（水产养殖专业论文）密鳞牡蛎人工繁育研究.pdf

密鳞牡蛎人工繁育研究 学位论文完成日期 指导教师签字： 答辩委员会成员签 棒、日 独创声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表 或撰写过的研究成果，也不包含未获得( 注；翅遗直墓丝噩蔓 鳖别直盟的：奎拦亘窒2 或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一同工作的 同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名：签字日期：m 年月r 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家 有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权学校可以 将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等 复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到 中国学位论文全文数据库，并通过网络向社会公众提供信息服务。( 保密的学位论文 在解密后适用本授权书) 学位论文作者签名：陆彻 签字日期：2 o l o 年6 月( 日 一字：磊 签字日期：嘶年f 月f 日 密鳞牡蛎人工繁育研究 密鳞牡蛎人工繁育研究 摘要 密鳞牡蛎( o s t r e ad e n s e l a m e l l o s al i s c h k e ) ，隶属于牡蛎属( o s t r e a ) ，一般栖息 于潮下带至水深3 0m 以内的盐度较高且较稳定的浅海，在我国、朝鲜半岛、日 本沿海均有分布，其软体部不但富含牛磺酸、高度不饱和脂肪酸，还具有低脂肪、 低胆固醇及无机盐、维生素含量高的特点，营养价值较为丰富。但由于密鳞牡蛎 在我国沿海分布分散，资源量少等原因，其经济价值尚未被开发利用。近年来， 由于海洋开发以及海区自然环境的不断恶化，密鳞牡蛎的资源量日趋减少。因此， 开展密鳞牡蛎的人工繁殖技术研究，对于保护密鳞牡蛎自然资源，开发新的养殖 品种具有重要意义。 本研究以密鳞牡蛎为对象，利用h e 染色技术、幼虫活体和显微观察，首次 对密鳞牡蛎的亲贝、面盘幼虫和稚贝等不同时期密鳞牡蛎的外部形态、内部结构、 生理机能等进行了初步研究，并研究了其亲体的培育，浮游幼虫的培养，盐度、 温度、密度和饵料等环境因子对浮游幼虫和稚贝的生长及存活的影响，并首次建 立了密鳞牡蛎的人工繁育技术，主要研究结果如下： 1 利用常规石蜡切片、h e 染色、幼虫活体观察和显微照相等技术，确认密 鳞牡蛎的繁殖方式为卵生型，d 形幼虫被释放前生活于亲贝鳃腔中，此时消化系 统已发育完全，被亲贝释放后能主动摄食。面盘是密鳞牡蛎面盘幼虫时期的主要 特征，是幼虫的游泳和摄食器官，并且在幼虫结束浮游生活后面盘萎缩。眼点和 足是密鳞牡蛎浮游幼虫准备附着的标志，并在附着完成后退化。 2 首次确立密鳞牡蛎人工繁育技术。密鳞牡蛎排出体外的d 形幼体在温度 2 3 2 5 c ，盐度2 8 3 0 下，经约2 8 天出现眼点，进入附着变态阶段。幼虫培育的 最佳盐度为3 0 。在2 4 3 2 c 范围内，幼虫生长速度与温度呈正比，成活率与温度 成反比。在培育密度1 4 个佃l 间，密度最低组生长最快，但存活率无显著差异。 4 种饵料投喂组中，金藻+ 扁藻组的生长率显著较高。不同附着基的附苗率依次 为：扇贝壳 波纹板 筛绢 网片 聚乙烯薄膜。 3 密鳞牡蛎稚贝培育期间，随着水温升高，发育加快，而且稚贝适温范围 密鳞牡蛎人工繁育研究 广泛，从实验结果可知，密鳞牡蛎稚贝的最适生长温度为2 4 2 9 。在l l l 东沿海， 密鳞牡蛎在自然海区的繁殖期在6 月。盐度对密鳞牡蛎浮游幼虫和稚贝影响的比 较分析表明，浮游幼虫的生存和生长盐度适应范围要比稚贝的适应范围狭窄。造 成这种差别的原因可能是浮游幼虫生活在海水中，相对盐度较稳定，而稚贝生活 在潮间带，受突变盐度影响的机会多，在漫长的进化过程中就形成了适应大范围 变化的特性。 关键词：密鳞牡蛎； 人工繁育；显微观察；影响因子；稚贝 密鳞牡蛎人工繁育研究 s t u die so nt h et e c h niq u e so fa r tific iai r e p r o d u c tio n o ft h eo y s t e ro s t r e ad e n s ei a m eii o s a a b s t r a c t f l a to y s t e r ( o s t r e ad e n s e l a m e l l o s al i s c h k e ) ，w h i c hc l a s s i e dt oo s t r e a ，u s u a l l y l i v e si nt h es u b t i d a lz o n e sa l o n gt h en