（外科学专业论文）蛋白水解诱导因子核心肽mrna在食管癌组织中的表达.pdf

煳 目录 摘要 中文论著摘要1 英文论著摘要3 英文缩略语5 前言6 日u 舌b 实验对象与方法7 实验结果1 0 讨论1 2 结论1 4 本研究创新性的自我评价1 5 参考文献1 6 附录 综述1 8 致谢2 6 个人简介2 7 ， ， 、 ， ， ， 一 二 三 四五六 中文论著摘要 蛋白水解诱导因子核心肽m r n a 在食管癌 组织中的表达 目的 恶病质是一种以短期内体重下降，脂肪和肌肉群进行性消耗为特征，即出现碳 水化合物、脂质和蛋白质代谢的变化，同时伴有厌食、贫血、浮肿、衰竭等表现的 综合征。引发恶病质的具体机制不是很清楚。大多数进展期恶性肿瘤的普遍表现 是癌性恶病质的发生发展，它是这些疾病死亡的一个重要的独立因素。在恶病质病 人中，骨骼肌萎缩是由于蛋白代谢增加和蛋白合成的减少，两种情况可能同时发生， 从而造成严重的肌肉萎。引发恶病质的具体机制不是很清楚。在癌性恶病质中组 织代谢所涉及的因子，包括肿瘤坏死因子a ( t n f 0 【) ，白细胞介素1 ( i l 1 ) ，白介素6 ( i l 6 ) ，干扰素7 ( i f n 吖) ，脂解因子锌以糖蛋白，肿瘤特殊产物。但有研究显示血清中 t n f a 、i l 1 、i l 6 矛n i f n 吖都与患有进展期和终术期癌症的病人的体重减轻无明 确联系。蛋白水解诱导因子( p r o t e o l y s i s i n d u c i n gf a c t o r ，p i f ) ，一种与恶病质病人的体 重减轻有关的因子。最丌始从m a c l 6 肿瘤模型中分离，人类p i f 的同系物随后在 体重减轻的恶病质病人的尿液中检出。在体内和体外，p i f 都可以引起骨骼肌的蛋 白水解。p i f 为糖基化的蛋自，分子量约为2 4 k d a ，包括一段4 k d a 的核心肽和碳水 化合物残基。一些胃肠道的肿瘤和肿瘤细胞系过量表达p i f 蛋白。 人类来源的p i f 定义为人类恶病质相关蛋白( h c a p ) ，在前列腺癌患者检测 出它的表达。实验证明仅在前列腺癌细胞系中检测出h c a p m r n a 的表达，而在间 质组织中没有表达。把这些癌细胞植入小鼠体内，小鼠的体重减轻明显和 h c a p m r n a 的表达有关。p i f 核心肽的基因定位于1 2 号染色体( 1 2 q 1 3 1 ) ，并于 j 下常皮肤、乳腺和脑组织以及源于原发和转移肿瘤的各种癌细胞中鉴定出它的转 录物。本研究主要通过半定量r t p c r 的方法，检钡, u p i f c pm r n a 在食管鳞状细胞 癌肿瘤组织、癌旁组织以及j 下常组织中的表达情况以及p i f c pm r n a 的表达与肿 m r n a 的表达，但是与肿瘤患者的肿瘤组织和癌旁组织相比表达的水平非常低 ( 尸 0 0 5 ) ， 而且与肿瘤的分化也无相关性( p o 0 5 ) 。 结论 p i f c p 基因m r n a 在食管癌患者肿瘤组织和正常食管组织的表达没有差异， 但是与食管良性疾病的食管组织中p i f c p 基因m r n a 的表达有差别。p i f c p 基 因m r n a 的表达与肿瘤分期和分化没有相关性。 关键词 p i fh c a p 恶病质 2 c a c h e x i ai saf o l t no fw e i g h tl o s sd e c r e s e d ，f a ta n dm u s c l eg r o u p sp r o g r e s s i n g c o n s u m e d ，w h i c hi st h es y n d r o m et h a tc a r b o h y d r a t e ，l i p i da n dp r o t e i nm e t a b o l i s m a c c o m p a n i e dw i t ha n o r e x i a , a n e m i a ，e d e m a , e x h a u s t i o na n do t h e rm a n i f e s t a t i o n st h e m o s tc o n u n o nm a n i f e s t a t i o no fa d v a n c e dc a n c e r si so c c u r r e n c ea n dd e v e l o p m e n to f c a c h e x i a w h i c hi sa ni m p o r t a n ti n d e p e n d e n tf a c t o rt h a ti n d u c e dt h ed e a t h o ft h e c a n c e r s 。