（食品科学与工程专业论文）鳜鱼保活运输的研究.pdf

上海海洋大学硕士学位论文 鳜鱼保活运输的研究 摘要 本文主要研究了二氧化碳麻醉及m s 2 2 2 麻醉与低温相结合的麻 醉方式在鳜鱼保活运输中的应用，寻求活鱼长途保活运输经济有效的 方法，以提高运输的密度和存活率，降低成本、保持水产品的品质、 增加经济效益。同时，该技术对鱼的鲜度、安全性、营养性、适口性 也没有影响，并避免了采用一般药物麻醉产生药物残留对人体健康造 成危害。 本研究以体重为4 5 0 - 5 5 0 9 的鳜鱼( s i n i p e r c ac h u a t s i ) 为研究对 象，在实验室条件下对其进行麻醉模拟运输。得出以下结论： 用梯度降温的方法得出鳜鱼的生态冰温区为0 9 o 7 c 。 在用二氧化碳对鳜鱼进行麻醉时最有效的方法为，先充氧气，再 充二氧化碳气体和氧气组成的混合气体进行麻醉。其中氧气( 纯度 9 9 9 9 ) ，二氧化碳气体( 纯度9 9 9 ) ，混合气体比例l ：1 ，压力为 o 1 m p a ，麻醉时间约1 0 - - , 1 3 分钟。麻醉后的鱼体放于4 。c 的水体中， 在鱼水比为l ：1 的情况下，经过1 2 8 h 的模拟运输后，测得鱼肉中生 化指标及营养指标的变化。结果表明鱼肉中的蛋白质、脂肪、水分和 灰分变化不明显，只有a t p 有明显的降低，但不影响其营养价值。 实验室条件下观测了鳜鱼( s i n i p e r c ac h u a t s i ) 成鱼在不同的 t 上海海洋大学硕士学位论文 m s 2 2 2 浓度处理下的麻醉效果，包括麻醉过程、苏醒过程中的行为 变化以及麻醉过程中呼吸频率的变化。结果表明，在麻醉液浓度为 1 4 0 - 2 2 0m g l 时，随着麻醉液浓度的升高，呼吸频率呈缓慢下降趋 势，当麻醉液浓度增加到2 4 0 - - 2 6 0m g l 时，呼吸频率呈开始上升然 后突降趋势，易造成鱼体的死亡。m s 2 2 2 麻醉鳜鱼成鱼的有效质量 浓度为2 0 0 - - 2 2 0m g l 。试验证明，采用m s 2 2 2 麻醉鳜鱼成鱼，鱼体 入麻时间短、复苏快，安全边界宽，m s 2 2 2 是一种理想的水产用麻 醉剂。用2 0 0 p p m 浓度麻醉后的鳜鱼在4 4 c 的水体中经过1 2 8 h 的模拟 运输后成活率为1 0 0 。 采用常规的生物毒性试验方法，在水温为1 8 2 0 ，盐度为3 0 0 0 4 0 ，p h 7 3 1 - - - 7 5 7 ，溶解氧( d o ) 8 2 8 5 m g l 的条件下研究分子氨 和亚硝态氮对鳜鱼( s i n i p e r c ac h u a t s i ) 毒性的影响。结果表明，分子氨 对鳜鱼2 4 、4 8 、9 6 h 的半数致死浓度( l c 5 0 ) 分别为o 3 8 9 、0 2 9 5 、0 19 3 m g l 和安全浓度为o 0 19 3 m g l ；亚硝态氮对鳜鱼2 4 、4 8 、9 6 h 的半 数致死浓度分别为19 6 3 2 、91 6 9 、7 5 4m g l ，安全浓度7 5 4 m g l 。 由此可以得出，水体中分子氨对鳜鱼成鱼的毒性作用非常明显，易造 成鱼体的死亡，而鳜鱼成鱼对亚硝态氮的耐受性稍强。 关键词：鳜鱼，二氧化碳，m s 2 2 2 ，氨氮，亚硝态氮，保活运输 i i 上海海洋大学硕士学位论文 t h es t u d yo nk e e p a l i v et r a n s p o r t a t i o no fs i n i p e r c ac h u a t s i a bs t r a c t t h ea n e s t h e s i at e c h n o l o g yo fc a r b o nd i o x i d ea n dm s - 2 2 2u n d e rl o w t e m p e r a t u r ea n di t sa p p l i c a t i o ni nl i v et r a n s p o r t a t i o no fs i n i p e r c ac h u a t s i ， w e r es t u d i e di nt h ep a p e r t oi m p r o v et h ed e n s i t yo ft r a n s p o r t a t i o na n d s u r v i v a lr a t e ，r e d u c et h ec o s t ，m a i n t a i nt h eq u a l i t yo fa q u a t i cp r o d u c t s ，a n d u l t i m a t e l yi n c r e a s ee c o n o m i cb e n e f i t s ，s oe c o n o m i ca n de f f e c t i v em e t h o d s o fl o n g d i s t a n c el i v et r a n s p o r t a t i o nw e r ed e v e l o p e d t