o r t ha n ds o u t hc o a s t so fc h i n a , a sw e l la st h e k o r e a np e n i n s u l aa n dj a p a n t h ef i a to y s t e r s s o f l b o d yi sn o to n l yr i c hi nt a u r i n e ， v i t a m i n ，h i g h l yu n s a t u r a t e df a t t ya c i d s ，b u ta l s oh a sl o wf a t , l o wc h o l e s t e r o l ，a n d m o 玛a n i cs a l t s h o w e v e r , b e c a u s eo f t h ef l a to y s t e r s s c a t t e r e dd i s t r i b u t i o ni nc h i n e s e c o a s t a la r e a sa n dl e s sr e s o u r c e s ，a n do t h e rr e a s o n s ，t h e i re c o n o m i cv a l u eh a sn o tb e e n d e v e l o p e da n du t i l i z e d i nr e c e n ty e a r s ，h a b i t a td e s t r u c t i o na n d d e t e r i o r a t i o no fm a r i n e s e v e r ep o p u l a t i o nd e c l i n e s t h u s ，i ti s n e c e s s a r yt oe s t a b l i s ht h et e c h n i q u e so f a r t i f i c i a lr e p r o d u c t i o no ft h ef l a to y s t e r s ，d d e n s e l a m e l l o s a , f o rt h ep r o t e c t i o no f n a t u r a lr e s o u c e sa n di n i t i a t i n ga q u a c u l t u r ea c t i v i t i e si nt h i ss p e c i e s t h ep r e l i m i n a r ys t u d yw a sc o n d u c t e da b o u tt h ee x t e m a ls h a p e ，i n t e r n a ls t r u c t u r e ， a n do t h e rp h y s i o l o g i c a lf u n c t i o n so fd i f f e r e n tp h a s e so ff l a to y s t e rb yu s i n gh e s t a i n i n gs l i c i n gt e c h n i q u e s ，t h eo b s e r v a t i o no f l a r v a ea n d p h o t o m i c r o g r a p h y t e c h n i q u e s a n do t h e rs t u d i e sw a sc o n d u c t e d , f o ri n s t a n c e ，t h ea r t i f i c i a lr e p r o d u c t i o n , t h ee f f e c to fe n v i r o n m e n t a lf a c t o r s ，i e t h es a l 硒t y , t h et e m p e r a t u r e ，t h ed e n s i t ya n d t h ed i f f e r e n td i e t a r y , o nt h eg r o w t ha n ds u r v i v a lo fl a r v a ea n ds p a t t h em a i nr e s e a r c h r e s u l t sa r ea sf o l l o w s ： 1 t h i ss t u d yi st h ef i i 或r e p o r to ft h em i c r o s c o p i cf e a t u r e so fl a r v a ea n dg o n a d s o fd d e n s e l a m e l l o s ac o l l e c t e di nq i n g d a o ，c h i n a f e m a l eo y s