾液经食道穿孔处流进胸腔，此时胸腔积液淀粉酶也升高，,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,27,五、酶类测定,5、碱性磷酸酶（alkalinephoephatase,alp）：积液中因肿瘤细胞释放大量alp，使积液alp/血清alp比值1，而其他性质积液alp/血清alp比值20g/l，积液cea/血清cea比值1时，应高度怀疑为癌性积液。有时强调胸水cea/血清cea比值4.3是恶性病变的一个指标。2、甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，afp）：血清afp作为原发性肝癌的标志物。腹水中afp检测结果与血清afp呈正相关。检测腹水中afp25g/l时对诊断原发性肝癌引起的腹水是有价值的。,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,29,六、肿瘤标志物测定,3、糖类抗原标志物（carbohydrateantigen，ca）：积液ca检测主要用于各种肿瘤转移所致的恶性积液的诊断与鉴别诊断。ca125：腹水中ca1251000u/ml常作为卵巢癌转移的指标，灵敏感性为85%，特异性可达95%,近年来报道在胃癌、结直肠癌、肝癌和胰腺癌中也有较高的阳性检出率；ca199是胰腺癌和结、直肠癌的标志物；ca50是胰腺和结、直肠癌的标志物；ca242作为腺癌的标志物.近来人有人提出用浆膜腔积液检测鳞状细胞癌抗原组织多肽抗原，对扁平上皮细胞癌、原发性肺癌的诊断有参考价值。,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,30,1、铁蛋白（feritin,ft）：癌性积液中铁蛋白多大于1500g/l，结核性时也升高但一般小于600g/l，因此如果与溶菌酶一起测定对癌性和结核性鉴别则有价值，癌性积液铁蛋白明显升高，积液ft/血清ft1，而溶菌酶含量不高；结核性者两者均升高，溶菌酶升高极为明显。2、纤维连结蛋白（fibronectin,fn）：纤维连结蛋白是一种多糖蛋白，认为肿瘤细胞可合成分泌fn。腹水fn75mg/l可高度怀疑癌性腹水。有报告癌性腹水fn为173.965.9mg/l,非癌性腹水为13.46.8mg/l,七、其他特殊成分测定,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,31,3、乳酸：浆膜腔乳酸含量测定有助于细菌性感染与非感染性的鉴别诊断，当乳酸高达6mmol/l以上时，应高度提示有细菌感染，尤其在应用抗生素治疗后的胸水，一般细菌检查又为阴性时更有价值。类风湿病、充血性心力竭及恶性肿瘤引起的积液中乳酸含量也可见轻度升高。4、纤维蛋白原降解产物（fibrindegradationproducts,fdp）：在癌性积液中fdp明显高于结核性，而结核性又高于肝硬化引起的积液。因此提出积液中fdp1000mg/l时，考虑癌性可能性较大。,七、其他特殊成分测定,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,32,5、c反应性蛋白（c-resctiveprotein,crp）：crp为急性时相反应蛋白，可用于漏出液及渗液的鉴别判断。crp10mg/l为渗出液。6、免疫球蛋白：渗出液：积液igg（iga）/血清igg（iga）0.5。7、-干扰素（-ifn）：结核性浆膜腔积液中-ifn含量升高，平均为91u/ml，而其它性质的胸腔积液-ifn含量均低于2u/ml。,七、其他特殊成分测定,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,33,七、其他特殊成分测定,8、2-微球蛋白（2-microglobulin,bmg）：2-mg蛋白对鉴别结核性积液和非结核性积液有一定的价值。另外风湿性胸腔积液和淋巴瘤并发的胸腔积液中，其含量也会升高，尤以后者最为显著。但在其它疾病引发的胸腔积液，包括恶性肿瘤和系统性红斑狼疮，其中2-mg均明显低于结核病、风湿病和淋巴瘤。9、白细胞介素（il）积液il-6,8的检测也助于漏出液和渗出液的性质鉴别，并有助于了解病人免疫状态、观察病情、掌握病程和确定治疗效果。渗出液il-6,8浓度高于漏出液。,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,34,10、肿瘤坏死因子（tnf）：结核性胸腔积液tnf为545ng/l(210-1530ng/l)；而非结核性胸膜积液tnf含量为62ng/l，明显低于结核性积液。11、补体：狼疮性积液和风湿性积液补体水平下降。