h er e s u l t ss h o w e d t h a tt h i st e c h n o l o g yh a dn oa d v e r s ei n f l u e n c eo nd e l i c i o u sd e g r e e ，s a f e t y , n u t r i t i o na n dp a l a t a b l e n e s so ff i s h ，a n da v o i d e dh a r m i n gt h eh u m a n h e a l t h yc a u s e db yt h er e s i d u e so fd r u gi nd r u ga n e s t h e s i al i v e f i s h t r a n s p o r t a t i o n t h ea n e s t h e s i at e c h n o l o g yt r a n s p o r t a t i o no fs i n i p e r c ac h u a t s iw a s e x a m i n e du n d e rl a b o r a t o r yc o n d i t i o n s e a c ho ft h es i n i p e r c ac h u a t s i w a s4 50 - - _ ，550 9 r e a c h e dt h ef o l l o w i n gc o n c l u s i o n s ： u n d e rt h em e t h o do fg r a d sd e s c e n d i n gt e m p e r a t u r e ，t h ee c o l o g i c a li c e t e m p e r a t u r er a n g eo f s i n i p e r c ac h u a t s ir a n g e df r o m - 0 9t o0 7 。c t h em o s te f f e c t i v em e t h o do fa n e s t h e s i aw i t hc a r b o nd i o x i d ew a s c o n d u c e da sf o l l o w e d ：f i r s t ，a d dp u r eo x y g e ni nw a t e r , t h e n ，i n t r o d u c e i i i 上海海洋大学硕士学位论文 e q u a la m o u n tc a r b o nd i o x i d ea n do x y g e nt oa n e s t h e t i z et h ef i s h i tt o o k a b o u t1o 13 m i n u t e s t h ep u r i t yo fo x y g e na n dc a r b o nd i o x i d ew a s 9 9 9 a n dt h ep r e s s u r ew a so 1m p a a f t e ra n e s t h e t i z e d ，t h ef i s hw e r e s t o r e di n4 cw a t e rf o r12 8 h t r a n s p o r t a t i o n ，a n dt h ef i s h w a t e rr a t i ow a s 1 ：1 t h ea n e s t h e s i am e t h o da n dt r a n s p o r t a t i o nt i m eh a dn os i g n i f i c a n t e f f e c t so nb i o c h e m i c a li n d e xa n dn u t r i t i o nv a l u e t h er e s u l t ss h o w e dt h a t t h ec h e m i c a lc o m p o s i t i o n sh a dn oa l t e r a t i o ne x c e p tt h er e d u c t i o no fa t e n oa d v e r s ee f f e c t so nn u t r i t i o nv a l u ew e r ef o u n di nf i s ht r e a t e dw i t h a n e s t h e s i at e c h n o l o g yo fc a r b o nd i o x i d e t h ee f f e c t so fm s - 2 2 2 ，a na n e s t h e t i cf o rf i s h ，o nb e h a v i o r so f s i n i p e r c ac h u a t s iw e r ee x a m i n e du n d e rl a b o r a t o r yc o n d i t i o n s ，i n c