（分析化学专业论文）顺序注射光度法测定食品中的nafeedta和酒石酸.pdf

j d e t e r m i n a t i o no fn a f e e d t aa n dt a r t a r i ca c i di n f o o d b ys e q u e n t i a li n je c t i o n s p e c t r o p h o t o m e t r y b yc h e n z h i x i a s u p e r v i s o r ：p r o f e s s o rf a ns h i h u a n o r t h e a s t e r nu n i v e r s i t y j u l y2 0 0 8 2 l_， f ljlllljj-一1_ 独创性声明 本人声明，所呈交的学位论文是在导师的指导下完成的。论文中取得 的研究成果除加以标注和致谢的地方外，不包含其他人己经发表或撰写过 的研究成果，也不包括本人为获得其他学位而使用过的材料。与我一同工 作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢 二f 恩。 学位论文作者签名：能志霞 日期： 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者和指导教师完全了解东北大学有关保留、使用学位论 文的规定：即学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和 磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人同意东北大学可以将学位论文的全部 或部分内容编入有关数据库进行检索、交流。 作者和导师同意网上交流的时间为作者获得学位后： 半年面一年口一年半口两年口 学位论文作者签名：你志致 签字日期： 导师签名： 签字日期 谚磅节 0 卯男1 1 f 0 譬了 东北大学硕士学位论文 摘要 顺序注射光度法测定食品中n a f e e d t a 和酒石酸 摘要 本文将顺序注射进样技术与分光光度检测方法联用，分别测定了铁加强酱油中 n a f e e d t a 的含量和葡萄酒中酒石酸的含量，获得了比较满意的结果。 论文第一部分介绍了顺序注射分析的基本原理及进展，并综述了近年来顺序注射技 术在食品分析中的应用。 第二部分介绍了基于在酸性条件下n a f e e d t a 解离出的f e “能够和k s c n 发生络 合反应，产物在4 8 3l i r a 处产生强吸收的原理，建立了测定加强铁酱油中n a f e e d t a 含 量的顺序注射分光光度法。对实际样品的测定，以微酸性条件下酱油样品作为空f l ( 此 时酱油中的n a f e e d t a 不发生解离) ，消除了酱油本底颜色及游离f c 3 + 的干扰。该方法 线性响应范围为5 0 1 0 0 0m g l 1 ，检出限为1 4m g l - 1 ，采样频率为6 0h ，连续1 1 次 测定的相对标准偏差小于2 0 ，测定结果和卫生部推荐标准方法一致。该方法简单， 快速，省略了繁琐的前处理步骤，明显减少了试剂试样的消耗量，减少了对环境的污染。 第三部分介绍了基于在醋酸醋酸钠缓冲溶液中，酒石酸和偏钒酸钠反应生成的红 色产物在4 9 0n l l l 处产生强吸收的原理，建立了顺序注射分光光度法测定葡萄酒中酒石 酸含量的方法。该方法线性范围为o 0 2 1 0g l - 1 ，相对标准偏差小于1 o 。实际样品测 定的回收率在9 8 一1 0 5 之间。 第四部分对实验进行了总结。 关键词：顺序注射分析；分光光度法；酒石酸；加强铁；食品 ，l憎 j i i 。l t 东北大学硕士学位论文 d e t e r m i n a t i o no fn a f e e d 硝t a r t a r i ca c i di n f o o d b ys e q u e n t i a li n j e c t i o n s p e c t r o p h o t o m e t r y a bs t r a c t t h i sd i s s e r t a t i o nw a s m a i n l yc o n c e n t r a t e do nt h ed e t e r m i n a t i o no fn a f e e d t ai n 。 