【word】 神经节苷脂治疗大鼠脊髓半切综合征运动功能恢复的机制.docx

神经节苷脂治疗大鼠脊髓半切综合征运动功能恢复的机制2392 中国临床康复笋7巷第,7舫2003725出舨 cln,l252003no.17 神经节苷h旨治疗大鼠脊髓半切综合征运动功能恢复的机制?吞砧研宄? mechanismofgangliosideonthemotorfunctioninratswithbrownsequardsyndrome 田纪伟ji-wei”non,高岱峰daifengc-qo,李家顺jia?shunli,贾连顺lionshunjia,赵书平shupingzhoo叶晓健xiao-jianye 田纪伟,李家顺,贾须,叶晓健,解放军第二军医大学长征医院骨科, 上海市200003 jiweilion,jlashunu,lion-shun,jio,xiao-jionye.departmentofortho. plic,changenghospital,secondmilitarymedicaluniveity,shaglai 200003,china 高岱峰,解放军第三0五医院医教部.北京市100017 dai-fengcoo,departmentofmedicaleducation,the305hospitalofpla, beijing100017,china 赵书平,解放军第八十八医院动物实验中心,山东省泰安市271000 5hupingzheo,departmentofexperimentalcenter,the88hospitalof pla.jinan271000,shandongprovinee,chiiia 作者简介:田纪伟.男,1964年生,山东泰安市人,汉族,1999年解放军 第二军医大学博士毕业,副主任医师,副教授,主要从事脊柱外科的诊 治研究. biography:jiweilion(1964一),male,b0皿intaian,shandongprovince, hannationality,edfromsecondmilitarymedicaluniversityin 1999,master,associatechiefphysician,associatepmfeasor.researchdi- recdon:spinalsurgery. tel:862l一63610109-739o9email: 田纪捕,高岱峰,李家顺,贾连顺,赵书平.叶晓健.神经节苷膳治疗大鼠脊髓半 切综合征运动功能恢复的机制【j】l中国临床康复,2003,7(17):23923 njw,coodf.ujs,jk3ls,zhaosp.ye刈mechanismofgongijosideonthe molorfunctiontnralswithbrown-sequardsyndromezhot,olfiftv.fivesdratswererandomlydividedintocontrolgroup(n= 6),injuredgroup(n=12)andtreatedgroup(tz=12)accordingtothesor- dtion.thesegmentsofcs70ftheratswerecuthalf,thetreatedgroupwas subjectedtotheintraperitonealinjectionof10mg/kggm.1atl5,9o.18o min,2and3d丑y8aftertmu眦,andtheinjuredandcontrolgroupswerein. iectedwithnormalsaline.tworatsin山e.miandtie8iedgroupsunder. wentlishtandelectronmicroscopetoexaminetl1einjuredspihalcordtissue at1.6and24hours.1and6weeksafterinjttryrespectively.rivlintestwas performedtoevaluatedthemotorfunctionoftherats.resultsthemaximum hecontrol heinjuredgroupatland6weeksafteri=jury respectively.themaximumglesatthehomemadetihboardinthetreated groupdeereasedlorequicklyuptothenormalvalueat6weeksaflerin jury.theineisionalhemorrhageoftheiniuredgroupalleviated,necrosisof