l u d i n g c h a n g e so fc h a r a c t e r i s t i cb e h a v i o rd u r i n ga n e s t h e s i aa n dr e c o v e r yp r o c e s s a sw e l la st h ec h a n g e so fr e s p i r a t o r yr a t ed u r i n ga n e s t h e s i ap r o c e s s t h e d e s i g n e dc o n c e n t r a t i o no fm s 一2 2 2w a s14 0 2 6 0 m g l t h er e s u l t s s h o w e dt h a tt h ee f f e c t i v ec o n c e n t r a t i o nw a s2 0 0 - - - ，2 2 0m g l w h e nt h e c o n c e n t r a t i o nw a s14 0 , - 。2 2 0m g l ，w i t ht h ei n c r e a s e dc o n c e n t r a t i o no f m s - 2 2 2 ，t h er e s p i r a t o r yr a t ew a sd e c r e a s e d w h e nt h ec o n c e n t r a t i o nw a s 2 4 0 - - - 2 6 0m g l ，r e s p i r a t o r yr a t ew a sr o s ea tt h eb e g i n n i n ga n dt h e n s h a r p l yd e c l i n i n g ，w h i c he a s i l y l e dt ot h ed e a t ho ff i s h t h er e s u l t s i n d i c a t e dt h a tm s - 2 2 2a sa na n e s t h e s i at os i n i p e r c ac h u a t s ii sf e a s i b l ei n t e r m so ft h ee f f e c t st h a tf i s hc a nb ei n d u c e da n e s t h e s i ar a p i d l ya n dr e c o v e r i v 上海海洋大学硕士学位论文 r a p i d l yw i t haw i d ec o n c e n t r a t i o nr a n g eo fs a f e t y w ed i da l la c u t et o x i c i t yt e s ta b o u tt h ee f f e c t sm a d eb ym o l e c u l a r a m m o n i aa n dn i t r i t et ot h ea d u l ts i n i p e r c ac h u a t s i t h i st e s tw a sd o n e u n d e r l a b o r a t o r yc o n d i t i o n sw h e r et h ew a t e rt e m p e r a t u r ew a s18 - 2 0 。c ， s a l i n i t y3 - 4 o ，p h7 3 1 7 5 7 ，a n dd o8 2 8 5 m g l t h er e s u l t ss h o w e d t h a tt h et o x i c i t yo fm o l e c u l a ra m m o n i a ，f o rt h es e m i l e t h a lc o n c e n t r a t i o n ( l c s 0 ) o f2 4 ，4 8 ，9 6 ha n dt h es a f ec o n c e n t r a t i o n sw e r e0 38 9 ，0 2 9 5 ，o 19 3 0 a n d0 019 3 m g l ；t h en i t r i t e ，f o rt h es e m i l e t h a lc o n c e n t r a t i o n ( l c s o ) o f2 4 ， 4 8 ，9 6h o u r sa n dt h es a f ec o n c e n t r a t i o n sw e r e19 6 3 2 ，91 6 9 ，7 5 4a n d7 5 4 m g l s ow ec a nc o n c l u d et h a tt h em o l e c u l a ra m m o n i ah a dp l a y e d o b v i o u sa n di m p o r t a n tr o l ei nt h et o x i c i t yo fa d u l ts i n i p e r c