t e r sb r o o d e dl a r v a ea t t h ee a r l yv e l i g e rs t a g e ( 1 3 0 - 1 4 0 呻) i nt h ei n f r a b r a n c h i a lc h a m b e r l a r v a ei nt h i s c h a m b e rd i s p l a y e daw e l l d e v e l o p e dv e l u mc o v e r e dw i t hl o n ga n ds h o r tc i l i a ；t h e a d d u c t o rm u s c l ew a si n c o m p l e t e l yd e v e l o p e d t h ed i g e s t i v es y s t e mo ft h el a r v a e ， i n c l u d i n g t h em o u t h ，e s o p h a g u s ，s t o m a c h ，d i g e s t i v eg l a n d ，a n di n t e s t i n e ，w a s i d e n t i f i a b l ei nh i s t o l o g i cp r e p a r a t i o n s ，i n d i c a t i n gt h a tt 1 1 占v e l i g e rl a r v a ei nt h eb r o o d i l l 密鳞牡蛎人工繁育研究 c h a m b e rw e r ec a p a b l eo f f e e d i n gu s i n gt h ev e l u ma n dc i l i a d i a m e t e r so fr i p ee g g s i nt h eo v a r yr a n g e df r o m8 0 9 0g r n m o s tf e m a l eo y s t e r sc o l l e c t e di nj u n e2 0 0 9w e r e s p a w n i n g o ra b s o r b i n gw h e r e a sm o s to fm a l eo y s t e r sw e r es p e n to rs e x u a l l yi n a c t i v e t h ee y ep o i n ta n df o o ta r et h es i g no fs e t t l e m e n to ff l a to y s t e rl a r v a ea n dd i s a p p e a r a f t e rm e t a m o r p h o s i s 2 t h eb r o o d s t o c kc u l t u r ea n dl a r v a er e a r i n gw e r ei n v e s t i g a t e di nt h eo y s t e rd d e n s e l a m e l l o s af o rt h ef i r s tt i m e t h ee f f e c t so fs a l i n i t y , w a t e rt e m p e r a t u r e ，d e n s i t i e s a n dd i e t so ng r o w t ha n ds u r v i v a lr a t e so ft h el a r v a eo fdd e n s e t a m e l l o s aw e r ea l s o e x a m i n e d a f t e rl a r v a lr e a r i n go fa b o u t2 8d a y s ，t h el a r v a ed e v e l o p e dt ot h es t a g eo f m e t a m o r p h o s i sc h a r a c t e r i z e db yt h ea p p e a r a n c eo fe y es p o ta tt h et e m p e r a t u r e 2 3 - 2 5 0 ca n ds a j 越t ) ，2 8 3 0 a st h et e m p e r a t u r ev a r i e df r o m2 4 0 ct o3 2 0 c ，t h eg r o w t h r a t eo ft h el a r v a ew a sp o s i t i v e l yc o r r e l a t e dt ot e m p e r a t u r e ，b u tt h es u r v i v a lr a t e n e g a t i v e l yc o r r e l a t e dt ot