（药剂学专业论文）离子敏感即型凝胶剂在鼻腔给药系统中的应用.pdf

j y 舢舢1 删8 删1 胛1 删删7 舢4 f 2 舢 目录 中文摘要1 英文摘要3 第一部分聚合物基质的性质及其鼻腔滞留能力评价8 l 材料和方法8 2 实验结果1 0 2 1 即型凝胶的微观结构1 0 2 2d g g 即型凝胶的流变性1 1 2 3 即型凝胶的持水能力1 2 2 4 在体消除动力学1 3 3 讨论1 5 本部分小结1 6 第二部分氢溴酸东莨菪碱鼻用即型凝胶剂的研制及评价1 7 第一节氢溴酸东莨菪碱鼻用即型凝胶的制备、质量评价及鼻粘膜刺激性考察 1 材料与仪器1 7 2 实验方法1 7 2 1s c o p 含量测定方法的建立1 7 2 2 处方设计和筛选1 8 2 3s c o p 鼻腔即型凝胶剂的质量评价1 9 2 4 初步稳定性试验2 0 2 5 毒性评价2 0 3 实验结果2 1 3 1 含量分析方法的建立2 1 3 2 处方的确定2 4 3 3s c o p 即型凝胶剂质量评价结果2 7 3 4 稳定性评价2 7 3 5 毒性评价2 8 4 讨论2 9 第二节东莨菪碱即型凝胶的药动学及脑内递药特性研究 1 材料与仪器3 0 2 实验方法与结果3 0 2 1 大鼠体内分析方法的建立3 0 2 2 大鼠体内分析方法评价3 1 2 3s c o p 鼻腔给药的脑内递药特性研究3 4 2 3 1 基本原理3 4 2 3 2 体外回收率的测定3 5 2 3 3 动物试验3 5 2 3 4 数据处理3 6 2 3 5 不同途径给药后s c o p 血药和微透析样品药一时数据3 6 2 3 6 药动学参数求算4 2 2 3 7 鼻腔给药后的脑内递药特性评价4 2 3 讨j 沧4 3 第三节东莨菪碱即型凝胶的大鼠药效学评价 1 材料与仪器4 4 2 实验方法4 4 2 1 药液配制4 4 2 2 动物分组及给药方案4 4 2 3 模型的建立4 5 2 4 评价指标4 5 2 5 统计学分析4 5 3 实验结果4 5 3 1 实验条件的筛选4 5 3 2 发生晕动症状的比率及时间分布4 6 3 3 即型凝胶的长效性评价4 7 4 讨论4 8 本部分小结4 9 第三部分柴胡即型凝胶剂的研制及药效学评价5 0 1 材料与仪器5 0 2 实验部分5 0 2 1 挥发油的提取和浓缩5 0 2 2 制剂的处方设计5 0 2 3 安全性评价5 1 2 4 药效学评价5 1 2 5 即型凝胶成凝性观察5 1 i i 5 1 5 1 5 2 5 3 5 3 5 4 5 5 4 讨论5 5 本部分小结5 6 第四部分糠酸莫米松即型凝胶剂的研制及药效学评价5 7 1 材料与仪器5 7 2 实验方法与结果5 8 2 1 制剂处方筛选及制备工艺5 8 2 2 含量测定6 0 2 3 体外释放评价6 l 2 4 药效学评价6 1 3 讨论6 8 本部分小结。6 8 全文总结6 9 参考文献。7 0 综述7 3 攻读硕士学位期间发表论文及专利申请情况7 8 致谢。7 9 i i i 复旦大学硕士论文离子敏感即型凝胶剂在鼻腔给药系统中的应用 离子敏感即型凝胶剂在鼻腔给药系统中的应用 中文摘要 从上世纪8 0 年代以来，关于鼻腔给药剂型的研制和开发日益增多，备受药 学研究者的关注。鼻腔内有效的自体保障机制和对外来异物的刺激敏感性促使人 们探索开发安全合理的给药系统。即型凝胶( i ns i r eg e l ) 是指以溶液状态给药后立 即在用药部位发生相转变，形成凝胶状半固体的制剂。由于兼备了液体与凝胶制 剂的优点，在药物载体领域有广阔的应用前景。本文应用新型材料去乙酰结冷胶 ( d e a c e t y l a t e dg e l l a ng u m ，d g g ) 作为成凝基质，以东莨菪碱( s c o p o l a m i n e ，s c o p ) 、 柴胡挥发油和糠酸莫米松( m o m e t a s o n ef u r o a t e ，m f ) 三种不同性质的药物作为模 型药物，从研究基质在鼻腔中的消除情况入手，设计了三种不同的鼻用即型凝胶， 并对其处方组成、制备工艺、鼻腔刺激性、药动学和药效学等进行了较为全面的 研究和考察。 为了研究基于d g g 的即型凝胶在鼻腔中的滞留能力，本文第一部分采用t 一闪烁照相技术，以示踪剂的强度为指征，在模拟生理条件下考察聚合物在家兔 鼻腔中的消除动力学过程。显微镜观察显示，d g g 与人工鼻液反应后其微观结 构由棒状小微管相互联结而形成小花状凝胶网络，并且随着浓度的增加这种凝胶 结构更加致密；流变学结果表明，d g g 溶液的粘度随剪切速率的增大呈明显下 降趋势，为假塑性流体特征；y 一闪烁照相结果表明，磷酸缓冲液在鼻部消除呈 典型的先快后慢的两相模式，1 8m i n 后仅有不足5 0 的标记物残留在鼻粘膜部 位，6 0m i n 时的残留量约为2 0 ；而d g g 溶液显著延长了标记物在鼻粘膜的滞 留时间，其放射活性一时间曲线下面积( a u c o 枷和a u c o _ 。) 