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羟丙基瓜尔胶的制备及表征 羟丙基瓜尔胶的制备及表征 高分子化学与物理专业 研究生邹时荚指导教师江波 摘要 瓜尔胶虽是目前已知的水溶性最好的天然高分子化合物之一，但却有溶解 速度慢，水不溶物含量高，粘度不易控制等缺点，这使得它难以满足工业应用 的要求，因此需要进行改性，如酯化、醚化等，以扩大它的应用范围。本文利 用环氧丙烷与瓜尔胶的反应，制备了羟丙基瓜尔胶；用分光光度法和核磁共振 测定了羟丙基瓜尔胶的取代度，考察了羟丙基在瓜尔胶上连接方式；并利用 b r o o k f i e l dd v i i i 流变仪考查了羟丙基的引入对瓜尔胶水溶液流变性的影响。 羟丙基和1 ，2 一丙二醇都能和浓硫酸发生反应，产物和茚三酮生成的紫色化合 物在5 8 6 n m 处的吸光度与羟丙基或1 ，2 一丙二醇的浓度在一定范围内成正比， 由此建立了分光光度法测量羟丙基瓜尔胶摩尔取代度的方法。在羟丙基瓜尔胶 的1 hn m r 谱图中，半乳糖和甘露糖h - 1 的共振信号处于最低场，而- c h 氢的化 学位移最小，三种氢原子峰都能和其它氢原子峰相分离，利用它们的峰面积之 比也可以测定羟丙基瓜尔胶的摩尔取代度。光度法与核磁共振测定的结果相一 致。将瓜尔胶和羟丙基瓜尔胶的”cn m r 谱图进行了比较，发现谱图中碳原子峰 的位置完全一样，且强度基本未发生变化，从而推测羟丙基是以长链方式与瓜 尔胶相连接，而不是在糖单元上均匀分布。结合”cn m r 的灵敏度，可以估计出 羟丙基的最小链长。此外，从瓜尔胶及羟丙基瓜尔胶溶液的表观粘度一剪切速 率变化的曲线上可以看出，瓜尔胶和羟丙基瓜尔胶溶液都呈假塑性，同时，羟 羟丙基瓜尔胶的制备及表征 丙基瓜尔胶溶液的粘度较瓜尔胶有很大程度的降低且降低的程度随摩尔取代度 的增大而增大。 关键诃 瓜尔胶羟丙基瓜尔胶 环氧丙烷改性表征核磁共振 4 羟丙基瓜尔胶的制备及表征 p r e p a r a t i o n a n dc h a r a c t e r i z a t i o no f h y d r o x y p r o p y l g u a rg u m c h e m i s t r ya n dp h y s i c so fp o l y m e r p o s t g r a d u a t e ：z o us i f t y i n gs u p e r v i s o r ：j i a n g b o ( f a c u l t yo f c h e m i s t r y , s i c h u a nu n i v e r s i t y , c h e n g d u 6 1 0 0 6 4 ，c h i n a ) a b s t r a c t g u a r g u m ，aw a t e r s o l u b l en a t u r a lp o l y m e r ，i so f t e nc h e m i c a l l y m o d i f i e dt o i m p r o v e i t s p h y s i c a l a n dc h e m i c a l p r o p e r t i e s p u r ea n d m o d i f i e d g u a r g u m s a r e w i d e l y u s e da st h i c k e n e r so r p r o t e c t i v e c o l l o i d si nt h ef o o d ，t e x t i l e ，p e t r o l e u ma n dm i n i n gi n d u s t r i e s i nt h i s w o r k ，h y d r o x y p r o p y lg u a rg u m i s p r e p a r e d a n dc h a r a c t e r i z e d t h e p r e p a r a t i o ni sb a s e do nt h er e a c t i o no fg u a rg u mw i t hp r o p y l e n eo x i d e t h ec h a r a c t e r i z a t i o ni sf o c u s e do n t h ed e t e r m i n a t i o no fm o l a r s u b s t i t u t i o na n dt h ec o n n e c t i o nb e t w e e