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文档简介
梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验(TPPA)及其在梅毒检测中的应用,1,.,2019/12/18,2,.,2019/12/18,1梅毒简介,3,.,2019/12/18,血清或血浆1ml,标本应无溶血,无脂血,无微生物污染。不满足上述要求的标本拒收,标本的采集应使用清洁,无菌的一次性的干燥管。标本用量最少50ul,七天内检测的标本应在2-8保存,贮存在-20可保存4W,同时避免反复冻融血清,梅毒抗体检测是采用抗原抗体凝集反应中的凝集反应。其原理如下:将梅毒(Nichols株)的精制菌体成分包被在人载体明胶粒子上。这种致敏粒子和样品中的梅毒螺旋体(TP)抗体进行反应发生凝集,产生粒子凝集反应(PA),并且可用来测定抗体效价,TPPA检测技术,4,.,2019/12/18,实验步骤,5、混匀,加盖,孵育2个小时,判读结果,5,.,2019/12/18,实验操作中的注意事项,试剂批号不同不可混用,试剂不可冷冻最好在白色湿布上加样,防止静电,易于观察致敏粒子与未致敏粒子使用前必须混匀,加完样后要充分震荡,注意不要溢出结果观察完毕前不要移动加样板,6,.,2019/12/18,1.观察加未致敏颗粒的第3孔,不出现凝集为有效试验。2.观察凝集反应强度:分级如下。4+:颗粒光滑覆盖整个孔底,有时边缘有折叠。3+:颗粒光滑覆盖大部分孔底。2+:颗粒光滑集聚覆盖孔底,周围有一颗粒环。1+:颗粒光滑集聚覆盖孔底,周围有一明显颗粒环。:颗粒沉集孔底,中央形成一小点。一:颗粒紧密沉积孔底中央。,结果判读条件,结果判读,对照孔结果无论是阴性还是阳性,只要致敏粒子是阴性,就出阴性结果,8,.,2019/12/18,RPR结果(前带现象),易出现在二期梅毒,9,.,2019/12/18,临床结果讨论,我们实验室TRUST+TPPA常出现以下4种情况:1、TRUST-,TPPA-可基本排除梅毒。极早期梅毒(无任何抗梅毒抗体产生)。极晚期梅毒。艾滋病病人合并梅毒感染。2、TRUST+,TPPA+现正梅毒,应考虑治疗。3、TRUST-,TPPA+极早期梅毒、晚期梅毒、治愈的早期梅毒(应询问病人是否有既往的梅毒感染和治疗史;若病人否认有既往史)。解释漏检4、TRUST+,TPPA-TRUST假阳性,10,.,2019/12/18,技术性:,标本的污染溶血操作失误,生物学假阳性,某些疾病:结核、疟疾、肝病、红斑狼疮、流感、肺炎、类风湿性关节炎、风湿性心脏病、风疹、系统性硬化症等,疾病发展过程中释放心磷脂到血液中假阳性。生理机能发生变化:少数孕妇也可发生生物学假阳性。服用免疫球蛋白类药物,梅毒血清试验假阳性因素:,11,.,2019/12/18,标本采集注意事项,操作过程注意事项,结果判定注
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