i r o nf o r t i f i e ds o ys a u c es a m p l ea n dt a r t a r i ca c i di nw i n e sb ys e q u e n t i a li n j e c t i o n ( s i ) 7 s p e c t r o p h o t o m e t r y t h eo b t a i n e dr e s u l t sw e r es a t i s f a c t o r y t h ef i r s ts e c t i o no ft h ed i s s e r t a t i o nc o n c e r n e do nt h er e v i e wo nt h ep r i n c i p l ea n d t h el a t e s td e v e l o p m e n to fs e q u e n t i a li n j e c t i o na n a l y s i s ，e s p e c i a l l yi t sa p p l i c a t i o n si n i nt h es e c o n ds e c t i o n ，as e q u e n t i a li n j e c t i o nm e t h o dw i t hp h o t o m e t r i cd e t e c t i o n w a sr e p o r t e df o rt h ed e t e r m i n a t i o no fi r o ni nf o r t i f i e ds o ys a u c es a m p l e ，w h i c hi s b a s e do nc o m p l e x a t i o nr e a c t i o no fi r o n ( i l l ) w i t ht h i o c y a n a t et of o r mr e dc o m p l e x w i t has p e c i a la b s o r p t i o na t4 8 3l m l t h el i n e a rr a n g eo ft h ec a l i b r a t i o nc u r v ew a s 5 0 1 0 0 t g m l 1 a3 sd e t e c t i o nl i m i to f1 4 丝g m l , ac o e f f i c i e n to fv a r i a t i o nl o w e r t h a n2 a t2 0 t g m l 1a n d6 0 , u g m l 1l e v e l ，a n das a m p l et h r o u g h p u to f6 0h 1w e r e o b t a i n e d t h er e c o v e r yo fn a f e e d t ai ns o ys a u c es a m p l e sw a sv a r i e df r o m9 5 t o 1 0 9 t h i sm e t h o dw a ss i m p l e ，f a s t ，a n da c c u r a t e t h em e t h o dw a ss u c c e s s f u l l y a p p l i e d t ot h ed e t e r m i n a t i o no fi r o ni nf o r t i f i e ds o ys a u c e s a m p l e s i nt h et h i r ds e c t i o n ，as e q u e n t i a li n j e c t i o nm e t h o dw i t hp h o t o m e t r i cd e t e c t i o nw a s r e p o r t e df o r t h ed e t e r m i n a t i o no f t a r t a r i ca c i di nw i n e ，w h i c hi sb a s e do nt h er e a c t i o n o ft a r t a r i ca c i dw i t hn a v 0 3i nn a c n a a cb u f f e rs o l u t i o nt of o r mr e dc o m p l e xw i t ha s p e c i a la b s o r p t i o n a t4 9 0m n t h el i n e a r r a n g eo f t h ec a l i b r a t i o nc u r v ew a s o 0 2 - 1 o g l 1 ，a n dt h er e l a t i v es t a n d a r dd e v