分别为对照溶液的2 和7 倍，6 0m i n 时标记物在鼻粘膜的残留量仍有6 2 4 o 第二部分将s c o p 制成鼻用即型凝胶制剂。建立了专属性强、操作简便的高 效液相色谱法，用于制剂的含量分析和有关物质检查；在制剂质量可控性上，进 行p h 值、每喷主药含量和有关物质等项目的考察；此外，进行了初步稳定性试 验，为制剂有效期的确定提供参考。体外释放度实验表明，药物的释放度随d g g 用量的增加而减少，释放曲线的拟合符合h i g u c h i 方程。应用在体蟾蜍上颚模型 证实s c o p 即型凝胶剂对粘膜纤毛运动影响不大。采用微透析取样技术测定了 s c o p 经不同途径和处方给药后嗅球及前庭区药物的浓度随时间的变化情况，即 型凝胶显著提高了s c o p 的生物利用度，鼻腔给药后在两区域的靶向效率 复旦大学硕士论文离子敏感即型凝胶荆在鼻腔给药系统中的应用 a u c b 曲a u c p l 枷。均显著高于皮下注射，s c o p 鼻用即型凝胶、溶液剂给药后嗅 球的d t l 分别为1 6 9 和2 0 5 ，前庭区的d t l 分别为1 8 0 和2 1 5 ，证实了s c o p 鼻腔给药具有一定的脑内递药特性，有部分药物可经鼻腔粘膜吸收直接转运入 脑。建立的大鼠机械致晕模型显示，即型凝胶可延长s c o p 的抗晕效果，并呈现 剂量依赖性。 第三部分将基于d g g 的鼻用即型凝胶应用于传统中药柴胡。通过对柴胡挥 发油紫外吸收值的控制，简化了提取过程；以溶剂的澄明度和纤毛毒性为指标， 筛选出高效低毒的增溶剂，优化了鼻用即型凝胶剂的处方；以松节油为发热剂， 建立稳定的家兔发热模型，药效学结果显示柴胡即型凝胶相比传统的鼻腔喷雾剂 可明显延长退热效果，其疗效可延长至2 0 3 0h 。 第四部分将糠酸莫米松制成鼻用即型凝胶制剂。采用单因素考察法筛选了助 悬剂、润湿剂及防腐剂。以卵白蛋白为抗原刺激大鼠建立过敏性鼻炎模型，药效 学结果显示m f 即型凝胶剂相比市售混悬剂可明显抑制大鼠的打喷嚏数，并呈现 剂量依赖性，单剂量给药后药效可维持长达9h 。 本文选用以d g g 作为成凝基质，分别应用于三种不同性质的药物，结果显 示三种制剂安全、稳定，相对原有剂型在疗效上均有明显提高，展现出良好的鼻 腔应用前景。 关键词：鼻腔给药系统；即型凝胶；去乙酰结冷胶；东莨菪碱；柴胡；糠酸莫米 松；药物动力学；药效学；微透析 2 s c o p o l a m i n e ，r a d i xb u p l e u r ia n dm o m e t a s o n ef u r o a t e ( m f ) w e r es e l e c t e da sm o d e ld r u g s ，t h e n t h r e en a s a ld r u gd e l i v e r ys y s t e mb a s e do nt h ec o n c e p to fi o n - a c t i v a t e dw e r ed e v e l o p e da n d e v a l u a t e di nv i t r oa n di nv i v o m i c r o s t r u c t u r eo fg e l sw a ss t u d i e db yo p t i c a lm i c r o s c o p e t h et h e o l o g ya n dt h ew a t e r h o l d i n gc a p a c i t yo fg e l sw e r ei n v e s t i g a t e db yv i s c o s i t ya n dc e n t r i f u g a le x p e r i e m e n t 9 9 m t c d t p a w a su s e da sm o d e ld r u gt oi n v e s t i g a t et h en a s a lr e s i d e n c et i m e t h em i c r o s t r u c t u r eo fg e l sw a s f o r m e db yt h ea g g r e g a t i o no ft h ed o u b l eh e l i c a ls e g m e n t st of