i nc a c h e x i ap a t i e n t s ，s k e l e t a lm u s c l ea t r o p h yi sd u et oi n c r e a s e dm e t a b o l i s mo f p r o t e i na n di n h i b i t e ds y n t h e s i so fp r o t e i n , w h i c hm a yo c c u rs i m u l t a n e o u s l y t or e s u l ti n s e v e r em u s c l ea t r o p h y t h em e c h a n i s mo fc a c h e x i a - i n d u c e di sn o tc l e a r i nt h ef a c t o r s w h i c hi n v o l v e di nt h em e t a b o l i s mo fc a n c e rc a c h e x i a ，i n c l u d i n gt u m o rn e c r o s i sf a c t o r - a ( t n f a ) ，i n t e r l e u k i n 一1 ( i l 1 ) ，i n t e r l e u k i n 6 ( i l - 6 ) ，i n t e r f e r o n - 1 , ( i f n 一丫) ，l i p o l y t i c f a c t o rz i n ca 2 g l y c o p r o t e i n ，a n dt u m o rs p e c i f i cp r o d u c t s h o w e v e r ，s t u d i e sh a v e s h o w nt h a ts e r u mt n f 0 【，i l 1 ，i l 6a n di f n 丫a r en o tr e l a t e dt ow e i g h tl o s so fp e o p l e w i t ha d v a n c e da n de n d s t a g ec a n c e rp a t i e n t s p r o t e o l y s i s - i n d u c i n gf a c t o r ( p i f ) i sa k i n d o ff a c t o r st h a ti sr e l a t e dt ow e i g h tl o s s ，w h i c hw a si n i t i a l l yi s o l a t e df r o mt h em a c 16 t u m o rm o d e l ，a n dt h e nah o m o l o g u eo fh u m a np i fs u b s e q u e n tw a sf o u n di nt h eu r i n e o fp a t i e n t sw h oh a dw e i g h tl o s s p i fc a l lb o t hc a u s es k e l e t a lm u s c l ep r o t e o l y s i si nv i v o a n di nv i t r o p i fi sag l y c a t i o no fp r o t e i n sw i t h2 4 0 0 0 k d a ，i n c l u d i n gac o r ep e p t i d e 、析t h4 k d aa n dc a r b o h y d r a t er e s i d u e s an u m b e ro fg a s t r o i n t e s t i n a lt u m o r sa n dt u m o r c e l ll i n e sc a ne x p r e s sp i fp r o t e i n t h eh u m a ns o u r c eo fp i fi s d e f i n e dt h eh u m a n c a c h e x i aa s s o c i a t e dp r o t e i n ( h c a p ) ，w h i c h c o r e p e p t i d eg e n e i sl o c a t e do n c h r o m o s o m e12 ( 12 q13 1 ) i tc a ni d e n t i f yt h et r a n s c r i p t si nn o r m a ls k i n ，b r e a s t ，b r a i n