i a t i o nw a sl e s st h a n1 o t h ef o u r t hs e c t i o ns u m m a r i z e dt h er e s e a r c ha n dr a i s e ds o m ep r o s p e c ta n d a p p l i c a t i o n so ft h ep r o p o s e dm e t h o d s k e yw o r d s ：s e q u e n t i a li n j e c t i o n ；s p e c t r o p h o t o m e t r y ；t a r t a r i ca c i d ；f o r t i f i e di r o n ；f o o d - 【臼【 - # _ i _ 东北大学硕士学位论文目录 目录 独创性声明i 摘要 a b s t r a c t i i i 第1 章概述。1 1 1j ； i 言1 1 2 顺序注射分析技术的产生及研究进展1 1 2 1 顺序注射分析原理1 1 2 2 顺序注射分析技术的新进展2 1 3 顺序注射分析技术在食品检测中的应用。3 1 3 1 食品中无机物含量的测定3 1 3 1 1 无机阳离子的测定。3 1 3 1 2 无机阴离子的测定5 1 3 2 食品中有机物含量的测定7 1 3 2 1 一般有机成分测定7 1 3 2 2 过程检测1 5 1 4 选题背景与意义1 7 第2 章顺序注射分光光度法测定加强铁酱油中n a f e e d t a 含量1 9 2 1 弓i 言1 9 2 2 实验部分2 0 2 2 1 实验原理2 0 2 2 2 仪器2 0 2 2 3 试剂及配制2 0 2 2 4 顺序注射系统的实验装置及操作过程2 1 2 3 结果与讨论2 2 2 3 1 最大吸收波长的确定2 2 2 3 2 试剂试样的组合及进样顺序的优化2 3 2 3 2 1 试剂试样的组合2 3 2 3 2 2 进样顺序2 3 2 3 3 实验参数的选择。2 4 东北大学硕士学位论文 目录 - _ _ - - _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ - _ - _ - - _ - _ _ _ - _ - _ - - _ l - 一一 2 3 3 1k s c n 体积2 4 2 3 3 2t w e 圮n 2 0 体积2 4 2 3 3 3 试样体积：2 5 2 3 3 4h c i 浓度。2 5 2 3 3 5 增敏剂及浓度2 6 2 3 3 6k s c n 浓度2 7 2 3 3 7 系统流速2 8 2 3 3 8 反应管道长度。2 8 2 3 3 9 氧化剂用量2 9 2 3 3 1 0 实验参数表。2 9 2 3 4 分析性能3 0 2 3 4 1 标准曲线和线性范围。3 0 2 3 4 2 精密度3 0 2 3 4 3 检出限31 2 3 4 4 共存物质的干扰3 1 2 3 5 方法可靠性与实际样品的分析3 1 2 3 5 1 样品的处理与测定3 1 2 3 5 2 回收率实验。3 2 2 3 5 3 对照实验3 2 第3 章顺序注射分光光度法测定葡萄酒中的酒石酸3 3 3 1 引言3 3 3 2 实验部分3 3 3 2 1 仪器装置3 3 3 2 2 试剂及其配制3 3 3 2 3 实验流路3 4 3 3 结果与讨论3 5 3 3 1 最大吸收波长3 5 3 3 2 进样顺序3 6 3 3 3 实验参数3 7 3 3 3 1 醋酸体积3 7 3 3 3 2 试样体积3 8 v - - 叮 东北大学硕士学位论文 目录 3 3 3 3n a v o y n a o h 体积3 8 3 3 3 4 反应管道长度3 9 3 3 3 5 试剂浓度4 0 3 3 3 6 流速及停流时间4 1 3 3 3 7 偏钒酸钠溶液中酒石酸的浓度4 2 3 3 3 8 实验参数表4 2 3 3 4 分析性能4 3 3 3 4 1 标准曲线4 3 3 3 4 2 精密度和检出限4 3 3 3 5 样品测定4 4 3 3 6 方法的局限性4 4 第4 章结论4 5 参考文献- 4 7 致谢5 7 、，i 东北大学硕士学位论文第一章概速 第1 章概述 1 1 引言 食品是人类生存和进行一切生命活动的能源。食品品质的好坏，直接关系着 人们的身体健康。食品分析工作在生产中起着“眼睛 作用。通过对食品生产所 用原料、辅助材料的检验，可以了解其质量是否符合生产的要求，使生产者做到 心中有数；通过对半成品和成品的检验，可以掌握生产情况，及时发现生产中存 在的问题，便于采取相应的措施，以保证产品的质量；并可为工厂制定生产计划， 为进行经济核算提供基本数据。