thewhitematterwasrejoined,agreatamountofrecombinantoligodendrocytes showedtllesymptomofproliferationandtllemotorfunctionrecoveredupto 9o%.conclusiongm.1playsaprotectiveroleinspinalcordandpro. motestllerecoveryofmotorfunctionintlleratawitllbss. subjectheading8:spinalcordinjuries;g(m1)gnglioside;rats 摘要:目的单唾液酸四己糖神经节苷脂(gm.1)可促进神经再生,有助 于运动功能恢复,评价gm一1对颈髓半切综合征(bss)的治疗效果.方 法取sd大鼠55只,随机抽签法分成对照组,损伤组,治疗组;直视下 半切大鼠颈髓1/2c阶段;治疗组在伤后15,90,180min,2,3d分别 腹腔内注射gm一110nag/ks,损伤组注射生理盐水.伤后1,6,24h,1,6 周时各取损伤组合治疗组大鼠各2只伤区颈髓组织送光镜和电镜检 查,并进行rivlin斜板试验以评价大鼠运动功能.结果正常对照组大 鼠在自制斜板上停留的最大角度为82.,损伤组术后1周平均为55.,6 周时有一定程度的增加65.;而治疗组术后增加较快,6周时接近正常. 治疗组半切处出血减轻,周围白质大部相连,髓鞘修复,大量重组的少 突胶质细胞增生,运动功能恢复9o%.结论gm一1对bss脊髓有保护 作用,并促进其恢复. 主量词:脊髓损伤;g(m1)神经节苷脂;大鼠 0引言 单唾液酸四已糖神经节苷脂(gm.1)是存在于哺乳动物神经 中的一种主要神经节苷脂.实验证明脊髓损伤后应用外源性 gm.1有助于保护细胞膜,抑制脊髓水肿,促进神经再生,并且有 助于运动功能恢复,防止神经脱髓鞘【ll.本文就应用gm.1后颈 髓半切伤综合征(bss)的恢复机制进行研究. 1材料和方法 1.1材料sd大鼠30只,体质量200300g,雌雄不分(由解 放军济南军区第八十八医院动物试验中心提供),随机数字表法 分成对照组6只,损伤组12只,治疗组12只;损伤组及治疗组作 病理和功能评价.直视下刀切法造模:根据胥少汀教授造模方 法.药品:gm.1由解放军第二军医大学附属长征医院提供,3g/l 戊巴比妥钠,100g/l活性碘,生理盐水及400g/l甲醛溶液. rivlia斜板:评价大鼠运动功能. 1.2动物模型的建立(1)手术方法:治疗组和损伤组大鼠用3 g/l戊巴比妥钠(30rag/kg)腹内注射麻醉,项部剪毛,动物俯卧 固定于手术台上,100g/l活性碘消毒,铺洞巾,以已.7,为中心 切开皮肤3cm,暴露相应棘突及椎板,轻柔剪去椎板及棘突,暴 露脊髓,连同一侧硬膜切开脊髓1/2,直视下达中央导水管,见 大鼠一侧躯体肢体痉挛性瘫痪,表明半切成功,缝合肌肉皮肤 (2)术后处理:室温维持2o25.c,保持干燥通风.治疗组于术 后15,90,180rain分别腹腔注射gm.110mg/kg,第2,3个24h 再次注射gm.110mg/ks;损伤组在同一时间注射等量的生理 盐水.治疗组和损伤组的大鼠伤口应用青霉素20万u外敷. 1.3病理切片的制作损伤组和治疗组分别与伤后1,6,24h, 1,6周各取2只动物断头处死,切取伤段脊髓组织制作切片,作 光镜及电镜观察. 1.4运动功能的评价采用mvlin斜板评定大鼠脊髓损伤16 周的运动功能,即大鼠停留在斜板上最大角度为其功能值.半切 伤后大鼠恢复取决于大鼠伤侧下肢恢复的情况,其时间治疗组, 损伤组恢复明显不同.该方法简便易行与脊髓相关性好1. 2结果 2.1伤段脊髓组织的病理观察(1/肉眼观察:半切后脊髓损伤 组远近端有不同程度的组织坏死,液化,出血,3周后组织出血减 少,5周后远端坏死物质吸收,由纤维组织形成.而治疗组3周后 组织的纤维瘢痕形成,5周后,远近端组织恢复正常色泽.(2)光 镜观察:损伤组术后1h脊髓灰质坏死.白质部分液化,中央管周 围出血;3周时,白质区水肿,灰质区液化吸收,而治疗组6h白质 溶解减轻,3周时灰质已无明显坏死.6周时远近端胶质瘢痕形 成,机化.灰白质难以区分,有少量胶质细胞形成连接.白细胞浸 润.(3)ca镜下超微结构:损伤组:术后1h微血管内皮细胞肿胀, 空洞形成,间质水肿,神经细胞粗面内质网脱颗粒,线粒体固缩, 部分肿胀,神经纤维.见图1.分髓鞘分层,断裂,分离及轴突移 位,部分轴索断裂.6h后间质明显水肿,细胞脱髓鞘减少,见图 2,3,4.治疗组:术后1h微血管扩大,未见血管内有形成聚集,灰 l71=丝.兰塑0/一垡鱼塑 质神经细胞固缩,简直可见出血,水肿,部分神经纤维脱髓鞘.6h 后神经细胞固缩,粗面内质网增生,微血管内皮空洞形成,部分 神经纤维髓鞘分离,轴浆内囊形成,可见轴索溶解. 