t i s s u e ，p r i m a r ya n dm e t a s t a t i ct u m o r so fv a r i o u sc a n c e rc e l l s 3 m a t e r i a l sa n dm e t h o d s e x t r a c t i o nt h et o t a lm r n ao f 6 0p a t i e n t sw i t he s o p h a g e a lc a n c e rt u m o rt i s s u ea n d n o r m a le s o p h a g e a lt i s s u e ，w h i l ee x t r a c t i o nt h en o r m a le s o p h a g e a lt i s s u e so f11c a s e so f p a t i e n t sw i t hb e n i g ne s o p h a g e a ld i s e a s e ，u s i n gs e m i - q u a n t i t a t i v er t - p c rm e t h o dt o d e t e c tt h ee x p r e s s i o no fp i fc o r ep e p t i d em r n ai ne s o p h a g e a lc a n c e ra n di nn o r m a l e s o p h a g e a lt i s s u e r e s u l t s t h ee x p r e s s i o no fp i f c pg e n em r n ai nt u m o rt i s s u e sa n di nn o r m a lt i s s u e s ， t h e r ei sn os i g n i f i c a n t l yd i f f e r e n c eo ft h ee x p r e s s i o no fp i f - c pg e n em r n ab e t w e e n t h et w of p 0 0 5 ) s i m u l t a n e o u sd e t e c t i o nt h ee x p r e s s i o no fm r n ai n11c a s e sw i t h b e n i g ne s o p h a g e a ld i s e a s eo r g a n i z a t i o n s ，d e t e c t i n gt h ee x p r e s s i o no fp i f - c pm r n a ， b u ti nav e r yl o we x p r e s s i o nl e v e lc o m p a r e dw i t ht h et u m o rt i s s u e s ( p 0 0 5 ) c o n c l u s i o n t h e r ei sn os i g n i f i c a n t l yd i f f e r e n c ei nt h ee x p r e s s i o no fp i f c pg e n em r n ai n e s o p h a g e a lc a r c i n o m a sa n dn o r m a le s o p h a g e a lt i s s u e s ，b u th a v ed i f f e r e n c e sb e t w e e n n o r m a lo rb e n i g ne s o p h a g e a ld i s e a s ea n de s o p h a g e a lt i s s u e t h e r ei sn or e l a t i o n s h i p b e t w e e nt h ee x p r e s s i o no fp i f c pg e n em r n aa n dt u m o rs t a g ea n dd i f f e r e m i a t i o n k e y w o r d s p r o t e o l y s i s - i n d u c i n gf a c t o r h c a pc a c h e x i a 4 5 论文 肿瘤恶病质诱导因子( p i f ) 核心肽m r n a 在食管癌组 织中的表达 o - ! 曼， 翮吾 恶病质是一种以短期内体重下降，脂肪和肌肉群进行性消耗为特征【l 】，即出现 碳水化合物、脂质和蛋白质代谢的变化，同时伴有厌食、贫血、浮肿、衰竭等表现 的综合征。