食品分析工作为食品新资源和新产品的开发，新 技术和新工艺的探索等提供可靠的依据。 近年来，随着食品工业生产的发展和科学技术的进步，食品分析的发展十分 迅速，国际上这方面的研究开发工作至今方兴未艾，一些学科的先进技术不断渗 透到食品领域。许多自动化分析技术如流动注射分析( f i a ) 、顺序注射分析( s l a ) 等也应用于食品分析中。这不仅缩短了分析时间、减少了人为的误差，而且有效 地提高了测定的灵敏度和准确度。 1 9 7 5 年r u z i c k a 和h a 璐e n l l l 提出的f i a 溶液处理新技术具有分析速度快， 节省试剂与样品，能与不同的检测器联用等显著优点，特别是在分离与预浓集技 术、固定化酶技术和利用不稳定反应及中间产物等方面发挥着其它分析方法不可 比拟的作用。但是f i a 也存在蠕动泵稳定性在较长的时间内较差，复杂分析任 务可能引起流路复杂化，操作人员需要技巧和经验等局限性。这些缺点使f i a 不 能在例行分析中发挥其自动分析应有的作用。在这种情况下，s i a 作为f i a 的一 个分支在9 0 年代被提了出来。1 9 9 0 年r u z i c k a 和m a r s h a l l l 2 】发表了有关顺序注 射分析的第1 篇论文。随后，s i a 技术由于如硬件简单，完全自动化，适于过程 检测等自身的优点得到了迅速的发展。s i a 技术用于食品分析仅仅十几年的时间 内，已经发表了几十篇相关的文献。本章简单介绍了s i a 技术的原理，并就近 年来s i a 新技术的发展及在食品分析中的应用进行了综述。 1 2 顺序注射分析技术的产生及研究进展 1 2 1 顺序注射分析原理 s i a 的核心是一个多通道选择阀。阀的各个通道由聚四氟乙烯管分别与检测 东北大学硕士学位论文第一章概述 器、样品、试剂等通道相连，公共通道与一个可以正反抽吸的泵相连。通过泵从 不同通道顺序地吸入一定体积的溶液，送到泵与阀之间的储存管中。在这一过程 中，由于样品和试剂之问径向和轴向的分散作用而互相渗透和混合，发生化学反 应，反应产物被推送到检测器中进行检测。由于需要精确的控制时间，整个系统 必须由计算机自动控制。 1 2 2 顺序注射分析技术的新进展 一个基本的s i a 流路连接上一些辅助的装置，对样品进行适当的在线预处 理，就可实现更为复杂的测定。这类技术主要包括在线渗析，气体扩散，萃取等， 以及近年来快速发展的顺序注射阀上实验室( s i l o v ) ，基于微珠注射的阀上实 验室( s i - b i - l o v ) ，顺序注射色谱技术( s i c ) ，顺序注射毛细管电泳联用( s i a c e ) 等技术。 顺序注射阀上实验室( s i - i d 【3 】处理溶液的量处于传统流动注射技术m l 级与微全分析技术n l 级之间，恰好在l 范围以内。微型s i a - l o v 的管道直径 一般为0 5m m ，恰好避免了实际样品( 可能含有颗粒) 对管道的堵塞。l o v 中这 种短而粗的管道有两个显著的优点：1 、有较大的比表面积可以避免管道对管内 物质的吸附；2 、为微珠注射技术( b 1 ) 提供了一个平台。 b i 技术有其独特的优点。可更新表面技术为解决以往在线固定微柱的各种 问题( 柱效降低和背压增大) 提供了一个有效的途径。其基本思想是每次分析完毕 都将吸附剂排出，而为下一轮分析装新柱。王建华【4 】等指出在阀上实验室中引入 可更新表面微型填充柱就得到了基于微珠注射的阀上实验室系统( s i - b i l o v ) 。 该技术不仅避免了常规在线填充柱固相萃取分离富集所面临的困难，而且为分离 富集体系的进一步微型化开辟了新的途径。 s i c 技术于2 0 0 3 年首次被g ；a t i n s k # t 5 1 提出。该技术在传统s i a 系统的多位旋 择阀和流通池之间联入一个单片分离柱，分离柱由大孔硅胶构成，有较强的吸附 能力和极低的流动阻力。反相柱与高效液相色谱中5j “m 的典型c 1 8 柱等效。s i c 技术有如下优点：分析时间短，产生废液少，试剂消耗量少，运行费用低，轻便 可携带，最显著的优点在于经济，可以在检测过程中的任何步骤加入试剂使之与 试样发生反应，能够利用停流技术或使流动方向改变，洗脱速度快且不需梯度洗 脱装置。其缺点是：由予柱长较短，流动相使用量比较少致使分离能力有限。 c h o c h o l o u 等f 6 】利用s i c 技术进行了硝酸拿若宁和对羟基苯甲酸甲酯的同时测 定。 盘 东北大学硕士学位论文第一章概述 z a c h a r i s 等1 7 】通过一个专门的微阀将s i a 装置与c e 装置相接，实现了s i a 技术与c e 技术的联用。