ng u a rg u ma n dh y d r o x y p r o p y lc h a i n + s p e c t r o m e t r ya n d1 hn m ra r eu s e dt od e t e r m i n em o l a rs u b s t i t u t i o n ，a n dt h e r e s u l t sd e t e r m i n e db yt h et w om e t h o d sa r ei ng o o da g r e e m e n t 1 3 cn m ri s u s e dt oa s s u m et h ec o n n e c t i o nb e t w e e ng u a rg u ma n d h y d r o x y p r o p y la n dt h e l e n g t h o f p 0 1 y o x y p r o p y l c h a i n t h ee f f e c t so f i n t r o d u c t i o no f h y d r o x y p r o p y lg r o u pa r ee v i d e n tf r o mr h e o l o g i c a lp a r a m e t e r ss u c ha sn o a n de t h e noa n deo fh y d r o x y p r o p y kg u a rg u ma r es m a l l e rf o rag i v e n c o n c e n t r a t i o nt h a nt h o s eo f g u a rg u m ，a n d t h e d e c r e a s e sa r em o r e s 羟丙基瓜尔胶的制备及袁征 p r o n o u n c e dw i t ht h ei n c r e a s i n go fm o l a rs u b s t i t u t i o n t h ei n t r o d u c t i o n o fh y d r o p h o b i ch y d r o x y p r o p y lg r o u pi ng u a rg u mi sq u i t ef a v o r a b l ef o r i t sp r a c t i c a la p p li c a t i o n k e yw o r d s ： g u a r g u m ；h y d r o x y p r o p y lg u a rg u m ；p r o p y l e n eo x i d e ； p r e p a r a t i o n ：c h a r a c t e r i z a t i o n ； n - m r 6 羟丙基瓜尔胶的制备及表征 1引言 瓜尔胶( g u a tg u m ) 是从产于印度、巴基斯坦等地的瓜尔豆( c y a m o p s i s t e t r a g o m 0 1 0 b u s ) 种子的胚乳中提取得到的，属半乳甘露聚糖，是目前已知的 水溶性最好的天然高分子化合物之一。 近年来，随着各国对环境污染问题的日益关注和重视，人们逐渐把注意力 集中到了无毒、环境友好、价格便宜并且可以再生的天然高分子上面。瓜尔胶 即是其中的种。独特的结构特征和性能决定了瓜尔胶易于被化学改性，从而 可以制备各种功能材料，这使得对它的研究，在美国、英国、印度等国都是热 门课题。然而，我国对瓜尔胶的研究进行得相对较少，报道不多“。3 1 。 1 1 瓜尔胶的结构 瓜尔胶的主要成分见表i “3 。 表1 ：瓜尔腔的主要成分 t a b it h eo o m p o s i t j 0 1 3 5o f g u a rg u m 组成含量 半乳甘露聚糖( 瓜尔耱) 水分 蛋白质 粗纤维 灰分 7 5 8 5 8 1 4 5 6 2 3 0 5 1 通常所说的瓜尔胶指的足瓜尔糖，其主链由( i - 4 ) 一1 3 - d - 甘露糖为结构单 元连接而成，侧链则由单个的a - d - 半乳糖组成并以( i - 6 ) 键和主链相接8 ， 如图i 。从整个分子来看，半乳糖在主链上呈无规分布”3 ，但以两个或三个一组 居多”1 。这种基本呈线形而具有分支的结构决定了瓜尔胶的特性与那些无分支、 不溶于水的葡甘露聚糖有明显的不同。因来源不同，瓜尔胶的分子量及单糖比 例不同于其它的半乳甘露蒙糖。瓜尔胶的分子量约为i 0 0 万- - 2 0 0 万，甘露糖 与半乳糖之比约为1 5 - - 2 i 。 