o r mat h r e e - d i m e n s i o n a ln e t w o r kb y c o m p l e x a t i o nw i t hc a t i o n sa n dh y d r o g e nb o n g d i n gw i mw a t e r t h ec l e a r a n c eo fn a s a lw a sf o u n d t oe x h i b i ta b i p h a s i cp a t t e r nb yy - s c i n t i g r a p h i ct e c h n i q u e ；a tt h ee n do f 2 0m i no n l yl e s st h a n2 0 o fa p p l i e ds o l u t i o nw a si nc o n t a c tw i t ht h en a s a lm u c o s a g e l a t i o no c c u r r e di n s t a n t a n e o u s l ya f t e r t o p i c a l l ya d m i n i s t r a t i n gt h ei ns i t ug e l ；t h e r e f o r et h er e s i d e n c et i m eo fr a d i o a c t i v em a k e rw a s s i g n i f i c a n t l yp r o l o n g e da n dt h er e t e n t i v ee f f e c tw a ss u p e r i o rt os o l u t i o n t h ea r e au n d e rt h e r e m a i n i n ga c t i v i t yi nt h em u c o s ar e g i o n ( a u c o - 6 0a n da u c 0 ) v s t i m ec u r v e si m p r o v e 2a n d7 f o l d s ，i nc o m p a r i s o nw i t hr e f e r e n c es o l u t i o n t h eu s eo f p o l y m e rs u c ha s0 5 d e a c e t y l a t e dg e l l a n g u mi nn a s a ld o s a g ef o r m si n c r e a s e st h er e s i d e n c et i m ew i t h i nt h en a s a lc a v i t y t od e v e l o pan o v e l ，i ns i t ug e ls y s t e mf o rn a s a ld e l i v e r yo fs c o p o l a m i n eh y d r o b r o m i d e ( s c o p ) as p e c i f i c a n dc o n v e n i e n th p l cm e t h o dw a se s t a b l i s h e dt o d e t e r m i n i n gt h e c o n c e n t r a t i o n so fs c o p , p h ，d r u gc o n t e n to fp e rs p r a ya n dr e l a t e ds u b s t a n c ei no r d e rt oc o n t r o l t h eq u a l i t yo fn a s a ls p r a y t h ev i s c o s i t yo ft h ed e a c e t y l a t e dg e l l a ng u mf o r m u l a t i o n se i t h e ri n s o l u t i o no ri ng e li n c r e a s e dw i t hi n c r e a s i n gc o n c e n t r a t i o n so fd e a c e t y l a t e dg e l l a ng u m i t sr e l e a s e i nv i t r ow a sm o d e r a t ei n a r t i f i c i a ln a s a lf l u i d t h em i c r o g r a p h