大多数进展期恶性肿瘤的普遍表现是癌性恶病质的发生发展，它是这些 疾病死亡的一个重要的独立因素【列。在恶病质病人中，骨骼肌萎缩是由于蛋白代谢 增加和蛋白合成的减少，两种情况可能同时发生，从而造成严重的肌肉萎。引发恶病 质的具体机制不是很清楚【3 j 。 蛋白水解诱导因子( p r o t e o l y s i s i n d u c i n gf a c t o r ，p i f ) ，一种与恶病质病人的体重 减轻有关的因子。最丌始从m a c l 6 中瘤模型中分离f 4 】，人类p i f 的同系物随后在体 重减轻的恶病质病人的尿液中检出。在体内和体外，p i f 都可以引起骨骼肌的蛋白 水解。p i f 为糖基化的蛋白，分子约为2 4 k d a ，包括一段4 k d a 的核心肽和碳水化合 物残基。一些胃肠道的肿瘤和肿瘤细胞系可以表达p i f 蛋白【5 1 。 人类来源的p i f 定义为人类恶病质相关蛋白( h c a p ) 【6 】，在前列腺癌患者检 测出它的表达。实验证明仅在前列腺癌细胞系中检测出h c a p m r n a 的表达，而在 间质组织中没有表达。将这些癌细胞植入小鼠体内，小鼠的体重减轻明显和 h c a p m r n a 的表达有关。p i f 核心肽的基因定位于1 2 号染色体( 1 2 q 1 3 1 ) 【7 1 ，并 于正常皮肤、乳腺和脑组织以及源于原发和转移肿瘤的各种癌细胞中鉴定出它的 转录物【8 1 。 我们之前用免疫组化的方法检测食管鳞状细胞癌的肿瘤组织和癌旁组织，在 肿瘤和癌旁组织中都检测出p i f 蛋白的表达，推测可能与p i f 是一种分泌性蛋白有 关，在肿瘤组织合成后，随血液循环到达全身组织。 本研究主要通过半定量r t p c r 的方法，检测p i f c p 基因m r n a 在食管鳞状细 6 一、材料 ( 一) 、试剂与仪器 r t p c r 试剂盒( 凯基公司) ，t r i z o l ( 凯基公司) ，琼脂糖，灭菌水，g e n e f i n d e r 染料，p c r 仪( 杭州博r 公司) ，h o f e r m i n v e 凝胶成像仪( u v p , u s a ) ，电泳仪 等。 ( 二) 、研究对象 收集2 0 0 8 年11 月到2 0 1 0 年1 月于中国医科大学附属盛京医院进行手术切除 并病例明确诊断的6 0 例食管鳞状细胞癌患者。跟据u i c c 2 0 0 3 年新的修订标准进 行t n m 分期：o 期0 ；i 期5 ；i i 期3 2 例；i i i 期18 例；期5 。高分化1 9 例， 中分化2 7 例，低分化1 4 例同时取1 1 例食管良性疾病患者手术切除的食管组织 作为对照。所有病例接受手术治疗前未行放化疗治疗。 ( 三) 、组织收集 从同一食管癌患者手术时切除的标本中获取肿瘤组织，癌旁组织( 距肿瘤病 灶边缘3 c m ) 。从食管良性疾病的患者手术切除标本中获取作为对照的正常组织。 组织样本存于液态氮中，待进一步分析，组织收集平均时间为1 5 分钟。 二、半定量r t p c r 检测p i f c p 基因的m r n a 表达 ( 一) m r n a 的提取 1 、取收集的食管组织标本称重10 0 m g ，用n a c l 冲洗后加入l m lt r i z o l ，组织匀 浆后室温孵育5 m i n 。每l m lt r i z o l 加入0 2m l 氯仿，剧烈震荡1 5 秒，室温孵育3 m i n 。 4 离心7 5 0 0 转1 5 m i n ，取上清0 5m l 。加0 5m l 异丙醇颠倒混匀，室温孵育1 0 m i n 。 4 c 离心1 5 0 0 0 转2 0 m i n ，弃上清，加入l m l7 5 乙醇4 离心7 5 0 0 0 转5 m i n 。 7 此步操作3 次弃上清，室温干燥5 1 0 m i n 加入1 0 2 0 9 ld e p c 水溶解r n a5 5 。c 温 浴10 m i n 。 2 、紫外分光光度计测r n a 样本的o d 2 6 0 、o d 2 8 0 值，计算r n a 的纯度， o d 2 6 0 o d 2 8 0 = 1 8 - 2 0 符合实验的纯度要求，r n a 样本浓度= o d 2 6 0 4 0 x 稀释倍 数。 ( 二) c d n a 合成 按照凯基r t p c r 说明进行逆转录，a m v ( a v i a nm y e b l a s t o s i av i r u s ) 反转 录酶将m r n a 合成c d n a 的第一链，每次反转录实验按操作步骤，采用10 9 l 体 系，取总r n a 2 0 u g ，r n a 于灭菌水混合物体积为6 7 5 u l 。反应体系如下： m i x 一1 o l i g d t 0 5 u l d n t p 0 5 u l 将m i x 1 与r n a 混合，6 5 * c 温浴5 m i n 。