高效液相色谱仪期间核查规程.doc

高效液相色谱仪期间核查方法一、依据和目的保证高效液相色谱仪的正常运行，在两次检定/校准之间进行期间核查，验证该设备是否保持检定/校准时的状态，确保其检验数据的有效性和准确性。二、使用范围该运行检查方法适用于使用中的1200高效液相色谱仪的期间核查检查方法。三、基本原理高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。四、仪器工作条件及要求1、环境温度：1535环境湿度：75RH%2、室内无强磁场干扰；3、室内部不存在妨碍仪器正常工作的震动；4、室内清洁，无腐蚀性气体；5、稳压器正常，并保持良好接地；6、供电电源：交流电压220V10%；7、排风设备完好，排风量达到实验要求；8、仪器放置在坚固的实验台上，并避免阳光直射。五、核查方法1、通用技术要求(1) 检查贮液器是否清洁；(2) 检查滤头是否堵塞；(3) 检查仪器电源线、信号线等插接是否紧密；(4) 检查各开关、旋钮、按键等功能是否正常，指示灯是否灵敏；将仪器各部分连接好，以100%甲醇为流动相，流量为1.0mL/min，启动仪器，待压力平稳后保持10min，用滤纸检查各管路接口应无湿迹2、泵流量设定值误差SS 、流量稳定性误差的检定SR分别设定流量为0.5 mL/min 、1.0 mL/min、2.0 mL/min，启动仪器，压力稳定后，在流动相出口处用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集5 min流出的流动相，在分析天平上称重，按式（1 ）、式（2 ）计算SS 和SR 。 （1） （2）式中：, 流量实测值，mL/min； 容量瓶+流动相的质量，g; 容量瓶的质量，g；试验温度下流动相的密度，g/mL；收集流动相的时间，min；同一组测量的算术平均值，mL/min；流量设定值，mL/min；同一组测量中流量最大值，mL/min；同一组测量中流量最小值，mL/min；流量设定值，mL/min0.51.01.5测量次数333收集流动相时间，min555允许误差SS5%3%2%SR3%2%2%3、基线噪声和基线漂移选用C18色谱柱，以甲醇：0.02mol/L乙酸铵=5：95为流动相，流速为1.0 mL/min，紫外检测器的波长选在230nm，检测灵敏度调到最灵敏档，开机预热，待仪器稳定后记录基线10 min，由检测器的衰减倍数和测得的基线峰-峰高对应标度，计算基线噪声，用检测器自身的物理量（AU）作单位表示。 (3)式中：检测器基线噪声； 衰减倍数； 测得的基线峰-峰高对应的记录仪标度，AU。基线漂移用1小时内基线偏离原点的值（AU/ h）表示。看基线噪声是否不超过510-4AU，基线漂移是否不超过510-3AU/ h4、整机性能（定性、定量重复性）选用C18色谱柱，根据检测器选择流动相和测量参数：以甲醇：0.02mol/L乙酸铵=5：95为流动相，流速为1.0 mL/min，紫外检测器的波长选在230 nm，基线稳定后由进样器注入20 L的25g/mL苯甲酸标准溶液，连续测量6次，记录色谱峰的保留时间和峰面积。按式（5）计算相对标准偏差RSD。 （4）式中：RSD（定性（定量）定性（定量）测量重复性相对标准偏差； 第i次测量的保留时间或峰面积； 6次测量结果的算术平均值； 测量序号。六、结果处理对仪器核查结果，应填写仪器设备期