12、类风湿因子：风湿性积液rf1:320或大于血清含量13、抗核抗体:狼疮性积液抗核抗体1:160或大于血清含量,七、其他特殊成分测定,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,35,一、细胞计数二、细胞分类计数三、病原微生物学检查,第四节浆膜腔积液显微镜检验,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,36,1、方法有直接计数法和稀释计数法两种；2、应将全部有核细胞（包括间皮细胞）都列入细胞计数内；3、临床应用：1）红细胞计数对漏出液和渗出液鉴别意义不大；2）白细胞计数：4、注意事项：1）接到标本立即计数，以免标本凝固或细胞溶解影响计数结果；2）标本如有部分凝固就不能进行细胞计数；,一、细胞计数（白细胞计数、红细胞计数）,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,37,二、细胞分类,1、方法：积液离心取沉淀制成涂片瑞氏染色油镜分类2、临床应用：1）漏出液：细胞较少，以淋巴细胞和间皮细胞为主2）渗出液：细胞数较多，各种细胞增加,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,38,二、细胞分类,渗出液：细胞数较多，各种细胞增加的意义如下：1、红细胞：多见于恶性肿瘤、结核或穿刺出血；2、中性分叶核粒细胞：常见于化脓性渗出液和早期浆膜结核；3、淋巴细胞：主要提示慢性疾病，如结核性、梅毒性、肿瘤性；4、嗜酸性粒细胞：见于变态反应、寄生虫病、多次穿刺刺激等所致的渗出液；,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,39,二、细胞分类,5、组织细胞：在炎症情况下，大量出现中性粒细胞时，常伴随组织细胞的出现（较白细胞略大，核呈肾形或不规则形，偏位、核致密、胞浆多呈泡沫状）6、间皮细胞：表示浆膜刺激或受损约15-30m，圆形、椭圆或不规则形，核在中心或偏位，胞浆多，可有空泡7、狼疮细胞：偶见于sle患者的浆膜液中8、癌细胞：大量形态不规则、胞体大小不等、核偏大并可见核仁及胞质染色较深的细胞，应高度重视9、浆细胞：少量出现没有重要临床意义；若在胸水中见到较多的浆细胞，可能是增殖性骨髓瘤。,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,40,二、细胞分类,10、其他1）结晶：如胆固醇结晶，可见于陈旧性胸水中的脂肪变性及胆固醇性胸膜炎的胸水中；无色透明，缺角四方形板状2）寄生虫：微丝蚴、阿米巴等3）脱落细胞学：病理科怀疑恶性肿瘤时可用细胞玻片离心沉淀仪收集积液中细胞，作巴氏或h-e染色，如见有多量形态不规则，细胞胞体大小不等，核偏大并可见核仁及胞质受色较深的细胞应高度重视认真鉴别。必要时用多克隆或单克隆抗体作免疫组织化学检查。,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,41,淋巴细胞,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,42,中性粒细胞,淋巴细胞,间皮细胞,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,43,中性粒细胞,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,44,间皮细胞,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,45,肿瘤细胞,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,46,如标本通过一般性状、显微镜以及化学检查已肯定为漏出液，一般则无检查细菌的必要；如肯定为或疑为渗出液，则应经无菌操作离心沉淀，取沉淀物作涂片染色（革兰氏染色、抗酸染色、真菌）检查及细菌培养。作涂片时应用油镜仔细观察，如见有细菌或真菌应及时报告临床医师，细菌检验必须认真负责，因细菌感染的胸膜炎可同时由多种细菌引起的，应从实验室角度分清主次。一旦培养阳性应做药物敏感试验供临床用药参考。,四、微生物学检查,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,47,一、质量控制：浆膜腔积液检验的质量控制包括检验前、检验中、检验后三方面内容。标本的合理采集和及时送检是分析前质量控制的关键，不合格的标本应予以拒检建立实验室规范化的操作规程是分析中质量控制的保证，由于目前尚缺乏专一的浆膜腔液质控物，临床上只能请有经验的技术人员抽检标本进行双盲复检，也能达到监控的目的结合临床，认真分析检验结果，严把审核关，是分析后质量控制不可缺少的。其中以检验中质量控制尤为重要。检验中项目的选择和方法的选择是检验质量的保证。