冰浴5 m i n m i x 2 r n a s e 抑制剂0 2 5 u l 10 x a m vr e a c t i o nb u f f e r l u l d t t 0 5 u l a m v0 5 u l 将m i x 2 与上述4 2 c 反应l h ，7 0 c 反应1 5 m i n ( 三) 引物 根据g e n b a n k 人类来源的p i f 基因序列( a y 5 9 0 1 5 0 ) ，用p r i m e r 5 软件设计引 物，通过n c b i 网站上的b l a s t 对引物的可靠性进行比对确认，之后由上海生工 生物技术有限公司合成，序列见表1 。 8 t m ( b p ) ( 四) p c r 体系及扩增 取1 9 l c d n a 加入p c r 反应液2 4 1 t l 合成第二链并进一步进行p c r 反应，按 照预实验获取的最佳实验温度、循环数等反应条件进行。 p c r 反应体系2 5 9 l ( 见下) ，9 4 c 预变性3 m i n ，9 40 c 变性3 0 s ，退火温度5 4 c ， 7 2 c 延伸l m i n ，3 5 个循环，循环结束后7 2 。c 延伸1 0 r a i n 。 10 x t a qb u f f e r 2 5 9 l m g c l 2 d n t p 灭菌d d h 2 0 t a q d n ap o l y m e r a s e 上游引物( 1 0 n m o l l 上1 ) 下游引物( 1 0 n m o l 9 1 ) c d n a ( 五) p c r 产物分析 9 狙 唧 删 驯 吲 吲 取1 0 i t i p c r 产物经1 2 琼脂糖凝胶电泳，g e n e f a n d e r 染色鉴定，凝胶成像分 析系统进行拍照、分析。通过软件测量灰度值。以p i f c p 与1 3 - a c t i n 之比，作为 p i f c pm r n a 的相对的表达量。 三、统计学处理 实验结果应用s p s s11 5 统计学软件进行t 检验，所有的值用m e a n + s d 表示， p o 0 5 ) 。 3 一 一 戈2 5 茄 l2 a 1 式 江一u 丫 王 匕 卜一n 式 乱v 0 低分化；和分化高分化 图四，分化程度不同p i f c pm r n a 的表达水平 讨论 恶病质，一种被描述为体重减轻、厌食、虚弱和衰弱的综合征，可在多于8 0 的胃肠道肿瘤患者中观察到。恶病质和体重减轻与进展期癌症病人生活质量下降 和生存率减低相联系。骨骼肌的消耗对于癌症病人生存率降低是一个重要因素， 在癌性恶病质中营养摄入减少起了重要作用，但是并不能解释所有观察到的变化。 尽管存在蛋白合成减少，加速的蛋白分解对于肌肉消耗起了很大作用1 9 1 。 多种细胞因子被认为可作为肌肉水解的信号，包括肿瘤坏死因子0 【( t n f 0 【) 、 白介素1 和6 ，活体实验中不断输入这些细胞因子可引起骨骼肌蛋白水解增加， 但是体外试验中没有一种细胞因子可以直接引起蛋白分解【1 0 , 1 1 】。 1 2 蛋白水解诱导因子( p r o t e o l y s i s i n d u c i n gf a c t o r ，p i f ) 则在癌性恶病质发生发 展中表现出能够引起肌肉分解的功能，可在有恶病质诱导性肿瘤小鼠的循环血中 发现，而在非恶病质诱导性肿瘤的小鼠中没有发现1 4 】。p i f 是一种相对分子量为 2 4 k d a 的糖蛋白，包括一段4 k d a 的核心肽和碳水化合物。最初从大鼠肿瘤模型 ( m a c l 6 ) 中分离，被证实与恶病质患者的体重减轻有关。另外，在没有体重减 轻的癌症患者和有体重减轻的良性疾病患者中，p i f 蛋白表达缺失。研究发现人的 p i f 同系物( h c a p ) 存在于有恶病质的癌症病人的尿液中【9 1 ，而在正常患者的尿 中则不存在，在由于创伤和体重减轻轻微或没有体重减轻的癌症病人的尿液中也 不存在。p i f 在8 0 患有胰腺癌的患者的尿液中存在，这些病人较尿液中没发现 p i f 的患者有显著的体重减轻【l0 1 。在体重减轻 l k g j 弓的胰腺、肝、直肠、结肠、 乳腺、肺和卵巢恶性肿瘤病人的尿中可检测到这种糖蛋白。c a b a l m a n z a n o 等】 报道，在尿中检测到p i f 的病人，肿瘤组织及肿瘤间质组织中有p i f 表达，并且 p i f 的表达与病人体重的减轻密切相关。表明p i f 是诱导恶病质的肿瘤组织或其宿 主特异性产生的，通过血流作用于全身并经尿排泄的。 我们之前用免疫组化的方法研究p i f 蛋白的表达，在食管癌患者的癌旁组织中 也检测出p i f 蛋白的表达，我们认为与p i f 是一种分泌性蛋白有关，通过血液循环 到达全身并产生蛋白水解作用。