羟丙基瓜尔胶的制备段表铽 m 图1 ：瓜尔胶的结构图 f ig 1s t r u c t u r eo fg u a rg u m 1 2 瓜尔胶的性质 1 2 1 流变性 瓜尔胶的水溶液具有很高的粘度其粘度与分子量的关系可以采用 m a r k h o u w i n k s a k u r a d a 方程： r 1 = k m 。来描述。但由于要制备具有不同分子 量的纯样及其分子量和特性粘数测量的困难，使得对m i l s 方程中q 和k 值的测 量进行得很少。d o u h l i e r ”3 等人测得的a 和k 值，分别为0 9 8 和7 7 6 1 0 一。 但等于0 9 8 的a 值明显高于了无规线团构型的高分子溶液所应有的。值。 m u b e e r 等人“1 利用高效凝胶排斥色谱，并和直角激光扫描检测计 ( r i g h t - a n g l el a s e rl i g h ts c a t t e r i n gd e t e c t o r ) 等联用，快速测定了分布 系数大于2 5 的瓜尔胶的 r 1 和m ，得到的n 和k 值分别为0 7 2 和5 1 3 1 0 ， 即： n _ 5 1 3 x 1 0 “m ，”。这和r o b i n s o n 洲等人报道的0 7 2 和3 8 i 0 1 相近。 瓜尔胶在水溶液中显示的是典型的缠绕的生物聚合物的性质。溶液呈假塑 性，没有屈服应力。牛顿流体区向假塑性区的过渡发生在很低的剪切速率区域 内，并随溶液的温度和浓度而变化。s v e n k a t a l a h 。”研究了瓜尔胶的流变性， 认为瓜尔胶溶液的流动可以采用c r o s s 模型来描述： 刁；= t 1 。+ 0 1 0 - t 1 。) 【1 + ( 九，) ” 这个方程可近似为： 羟丙基瓜尔胶的制备及表征 1 r ；= 1 ”o + ( 九y ) ”q 式中：玎；一剪切速率为，时的粘度：1 1 0 ，q 。一，分别为0 , n o o 时的粘度；九一松 弛时间：m 一常数。 其中的参数可以通过计算机采用最小二乘拟合的方法来计算。 n 。与温度的关系可用阿仑尼乌斯公式表示： r t0 = a e x p ( e a r t ) 式中：a 一指前因子；e - 流动的活化能；t 一温度。 r l 。与浓度的关系为： l o g ( n 。r l “) 1 = a l o g n 】+ a l o g c 式中： n 卜特性粘数；c 一溶液浓度。 这些关系式虽与实验数据符合得很好，但是由于所用的参数太多，实际应 用时显得很麻烦。 rh w w i e n t j e s l l 3 - 1 4 1 等人研究了瓜尔胶溶液的线性粘弹性，得到的松弛谱图 表明：在c o 1 0 3 赫兹的范围内，溶液的粘弹性可用r o u s e 模型来描述。然而， 在低频区还有两个储能模量平台：分别在1 1 0 0 h z 和( i ) o0 1 h z 的区域内。将 溶液的粘弹性和现有的一些模型相比较，可以发现：典型的蛇型模型、非化学 键断裂等模型不适用或不完全适用于瓜尔胶溶液，体系中存在着两种相互独立 的松弛机理。改变溶剂和用酶降解瓜尔胶的实验结果表明：1 1 0 0 h z 区域内的 平台似乎是由多链结构的构象松弛引起的，而o ) m s ( n r s ) 就可估算羟丙基的最小链长，也就是羟 丙基的最小聚合度d p 。由图l 的结构式可知n = 3 ，从而计算出所合成的羟丙基 的最小长度为2 8 。 3 3 瓜尔胶及羟丙基瓜尔胶流变性的表征 ， 由于流变性对分子结构的影响非常敏感，因此羟丙基的引入对瓜尔胶性质 的影响可以从瓜尔胶及羟丙基瓜尔胶的流变曲线上反映出来。 按照所述的实验方法，测定了瓜尔胶及羟丙基瓜尔胶溶液的表观粘度一剪 切速率曲线，部分曲线如图1 l 、1 2 所示。 争 蚤 磊 8 女 3 0 0 2 0 0 l0 0 1 1 。：1 4 图1 1 瓜尔胶及羟丙基瓜尔胶( 摩尔取代度为0 5 1 ) 的流变图( w t ：04 ) ( 瓜尔胶 羟丙基瓜尔胶) f ig1 1 r h e o g r a m so fg u a rg u n la n dh p g ( w t ：0 4 ) ( o g u a rg u m h p gm s ：0 5 1 ) 种如 s 如 蚪 阿 j 加o0 0 羟丙基瓜尔胶的制各及表征 【j 01 02 03 04 05 06 0 s h e a rm e ( s 。