ac h u a t s i ，a n di t c a ne a s i l yk i l lt h ef i s h ，w h i l et h ea d u l ts i n i p e r c ac h u a t s ih a sh i g h e r r e s i s t a n c et ot h en i t r i t e k e yw o r d s ：s i n i p e r c ac h u a t s i ，c 0 2 ，m s - 2 2 2 ，a m m o n i a ，n i t r i t e ， k e e p a l i v et r a n s p o r t a t i o n v 上海海洋大学学位论文原创性声明 本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位 论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除 文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集 体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我 对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者签名：断+ 弓z 日期：弘fp 年 乡月) 日 上海海洋大学学位论文版权使用授权书 学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定， 同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子 版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学 位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影 印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 保密 口 ，在年解密后适用本版权书。 本学位论文属于 不保密 囱 学位论文作者签名：新璋缸指导教师签名：j 、立号、 日期：加口年乡月日日期：扒。年3 月。日 上海海洋大学硕士学位论文 引言 中国水产品资源丰富、种类繁多，水产品具有低脂肪、高蛋白的特 点，是人类合理膳食结构中不可缺少的重要组成部分，已成为人们摄 取动物性蛋白质的重要来源。随着人们生活水平的提高，人们对食品 质量要求也越来越高，鲜活水产品市场无论是在品种、价格、供销体 系等诸多方面都发生了巨大的变化，从国内外市场看，鲜度较好的水 产品不仅畅销，且价格好。品种由原来的“四大家鱼”向名贵鱼类转 变，现在香港消费的水产品9 0 是活鲜品，上海地区每年消费鲜活水 产品1 2 0 万吨，名贵品种达4 0 多万吨。近几年我国从沿海到内地，水 产品活体销售中心也不断涌现，供应量呈直线上升趋势，生猛海鲜、 游水活鱼深受国内外消费者的青睐，每年进入上海市场的活水产品就 达3 万吨左右，这也是市场指导生产的一个强烈信号【1 1 。因此，保活 运输是保持水产品最佳鲜度，以满足消费者需求的最有效方式，同时 也提高了企业的经济效益。 活鱼运输旨在运鱼，不在运水，所以在运鱼过程中如何多运鱼、 少运水、少死鱼甚至在运输途中不换水，这是研究活鱼运输技术的关 键。由于海水鱼生长的环境和生活习性与淡水鱼不同，对氧气的摄取 能力比淡水鱼弱，对水质变化的适应能力也比淡水鱼低，要进行海水 鱼的长距离保活运输，提高鱼类在运输途中的存活率与许多因素有关： 上海海洋大学硕士学位论文 如水的溶氧量，清澈度，温度；被运鱼种的体质；运输途中的各种意 外等。排除体质和意外两个因素，可以说在运输过程中正常存活的 必要条件是：适宜的水温、良好的水质和足够的溶氧，三者缺一不可。 目前国内较多采用水池、水车、水船和尼龙袋装水充氧等进行保 活，水处理复杂，有的使用药物麻醉保活，在水产品体内的药物残留 会危害人体健康，易形成环境污染2 1 。因此，研究新的水产品保活储 存环境，提高存活率，延长活运时间，获得高品质的活体，满足市场 需求，已成为渔业可持续发展的关键问题，具有明显的重要意义。 在保活运输过程中，环境条件变化和刺激都会对鱼体造成胁迫而 使鱼体产生应激反应，导致鱼体的皮质醇含量显著升高，外周组织、 尤其蛋白质水解作用以及脂肪和糖原分解增强，乳酸含量升高等，而 这些变化可能影响鱼体的肌肉品质。 本文以鳜鱼为实验原料，研究二氧化碳及m s 2 2 2 麻醉对低温贮 运中鳜鱼生化特性及肉质的影响，为确定鳜鱼麻醉低温保活运输的麻 醉方法提供依据。 上海海洋大学硕士学位论文 第一章鲜活水产品保活技术研究进展 1 水产品保活技术现状 快速、高密度活体运输，历来为广大水产技术工作者所重视，并且己发展多 种有效的水产动物活体运输方法。 1 1 塑料袋充氧运输口1 塑料袋充氧运输是最为常见也是最为简单的方法，受精卵、鱼苗、鱼种、虾 苗等个体不大品种的运输常用此方法。使用塑料袋进行活体运输，如果方法得当， 不仅获得较高的成活率而且成本很低。