i cr e s u l t ss h o w e dt h a ti ns i t ug e l s w e r es a f e ，w i t h o u tn a s a lc i l i o t o x i c i t y b yu s i n gm i c r o d i a l y s i sm e t h o d , t h ed i s t r i b u t i o no fs c o pi n b r a i nt i s s u ew a si n v e s t i g a t e df o l l o w i n gi n t r a n a s a l ；s u b c u t a n e o u sa n do r a la d m i n i s t r a t i o n t h eb r a i n t i s s u e - t o - p l a s m aa u cr a t i o si nv a r i o u sb r a i nt i s s u e sf o l l o w i n gi n t r a n a s a la d m i n i s t r a t i o nw e r e 3 复旦大学硕士论文离子敏感即型凝胶荆在鼻腔给药系统中的应用 s i g n i f i c a n t l yh i g h e rt h a nt h o s eo b t a i n e da f t e rs ca n di x ) d o s i n g , w h i c hi n d i c a t e daf r a c t i o no ft h e s c o pd o s ec o u l db et r a n s p o r t e dd i r e c t l yf r o mt h en a s a lc a v i t yi n t ot h eb r a i n i n t r a n a s a ls c o pi n s i t ug e la tad o s e o f10 0 l a g k gd e c r e a s e ds y m p t o m so fm o t i o ns i c k n e s ss i g n i f i c a n t l y i n c o m p a r i s o nw i t hs u b c u t a n e o u sa n do r a la d m i n i s t r a t i o n t h ep u r p o s eo ft h i ss t u d yw a st od e v e l o pan a s a li n s i t ug e ls y s t e mf o rr a d i xb u p l e u r i e m p l o y i n gd e a c e t y l a t e dg e l l a ng u m 雒ap o l y m e r r a d i xb u p l e u r ii ns i t ug e lc o n t a i n i n g0 2m l e s s e n t i a lo i le x t r a c t e df r o m4 5 0gr a d i xb u p l e u r i ，p r o p e rs o l u b i l i z i n ga g e n t sa n dd e a c e t y l a t e d g e l l a ng u m ( 0 5 w v ) w a sp r e p a r e da n dc h a r a c t e r i z e d t h ea n t i p y r e t i ce f f e c tp r o d u c e db yi ns i t u g e lf o r m u l a t i o nw a si n v e s t i g a t e di nf e v e r e dr a b b i t sa n dc o m p a r e dt oa ni n t r a n a s a ls o l u t i o n t h e r e s u l t i n gi n s i t ug e lw a sac l e a ra n dl i g h t - y e l l o wl i q u i d i n t r a n a s a la d m i n i s t r a t i o no ft h i s p r e p a r a t i o nt of e v e r e dr a b b i t sd e c r e a s e db o d yt