1 ) 图1 2 摩尔取代度为0 5 1 ( w t ：1 ) 的羟丙基瓜尔胶的粘度一剪切速率曲线( 从上至 下温度依次为：2 9 8 k ：3 0 3 k ：3 0 8 k ；3 1 3 k ：3 1 8 k ；3 2 3 k ) f i g1 2h p g ( m s ：0 5 1 ) ( w t ：1 ) v js c o s i t yv s s h e a rr a t e ( t e m p e r a t u r e v a r ia t i 0 1 3 ：2 9 8 k ：3 0 3 k ：3 0 8 k ：3 13 k ：3 1 8 k ：3 2 3 k ) 由此可以看出，在水溶液中，羟丙基瓜尔胶与瓜尔胶都显示出典型的缠绕 的生物聚合物的性质。在所研究的温度与浓度范围内，瓜尔胶及羟丙基瓜尔胶 的流动里假塑性，没有屈服应力。在相同的剪切速率下，羟丙基瓜尔胶的表观 粘度比瓜尔胶的表观粘度有很大程度的降低。利用公式【4 4 l l o g 旷= l o g k + 盯l o g y 作出l o g j l o g y 曲线，外推至l o g y 为零处，可以求出瓜尔胶及羟丙基瓜尔胶 的零切粘度。图1 3 绘制了2 5 时瓜尔胶及羟丙基瓜尔胶的零切粘度随取代度 变化的曲线。由瞄线可以看出，羟丙基瓜尔胶的零切粘度较之瓜尔胶有很大程 度的降低，且降低的程度随取代度的增大而增大。这可能是由两个因素引起的： 第一，在瓜尔胶的分子中存在着很多羟基，羟基之问强烈的氢键作用使得瓜尔 胶分子或链段之间相互缠绕，形成较大的流动单元，而表现出较高的粘度。在 瓜尔胶中引入疏水性的羟丙基后，羟丙基干扰了瓜尔胶链间氢键的形成而减小 了流动单元，从而使得流动阻力也得以减小，而降低了粘度。对瓜尔胶链间作 用的干扰，随羟丙基数量的增多而增多，但羟丙基降低瓜尔胶粘度的能力随取 代度的增大而逐渐减弱，使得零切粘度降低的程度也相应减小。第二，在改性 羟丙基瓜尔胶的制各及表征 岜 茸 墨 皇 岛 2 0 0 9 0 0 6 0 0 3 0 0 0 l 。- - 。一 0 0 20 4 0 6 m s o f g u m s 图1 3 瓜尔胶及羟丙基瓜尔胶的零切粘度一摩尔取代度曲线( w 3 04 ，2 9 8 k ) f i g 1 3 z e r os h e a rv is g o s i t yv s m so f g u m s ( w w o 42 9 8 k ) c o n c e n t r a t i o n ( w w ) 图1 4 瓜尔胶及羟丙级瓜尔胶粘性流动的表观活化能一浓度曲线( m s ：o 0 a , 02 4 0 0 5 ” f i g1 4a c t iv a t i o ne n e r g yv s o o n o e n t r a t i o r so fg u m s ( m s ：0 a 0 2 4 0 0 5 1 ) 的过程中，不可避免地伴随有瓜尔胶的降解，这也降低了瓜尔胶的粘度。 利用a r r h e n u i s 方程3 no = a e x p ( e o r t ) 可以计算出瓜尔胶及羟丙基瓜尔胶溶液流动的表观活化能。图1 4 绘制了瓜尔胶 及羟丙基瓜尔胶溶液的表观活化能随溶液浓度变化的曲线。 从图中可以看出粘性流动的活化能随取代度的增大而减小。这说明羟丙基在 减小瓜尔胶分子间作用力时，也降低了瓜尔胶水溶液对温度的敏感性。与此同时， 两种羟丙基瓜尔胶的表观活化能随浓度的变化表现出相似的规律。在溶液浓度小 oo；if岜8 u0一-云日 羟雨萋壤客艘的铷备及表征 予1 瓣，滚滚熬表躐溪讫载帮睫演液浓溲黪壤大嚣增大，程l 锈黠，漆滚瓣袭鼹 溪健转运蘩最丈，瑟矮，爨l l 涟溶液浓瘫懿澄太露薄诋，遮可施楚由予疆溶渡浓度 游嶷亿，滚动攀元遣槎相应霸羹发垒交纯。 羟丙基瓜尔胶的制备及表征 4 结论 本文利用环氧丙烷与瓜尔胶的反应，制备了疑丙基瓜尔胶，对其进行了表 铤菸考察了羟嚣蕤夔雩| 入对瓜尔黢浚交蛙懿影璃。黯羟嚣基最尔骏弱袭薤，重 点进行了取代度的测量及羟丙基在瓜尔胶上连接方式的考察。羟丙基和l ，2 一 丙二醇都施翻浓硫酸发生反瘟，产耪帮茚三酮生成的紫色络合瀚在5 8 6 n m 鲶的 吸光度与羧雨基或1 ，2 一丙二醇的浓度在定范围内成正比，融此建立了一种 分光光度法测量羟丙基瓜尔胶摩尔取代度的方法。该方法简单，易于操作，有 缀强的实用性。攘羟雨基瓜尔胶的hn m r 落曩中，甘露糖和半乳糖的h - i 处于 最低场，- - c h , 氢的化学位移最小，这三种氨原子的峰都能和其它氢原子峰柏分 离，馥到麓一蹦，蟹露营露糖、半孚l 耱鞋一1 懿涟瑟积之院也哥戮溺定羟嚣鏊蕊 尔胶的摩尔取代度。光度法与核磁共振测定的结果一致。将瓜尔胶和羟丙基瓜 尔胺的”cn m r 的谱圈进行了眈较，发现谱国中碳原子的峰静位置完全一样， 且强度基本未发生变化。从丽攘测羧蕊基是以长链方式与瓜尔胶相连接，两不 是在糖单元上均匀分布。结合”cn m r 的灵敏度，可以估算出羟丙基的链长。 