e m p e r a t u r e f o rt h ef o u re x p e r i m e n t a lg r o u p s 、析t l ls t o c k i n g d e n s i t i e so f1 ，2 ，3a n d4l a r v a em l ，l a r v a er e a r e da tt h el o w e s td e n s i t yh a dt h el a r g e s t m e a ns i z e ，b u tt h e r ei sn os i g n i f i c a n td i f f e r e n c ei ns u r v i v a lr a t e c o m p a r e d 诵t l lt w o m o n o a l g a ld i e t so fi s o c h r y s i sz h a n j i a n g e n s i sa n dp l a t y m o n a ss u b c o r d i f o r m i sa n da m i x e dd i e to fzz h a n f i a n g e n s i sa n dc h l o r e l l av u l g a r i s ，t h eh i g h e s tg r o w t hr a t ew a s a c h i e v e dw i t ht h em i x e dd i e to flz h a n j i a n g e n s i sa n d 只s u b c o r d i f o r m i s t h es e t t i n g r a t e so ft h eo y s t e rl a r v a ev a r i e dd e p e n d i n go nt h et y p eo fs u b s t r a t eu s e d t h es c a l l o p s h e l lh a dt h eh i g h e s ts e t t i n gr a t eo fl a r v a e ，f o l l o w e db yp l a s t i cs h e e t , s c r e e nm e s h ， m o n o f i l a m e n tn y l o na n dp l a s t i cf i l m 3 t h ee f f e c t so fr e d u c e ds a l i n i t yo nd d e n s e l a m e l l o s as p a tw e r es t u d i e da t 2 4 - 2 6 0 c ( n a t u r a lt e m p e r a t u r e ) ，2 8 0 c ，a n d3 1o c g r o w t ha n ds u r v i v a lr a t ew e r es t u d i e d a ts a l i n i t i e so f3 2 ，3 0 ，2 6 ，2 2a n d18 f o rap e r i o do f3 0d a y s i nt h ep e r i o do f c u l t i v a t i o no ff l a to y s t e rs p a t ，t h eg r o w t hr a t eb e c a m eh i g h e ra st h ew a t e rt e m p e r a t u r e i n c r e a s e d ，a n dt h ea p p r o p r i a t et e m p e r a t u r ef o rg r o w t hi s2 4 - 2 9 0 c t h ee f f e c to f s a l i n i t yo nt h el a r v a ea n ds p a to ff l a to y s t e rs h o w st h a ta td i f f e r e n td e v e l o p m e n t a l s t a g e so ft h ef l a to y s t e r , t h es a l i n i t yt o l e r a n c ei sd i f f e r e n t ，f o re x a m p l e ，l a r v a eh a s n a r r o w e rt e m p e r a t u r et o l e r a n c et h a ns p a t t h er e a s o no ft h ed i f f e r e n tt e m p e r a t u r e t o l e r a n c eb e t w e e nl a r v a ea n ds p a tm a y b el e a db yt h ed i f f e r