e m p e r a t u r em a r k e d l y ( 1 1 a tt h ed o s e so fo i l f r o m1 5 gb u p l e u r i b o d y ) a n dt h ee f f e c tc o u l dl a s tf o r2 0 - 3 0h t h er e s u l t ss u g g e s tt h a tr a d i x b u p l e u r ii ns i t ug e lc a nb eg r e a t e re f f e c t i v et h a nt h es o l u t i o ni nt h et r e a t m e n to ff e v e r t h em a i np u r p o s eo ft h i ss t u d yw a st op r e p a r ean o v e li ns i t ug e ls y s t e mf o rn a s a ld e l i v e r yo f m fa n ds t u d yi t se f f i c a c yo na l l e r g i cr h i n i t i sm o d e l i ns i t ug e lw a sas y s t e mc o n s i s t i n go f d e a c e t y l a t e dg e l l a ng u m ，x a n t h a ng u ma n dm f m fi nd e a c e t y l a t e dg e l l a ng u mp r o d u c e d o b v i o u s l ye f f e c to na l l e r g i cr h i n i t i sa tt h ed o s e so f2 0i - t g b o d yf o l l o w i n gi n t r a n a s a la d m i n i s t r a t i o n , a n dt h ee f f i c a c yw a ss i g n i f i c a n ts u p e r i o rt ot h ec o m m o ns o l u t i o n ( p o 01 ) t h ei o n - a c t i v a t e dg e l s y s t e mi sap r o m i s i n ga p p r o a c hf o rt h ei n t r a n a s a ld e l i v e r yo fm ff o rt h et h e r a p e u t i ce f f e c t s i m p r o v e m e n t t h ei ns i t ug e l ss u b s t a n t i a l l yi n c r e a s e dt h ep h a r m a c o l o g yo ft h r e em o d e ld r u g s ，a n ds h o w e d g r e a tp o t e n t i a li ni n t r a n a s a la p p i l i c a t i o n k e yw o r d s ： i n t r a n a s a ld r u gd e l i v e r y ；i ns i t ug e l ；d e a c e t y l a t e dg e l l a ng u m ；s c o p o l a m i n e ( s c o p ) ；r a d i x b u p l e u r i ；m o m e t a s o n ef u r o a t e ( m f ) ；p h a r m a c o k i n e t i c s ；p h a r m a c o l o g y ；m i c r o d i a l y s i s 4 复旦大学硕士论文 离子敏感即型凝胶剂在鼻腔给药系统中的应用 1 l 翮青 鼻腔给药是指药物制剂在鼻腔内使用，发挥鼻腔局部的治疗作用或通过鼻腔 粘膜吸收发挥全身治疗作用的给药方法【1 j ，其制剂系统称鼻腔给药系统( n a s a l d r u gd e l i v e r ys y s t e m ) 。人类鼻腔内总容积约为1 5m l ，鼻腔粘膜表面积为1 5 0 c m 2 。鼻粘膜上存在很多微细的绒毛，使药物吸收的有效面积显著增加；鼻粘膜 下有很多毛细血管和淋巴管，可使药物迅速被吸收；药物经鼻腔毛细血管吸收后 直接进入体循环，因此，可以避免肝脏的首过效应，提高某些药物的生物利用度； 近年来研究发现，通过鼻腔给药能够增加药物的脑内递送，有利于脑部疾病的治 疗【2 1 。