s i a 装置的主要作用在于氨基酸和多肽的在线衍生化。 以二氯三嗪基氨基荧光素作为衍生剂，利用激光诱导荧光检测待测物质的衍生产 物。s i a 过程包括四步：1 、将试剂与试样引入中心管道；2 、试剂与试样区带在 反应管道中进行混合；3 、停流使反应充分；4 、将衍生化后的试样推入微阀。然 后经由微阀的一个通道将少量待测物引入c e 装置进行毛细管电泳分离分析。该 方法完全自动化，试剂试样消耗量少，经济快速，和未进行衍生化的u v 测定方 法相比，检出限改善2 5 0 5 0 0 倍。 1 3 顺序注射分析技术在食品检测中的应用 1 3 1 食品中无机物含量的测定 1 3 1 1 无机阳离子的测定 v a ns t a d c n 8 】等根据c u ( i i ) 与二乙基二硫代氨基甲酸酯( d d t c ) 反应所得产物 在4 6 0n i n 处产生强吸收的原理，建立了饮用水和食品中c u ( n ) 含量的s i a 测定 体系。该方法通过改变s i a 体系的物理参数( 往复运动的次数和长度) 和加入掩蔽 剂( e d t a 和柠檬酸) 来消除干扰，而没有使用传统的萃取方法。这在很大的程度 上避免了环境污染，是一种环境友好型分析方法。该方法检出限为0 2m g l 1 ， 线性范围为0 5 5 0m g l 1 ，相对标准偏差小于4 5 。 魏芳芳1 9 】等基于铝与8 羟基喹啉5 磺酸在酸性介质中的产物的荧光性质，以 十六烷基三甲基溴化胺为增敏剂，将顺序注射进样方式与荧光检测技术联用，建 立了铝的顺序注射荧光分析法。方法简单、快速、线性范围为3 0 3 5 0 g l - 1 ， 检出限为0 6 肛g l - 1 ，r s d 小于1 。茶叶中铝含量的测定结果与标准值一致。 水和罐装鱼罐头中汞含量的s i a 测定方法以冷原子蒸气法为基础，以带有 石英吸收池的原子吸收分光光度计作为检测器。m i r a b b 1 0 l 等报道了一个使用两个 注射泵作驱动装置的s i a 系统。同时使用了一个丙烯酸材料的圆柱状气液分离 室，用氯化锡作还原剂。2 0 0 0 年d o c r i n g 等【l l j 在m i r a b 6 工作基础上进一步优化 了该流路，使其更为简单：一个单通道的蠕动泵，一个简单的t 型气液分离装 置，同样的还原剂。固体样品引入系统之前，要在酸中消解。测定结果和标准参 考物质对照，没有显著性差异。与f i a 相比，该方法试剂消耗少，产生的废液 少，硬件要求简单，但检出限较高。 d u a n 等【1 2 j 提出了s i 与f i 联用测定茶叶中超痕量镉的原子荧光光度分析法 东北大学硕士学位论文 第一章概述 ( _ 悯) 。首先使用流动注射固相萃取技术( f i s p e ) 将c d 2 + 与基体分离，并进行预 浓集，然后使用顺序注射氢化物发生技术( s i h g ) 进行c a 2 + 含量的测定。该文作 者优化了s p e 分离与预浓集和h g 检测参数。待测组分与基体进行了较好的分 离，使得氢化物发生效率显著提高，所需c 0 2 + 的浓度仅为o 2m g l 1 ，比原先的 报道降低了很多。在该体系中，几乎没有离子可以干扰c d 2 + 的测定。s p e 萃取柱 可以重复使用4 0 0 余次。对0 2 g l 1 的c d 2 + 进行6 次测定，r s d 为0 9 7 。在 o 1 2 比g l 1 的范围内，线性曲线的相关系数为1 0 0 0 0 ，检出限达1 0 8n g l 1 ，对 标准物质的测定结果与推荐值一致。 a r a 6 j o 等1 1 3 j 用s i a 比色法测定了婴儿营养加强食品中铁的含量。f e 3 + 和硫氰 酸反应产生一种有色的化合物，通过测定有色化合物的含量来测定f c 3 + 的含量。 样品需要进行干法灰化，然后用0 2t o o l l 1 的硝酸溶解。标准曲线的线性范围为 0 5 0 - 2 0 0m g l 1 。每次测定仅需要消耗1 4 0 l 样品和8m g 的硫氰酸。对1 2 个 样品进行分析，与f a a s 方法测定结果一致。每次测量需时3 4s ，采样频率为 1 0 0h ，相对标准偏差小于2 。 k a s s 等【1 4 j 基于f e n 与钛试剂反应生成的蓝色化合物在6 3 5a m 处有强吸收， 利用s i a 光度法测定了f e 3 + 与总铁含量。测定总铁时，需要加入h 2 0 2 将f e 2 + 氧 化。在试剂与试样区带中间增加钍试剂区带可以用来消除腌渍样品中h f 的干扰。 该法对腌渍样品的测定结果和e d t a 滴定方法一致。 c o s t a 和a r a t i j o 1 5 j 将s i a 技术和火焰原子吸收光度法联用，测定了葡萄酒中 f e ( m ) 和总铁含量。