塑料袋注入四分之一的水，袋中水与氧气 所占的比例为1 ：3 ，为避免损伤鱼体，塑料袋的外面先覆上纸，然后再套上一层 或两层同样大小的塑料袋。注入水放入鱼后，先将里面的空气排出，然后进行充 氧。 1 2 无水运输m 1 部分特种水产动物短期抗缺水能力强，在运输时常采用无水运输，保持体表 湿润即可，例如鳖、乌龟、螃蟹、黄鳝、泥鳅等。无水保活的特点是：不用水， 运载量大，无污染，质量高等。 采用无水保活时，应始终保持一定的湿度，满足这些特种水产动物对水分的 最低需求，同时尽量在低温条件下运输。 1 3 麻醉运输州 麻醉运输是采用麻醉抑制中枢神经，使水产动物失去反射功能，从而降低呼 吸和代谢强度，提高存活率的一种运输方法。麻醉药物用于活鱼运输有存活率高、 运输密度大、运输时间长、操作方便、途中管理简便等优点，运输退出后，将鱼 类放入清水中可复苏，因而近年来受到重视。国际上己采用麻醉类药物进行大规 格的活鱼的运输，国内应用的历史不太长，但发展很快。 1 3 1 低温麻醉 通过对温度进行控制，降低温度以减少它们的活动能力、新陈代谢和氧气的 3 上海海洋大学硕士学位论文 消耗，以降低死亡率，使其尽可能运送更长的距离，并增加装运时的密度。水产 动物多为冷血动物，都有一个固定的生态冰温，在其冰温范围内，选择适当的降 温方法，使水温和体温缓慢的下降，同时尽可能不要引起运输个体的不良反应， 最终达到进行冰温运输的要求。许多鱼类如牙鲆、河豚等要采用缓慢梯度降温法， 降温梯度一般每小时不超过5 c ，这样可减少鱼的应激反应，提高存活率。 低温运输，并不是一种孤立的方法，通常与其他各种运输方法混合应用。最常 见的是成鳗出口时的活体运输。为了保证运输的成活率，对待售鳗鱼采取三级降 温，由养殖水温2 6 左右逐渐降至1 2 1 5 ，然后把鳗鱼放入装有冰水混合物的 塑料袋中，袋中水温约保持为6 8 。 1 3 2c 0 2 麻醉 鱼类对水环境中的二氧化碳非常敏感，水中的二氧化碳分压直接影响鱼鳃部 的气体交换。如果水中二氧化碳的分压高，鱼体内血液中二氧化碳不能向水中扩 散，以致碳酸积累，血红蛋白与氧的亲和性下降，血红蛋白的氧饱和度下降，就 会导致即使水中含氧量很充足，鱼仍然会缺氧而休眠，因此，高浓度的二氧化碳 可使鱼类麻醉，可利用这一特点对活鱼进行保活运输，具有提高运输量、降低运 输成本的作用，国外有过研究，但技术不成熟，非常值得进一步研究和探讨。 b k m i s h r a ( 1 9 8 8 ) 做过用碳酸麻醉平均体长4 7 锄印度鲮鱼苗的实验。结果表明， 在5 0 0 p p m 的碳酸溶液中死亡率在5 以内，鱼苗存活时间可长达2 1 5 小时，比 对照组延长了1 1 0 小时。赵振山( 1 9 9 4 ) 也作过碳酸麻醉浓度为5 0 0 p p m 的运输 介质中，草鱼苗经2 0 1 小时的运输，成活率仍可达到9 0 以上，比对照组的运输 时间延长1 倍多。 1 3 3m s - 2 2 2 麻醉 m s 2 2 2 的化学名称为3 一氨基苯甲酸乙酯甲烷磺酸盐，最早为瑞士山都士公 司所开发的人用于局部麻醉，国外从5 0 年代起就用于鲑鳟等活鱼的短途运输，目 前己广泛用于活鱼、活蛙的运输、孵化、称量和标志。 m s 2 2 2 在水溶液中可经鱼鳃、鱼皮等部位传导至鱼脑感觉中枢后抑制了鱼 对外界的反应能力和鱼的活动能力，使鱼进入休眠状态。这主要表现为鱼的反应 迟缓，呼吸频率减慢，鱼体内代谢强度降低，减少了水体中溶解氧的消耗等。 b a u d i n ( 1 9 3 2 ) 曾进行过经m s 2 2 2 麻醉处理的金鱼耗氧量试验。结果表明，金鱼在 药物麻醉下，对水中溶解氧消耗减少，在1 6 c 以下，1 ：2 0 0 0 0 的药物浓度可在 3 0 6 0 分钟内使金鱼麻醉，经2 4 小时以上金鱼也不受药害。 4 上海海洋大学硕士学位论文 m s 2 2 2 进入鱼体后，主要积聚于脾脏、肝脏等部位，在肌肉中含量甚微， 且在清水中极易从鱼体中转移到水中。试验证明，m s 2 2 2 麻醉时间短，对鱼、 人较安全，因此被广泛用于多种鱼的运输。 2 保活运输技术在国内外的研究进展 2 1 国内研究状况u 9 1 水产品的保活运输研究最早开始于二十世纪六十年代末，主要是提高梭子蟹 在运输中的成活率，七十年代又针对石斑鱼的保活运输进行了研究，但基本上都 是带水运输。九十年代，随着市场经济的建立和发展，保活运输的研究才真正开 始引起重视，昆明多功能活鱼运输机试验取得成功，主要技术指标达到了国际水 平。本世纪初，开始研发活鱼运输汽车，并陆续有申请专利的报道，云南、上海、 大连、山西都生产了部分有活鱼车，主要以运输鲤鱼、鲫鱼等低质鱼为主，技术 上主要是采用充氧方式保活，并开始部分低温方式保活，但基本无严格意义上的 水质净化、升降温控制设备，其运输作业半径一般在3 0 0 - - 5 0 0 公里范围。由于汽 车运输的不确定性、车载量小、成本相对较高、水质处理困难等问题，且易受道 路、气候等因素的影响和制约，无法适合长距离大规模的活体水产品运输。 目前，航空运输是我国长距离鲜活水产品运输的主要方式，由于航空运价高、 运力有限，不可能做到大规模运输。对不同水产品的保活运输尚未建立标准。 2 1 1 虾类保活技术研究 杜守恩( 1 9 9 7 ) 等作过活龙虾的低温保活。