因此，鼻腔给药是一种很有发展前景的给药方法。 在鼻腔给药系统中，溶液剂因制备工艺简便，给药剂量准确，使用便捷且患 者用药顺应性强而广泛使用。但由于鼻粘膜纤毛及鼻粘液的运动，致使溶液剂在 鼻粘膜表面的滞留时间很短( 约1 5 3 0m i n ) 引，生物利用度较低。一些生物粘附制 剂如鼻用凝胶剂虽能延长药物在鼻粘膜滞留时间，但其粘度较高，给药剂量不准 确且使用不便，严重限制了该剂型的发展。选择适宜的高分子辅料作为增稠剂， 延缓鼻液对药物的清除一直是提高鼻腔给药疗效的重要手段。 即型凝胶( i ns i t ug e l ) 是一种高分子聚合物的溶液剂，因用药部位的温度【4 - 5 1 、 离子强度【6 】或p h 值【7 】的改变而发生相转变，形成具有粘弹性的半固体凝胶体系。 该制剂能在适当的生理条件下，在用药部位发生胶凝现象，从而达到延长药物滞 留时间，提高生物利用度的作用。由于兼备了液体与凝胶制剂的优点，它在药物 载体领域有广阔的应用前景，如眼部给药、口服给药、植入给药、鼻腔给药系统。 近年来，即型凝胶给药系统已经引起了各国学者的广泛关注，成为药剂学领域的 研究热点之一。 晕机病、晕船病统称晕动病( m o t i o ns i c k n e s s ) 或运动病，主要是人乘坐飞机 或轮船时因其发动机产生轰鸣的低频噪声或次声引起的一种疾病，其症状表现为 恶心、呕吐、食欲减退等，大大影响了人们的出行。东莨菪碱( s c o p o l a m i n e ，s c o p ) 作为一抗胆碱药，主要通过降低迷路受体的应激性并抑制前庭小脑通路的传导起 到防晕止吐的作用。s c o p 用于抗晕的临床给药途径主要有注射、口服和经皮。 皮下及肌肉注射，起效虽快、作用确切，但需专业医护人员操作，对于晕动病的 治疗非常不便。口服给药虽安全方便，但存在严重的首过效应，生物利用度仅为 1 0 左右【8 】，且起效迟缓，效果不够理想。经皮吸收制剂的优点是可延长药效持 续时间，但缺点也显而易见：给药后需1 2 1 6h 才能达到最高血药浓度 9 1 ，而且 复旦大学硕士论文 离子敏感即型凝胶剂在鼻腔给药系统中的应用 此给药途径表现出不规则的药时曲线，从而引起明显的副作用【l o j 。因此，上述给 药方法患者用药的顺应性都受到一定的影响，研制一种有效、便捷的s c o p 新剂 型具有较高的临床意义。 柴胡( r a d i xb u p l e u r i ) 作为传统中药己被广泛应用。柴胡注射剂因其疗效确 切，毒性低，且具标本兼治等优点而在退热药市场，尤其是儿童退热药市场占有 相当的份额。但是，注射剂给药不便，还会引起强烈的注射疼痛，致使病人用药 的顺应性较差。本课题组早期开发了柴胡鼻腔喷雾剂，实验结果显示退热疗效与 注射剂相仿，且顺应性好，但该剂型也存在不足之处，如在鼻腔中滞留时间不长， 致使疗效持续时间较短，需频繁给药。本文将柴胡挥发油制备成具有环境敏感特 性的鼻用即型凝胶制剂，以改善上述缺陷。 过敏性鼻炎是一种由多种致敏源所致的过敏性炎性疾病，春秋季节和寒冷气 候下易发作，是常发生于鼻粘膜的变态反应，近年来发病率有增加的趋势。此病 可发生于任何年龄的男女，以1 5 4 0 岁多见。典型症状为鼻痒、鼻塞、打喷嚏、 大量水样鼻涕、嗅觉减退等。过敏性鼻炎发作时病人十分痛苦，需要积极的治疗 以缓解症状。针对过敏性鼻炎的治疗，首先要注意去除病因和诱因，如保暖御寒， 避免接触花粉，防止尘螨叮咬等。其次给予针对性的药物予以对症治疗。过敏性 鼻炎在临床上可分为常年性和季节性鼻炎两种类型。目前治疗季节过敏性鼻炎的 药物有很多，临床上常用的药物主要有抗组胺剂、抗白三烯药物与糖皮质激素。 抗组胺药对鼻痒、喷嚏、流清涕有良好效果，但对鼻塞无效果。目前常用的 以苯海拉敏、扑尔敏为代表，但作用时间相对较短且服药后有嗜睡副作用。 抗白三烯药物包括缩血管剂、抗胆碱药、肥大细胞膜稳定剂。缩血管剂常用 的药物有麻黄素滴鼻剂，一般仅用于滴鼻，不作口服用药。这类药物的缺点是停 药后可产生反跳现象，久用可产生依赖性，且不良反应较多，故目前临床已较少 使用，不作为过敏性鼻炎的常规用药。传统的抗胆碱药阿托品，对过敏性鼻炎并 无明显效果；但异丙托溴铵鼻腔喷雾对流清涕、打喷嚏效果显著，将其与糖皮质 激素联合应用，还可有效缓解鼻塞，并且作用迅速。抗胆碱药的主要副作用有鼻 粘膜干涩和出血，需注意用量不可太大，喷鼻次数不可太频繁。肥大细胞膜稳定 剂主要有色甘酸钠喷雾剂和酮替芬口服剂，这类药物用于过敏性鼻炎治疗的效果 并不明显，一般仅用作复发的预防。 