三价铁离子的测定基于有机试剂m i b k 对f e o r l ) 和硫氰酸盐 形成化合物的萃取。在该体系的在线液液萃取装置中，含有一个带有多孔陶瓷板 的玻璃瓶，密度比水小的有机相( 含有铁硫氰酸络合物) 处于陶瓷板上方，而水相 经孔道向下流入废液池。这种萃取分离装置避免了使用相分离器和较大体积的有 机相，显著提高了灵敏度( 与直接在水相或有机相中显色方法相比较，灵敏度分 别增加了0 5 倍和1 4 5 倍) 。总铁含量的测定只需要将一定体积的样品溶液直接 吸入中心管道，并由泵推入检测器检测。十个酒样的测定结果和硫氰酸盐比色法 ( f e 3 + ) 及原子吸收光谱法( 总铁) 所得结果一致。 c o s t a 等1 1 6 】用两种略有不同的s i a 方法测定了酒中的z n ，m g ，f e ，c u 等金 属离子的含量。装置以原子吸收光谱仪作为检测器，以蠕动泵作为推动装置，以 三通螺旋管以保证流动的重现性，并联入一个选择阀，成功地测定了z n ，m g ， f c 和浓度高于0 2 y g l - 1 的铜离子。当测定浓度低于0 2 , u g l - 1 的铜时，需要额外 东北大学硕士学位论文 第一章概述 加上一个模块首先进行在线的预浓集。预浓集在两相中进行，用了一个商用的涂 有c 1 8 的硅胶作为吸附剂，用乙二铵n n - - - 7 _ _ , 基二硫代氨基甲酸酯( d d t c ) 水溶 液作螯合试剂。作者通过分析含有不同浓度的这些金属的样品证明了该体系的可 行性。用该体系可以进行多通道同时测定而不用更改装置流路，所得结果与标准 方法测定结果一致。 o l i v e i r a 等人【1 刀提出了同时测定食品中钙、镁、铁含量的顺序注射光度分析 方法。将待测试样以悬浮液的形式引入s i a 管道中，在浓硝酸存在的条件下进 行在线的微波消解。通过多位选择阀和注射泵依次吸入消解后的试样，显色剂 1 ( 邻甲酚酞) ，掩蔽剂( e g t a ) ，然后进入检测器检测镁的含量。按同样的方法吸 入消解后的试样，显色剂1 测定钙、镁的总量；两者相减即得到钙的含量；最后 吸入消解后的试样，显色剂2 ( 邻二氮杂菲) 测定铁的含量。所得结果与手工消解 后火焰原子吸收光谱法所得结果一致。 1 3 1 2 无机阴离子的测定 l i m a 等1 1 8 l 提出用顺序注射滴定电位法测定牛奶中的氯化物。该体系采用三 明治迸样方式( 滴定剂a g n o a 在两端包夹样品区带) ，以a 9 2 s a g 电极作检测器， 通过测定滴定剂中a 矿的损耗量来测定样品中c l 。含量。该方法对实际样品测定 的结果在统计学上与标准方法结果没有显著性差异。 基于酸性溶液中h c h o 存在下，k m n 0 4 氧化r 产生强化学发光的原理，高 春英等【1 9 】建立了一个简单快速测定微量碘的顺序注射化学发光分析方法。r 在 3 0 x 1 0 - s - 8 0 x 1 0 击t o o l l - 1 范围内与发光强度呈良好线性关系。对2 0 x 1 0 - 6 m o l l 1 r 进行1 1 次重复测定，相对标准偏差( r s d ) 为2 6 ，检出限( 3 s ) 3 01 3 x 1 0 - s t o o l l - i ， 测定了4 种食品中的碘含量，回收率在9 2 8 1 0 7 7 之间，采样频率为7 0h 1 。 o l i v e i r a 等1 2 0 l 提出一个带有在线预处理装置的s i a 方法，用于各种食品( 如： 酒，牛奶，果汁，蔬菜等) 中总磷含量的测定。该法利用磷铝兰这一广为人知的 原理，使用光度法进行检狈t ( 6 1 9n m ) 。蔬菜样品需要8 0 条件下干燥至恒重，然 后研磨成小于6 0 比m 的颗粒，取0 2 5g 和o 5m l t x - 1 0 0 于2 5m l 水中混合均匀 后引入s i a 系统。牛奶要经过1 0 倍稀释，而葡萄酒和果汁可以不经任何处理直 接引入s i a 体系。吸入s i a 系统的样品和h n 0 3 直接进入一个在线微波消解装 置停流消解，消解结束后，将反应所需的各种试剂经由中心管道推入消解装置中 充分混合，然后改变泵的运动方向，将混合后的溶液推入检测器检测信号。该方 法避免了手工消解样品过程中引入人为误差，在消解过程产生的酸性气体经 东北大学硕士学位论文 第一章概述 n a o h 溶液吸收后排出，避免了环境污染。 l i m a 等1 2 1 j 也进行了牛奶中磷的测定借助s i a 停流技术，可以非常容易地 对复杂基体进行在线消解。该实验中，使用在线u v 光氧化并使用硫酸和过硫酸 钾将各种磷的化合物转化成正磷酸盐。