选取从广东省空运的无损伤、活 力较强的活龙虾( 5 0 0 8 0 0 9 尾) ，洗净身体放进试验水族箱内，每箱放5 - 6 尾， 不投饵，水温从2 0 降至1 0 ，每箱一次降温2 4 c ，暂养5 - - 6 天。通过7 、8 月 多批量试验，水温1 4 - 1 6 ，龙虾代谢较缓慢，具有一定活力，1 0 - 1 4 天暂养存 活率为1 0 0 。 齐静涛( 1 9 9 6 ) 一文中研究了日本对虾活体干法运输技术，从捕捞阶段逐渐 降温的对虾放入1 8 。c 水中，若暂养时间较长，则慢慢降温，每小时降1 ；若暂 养时间较短，每小时降2 ，总之要在包装前把温度降至1 2 。要用盐度表或比 重计直接或间接测出水体的盐度，若不在对虾的生存范围内，则要加盐调节。暂 养水深不低于5 0e l l l ，要连续充气。结果，用充氧包装法平均成活率为9 0 6 ，木 屑包装法平均成活率为9 5 3 。 5 上海海洋大学硕士学位论文 2 1 2 贝类低温保活技术研究 殷邦忠等( 1 9 9 4 ) 以魁蚶为例作了研究，工艺：魁蚶一清洗一吐砂一分级一 包装一预冷一保藏一运输。结果表明，在从3 o 降至一2 0 时部分魁蚶的根部出 现微冻，肉色明显变暗：2 3 c 魁蚶根部全部出现微冻，但存活率仍为1 0 0 ；- 2 5 魁蚶贝肉根部、中部出现冻结，大部分个体己死亡。因此，魁蚶的最低保藏温 度为- 2 3 c 。在o 2 3 保藏2 0 天，存活率1 0 0 ；保藏1 6 天，失重率为4 8 ：4 - - 6 保藏1 6 天，失重率增至1 1 8 。 2 1 3 鱼类保活技术研究 1 9 9 1 年江苏淡水所对青虾进行无水保活运输，经过1 6 小时，存活率达9 0 以上，经过3 8 小时，存活率达7 5 。闽浙活鳗运销日本及港澳，采用分级梯度 降温，充氧方法，运输2 4 3 3 小时，存活率9 5 以上。1 9 9 3 年山东将河豚加 水、加冰充氧运销日本，经1 0 - - 1 8 小时，存活率达9 5 以上。船舱加水充氧运 输活牙鲆，经3 3 小时，存活率达9 6 。1 9 9 4 年l o 月，湖北宜昌在罗氏沼虾的 水中加入保活剂，充气经2 0 小时，存活率达9 1 4 ，充氧3 2 小时运输，存活 率9 6 4 8 。1 9 9 5 年山东烟台活虾运输，无水充氧，低温休眠，木屑包装运输，经 1 0 1 8 小时，存活率达9 0 以上。1 9 9 5 年，湛江水院用新对虾经过麻醉充氧降 温干运2 1 小时，存活率最高可达9 0 。1 9 9 6 年福建水产所对真鲷苗、鲈鱼苗、 石斑鱼苗空运加水充氧，经l o 小时，存活率9 0 以上。1 9 9 9 年山东枣庄将淡 水鱼采取休眠方法运销到韩国，次日上午运到韩国，复苏后放入水中鱼鲜活如初。 2 2 国外研究在状况n 州2 1 在二十世纪九十年代后已开始研究低温麻醉技术和无水保活运输，并已开发 出活鱼运输车，对牙解、康吉鳗、乌贼和河纯等进行了试验，结果较理想。日本 h y o m i ns y s t e m 公司将冬眠的鲈鱼能保活4 0 天、鳟鱼9 0 天、蟹5 6 个月，加拿大、 美国、澳大利亚也都采用无水保活龙虾，存活率达9 5 。1 9 9 1 年，日本利用冰温 技术进行无水保活运输研究，保活时间提高了十倍，运载密度增加了4 5 倍，把 比目鱼由日本成田机场无水空运美国3 0 小时，存活率8 7 5 ；1 9 9 2 年日本北海道 还开发了一种活鱼罐头，使活鱼处于昏迷状态，两天内不死亡。1 9 9 7 年日本用新 型集装箱从名古屋运送象鼻蚌到上海，经过5 - 6 天，存活率为9 0 。挪威、英国 曾做过4 0 0 5 0 0 公里短途铁路运输水产苗种试验，超过2 0 0 0 公里以上的铁路运输未 见报道。 6 上海海洋大学硕士学位论文 3 本课题研究内容 3 1 实验室内鳜鱼活体代谢、水化指标参数的研究 a 检测的鳜鱼代谢指标：呼吸频率、鱼肉的p h 、乳酸、糖原、a t p 及其降解 产物、失重率。 b 检测的水化指标参数：水体温度、盐度、p h 、含氧量、氨氮、亚硝氮、溶 氧量。 通过对以上指标的检测，明确运输密度、时间、梯度降温速率、过滤速度等 不同工况条件对鳜鱼代谢和水质的影响。 3 2 实验室内鳜鱼运输密度、成活率的研究 a 分析、研究活体密度与成活率之间的关系，以及温度对运输密度和成活 率的影响，得到最适的运输密度。 b 项目指标( 见表1 1 ) 表1 - 1 项目指标 t a b 1 1t a r g e to f t h ei t e m 3 3 鳜鱼休眠及唤醒机制的研究 a 鳜鱼休眠机制的研究 低温麻醉：通过对温度进行控制，调低温度以降低它们的活动能力、新陈代 谢和氧气的消耗，以降低死亡率，使其尽可能运送更长的距离，并增加装运时的 密度。 7 上海海洋大学硕士学位论文 二氧化碳麻醉：实验室内通过调解二氧化碳和氧气的比例，分析研究促使鳜 鱼休眠，以进一步降低活体代谢水平，找出休眠参数变化情况。 m s 2 2 2 麻醉：m s 2 2 2 在水溶液中可经鱼鳃、鱼皮等部位传导至鱼脑感觉中 枢后抑制了鱼对外界的反应能力和鱼的活动能力，使鱼进入休眠状态。 