糖皮质激素鼻腔喷雾治疗效果较好，常用制剂包括o 5 可的松、0 0 2 5 倍 氯米松等喷雾剂。鼻用糖皮质激素对四大症状均有显著的改善，尤其是对鼻塞较 抗组胺药有更好的效果，且可用作预防过敏性鼻炎的发作。由于其使用方便、疗 效确切，已于2 0 0 1 年被世界卫生组织推荐为过敏性鼻炎治疗的首选用药。 将糖皮质激素制备成鼻腔局部使用制剂可显著降低由于长期服用激素类药 6 复旦大学硕士论文离子敏感即型凝胶剂在鼻腔给药系统中的应用 物所导致的全身不良反应，包括下丘脑一垂体一肾上腺( h p a ) 轴抑制。但是，目 前使用的糖皮质激素鼻腔喷雾剂仍有不同程度的鼻粘膜吸收，其全身性的副作用 仍然不容忽视。糠酸莫米松( m o m e t a s o n ef u r o a t e ，m f ) 是有效治疗炎症的甾体激素 类化合物，由先灵葆雅( 商品名：n a s o n e x ) 公司研制开发。它们的鼻粘膜吸收极 其微量，因此，鼻腔喷雾剂的全身性副作用很低，是一种新型的、理想的过敏性 鼻炎治疗药物制剂。它的研制大大减轻了患者的痛苦，但由于生理条件及剂型的 限制，该产品也存在一些不足，如制剂在鼻粘膜上滞留时间短、药效不够持久等。 市售的糠酸莫米松以混悬型鼻腔喷雾剂为主。由于人类鼻粘膜表面含有大量 的鼻纤毛及鼻粘液，它们的运动导致药物在鼻粘膜表面的滞留时间很短，因此， 药物往往尚未完全发挥作用即被清除，致使临床疗效受到一定的影响。鉴于此， 研发临床疗效理想、安全性好的新型糠酸莫米松鼻用制剂具有很高的研究价值和 应用前景。 本论文主要研究内容按下列框架进行： 第一部分聚合物基质的性质及其鼻腔滞留能力评价 第二部分东莨菪碱鼻用即型凝胶剂的研制及评价 第三部分柴胡鼻用即型凝胶剂的研制及评价 第四部分糠酸莫米松鼻用即型凝胶剂的研制及评价 7 复旦大学硕士论文离子敏感即型凝胶剂在鼻腔给药系统中的应用 第一部分聚合物基质的性质及其鼻腔滞留能力评价 即型凝胶的形成机制是利用高分子材料对外界刺激的响应，使聚合物在生理 条件下发生分散状态或构象的可逆变化，完成由溶液向凝胶的转化过程。这种特 殊的凝胶可分为温度、p h 或离子强度敏感等类型。温敏型主要包括一些嵌段共 聚物，以泊洛沙姆最具代表性；p h 敏感型主要包括醋酸纤维素酞酸酯和丙烯酸 聚合物，通过改变环境的p h 值而产生相变；离子敏感型材料以海藻酸钠最为常 用，但近年来去乙酰结冷胶也开始被人们所关注。 去乙酰结冷胶( d e a c e t y l a t e dg e l l a ng u m ，d g g ) 属阴离子型线性多糖，其结构 由多个四糖单元构成【i ，当配制成一定浓度的溶液后具有阳离子诱导胶凝的性 质。利用这一独特性质它己被用于口服【1 2 。1 3 】、眼用1 4 那】以及植入给药【1 6 】系统，但 目前在鼻腔给药系统中的研究报道不多。有文献指出人鼻腔中每天鼻液量为1 5 2 m l ，并富含阳离子( n a + 、k + 、c a 2 + ) u ，因此作者认为人鼻腔的环境适合用于制 备离子敏感型的即型凝胶，d g g 可被应用于鼻腔给药系统。 本部分以d g g 为基质制备鼻用离子敏感型即型凝胶，并对其微观结构、流 变性、持水性进行考察，以9 9 1 1 1 t c d t p a 为示踪剂考察即型凝胶在家兔鼻粘膜上的 滞留时间，并对其机理进行分析。 1 材料和方法 1 1 试剂 去乙酰结冷胶( 上海众伟生化有限公司) ；锝标记二乙烯三胺五乙酸 ( 5 跏t c d t p a ，复旦大学放射药学教研室提供) ；甘露醇、醋酸洗必泰均为分析纯， 水为去离子水。 1 2 仪器 恒温磁力搅拌器( s 2 3 - 2 上海司乐仪器厂) ；光学显微镜( o l y m p u sb x 5 0 日 本) ；旋转粘度计( n d j - 5 s 上海地学仪器厂) ；超滤离心管( 分子量1 0 0km i l i p o r e ) ； 单光子发射计算机断层扫描照相系统( s p e c ts i m e n s 德国) ；图形分析系统 ( s i m e n sm e d i c a ls y s t e mi c o n p ，德国) ；精密数显酸度计( p h s 3 t c 上海天达仪器 有限公司) ：液体快速混合器( x w - 8 0 a 上海医科大学仪器厂) ；电热恒温鼓风干燥 箱( 上海跃进医疗器械厂) 。 1 3 动物 新西兰种白兔，雄性，体重2 0 , - - - 3 0k g ，由复旦大学医学院实验动物中心提 供。实验前2 4h 自由进食、饮水，并进行鼻腔检查，以确保无任何鼻部伤害。 复旦大学硕士论文离子敏感即型凝胶剂在鼻腔给药系统中的应用 1 4 人工鼻液的制备 根据鼻液的电解质组成配制人工鼻液，其组成成分为1 1 】：每1 0 0 0m l 去离 子水中含氯化钠7 9 1g 、碳酸氢钠2 5 6g 、氯化钾3 6 8g 和氯化钙0 5 1g 。 