在与钼酸盐及作为还原剂的氯化锡反应 后，生成的蓝色化合物在7 1 0n m 处进行光度法测定。对牛奶样品用s i a 方法和 手工方法同时测定，结果在统计学上没有显著性差别。 m a s t o r t e s 等1 2 2 l 提出了一种新颖的测定磷含量的s i a 方法。该方法没有使用 传统测磷方法中常用的还原剂s n c h 、抗坏血酸等，而是在s i a 多位选择阀的一 个端口接入了电极，使钼酸铵和正磷酸根的混合溶液在工作电极上发生还原反 应，形成能在7 6 0n m 处产生强吸收的还原产物。通过测定产物的吸光度测得样 品中磷的含量。由于避免了不稳定还原剂的使用，该方法更适于磷含量的长时间 监测。对样品进行适当的在线预处理或者改变一些实验参数可以测定0 3 8 0 0 r a g - l 1 的磷。用该方法和标准方法对样品进行同时测定，结果经t 检验，在9 5 的置信水平上没有显著性差异。 o l i v c i r a 等瞄j 建立了测定蔬菜中n 0 3 的s i a 方法。该方法试剂试样消耗量少， 废液少，且成本低。样品中的n 0 3 用水浸出并过滤后，被镀镉的还原柱还原成 n 0 2 然后基于g r i c s s i l o s v a y 反应原理进行测定。首先用磺胺将其重氮化，然后 与n - ( 对一萘基) 乙二胺盐酸盐( n - ( i - n a p h t y l ) e t h y l e n e d i a m i n ed i h y d r o c h l o r i d e ) 反 应生成在5 3 8s i n 处有强吸收的红色化合物，n 0 3 的转化率为9 9 1 ，线性范围 为1 3 5 5 0 0m g l 1 ( 对蔬菜而言：0 2 7 0 - 1 0 0g l 1 ) 。对1 5 个蔬菜样品的测定结果 与常规方法所测结果一致，采样频率为2 4h 1 ，相对标准偏差为1 2 o l i v c i m 等l 矧基于同样的反应原理，建立了同时测定肉类样品中n 0 3 。和n c h 的s i a 方法。n 0 2 可以直接测定，而n 0 3 的测定要先经过一个在线的镉还原柱 将其还原成n 0 2 再进行测定。在最优条件下，线性范围分别为0 0 3 0 1 2 2 m g l 1 ( n 0 0 和0 0 3 4 - 3 9 5m g l - 1 ( n 0 0 ，采样频率为9h - 1 。对实际样品的测定结 果与标准方法结果一致。 l i m a 等f 2 5 l 提出了一种分光光度法测定奶制品中的硝酸盐的s i a 体系。以溶 有e d t a 的n h 4 0 h n i - h c i 缓冲溶液作为载流，吸入一定体积待测样品，使其流 经一个在线的镀铜的镉还原柱，将样品中的硝酸盐还原成亚硝酸盐，采用停流技 术以确保还原反应进行完全，然后和显色剂溶液混合，此时测定的是硝酸盐和亚 硝酸盐的总含量( 以亚硝酸盐计) 。当测定亚硝酸盐含量时，样品吸入管道后，不 东北大学硕士擎位论文第一章概述 经过还原柱的管道直接和显色剂混合并进入检测器检测。以亚硝酸盐计的总量减 去亚硝酸盐的含量即可求出样品中硝酸盐的含量。光度测定原理是基于g r i e s s 反应，产物在5 3 8n m 处有强吸收。该方法自动化程度高，减少了试剂消耗，降 低了排废量，节省了检测时间，采样频率为2 1h 一，和文献报道的方法比较，分 析速度提高了1 0 倍。 c e r d a 等1 2 6 1 提出了一种新颖的s i a 进样方法，同时测定了n 0 3 - 和n 0 2 含量。 在体系的中心管道处连接入一个c u c d 还原柱( 将n 0 3 。还原成n 0 2 ) 。采用两端 显色剂区带包夹足够长的一段试样区带的进样方式，试样区带的一部分流经 c u c d 还原柱( 将n 0 3 还原成n 0 2 ，测总含量) ，而另一部分却不能与还原柱接触 ( 测n 0 2 含量) ，两部分显色剂分别和与其邻近的试样部分反应，当经过检测器时 产生两个信号峰。第一个峰是试样中的n 0 2 。产生的信号，而第二个峰是试样中 总的n 0 2 ( 包括n 0 3 还原得到的n 0 2 ) 产生的信号。该方法的线性范围分别为 0 5 4 0p m o l l 1 0 2 ) 和2 - 1 0 0p m o l l 1 烈0 3 ) 。使用该方法测定了自来水中n o ； 和n 0 2 。的含量，测定结果与离子色谱方法及f i a 方法所得结果一致。 基于s 0 2 与甲醛和盐酸副品红反应生成的有色物质可以在5 8 0n l n 处测定的 原理，s e g u n d o 和r 孤g e i 【2 7 l 提出了同时测定葡萄酒中游离和总s 0 2 含量的s i a 方 法。