e n te n v i r o n m e n to ft h e i r r e s p e c t i v el i f e ，s t a b l ef o rl a r v ab u tc h a n g e f u lf o rs p a t i v 密鳞牡蛎人工繁育研究 k e yw o r d s ：o s t r e ad e n s e l a m e l l o s a ；a r t i f i c i a lr e p r o d u c t i o n ；m i c r o s c o p i co b s e r v a t i o n ；f a c t o r s ； s p a t v 密鳞牡蛎人工繁育研究 密鳞牡蛎人工繁育研究 目录 第一章综述1 第一节牡蛎的分类及其人工繁育技术研究1 1 1 1 牡蛎的分类1 1 1 2 牡蛎的人工繁育技术3 第二节密鳞牡蛎的概述1 1 1 2 1 分类地位和分布区域1 1 1 2 2 密鳞牡蛎的外部形态和内部特征1 1 第三节密鳞牡蛎的研究概况1 2 1 3 1 国外1 2 1 3 2 国内1 3 第四节研究的立论依据和目的意义1 5 第二章密鳞牡蛎孵育腔的显微观察：1 6 前言：i t )月u 舌 1 材料与方法1 7 1 1 材料1 7 1 2 方法1 7 2 结果1 7 2 1 各时期密鳞牡蛎内部结构观察1 7 3 讨论2 4 第三章密鳞牡蛎人工苗种繁育2 6 前言z b日i j 舌 1 材料与方法2 6 1 1 亲贝蓄养一2 6 1 2 幼虫的收集、培育与采苗2 7 密鳞牡蛎人工繁育研究 1 3 环境因子对幼虫生长与存活的影响2 7 1 4 附着基对幼虫附着变态的影响2 8 1 5 统计分析2 8 2 结果2 8 2 1 浮游幼虫的培育2 8 2 2 环境因子对幼虫生长和存活的影响2 9 2 3 附着基对幼虫附着变态的影响3 3 3 讨论3 4 第四章密鳞牡蛎稚贝的盐度耐受性3 6 前言3 6刖茸3 b 1 材料和方法3 6 1 1 材料来源3 6 1 2 稚贝的培育3 7 1 3 实验设计3 7 1 4 统计分析3 7 2 结果3 7 2 1 密鳞牡蛎稚贝不同温度和盐度下的生长率3 7 2 2 密鳞牡蛎稚贝不同温度和盐度下的存活率3 9 3 讨论4 1 参考文献4 5 结论与创新点5 2 致谢5 3 硕士就读期间已发表的文章5 4 密鳞牡蛎人工繁育研究 第一章综述 第一节牡蛎的分类及其人工繁育技术研究 1 1 1 牡蛎的分类 牡蛎属软体动物门( m o l l u s o a ) ，牡蛎科( o s t r e i d a e ) ，是世界性广布类群，由 于其肉味鲜美，营养丰富，从远古时代就被人类所食用，具有很高的经济价值， 是世界各国海水养殖业重要的养殖对象，也是目前我国乃至世界产量最大的经济 贝类。由于牡蛎的广栖息性，在近海沿岸的各种生境下均能大量繁殖，外部形态 常随着其生活环境的不同而发生极大的变化( 阙华勇等，2 0 0 3 ) 。牡蛎为翼形类， 两壳不等，左壳大，右壳小，壳表粗糙，具鳞、棘刺等。绞合部无齿，或具结节 状小齿。单柱类，二孔型。由于种类不同，形态各异。外套膜左右两片；呼吸系 统的鳃位于鳃腔中，左右各一对，共4 片，呼吸主要由鳃完成；消化系统包括唇 瓣、口、食道、胃、消化盲囊、肠、直肠和肛门；循环系统是开放式的，由围心 腔、心脏、副心脏、血管和血液组成：肾脏由肾小管和肾围漏斗管组成，左右各 一；在繁殖季节，牡蛎的内脏块充满了生殖腺，分为三部分，即滤泡、生殖管和 生殖输送管；神经系统由脑、脏神经节及其联络神经构成( 王刚等，2 0 0 2 ) 。 但牡蛎的分类等许多与养殖、资源开发密切相关的问题在国内外都没有得到 有效的解决，限制了一些相关学科的发展。在我国，牡蛎分类比较混乱，甚至盲 目引进了我国已有分布并开展养殖的种类，因此，解决牡蛎的系统分类问题显得 尤为重要。牡蛎的分类研究开始较早，但直到林奈( l i n n a e u s ，1 7 5 8 ) 时代才正式 提出牡蛎属( o s t r e a ) 的命名。以后许多学者，如l a m a r e k ( 1 8 1 9 ) ，s o w e r b y ( 1 8 7 0 1 8 7 1 ) ，l a m y ( 1 9 2 9 ) 和t h o m s o n ( 1 9 5 4 ) 等分别对牡蛎进行了较系统的分类研 究，提出了一些新的分类阶元。至l j 7 0 年代初，世界上记载的现存牡蛎已达1 0 0 多 种，然而牡蛎栖息的环境复杂，贝壳的形态变化极大，多数种类单纯依靠贝类的 形态特征是很难区分的。根据推测，这1 0 0 多种牡蛎中大约有近2 1 3 是同物异名 ( h a r r y ，1 9 8 5 ) 。s t e n z e l ( 1 9 7 1 ) 总结了古贝类和现生贝类的分类成果，并结合原壳 等特征将牡蛎亚目分为两个科、5 个亚科( 其中3 个现生亚科) 。