通过以上三种麻醉方法的研究，分析出麻醉剂不同剂量对麻醉效果的影响以 及在鱼体中的残留位置、残留量对鱼体自身的影响，人体食用是否安全等，最终 确定出在哪种运输状态下，活体运输前后各方面指标达到最佳。 b 鳜鱼唤醒机制的研究 在室内自然光照条件下，打开泡沫箱及其活鱼包，对鱼进行复苏。取出活鱼 包中的鱼，将鱼放入1 5 - - 2 0 的清水环境条件中，充空气暂养，恢复活力，并观 察其恢复速度与存活状况。 3 4 运输条件下活体脱毒、肌肉品质变化的研究 采用栅栏技术研究上述不同温度、密度、氧气和药物用量对其呼吸频率的影 响，测定不同条件下活体运输的前、中、后鳜鱼肌肉组织中的糖原、乳酸、a t p 及降解产物等生化指标的变化，了解水产品生理与肌肉品质之间的变化。 4 本研究的目的和意义 4 1 鳜鱼保活运输的研究背景 随着鳜鱼养殖业的蓬勃发展，鳜鱼活鱼运输越来越显得十分重要。鳜鱼为肉 食性鱼类，常见膘肥体壮，古词有“桃花流水鳜鱼肥 ，因而得名胖鳜。鳜鱼肥满 度很高，肉质丰腴细嫩，味道鲜美可口，营养丰富，富含人体必需的8 种氨基酸。 鳜鱼因无肌间刺，为小孩和老人理想的高蛋白( 1 9 3 ) 、低脂肪( 0 8 ) 的保健 食品。 过去，鳜鱼是我国出口创汇的拳头产品，在海外被誉为“淡水石斑”。现在， 国内的宾馆和酒楼对鳜鱼的消费量也与日俱增。在国内外市场迫切需求鳜鱼的情 况下，因此鳜鱼身价倍增，一般1 千克鳜鱼相当于1 0 千克鲢鱼的价值。为了尽早 地把鳜仔鱼养殖成大规格鱼种和当年将鳜鱼种养成商品的鳜鱼，就必须从纬度较 高的南方( 如广东省和海南省) 运输鳜仔鱼和鳜鱼种；为了使养殖的商品鳜鱼获 得最好的经济效益，就必须将其运输至市场价格高的开放城市和地区( 如北京、 上海、广州、武汉和港、澳) 或者出口国外【1 3 , 1 4 】。 8 上海海洋大学硕士学位论文 4 2 鳜鱼在麻醉保活运输中影响存活率的主要因素 在鳜鱼活鱼运输中，如何提高其运输成活率又是一个至关重要的问题。鱼类 是水生低等变温脊椎动物，容易受外界环境的影响，运输中环境的胁迫以及高密 度造成的拥挤胁迫等都会引起鱼体的应激反应和生化指标上的变化，见表1 2 。 袁1 - 2 环境影响因素及鱼体的生理反应( 引自i s h i o k a ) t a b 1 - 2e n v i r o n m e n t a li m p a c tf a c t o r sa n dt h ep h y s i o l o g i c a lr e s p o n s e so ff i s h ( a f t e ri s h i o k a ，) 影响因素鱼体的生理反应 4 2 1 温度 4 2 1 1 温度影响存活率的原因分析 水温高低直接影响鱼类的耗氧率。一般在鱼类适宜的温度范围内，耗氧率随 着水温的高低而升降，水温越低，耗氧率也越低【15 1 。因此较低的保活温度对长时 间保活运输的存活率具有积极作用。鱼类长期在低水温下生活的话，保活水温可 随驯化温度而变化，可以在低水温下保活运输。但是，如温度低于鱼类生存的极 限水温，则会引起鱼类大批死亡。温度影响代谢率，直接对鱼体排泄产生作用， 排泄率随温度升高而增大，保活运输中温度越高，鱼复苏越快，代谢强度也越强， 越会造成水质污染，影响存活率。 9 上海海洋大学硕士学位论文 4 2 1 2 温度与血红蛋白载氧能力的关系 温度对h b 载氧能力的影响，可能是通过影响体液中旷的活度来实现。当温 度升高时，h + 活度增加，组织代谢活跃时，局部温度升高，二氧化碳和酸性代谢 产物增加，降低了硒对0 2 的亲和力16 1 。 4 2 2 盐度 盐度对淡水鱼生存具有重要影响，适宜的盐度对于淡水鱼保活有积极的作用。 淡水鱼类必须吸收盐分排出水以维持高渗调节，当外液盐度稍有升高且不影响其 生理平衡时，由于减小了体内外的盐度梯度，从而节约了用于渗透调节的能量， 并使标准代谢降低。例如，鲢鱼( v o no e r t g e n , 1 9 8 5 ) 、鲤鱼和日本沼虾都是在盐度 3 的微盐水中标准代谢降到最低点。大致说来，盐度3 - - 4 可能是许多淡水动物渗 透调节中最节能的最佳盐度【l2 1 。 使用氯化钠是鱼类保活运输中保护鱼体的有效方式之一。在包水中添加适量 的海水晶有助于降低鱼类应激反应，减少鱼体的粘液分泌，降低水体中泡沫量， 调节代谢强度，延迟鱼类死亡【l7 1 。增加水体中氯化钠和氯化钙的含量可以减少鱼 等水产品在装卸过程中的应激反应和延迟死亡。钠离子有助于减少粘液的形成。 钙离子可使渗透压调节和代谢作用的失调受抑制。氯化钠与氯化钙的用量与水产 品的种类和水体的温度有关，盐度过高也会对淡水鱼产生毒性作用。 p h 是影响盐度毒性的较重要因素，而水中的o h 一与c 0 3 2 - 是产生这种影响的 较主要因子。在不同p h 时，盐度的半致死浓度随p h 增高而递减，说明p h 的增 高能增加盐度对鱼的毒性作用【1 8 】。在二氧化碳保活运输中，p h 不会太高，因此， 低盐度不会对保活存活率产生负面影响。 盐度对鱼的耗氧率会产生影响，在某个阈值以上，随着盐度的增高耗氧率迅 速上升。当水中的盐度超过鱼体液的浓度时，为了维持原来的渗透压，鱼体耗氧 相应增加。另外，盐度增高，鱼体失水，体重变轻，这也可能是耗氧率增高的原 因，不利于鱼类的保活运输。 