在流路中连入了一个气体扩散装置，该装置含有一个可更换的憎水膜。通过 该膜s 0 2 由给予液流管道进入接收液流管道。在样品进入扩散系统的接受管道之 前，为了促进s 0 2 气体的形成，向样品中加入4t o o l l 1 的h c i 溶液。样品被直 接吸入储存管，然后反推至气体扩散装置可以测定游离的s 0 2 。测总的s 0 2 时， 需要将样品先与2 5m o l l 1 的n a o h 溶液在线混合，使待测物质发生解离反应释 放被束缚的s 0 2 。本装置中，每个管道都简单的连接到一个选择阀的不同阎位上， 测得的游离和总s 0 2 的含量与标准参考方法一致。研究了可能存在的干扰后，作 者得出一个结论，该s i a 体系不能应用于c 0 2 含量较高的发泡的葡萄酒样品的 测定。 1 3 2 食品中有机物含量的测定 1 3 2 1 一般有机成分测定 j a k m u n e e 等【2 8 l 研究了果汁总酸度的s i a 滴定方法。首先将一定量的试剂 ( n a o h ) 、试样和指示剂( 酚酞) 依次吸入中心管道，然后改变泵的运动方向，使混 合区带流经反应管相互混合并反应，使指示剂颜色发生变化，在5 5 2n m 处检测 吸光度。吸收信号和酸度在o 2 1 0 及o 5 2 5 的范围内成线性。相对标准偏 7 东北大学硕士学位论文第一章概述 差小于1 ( 0 3 和o 6 ，n = 1 1 ) ，采样频率为3 0h 一。所得结果与标准滴定法一 致。 王伟等【2 9 j 以溴百里酚蓝( b t b ) 为指示剂，以n a o h ( 含指示剂) 为滴定剂，基 于未反应碱的峰面积与酸浓度的对数成反比的原理，利用顺序注射光度滴定法测 定了食醋及软饮料的总酸度。顺序注射滴定方法不需要人为目视判断滴定终点， 不受基体本身颜色干扰，避免了人为误差的引入，拓宽了实际应用范围。用该方 法对市售两种软饮料及两种食醋，进行检测，与国家标准滴定方法对比，两种方 法测定结果基本一致。 v a ns t a d e n 3 0 1 提出了一个测定软饮料中总酸度的s i 电位滴定体系，以p h 电 极作为指示电极，采用三明治进样方式，依次吸入碱、酸、碱，使三个区带在中 心管道充分混合并反应，然后改变泵的运动方向，使混合后的区带流经指示电极， 得到样品信号。峰宽与样品总酸度的对数在0 1 加6 杈w v ) 之间成线性关系。该 方法采样频率为4 5h 1 ，相对标准偏差小于0 5 。实际样品的测定结果与自动滴 定方法和手工滴定方法所得结果经t 检验在9 5 的置信水平上没有显著性差异。 f l e t c h e ra n dv a l ls t a d e n 3 1 j 等用s i a 光度法测定了酒饮料中乙醇含量。该体系 使用l a b v i c w 软件编写程序，使s i a 的泵和阀同步动作，数据采集完全自动化， 降低了试剂的使用量( 0 2m o l l 1 重铬酸钾和4m o l l 1 硫酸) ，线性范围可达6 ， 检出限为0 0 9 ，1 - 6 范围内的信号相对标准偏差小于1 ，采样频率为1 9h 一。 贾宏新等【3 2 】基于甲醛在碱性条件下与间苯三酚反应生成的橙红色化合物可 以在4 7 0 n m 处检测，信号强度与甲醛含量成正比这一原理，结合顺序注射技术， 建立了测定食品中甲醛含量的简单方法。在优化条件下，甲醛浓度的线性范围为 0 2 5 8 0 t g m l 1 ，其回归方程为a = 0 0 0 1 6 3 + 0 0 1 5 8 9 e ( c 单位为, u g m l 1 ， r = o 9 9 9 2 ) ，方法检出限为0 1 0 z g m l l 。在采样频率为2 0h 4 的分析速度下，连 续1 1 次重复测定2 0 g m l 1 的甲醛标准溶液，相对标准偏差r s d 为2 7 。 基于硫酸介质中高锰酸钾直接氧化d l - 苹果酸产生化学发光的原理，结合顺 序注射进样技术，徐小娜等【3 3 】对d l - 苹果酸的s i a 测定方法进行了初步试验。 对进样顺序、体积、流速和浓度各因素进行了优化，在1 5 6 l 进样体积下，方 法的线性范围为1 0 x 1 0 4 一1 o x l f f 2t 0 0 1 l 1 ，检出限( 3 s ) 为5 0 x l f f 5m o l u 1 ，方法 的相对标准偏差为1 3 ( 5 o x l o om o l r l ，n = 1 1 ) 。采样频率为8 4h 1 。但在本文 所述的实验条件下干扰严重，回收率偏低，和酸碱滴定分析对比，误差较大。 基于氨基酸可以与2 ，4 ，6 三硝基苯磺酸反应，生成的黄色化合物可以在3 5 0 8 - 东北大学硕士学位论文第一章概述 l i r a 处检测的原理，v a l ls t a