通过进一步研究p i f 核心肽基因的表达，证实 p i f c p 在食管癌患者的癌旁组织都有表达，并且在这两种组织中，p i f c p 基因的 表达水平没有显著差异，因此，我们可以推j 1 9 1 i j p i f 的蛋白在这两种组织中都有表达。 而在正常人或食管良性疾病的食道组织中检测出了p i f c p 的少量表达。有文献报 道，认为p i f 在人的胚胎时期有重要的作用，而在成人p i f 基因处于休眠状态，由 于肿瘤细胞的变异导致其重新表达。 有文献报道，研究表明p i f c p 的m r n a 在正常人的组织中表达水平非常低或 者不表达，而在一些肿瘤组织中和肿瘤的细胞系中过量表达【1 2 1 。我们检测食管癌患 者的肿瘤组织和癌旁组织，发现在食管癌患者的肿瘤组织和癌旁组织中p i f c p 的 m r n a 表达都升高，两者之间表达水平没有显著性。在一些正常人或食管良性疾 病手术切除的食管组织中也检测出了p i f c p 的m r n a 的表达，但是量非常少。之 前的研究认为p i f c p 基因m r n a 仅在肿瘤组织和肿瘤细胞系中表达i l 引，但是我们 1 3 的研究 织中也 m r n a 的表达和癌旁组织中的表达水平几乎相同。因此，我们推测，p i f c p 不仅 在食管癌患者的肿瘤组织中表达，在癌旁组织，整段食道甚至全身都有表达。这 可以解释很多术后食物摄取足够的食管癌患者，也同样出现消瘦，并发展为恶病 质，很可能是跟肿瘤的发生和发展使p i f c p 基因重新表达有关，并且可能是全身 性的。 有文献报道【纠，观察植入携带p i f c p 基因肿瘤细胞( p c 3 m ，l u c a p 3 5 ) 的小 鼠，p i f c p 基因的表达与肿瘤的生长分化有显著的关系，并且可以诱导小鼠的体 重减轻。我们的实验证实尽管p i f c pm r n a 在食管癌的肿瘤和癌旁组织中表达上 调，并且肿瘤分期越高，分化程度越低，p i f c pm r n a 表达越高，但与肿瘤的分 期与分化无明显的相关。这可能说明人的p i f c p 基因对食管癌是一个促进因子， 促进食管癌的生长和分化，但是p i f c pm r n a 的表达与食管癌的发展没有明确的 相关性，并且不能通过检钡j j p i f c pm r n a 的表达判断食管癌患者的预后。而且， 也不能通过干预p i f c p 基因的表达，来预防肿瘤病人的恶病质产生，或治疗恶病 质。根据相关文献，因为p i f 是一种糖蛋白，它的活性与糖基化过程密切相关f 1 4 1 ， 这说明翻译后的修饰对p i f 的生物活性起着重要作用。但是它的糖基化过程和机制 目前还不清楚。因此，由p i f 导致人的恶病质的发生可能是一个复杂的过程。 结论耋口匕 1 、用半定量r t p c r 方法，分别检测在食管癌患者肿瘤组织和癌旁组织和食管 良性疾病的食管组织中p i f c p 基因m r n a 的表达，肿瘤组织和癌旁组织中p i f c p 基因m r n a 的表达无差异，但是与食管良性疾病的食管组织中p i f c p 基因m r n a 的表达有差别。 2 、用半定量r t p c r 方法，检沏j j p i f c p 基因m r n a 的表达与肿瘤分期和分化 没有相关性。 1 4 本研究创新性的自我评价 本实验运用半定量r t p c r 的方法，分析了p i f c p 基因在食管癌患者的肿瘤组 织、癌旁组织和食管良性疾病的正常食道组织中的表达水平的差异，以及在肿瘤 不同分期和分化程度上表达的不同。探讨了p i f 核心肽基因和蛋白水平的表达和食 管癌的发生和发展之间的关系，并提出了一些假设。希望通过进一步研究，为肿 瘤恶病质的预防和发生提供一个新策略。 1 5 参考 l 2 3 15 ：5 6 2 5 6 4 4w a t c h o mt m ，d o w i d a rn ，d e j o n gc h ，w a d d e l li d ，g a r d e no j ，r o s sj at h ec a c h e c t i c m e d i a t o rp r o t e o l y s i si n d u c i n gf a c t o ra c t i v a t e sn f k a p p a ba n ds t a t 3i nh u m a nk u p f f e r c e l l sa n dm o n o c y t e si n tjo n c 0 1 2 0 0 5o c t ；2 7 ( 4 ) ：1 10 5 1 11 1 5w h i t e h o u s ea s ，k h a ij ，t i s d a l em j i n d u c t i