,第五节浆膜腔积液检验的质量控制与临床应用,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,48,常规操作流程,观察外观,计数,离心,稀释,进一步检验,细胞分类,上清液,沉淀,细胞数多,阴性,rivalta,阳性,不做蛋白定量,蛋白定量,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,49,（1）一级检查（一般检测）：为一些较简易的项目，包括比密、ph、总蛋白、粘蛋白试验、细胞总数、分类与形态学检查以及细菌检验。（2）二级检查（进一步检测）：有crp（c反应性蛋白）、fdp（纤维蛋白降解产物）、ld（乳酸脱氢酶）、ada（腺苷脱氨酶）、asp（酸溶性蛋白）、amy（淀粉酶）、gp（糖蛋白）等。（3）三级检查（特殊检测）：包括肿瘤标志物cea（癌胚抗原）、afp（甲胎蛋白）、hcg（绒毛膜促性腺激素）、同工酶、蛋白质分析、肿瘤特异性抗原及细胞免疫功能等。90年代国内已从一般检查发展到细胞学、生物化学、微生物、免疫学、遗传学等多项优化组合检查。,检测的项目选择,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,50,浆膜腔积液是临床一种常见的症状，伴随许多疾病的出现，实验室的检查对积液的性质以及原因的分析，是临床疾病的诊断与鉴别诊断不可缺少的手段之一。随着检验内容的日益增多以及相关检验技术的不断提高，实验室检查也越来越引起临床的重视。,二、临床应用,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,51,应用1：,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,52,（接上）,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,53,应用2：,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,54,病理性胸水,结核性胸膜炎（54.8%）恶性肿瘤(40%)血胸充血性心力衰竭上腔静脉阻塞或血栓肺炎类风湿关节炎sle,应用3：,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,55,病理性腹水,肝硬化（42.4%）恶性肿瘤（25.9%）结核性腹膜炎（21.8%）慢性肾病下腔静脉阻塞或血栓胰腺炎,应用4：,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,56,应用5：,病理性心包积液,结核性非特异性肿瘤性以结核性占首位，但肿瘤性呈逐年上升趋势。可形成漏出液或渗出液。,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,57,第六节前沿知识与病例分析,一、前沿知识,1、染色体检查：这是诊断恶性肿瘤有效检查方法之一，阳性率可达75%左右。染色体分析多数为非整倍体，以超过2倍体及多倍体为主。常伴有特殊形态的染色体，如巨大染色体、微小染色体、有时有染色体断裂、移位、镶嵌现象。2、流式细胞仪（fcm）：是采用流式细胞术对细胞或颗粒悬液进行快速分析的自动分析仪器。fcm用于浆膜腔积液检查主要集中在dna含量分析、肿瘤细胞抗原的测定、淋巴细胞的免疫表型分析，对恶性肿瘤的诊断以及评价治疗效果有一定的临床意义。3、分子生物学技术：核酸探针（tb）、pcr（tb）、肿瘤标志物（p53蛋白及抗体、端粒酶、细胞因子等）4、细胞学检查：细胞化学染色、荧光染色、核仁组成区嗜银蛋白染色（agnor）、淋巴细胞亚群分析、电镜分析等。,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,58,二、病例分析,病例一：某病人，三天来腹胀，腹部持续隐痛，发烧，腹水检查：蛋白3.8g%，比重1.021，白细胞1000/ul，平时有食欲不振，乏力，牙龈出血，面色晦暗，10年前有过肝炎史。试问：（1）试分析腹水性质及可能的诊断。（2）腹水还需作哪些进一步检查。,第六节前沿知识与病例分析,2019/12/18,第十六章浆膜腔积液检验,59,（1）腹水主要病因有肝硬化、恶性肿瘤、结核性腹膜炎、慢性肾病、下腔静脉阻塞或血栓等。此腹水性质为渗出液。此病人有肝炎病史，食欲不振，乏力，牙龈出血，面色晦暗，很可能是肝炎后肝硬化合并腹腔感染，因肝硬化病人机体抵抗力降低，其下消化道的细菌由于肠道屏障作用减弱可经淋巴系统进入腹腔，引起腹膜感染，其致病菌大多为大肠杆菌和副大肠杆菌。（2）实验室检查除上述的腹水一般检查外，还需对腹水作蛋白分析并结合血液蛋白，腹水细菌培养，以及感染性系列指标如crp、ld、igg、iga等检查；同时也为了