后来t o r i g o e ( 1 9 8 1 ) 又根据牡蛎繁殖方式的不同修正了s t e n z e l 的分类系统，提出了一个新的亚科一巨 密鳞牡蛎人工繁育研究 蛎亚科，并比较系统的报道了日本的2 2 种现生牡蛎。h a r r y ( 1 9 8 5 ) 将现生牡蛎分为 2 个科、4 个亚科、2 4 属，共计3 6 种，并提出了一些新的分类特征。以上两位学者 都注意到了牡蛎的内部结构特征在分类上，特别是在亚科阶元上的应用。但在种 类界别中，t o r i g o e ( 1 9 8 1 ) 仍然过于强调贝壳的形态差异，因而导致了许多同物异 名；而h a r r y ( 1 9 8 5 ) 贝3 j 特别注重环境的影响，仅仅根据壳形差异的连续性又将一些 种类不恰当的合为一种，如主要分布于印度西太平洋区的小蛎属牡蛎，以往的 记载大约有7 中，h a r r y ( 1 9 8 5 ) 将其全部并为一种，j 面t o r i g o e ( 1 9 8 1 ) 仅在日本海域 就记述了5 种( 李孝绪，1 9 9 4 ) 。6 0 年代初就有一些学者开始借助其他手段来解决 牡蛎分类中的疑难问题。r a n s o n ( 1 9 6 0 ) 研究t 3 4 种牡蛎原壳的形态，为 s t e n z e l ( 1 9 7 1 ) 对古代和现代牡蛎的系统分类奠定了基础，但在她的报告中很难看 出种间差别。至1 9 9 4 年，国内外牡蛎染色体组型研究的文章有近3 0 篇，报道了2 1 种牡蛎( 含同物异名种) 的染色体组型，除复瓦牡蛎( p a r a h y o t i s s ai n b r i c a t a ) p 卜，其 余2 0 种的染色体都为l o 对中着丝点或近中着丝点染色体，组型差异甚微，很难作 为分类依据。b u r o k ea t a l ( 1 9 7 9 a ，b ) 和t o r i g o e ( 1 9 7 5 ，1 9 7 8 ) 等利用蛋白质及同工酶 电泳分析的方法研究了牡蛎属间的遗传差异，取得了一定的进展，但由于涉及的 种类有限，种内的遗传差异程度还了解甚微，因此，很难阐明种间的相互关系。 至1 9 9 4 年，与许多外形相似牡蛎的分类研究方面还没有找到比较满意的解决方法 ( 李孝绪，1 9 9 4 ) 。 根据h a r r y ( 19 8 5 ) 的分类系统和李孝绪09 9 4 ) 的修正，中国的现生牡蛎应分别 隶属于2 科4 亚科1 0 属，共计1 5 个种。 名录如下： 牡蛎亚目 o s t r e i n af e r u s s a c ，18 2 2 牡蛎超科o s t r e a e e ar a f i n e s q u e ，1815 曲蛎科g r y p h a e i d a ev y a l o v ，1 9 3 6 强蛎亚科p y e n o d o n t e i n a es t e n z e l ，19 5 9 舌骨蛎属h y o t i s s as t e n z e l ，1 9 7 1 舌骨牡蛎h 咖o a s ( l i n n a e u s ，1 7 5 8 ) 拟舌骨牡蛎p a r a h y o t i s s ah a r r y ，19 8 5 复瓦牡蛎尸- i m b r i c a t a ( l a m a r c k ，1 8 1 9 ) 2 密鳞牡蛎人工繁育研究 中华牡蛎尸s i n e n s i s ( g m e l i n ，1 7 9 1 ) 牡蛎科o s t r e i d a er a f i n e s q u e ，18 15 冠蛎亚科l o p h i n a ev y a l o v ，19 3 6 冠蛎属l o p h ar o d i n g ，17 9 8 鸡冠牡蛎l c r 括t a g a h i ( l i n n a e u s ，1 7 5 8 ) 齿蛎属d e n d o s t r e as w a i n s o n ，18 3 5 薄片牡蛎d f o l i u m ( l i n n a e u s ，17 5 8 ) 缘齿牡蛎d c r e n u l i f e l a ( s o w e r b y ，18 7 1 ) 褶蛎属a l e c t r y o n e l l as a e c o ，18 9 7 褶牡蛎a p l i c a t u l a ( g m e l i n ，1 7 9 1 ) 巨蛎亚科c r a s s o s t r e i n a et o f i g o e ，19 8 1 。 