o no fp r o t e i nc a t a b o l i s mi nm y o t u b e sb y 15 ( s ) h y d r o x y e i c o s a t e t r a e n o i c a c i d t h r o u g h i n c r e a s e d e x p r e s s i o n o ft h e u b i q u i t i n - p r o t e a s o m ep a t h w a y j b rjc a n c e r ，2 0 0 3 ，8 9 ( 4 ) ：7 3 7 7 4 5 6w h i t e h o u s ea s ，t i s d a l em ji n c r e a s e de x p r e s s i o no ft h eu b i q u i t i n p r o t e a s o m ep a t h w a y i nm u r i n em y o t u b e sb yp r o t e o l y s i s - i n d u c i n gf a c t o r 伊i f ) i sa s s o c i a t e dw i t ha c t i v a t i o no f t h et r a n s c r i p t i o nf a c t o rn f k a p p a bb rjc a n c e r 2 0 0 3s e p15 ；8 9 ( 6 ) ：1l16 - 2 2 7 w i g m o r es j ，f e a r o nk c h ，s a n g s t e rk ，e ta l ( 2 0 0 2 ) c y t o k i n er e g u l a t i o no fc o n s t i t u t i v e p r o d u c t i o no fi n t e r l e u k i n - - 8a n d 6b yh u m a np a n c r e a t i cc a n c e rc e l ll i n e sa n ds e r u m c y t o l i n ec o n c e n t r a t i o n si np a t i e n t sw i t hp a n c r e a t i cc a n c e r i n tjo n c o l21 ：8 81 8 8 6 8s m i t hh j ，t i s d a l em j i n d u c t i o no fa p o p t o s i sb yac a c h e c t i c f a c t o ri nm u f i n em y o t u b ea n d i n h i b i t i o nb ye i c o s a p e n t a e n o i ca c i d j a p o p t o s i s ，2 0 0 3 ，8 ( 2 ) ：1 6 1 1 6 9 9m c cg o m e s - m a r c o n d e s ，h js m i t h ，j cc o o p e ra n dm jt i s d a l ed e v e l o p m e n to fa n i n v i t r om o d e ls y s t e mt oi n v e s t i g a t et h em e c h a n i s mo fm u s c l ep r o t e i nc a t a b o l i s mi n d u c e d b yp r o t e o l y s i s i n d u c i n gf a c t o r b r i t i s hj o u r n a lo f c a n c e r ( 2 0 0 2 ) 8 6 ，16 2 8 - 16 3 3 10h e l e n j s m i t h ，p r a d i pm u k e o i ，a n d m i c h a e lj t i s d a l ea t t e n u a t i o no f p r o t e a s o m e - i n d u c e dp r o t e o l y s i si ns k e l e t a lm u s c l eb yb - h y d r o x y - b m e t h y l b u t ) ，r a t ei n c a n c e r - i n d u c e dm u s c l el o s s c a n c e rr e s2 0 0 5 ；6 5 ( 1 ) ：2 7 7 2 8 3 1 lw h i t e h o u s ea s t i s d a l