2.2运动功能评价正常对照组大鼠在自制斜板上停留的最 大角度为82.,损伤组术后1周平均为55.,6周时有一定程度的 增加65.;而治疗组术后增加较快,6周时接近正常.见表1. 表1大鼠在rivlin斜板上爬行最大角度 tab/ecrvdedmaximalangleonrivlinltboard(.) 注:两组比较t=一2.934.p<0.o1 ,vt=一2.934,p<0.ol,w打1mdgroup 3讨论 gn.1是位于细胞膜表面的一中含唾液酸的糖鞘脂.占细胞 膜总脂类的5%20%.主要位于双脂层的外表面.是多数哺乳 动物的细胞膜组成成分,在中枢神经尤为丰富.动物试验表明外 源性gn.1能通过血脑屏障,在神经损伤区含量最高,与损伤区 的神经组织和神经细胞有高度的亲和力.并通过稳定膜结构与 功能发挥作用;体外试验表明:gm一1与神经膜结合能明显增 加神经增生因子(ngf)的功能.促进神经再生【7】. 脊髓损伤后,受伤的脊髓微血管通透性增大,特别是在半切 伤后,硬膜撕裂,脑脊液外流,大量的ca2内流,激活多种蛋白 酶,和磷脂酶a2,经过一系列生化反应,产生大量的自由基,使细 胞内发生脂质氧化反应,广泛损害线粒体,高尔基体,溶酶体的 细胞器及膜型结构,导致细胞自溶.后者有加重微循环障碍.形 成恶性循环81.gm一1的作用机制是防止ca2内流和神经水肿, 神经阻滞治疗糖尿病性周围神经炎 杨小立,周春琴,马振林(西安交通大学第一医院康复医学中心,陕 西省西安市710061) 主题词:糖尿病神经病变;神经传导阻滞;对比研究 摘要:糖尿病性周围神经炎占糖尿病发病率的4%5%.女性多 于男性,表现为对称性肢体远端感觉运动神经受累,下肢严重,星 自发性钝痛和感觉异常,常诉足底烧灼样痛或刺痛.常规降糖药物 及对症治疗效果欠佳.采用神经阻滞为主的综合治疗.疗效显着. 1材料和方法 1.1材料1993-o1/2002.11本院收治160例均符合糖尿病性 周围神经炎诊断标准”1,随机分2组,治疗组80例应用神经阻滞 为主的综合治疗;对照组80例应用传统药物治疗.男73例,女 97例,年龄4572岁,病程0.525.0年;疗程2周3个月. 1.2方法行腰部硬膜外神经阻滞.选择k或i.间隙穿 刺,成功后注入10g/l利多卡因5ml.测平面后,即可分次注入 混合镇痛液2oml(含20g/l利多卡因5m1.100g/l氯化钠溶 液loml,山莨菪碱5mg,维生素bt20.5mg,维生素bdoomg). 封口留管,1次/d,同时抗感染治疗,3d后拔管,4周为1个疗 程.同时口服阿卡波糖50mg,3次/d或/和格列毗嚷5mg,2 次/d,使全天血糖保持在正常水平.口服维生素bt,维生素b6, 肌注维生素b.:.统计学处理:两组结果采用检验. 2结果 按vas评分标准评估.优:疼痛0级,疼痛消失,活动自如 2393 抵抗自由基,保护细胞膜及增强ngf的功能,从而早期终止脊髓 继发性病理损害,促进神经再生.i脚nakat和hnkada8等应用外 源性gn.1腹腔注射治疗胸髓损伤小鼠91,并利用免疫组化技术 对照未经治疗的小鼠,结果发现:应用gn一1治疗小鼠脊髓损伤 灶周围神经轴突和髓鞘gn.1表达阳性率明显高于未经治疗的 小鼠.外源性gn.1与髓鞘结合的比率高于轴突结合,同时gn.1 向脊髓传导束转运加快,其与髓鞘结合有特殊亲和力,并防止脱 髓鞘,同时gn.1能促进运动功能恢复. 对bss大鼠模型应用gn.1治疗结果进行gn一1对脊髓半切 综合征的疗效评价:本实验运用病理观察研究.结果表明:治疗 组应用gn一1可明显减轻继发行病理损害,减少脊髓组织水肿, 出血及坏死,保护伤区白质.促进神经细胞膜稳定,促进断端胶 原细胞连接,有利于神经传导功能恢复和伤后运动功能恢复. 4references 1】fenai.experimentalneubiologycentralrv0u8yetemhacat.如r ioi20111;7:27 2】xuxt,(sb.bb8ic衄dclinicofspinalcordl王ri朗.耐vpje pli掘l月bwc2000:699 3】i玎1毗咀kaji-iu&s,mdatilerlegm一1g眦臣hideintheured自pinalcord ofrab:|ni衄iin0b_ist0chemical自缸ldyil且ig_腿j啪,ill1996;13:163 4】weifiehsd,cofferhb,n衄呵anapa,d.hi吼op出ocoo1.ionma出c re帅nnceimng自ign8lpilnem8ina自pinalcordinjirymode1.两1cord dq;e嘶0narewcent.仇,跚1rn口1996;3:381 (图14见插图171页) 牧稿野期:200303一o7(26