爪蛎属( 新属) t a l o n o s t r e ag e n n o v 猫爪牡蛎( 新种) zt a l o n a t as p n o v 巨蛎属c r a s s o s t r e as a c c o ，18 9 7 长牡蛎cg i g a s ( t h u m b e r g ，17 9 3 ) 近江牡蛎cr i v u l a r i s ( g o u l d ，18 61 ) 拟近江牡蛎c r a s s o s t r e as p 小蛎属s a c c o s t r e ad o l f u s sa n dd a u t z e n b e r g ，1 9 2 0 僧帽牡蛎c u c u l l a t a ( b o r n ，17 7 8 ) 棘刺牡蛎e c h i n a t a ( q u o ye tg a i m a r d ，18 3 5 ) 牡蛎亚科o s t r e i n a er a f i n e s q u e ，18 15 平蛎属p l a n o s t r e ah a r r y ，19 8 5 鹅掌牡蛎pp e s t i g r i s ( h a n l e y ，18 4 6 ) 牡蛎属 o s t r e al i n n a e u s ，17 5 8 密鳞牡蛎d d e n s e l a m e l l o s al i s c h k e ，18 6 9 1 1 2 牡蛎的人工繁育技术 牡蛎在全世界很多国家都是最重要的海洋经济种类之一，牡蛎养殖的总产量 和单位面积产量也都在所有养殖品种中位居首位( 王如才e ta l ，2 0 0 4 ) 。牡蛎作为 3 密鳞牡蛎人工繁育研究 育种对象，具有许多其它经济水产种类所没有的优势：牡蛎的怀卵量大，一个 壳长1 3 c m 左右的太平洋牡蛎，其最大怀卵量能达到甚至超过50 0 0 万( 王如才e ta l ， 1 9 9 8 ) ，可提供足够数量的选育个体；牡蛎某些重要的经济性状体重、体长等 的现实遗传力较大，一般都能达到0 2 0 5 的范围( b o u d r ye ta l ，1 9 9 8 ；刘小林等， 2 0 0 3 ) ，而多数鱼类，其体重、体长、生活力和抗性等方面遗传力通常都低于0 3 ( 楼 允东，1 9 9 9 ) ；牡蛎的繁殖周期相对较短，性成熟较快，能较快地进行多代选 育和评估选育效果。牡蛎从发生后约1 年即达到性成熟，开始繁殖。由于牡蛎的 种类不同、繁殖区域有差异，就是同一种牡蛎也因海区条件不同而不一致。即使 是同一海区的同种牡蛎，每年的繁殖期也会随着环境的变化而有先后，但多数是 在5 8 月。卵生型牡蛎产卵量很大，据测定充分成熟了的牡蛎，其生殖腺在体中 央部横断面占整体面积的6 0 , - - - , 8 0 精子或卵子约占体重的2 3 。一个壳长1 4 8 e m 的长牡蛎，在5 8 分钟内就可产卵5 5 8 0 万粒卵；美国牡蛎在3 0 - - 7 0 分钟内1 次的产 卵量可达l 亿粒( 王刚e ta l ，2 0 0 2 ) 。 全世界牡蛎的种类繁多，其繁殖方式有两种：幼生型在繁殖季节，亲贝将 成熟的精子和卵子排到鳃腔里，并在此腔受精，经过卵裂发育成面盘幼虫后才离 开母体，在海水中经过一个自由浮游阶段，然后固着变态成稚贝，密鳞牡蛎属于 典型的幼生型( b u r o k c r ，1 9 8 5 ；f o i g h i le ta l ，2 0 0 0 ) 。卵生型在繁殖期间，亲贝 把成熟的精子或卵子排出体外，在海水中受精、卵裂发育成幼虫，再固着变态成 稚贝。它的整个生活史都在自然海区里度过。大多数牡蛎属于这种类型( 王刚e ta l ， 2 0 0 2 ；s t r a t h m a n ne ta l ，1 9 8 2 ) 。无论是幼生型还是卵生型的牡蛎，世界均已成功的 进行人工繁育，幼生型种类如欧洲平牡蛎( o s m e ae d u l i s ) 、智利牡蛎( o s t r e a c h i l e n s i s ) 、阿根廷牡蛎( o s m e ap u e l c h a n a ) 等，而成功进行人工繁育的卵生型种类 有太平洋牡蛎( c r a s s o s t r e ag i g a s ) 、欧洲巨牡蛎( c r a s s o s t r e aa n g u l a t a ) 、美洲牡蛎 ( c r a s s o s t r e av i r g i n i c a ) 、近江牡蛎( c r a s s o s t r e ar i v u l a r i s ) 、澳大利亚岩牡蛎 ( c r a s s o s t r e ac o m m e r c i a l i s ) 等。 牡蛎一般为雌雄异体，体外受精，卵多数呈圆形，太平洋牡蛎成熟卵径5 0 6 0 微米，精子全长约6 0 微米，头部近2 微米。 一受精卵子受精后收缩呈球形，同时生出一层透明的受精膜，细胞质 开始流动，核消失。 4 密鳞牡蛎人工繁育研究 二分裂 2 细胞时期：在2 0 - 2 3 c 的水中，卵子受精后3 0 m i n 左右，细胞质流向植物极， 并向该区伸展，使卵子成为梨形，突出部分较透明，此即第一极叶。1 0 r a i n 后， 卵开始第一次分裂，分裂面与卵轴平行略偏斜一侧，成为2 个大小不等的分裂球， 大分裂球含有极叶，极叶以后慢慢缩回，2 个分裂球才形成。 4 细胞时期：第一次分裂完成后1 5 m i n ，较大分裂球的细胞质又向植物极延伸， 形成第二极叶，过1 0 m i n 第二次分裂开始，分裂面与第一次垂直，与卵轴方向平 行，但在较大分裂球上的分裂线略偏一边，极叶连于一个较大的分裂球上，成为 一大三小分裂球，以后极叶又缩回。 