em ji n c r e a s e de x p r e s s i o no ft h eu b i q u i t i n p r o t e a s o m ep a t h w a y i nm u r i n em y o t u b e sb yp r o t e o l y s i s - i n d u c i n gf a c t o r ( p i f ) i sa s s o c i a t e dw i t ha c t i v a t i o no f t h et r a n s c r i p t i o nf a c t o rn f k a p p a bb rjc a n c e r 2 0 0 3s e p1 5 ；8 9 ( 6 ) ：1 11 6 - l1 2 2 12 a j a t o i ，n f o s t e r ，b w i e l a n d ，e ta lt h ep r o t e o l y s i s - i n d u c i n gf a c t o r ：i ns e a r c ho fi t s c l i n i c a lr e l e v a n c ei np a t i e n t sw i t hm e t a s t a t i cg a s t r i c e s o p h a g e a lc a n c e r d i s e a s e so ft h e e s o p h a g u s ( 2 0 0 6 ) 19 ，2 41 2 4 7 l3b o s s o l am m u s c a r i t o l im 。c o s t e l l ip e ta il n c r e a s e dm u s c l ep r o t e a s o m ea c t i v i t yc o r r e l a t e s w i t hd i s e a s es e v e r i t yi ng a s t r i cc a n c e rp a t i e n t s j a n ns u r g 2 0 0 3 ，2 3 7 ( 3 ) ：3 8 4 3 8 9 14 c a b a l - m a n z a n o 氏b h a r g a v ap ，t o r r e s d u a a ea ，e t a l p r o t e o l y s i si n d u c i n gf a c t o ri s e x p r e s s e di nt u m o u r so fp a t i e n t sw i t hg a s t r o i n t e s t i n a lc a n c e r sa n dc o r r e l a t e sw i t hw e i g h t l o s s j b rjc a n c e r ，2 0 0 1 ，8 4 ( 1 2 ) ：1 5 9 9 - 1 6 0 1 l5c a r i u kp ，l o r i t em j ，t o d o r o vp t 。e ta li n d u c t i o no fc a c h e x i ai nm i c eb yap r o d u c ti s o l a t e d f r o mt h eu r i n eo fc a c h e c t i cc a n c e rp a t i e n t s j b rjc a n c e r ，19 9 7 ，7 6 ( 5 ) ：6 0 6 - 613 摘要 蛋白水解诱导因子( p r o t e o l y s i s i n d u c i n gf a c t o r ，p i f ) 是一种相对分子量为2 4 0 0 0 的蛋白，它是一种复合糖蛋白，能直接诱导体外骨骼肌的蛋白降解。在体重减轻 大于等于l k g 月的胰腺、肝、直肠、结肠、乳腺、肺和卵巢恶性肿瘤病人的尿中 可检测到p i f 。在尿中检测到p i f 的病人，肿瘤组织及间质组织中有p i f 表达，并 且p i f 的表达与病人体质量的减轻密切相关。这都表明p i f 是诱导恶病质的肿瘤 组织或其宿主特异性产生的，通过血流作用于全身并经尿排泄。 关键词 恶病质、蛋白水解诱导因子、恶性肿瘤 引言 恶病质，一种被描述为体重减轻、厌食、虚弱和衰弱的综合征，可在多于8 0 的胃肠道肿瘤患者中观察到1 1 。恶病质和体重减轻与进展期癌症病人生活质量下 降和生存率减低相联系圈。骨骼肌的消耗对于癌症病人生存率降低是一个重要因 素，在癌性恶病质中营养摄入减少起了重要作用，但是并不能解释所有观察到的 变化【3 1 。尽管存在蛋白合成减少4 1 ，加速的蛋白分解对于肌肉消耗起了很大作用【5 】 多种细胞因子被认为可作为肌肉水解的信号，