4 2 3 水质 4 2 3 1p h p h 能够直接影响到鱼体的生理状况，从而影响保活运输的存活率。在酸性水 体内，可使鱼类血液中p h 下降，使一部分血红蛋白与氧的结合受阻，因而降低 1 0 上海海洋大学硕士学位论文 其载氧能力，导致血液中氧分压变小。在这种情况下，尽管水中的含氧量较高， 鱼类仍会缺氧。鱼类最适合在中性和弱碱性的水中生活，各种鱼类有不同的最适 p h 值，一般在范围为7 - 8 5 ，不低于6 。所有鱼类对于水p h 值有一个显而易见 的极限，超过极限，即使极短的时间，鱼也会死亡，这种极限p h 值一般小于4 0 或大于9 5 。当p h 值超出极限范围时，则往往破坏皮肤粘膜和鳃部组织，直接对 鱼体造成危害。 因此，为避免保活运输末期的p h 值太低，麻醉后的鱼在打包前要用低温清 水冲去残留的麻醉水，以防止降低包水初始的p h 值，同时可以适当提高包水的 p h 值以控制保活运输过程中的p h 值，保证保活运输的存活率。 4 2 3 2 溶解氧 水中溶氧量是影响鱼体存活率的重要因素之一。虽然麻醉保活运输过程中， 鱼类代谢较低，但水中的溶解氧降低到一定数值时，鱼类加快呼吸频率来弥补氧 量的不足。当低于临界氧浓度时，呼吸作用受阻，鱼容易窒息致死。因此，在高 密度、长时间、远距离的保活运输过程中要有充足的氧供给，才能保证较高的存 活率。在保活运输时，水温较低，有利于提高氧气的溶解度，并且氧气的分压与 溶解度成正比，因此保活过程中要不断充入空气以保证有足够的氧气供给鱼类的 存活。 4 2 3 3 氨氮和亚硝酸盐 氨氮和尿素是鱼类的主要排泄物，一般淡水鱼类的排泄物中，氨氮约占总排 泄氮的8 0 ，水中氨氮的过量积累会对鱼类造成毒性伤害。在保活运输过程中， 由于代谢作用导致水中氨氮含量有所增加，氨氮和亚硝酸盐对鱼均有较强的毒性 作用，特别是非离子氨对鱼的毒性作用极强，如不控制，就会导致鱼中毒死亡。 亚硝态氮的毒性主要是影响氧的运输、重要化合物的氧化以及损坏器官组织。 血液中亚硝态氮的增加能将血红蛋白中的二价铁氧化为三价铁，三价铁血红蛋白 ( 氧化型血红蛋白) 则没有运输氧的能力。二氧化碳及m s 2 2 2 麻醉，降低了鱼类 代谢，进而降低了鱼类的排泄强度，有利于鱼类的长时间保活，提高存活率。亚 硝态氮是很不稳定的中间产物，在溶氧丰富的水中，较容易氧化为硝态氮【l 叭。亚 硝酸盐在鳜鱼的保活运输过程中转化成毒性较小的硝酸盐，而且保活运输的有限 时间不会产生硝态氮的大量积累，因此，在高密度保活运输的水环境中氨氮是对 鱼类存活率带来影响的因素之一。 上海海洋大学硕士学位论文 4 2 4 代谢 麻醉保活运输前后鱼体的代谢状况受多方面因素的影响，如鱼的体质状况、 水温、盐度、水质的变化( 溶氧量、p h ) 等。 因此，充分降低鱼类运输中代谢率，这是鱼类保活运输的技术关键【2 0 】。鱼类 的呼吸运动具有节律性，在一定范围内鱼鳃的通水量随呼吸频率加快而增加。不 同鱼类生活习性不同，它们的呼吸频率相差很大，同种鱼类的呼吸频率受到年龄、 个体大小、活动强度、水温、水中溶氧量和c 0 2 含量等因素的影响。 5 结论 在运输中运用传统及现代化的检测手段，采取预防和调控，在运输过程中安装 水质净化系统，保持充足的溶解氧含量，把水质变动调控在鱼能承受的范围之内， 最大限度地减少和避免诸多因素对鱼的影响，尽可能使鱼体处于稳定状态。对于鳜 鱼的应激反应，需要通过调查了解、分析判断及经过理化、生化和生物学等方面 的检验诊断，消除应激原的影响。综合以上有利因素，消除不利因素，最大限度的 满足鳜鱼的存活需求，以提高保活运输中的存活率。 1 2 上海海洋大学硕士学位论文 1 引言 第二章生态冰温的确定 近年来，随着人们生活水平的提高，消费者对水产品的需求日益趋向鲜活产 品，使得鲜活水产品在国内外市场上成为抢手货。然而，水产品的产地与消费地 之间往往有一段距离，这就为研究人员提出了新的课题水产品活体运输技术的 研究。因此，水产品的保活运输越来越引起人们的重视。目前，有关水产品的保 护运输方法主要有：增氧法、麻醉法、低温法【2 1 1 。随着研究技术的成熟，现在多 采用低温与麻醉相结合的保活运输方式。 在活体运输研究方面，日本等渔业发达国家处于领先地位，我国的殷邦忠等、 齐静涛等、采用低温法无水保活魁蚶、菲律宾蛤仔、日本对虾也获得成功，成功 率达9 0 以上。目前对鱼类的研究报道较多的主要集中在采用麻醉剂如m s 2 2 2 和c 0 2 药物方面。对前者方法进行改进，采用低温麻醉保活的运输方法能大大提 高保活运输时间，增大鱼水比，降低运输成本。 本研究以鳜鱼为试验材料，在实验室条件下确定鳜鱼的生态冰温，以期为鳜 鱼的低温麻醉保活技术提供技术支持及理论依据。 2 材料与方法 2 1 实验材料 在鳜鱼买进实验室之前，先做好暂养的各种工作。鳜鱼买自上海市铜川路水 产市场，购买时挑选体质健壮、大小均匀( 0 4 5 - - 一0 5 5 k g ) 、鳞片完整及健康无伤 的带回实验室。运输为充氧运输，带回实验室后，放于清洁的水中暂养。 2 2 实验仪器 s i e m e n sk k 2 6 e 1 2 t i 冰箱 n e t d a q 系列网络型数据采集器 1 3 上海海洋大学硕士学位论文 j p b 一6 0 7 型便携