8 细胞时期：受精后3 h 2 0 m i n 左右，行第三次分裂。分裂前极叶出现的动作与 前者相同，第三次分裂位于赤道附近与卵轴垂直。分裂时每个分裂球的上半向右 旋转，分裂后分裂球继续移位，把上部4 个分裂球移向顶端，成为1 a 等4 个，1 a 等4 个，共8 个分裂球。 1 6 细胞时期：前一次分裂后1 h ，行第四次分裂。分裂球旋转方向与前一次相 反，即向左旋转，成为2 a 等4 个，2 a 等4 个，1 a 1 等4 个，1 a ? 等4 个，更1 6 个分裂球。 3 2 细胞时期及桑椹期：3 2 细胞形成时，分裂球又向右旋转，分裂球继续分裂， 数目越来越多，形成桑椹期。 三囊胚期在植物极一端，大分裂球逐渐陷入胚体之内，未陷入之前， 行一次与胚体中轴几乎平行的分裂，分为2 个大细胞，大细胞顶端有- d , 腔，为 囊胚腔。大细胞分裂后不久，又分出2 个小细胞暂留于外部，胚体内的细胞继续 分裂出许多细胞，充满于胚体内部。胚胎表面被有短而小的纤毛，开始孵化游动， 此时约为受精后8 h 4 0 m i n 。 四原肠胚期由于外胚层小细胞下包，且d 细胞分裂的细胞增多，把2 个 大细胞分出的2 个小细胞推向一侧，此区细胞开始内陷，四周细胞隆起，形成一 小孔，称为原口或胚孔，这时约为受精后9 h 3 0 m i n 。胚体内的细胞逐渐分化成一 圆管状的原肠，然后发育成为消化道。 五担轮幼虫受精后1 2 h ，胚体渐变梨形，顶端膨大，细胞加厚，长有一 丛纤毛，为顶纤毛束，其中央有1 2 根粗大的触毛或鞭毛。胚体背部细胞加厚且 略下陷，为胚体的壳腺。胚孔闭合区继续内陷，逐渐形成口凹，此即为早期担轮 密鳞牡蛎人工繁育研究 幼虫。在静水域里，幼虫喜浮游于缸壁上及水表面或明晰透亮地区，但趋光性不 很明显。至晚期担轮幼虫，胚体左右略变扁平，背部长，腹部宽，其顶端变平， 四周细胞隆起，壳腺内陷，将分泌贝壳。幼虫趋光性不甚明显，但往往过分聚集 于明亮地区而引起大量死亡，对机械作用很敏感，倘若水域受震动，不久可在缸 底明亮的角落，发现许多活力弱的幼虫或尸体。 六面盘幼虫 l 直线铰合幼虫( 亦名d 形幼虫)受精后2 4 h ，胚体两侧覆盖两片较硬而透 明的半圆形的贝壳，在背部呈直线的铰合，胚体顶端呈椭圆盘状，形成面盘，其 四周细胞被有纤毛，使贝壳闭合的前后闭壳肌也已形成。同时也出现几对幼虫缩 肌，一部分伸向面盘，使面盘能自由伸缩，一部分伸向壳的腹缘和后缘。消化器 官分化尚未完善，不具有吞食机能。第三天的幼虫，消化道开始弯曲，肾组织正 出现，但未完全分化。第五天时，肾较发达呈管状，消化盲囊由淡黄色变成褐色 并具有吞食、消化之机能。 2 壳项幼虫8 天时，贝壳的两侧靠近中央处稍稍隆起，形成幼虫的壳顶， 但不甚明显。第l o 天略明显，半个月的幼虫壳顶隆起更为明显，壳的后端腹缘生 长快，贝壳变成不对称，壳顶已不在中央。内部器官、足、听囊、眼点和鳃组织 逐渐出现，但都不明显。足呈扁平状，足丝腺、足神经节逐渐形成，但这时足丝 腺不具有分泌足的技能。随着足的形成，伸向足的2 对缩肌也出现了，位于顶板 下的脑神经节及位于消化盲囊两侧的内脏神经节均已形成，但未很好分化。位于 足的基部的听囊也明显可见，听囊前方的1 对眼点布满了色素，在眼点基部的鳃 组织，形成了管状而又弯曲的鳃，此时每侧形成了2 个内鳃丝，但还不具有纤毛。 胃的顶端出现隔膜，胃的左右两侧消化盲囊开始各分成两叶，在胃的末端左侧突 出一小囊，叫晶杆囊。 浮游幼虫时期器官的形成： a 、面盘面盘的发生是由口前纤毛带增加细胞并相对地前移，且幼虫前端 的扩张相结合而成。面盘呈盘状，上面生有许多纤毛，但没有中央鞭毛。面盘是 幼虫运动和摄食的重要器官，面盘在浮游幼虫的末期有萎缩现象，面盘的组织在 幼虫附着后便开始破坏和脱落。面盘顶端部分向内陷，其深度与口凹差不多，将 来此内陷的侧壁向外翻出，形成外唇瓣，其它部分在附着后2 4 d , 时内就完全分解 6 密鳞牡蛎人工繁育研究 消失。 b 、贝壳在担轮幼虫时就已奠定贝壳的基础。最初形成的贝壳为马鞍形， 而后来在中线的两侧有对称的两个钙化中心，是为左右壳的开始，但此时两壳的 背部仍然是连续不分的。铰链组织在背中线的两侧开始形成，后来随着幼虫的生 长，双壳越来越明显，并且背缘平直，所以整个贝壳由马鞍形变成d 形。后来壳 顶隆起，此后不久再发生变化，左壳壳顶突出，右壳生长较慢，使左右两壳呈不 对称状态，此时幼虫已行将附着，至于贝壳形成的速度在整个发生过程中并不是 一致的，在幼虫初期生长较慢至后期较快。 c 、闭壳肌当贝壳生长到包围幼虫身体的一半时，前后闭壳肌开始出现， 至幼虫附着之后，前闭壳肌消失，后闭壳肌增大，并逐渐移到身体的中央部分。 d 、足足部是由幼虫的口与肛门之间突出来的一个小突起发展而成，足呈 棒状，表面遍生纤毛。随着幼虫的生长足部逐渐增大，至浮游幼虫末期足部最发 达，幼虫依靠足部在附着物上匍匐爬行，一旦遇到合适的条件就分泌足丝