1 5 即型凝胶的制各 3 种不同浓度的即型凝胶处方组成如表1 - 1 所示。制备过程如下：按表1 称 取处方量醋酸洗必泰至适当容器中，加入适量的去离子水搅拌使之溶解，然后加 入处方量的d g g ，在磁力搅拌下加热至1 0 0 使其分散均匀，然后置于4 冰箱 中完全冷却得到澄明溶液，最后加入甘露醇并搅拌使其溶解，用去离子水定容至 总量，分装于喷雾瓶中，装上鼻腔喷雾剂泵，即得。处方中甘露醇作为渗透压调 节剂，醋酸洗必泰作为防腐剂。 t a b1 - 1c o m p o s i t i o no ft h r e ek i n d so fi ns i t ug e l s 1 6 凝胶微观结构的观察 分别取上述三种即型凝胶制剂一滴于载玻片上，在其中心位置分别滴加一滴 含有酚红染料的人工鼻液，使其充分反应后覆上盖玻片，放入3 7 ( 2 恒温鼓风干 燥箱内，待水分挥干后冷却至室温，光学显微镜下观察即型凝胶的微观结构。 1 7 粘度的测定 参照2 0 0 5 版中华人民共和国药典二部附录v i g 项下粘度测定第二法， 使用旋转粘度计在室温条件下测定去乙酰结冷胶溶液的动力粘度，比较三种浓度 的溶液( o 2 、0 5 、l ) 在不同剪切速率下的流变学性质。 分别将上述三种即型凝胶以1 ：i ( v n ) 与人工鼻液反应，然后转移至量杯中， 使用旋转粘度计在3 7 。c 下测定反应体系的粘度随时间变化的情况。 1 8 凝胶持水能力的测定1 7 1 将上述三种即型凝胶以1 ：1 ( v v ) 与人工鼻液反应，静置1m i n 使其反应完 9 复旦大学硕士论文离子敏感即型凝胶剂在鼻腔给药系统中的应用 全，然后进行离心失水实验：小心将其转移至超滤离心管内管中( 避免破坏凝胶 表面) ，称重( 记为w o ) ，以2 0 0r m i n 离心，于不同时间点取出内管分别称重( 记 为w ) ，以w w o 值评价即型凝胶在外力作用下的持水能力随时间变化的情况。 1 9 离子种类对成凝能力的影响 以g e l2 即型凝胶为代表，以l ：l ) 分别与含单一阳离子( n a + 、k + 或c a 2 + ) 的溶液( 离子浓度同人工鼻液) 反应，考察阳离子种类对成凝能力的影响。以人工 鼻液形成的凝胶为对照，采用“项1 8 下方法比较不同阳离子成凝能力的差异。 1 1 0 在体消除动力学研究 1 1 0 1 制剂的标记 将9 9 1 1 1 t c d t p a 溶液于实验当天加入到冷的即型凝胶制剂中，涡旋震荡使其 充分混合，最终配成含0 5 d g g 的聚合物溶液。以9 9 n 1 t c d t p a 标记的等渗磷 酸缓冲溶液( p b sp h6 8 ) 为对照。给药时，每o 1m l 制剂的放射活性介于2 1 2 5 m b q 剂量之间。 1 1 0 2 实验设计 为消除个体差异及用药顺序对实验结果的影响，本文采用拉丁方实验设计。 由于9 9 m t c 的半衰期仅为6h ，洗静期一周后体内放射性核素残留量即不足o 1 ， 因此在给药方式上采用两周期交叉给药。 将家兔用兔箱固定，保持清醒状态下使其俯卧于s p e c t 系统的监测器前， 固定头部，低能高分辨率探头距离兔鼻1 0c m 。以盛有相同剂量的待测溶液于 s p e c t 系统中定位。待测的放射性标记溶液于室温放置3 0m i n ，然后采用鼻腔 喷雾泵给予各试验制剂o 1m l 。s p e c t 系统自动调节至1 4 0k e v 测定啪t c 的 放射线，给药5s 后开始连续动态监测。采用1 2 8 x 1 2 8 像素矩阵，6 0 m i n 内先后 以3 6 x 2 0s 、再以1 2 x 4 0s 、最后以3 0 x 8 0s 的顺序采集7 8 帧动态图像。全部图像 划分为2 个待考察的区域，区域l ：整个鼻粘膜表面，区域2 ：除鼻粘膜外的全 身。按下列公式自动校正衰变后，将鼻粘膜表面区域的残留放射活性对时间作图 以评价消除动力学参数。 鼻腔残留括性= 西甄毒莲蓦，。 2 实验结果 2 1 即型凝胶的微观结构 l o 复旦大学硕士论文 离子敏感即型凝胶剂在鼻腔给药系统中的应用 图1 是即型凝胶形成前后的光学显微镜照片。图1 1 a 为g e l2 制剂滴加 去离子水后的照片，图1 1 b 和1 1 c 为g e l2 制剂滴加了人工鼻液后的照片。 a bc f i g1 - 1p h o t o m i c r o g r a p ho fi o n a c t i v i t ei ns i t ug e l sb e f o r ea