剥爱b r o o k f i e l dd v 1 l l + 浚变 义测量了瓜尔胶及羟嚣基恩尔驳的袭鼹糙度睫剪切 速率变化的曲线，可以看出瓜尔胶和羟丙纂瓜尔胶溶液都里假辍性，同时，羟 丙萋悉尔黢酌藕液较瓜尔胶有穰大稚度的醛低显降低豹糕度随鞭代度豹增大丽 增大。 羟丙基瓜尔胶的制各及袭征 参考文献 王著，赵根锁，张国宝色学玩1 9 9 5 ，3 5 ( 3 ) ：2 0 5 2 0 7 王著，张国宝，王颖，赵根锁光著鹎：踏辔砂析以 唐燕祥矿艏觚1 9 9 5 ，4 ( 3 ) ：2 5 ，6 7 7 1 化工百科全书编辑委员会纪i 百刺坌书埘 1 4 ：1 0 3 5 1 0 3 8 1 9 9 7 ，1 7 ( 3 ) ：4 6 5 0 北京化学工业出版社1 9 9 7 5 m c c l e a r y ，b vc s z b o h y d r a t er e s e a r c h 以1 9 7 9 ，7 1 ：2 0 5 2 3 0 6 m e c l e a r y ，bv ，c l a r k ，a h d e a ，i cm ，& r e e s ，1 3 a c a r b o h y d r a t er e s e a r c h i j j ? 1 9 8 57 1 3 9 ：2 3 7 2 6 0 7 o r a s d a l e n ，h ：p a i n t e r ，t j 8 r o s a n g e l ab 6 a z c i a c r i s t i n at 1 5 7 1 6 3 c a r b o h y d r a t er e s e a r c h l j j ? 1 9 8 0 8 1 1 5 9 6 6 a n d r a d e c a r b o h v d , r a t e p o l y m e r si 力1 9 9 7 3 4 9 d o u b l i e r jl ，l a u n a y ，b t e x t ，s t u d 织1 9 8 1 ，1 2 ：1 5 1 1 7 2 1 0 mu b e e r ，p j w o o d ，j w e i s z c a r b o h y d r a t op o l y x e r s 砚1 9 9 9 ，3 9 ：3 7 7 3 8 0 1 1 r o b i n s o n ，g ，r o s s m u r p h y ，s b ，m o r r i s ，e c a r b o h y d r a t e r e s e a r c h 砚1 9 8 2 ， 1 0 7 ：1 7 3 2 1 2 sv e n k a t a l a h e g m a h a d e v a nj o u r n a lo fa p p l i e dp o l y m e rs c i e n c e 砚1 9 8 2 2 7 ：1 5 3 3 1 5 4 8 【1 3 r h w w i e n t j e s 阮h g d u i t s ，j w p b a k k e r ，r j j ，j o n g s c h a a p j m e l l e m m a c r o m o l e c u l a r s 3 jj2 0 0 1j3 4t 6 0 1 4 - 6 0 2 3j 1 4 r o l a n d h w w i e n t j e s ，m i c h e l h g d u i t s ，r j j j o n g s c h a a p j m e l l e m a m a c ? o m o l e c u l a r si j j ? 2 0 0 0 73 319 5 9 4 9 6 0 5 1 5 l l o p e s ，c t a n d r a d e ，m m i l a s m r i n a u d c a r b o h y d r a t ep o l y m e r s 玩 1 9 9 2 ，1 7 ：1 2 1 1 2 6 【1 6 c a t h e r i n es c h o r s c h c a t h e r i n gg a m i e r j e a n l o u i sd o u b l i e r c a r b o h y d r a t e p o l y m e r s l 乳1 9 9 77 3 4 ：1 6 5 1 7 5 j 1 7 b e r n a r dl a u n a y ，g e r a r dc u v e l i e r s s l o m o n m a r t i n e z r e y e s c e w b o h y d r a t 日 p o l y m e r st j l7 1 9 9 7 j3 4 ：3 8 5 3 9 5 1 2 3 4 羟蓠基蕊尔艘静翱备及隶征 ! 翳r b ，g a r c i a ，醚d eb o i n o s 盎c 。t 。a n d r a d e 。p o l y m e rb u l l e t i n 缀1 9 9 4 ， 3 2 ：1 1 l 一1 1 6 搀】y u r i ja a n t o n o v ，j a o q u e sl e f e b v r e ，j e a a - l o u i sd o a b l i e r ，j o u r n a lo f a p p l i e d p o l y m e rs c i e n c e i 办。1 9 9 9 。7 1 t 4 7 1 - 4 8 2 f 2 0 a ，r ，k n l k ”n i 记s s o p p i m a t h 矗t m a m i n a b h a v i p o l y m - p l a s t t e c h e 0 1 e n g 掘 2 0 0 0 ，3 9 ：4 3 7 4 5 6 【2 l jv a r l d i t ab p a l ，s a a da k h a n 、妇巾蛆v d r a t ep o l y m e r s 玩2 0 0 2 4 9 ：2 0 7 - 2 1 6 2 2 k a v i t t a u n k ，k u n jb e h a r ij o u r n a lo f 霹p p l i e d p o l y m e rs c i e n c e 蕊2 0 0 0 。7 9 ：3 9 - 4 4 2 3 a k a s ht a y a l v a n d i t ab p a i $ a a da k h a n m a c r o m o l e c u a r s 觚1 9 9 9 。 3 2 ：5 5 6 7 5 5 7 4 2 4 b 。r 。n a y a k ，r p si n 曲。e u r o p e a np o l y m e r 西u r n a l 屈2 0 0 1 。3 7 ：1 6 5 5 - 1 6 6 6 【2 5 jb ，r n a y a k ，r p s i n g h 、p o l y m e ri n t e r n o t i o n a l 舰2 0 0 1 5 0 ：8 7 5 8 8 4 2 6 b ，跫n a y a k 矗& p ；s i n g h j o u r n a l 醪a p p l i e dp o l y m e rs c i e n c e 级2 0 0 i ， 8 1 ：1 7 7 6 1 7 8 5 f 2 7 js h a i l e s hp p a t e l ，r a n j a ng ，p 8 t e l ，v i t h a ls p a e lb r i t f s hp o l y m e r 勇u r n a l 蕊 1 9 8 8 ，2 0 ：4 3 4 7 2 s j a r a g h e b ，虢k a m e l ，l ，a b de l t h a l o u t h ，s h 。n a s s a r d o k k i c a i r o ( e g y p t ) s t a r c h s t a r k e 融1 ；1 9 9 4 。4 6 ：4 4 3 - 4 4 6 2 9 t e l im d ，c h i p l u n k a rv t e x t i l ed y e ra n dp r i n t e z 棚1 9 ( 1 9 8 6 ) ：1 3 - 2 0 【3 0 p t a k a s ha 。；k a p o e rr + g y l l u l o s ec h e m i a # r ya n dv e c h n o l o g r 况1 9 8 4 ，t 8 ：2 0 2 - 2 1 2 3 i f r o l l i n i ee ：r e e dw ：m i l a sm ：r i n a a u d om c a t , b o h y d r a t ep o j v m e r s 胍1 9 9 5 ， 2 7 ( 2 ) ：1 2 9 1 3 5 3 2 y e h ，m i c h a e lh e u r , 忍a p p le p 6 3 2 0 5 7 【3 3 3u d n b a j p a i s a n d e e pr a i 知u r n a lo f a