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XN系列血液分析仪检测原理和临床应用 SysmexCorporation 1 检测原理 半导体激光的流式细胞术 波长633nm激光照射细胞获得前向散射光 FSC 侧向散射光 SSC 侧向荧光 SFL 将细胞进行计数和分类 FSC 反映细胞的大小SSC 反映细胞内颗粒物质的大小和多少SFL 反映细胞内核酸含量的多少这3种信号 运用独创性的数字技术和演算法 对细胞进行计数和分类 2 检测原理 3 检测通道及原理 XN的几个主要通道WNR WDF WPC RET PLT F通道 均采用核酸荧光染色和流式细胞技术 激光 分色镜 侧向荧光核酸和细胞器的种类和多少 侧向散射光细胞内部信息 前向散射光细胞的大小信息 WNR WDF WPC RET PLT F 4 核酸荧光染色技术 荧光强度与细胞的核酸含量成正相关 荧光染色后 荧光强度大小依次排列顺序为 异型淋巴细胞 原始细胞 幼稚粒细胞 单核细胞 淋巴细胞 粒细胞 晚幼红细胞 网织红细胞 网织血小板 聚集血小板 成熟红细胞 成熟血小板 5 XE系列 WBC BASO NRBC FSC FSC SFL SSC XN系列 NRBC BASO SFL NRBC BASO WBC FSC WBC WBC 1 2WNR通道通道 6 溶血剂 LysercellWNR染色液 FluorocellWNR WNR散点图 SFL 侧向荧光 FSC 前向散射光 检测参数WBC NRBC BASO报警信息PLTClumps NRBCPresent WBCAbnormalScattergram 嗜碱性粒细胞 淋巴细胞 单核细胞 粒细胞 中性粒细胞 嗜酸性粒细胞等 有核红细胞 红细胞 弱 中 强 极弱 极弱 中 中 强 侧向荧光 SFL 前向散射光 FSC 细胞膜通过溶血 荧光 1 2WNR通道通道 7 无论CBC模式还是在CBC DIFF模式 仪器均能自动检测NRBC 并修正白细胞计数及分类的结果 由于采用荧光染色法进行白细胞的计数 所以不再存在难溶红细胞 脂肪颗粒 聚集血小板对白细胞计数造成的干扰 不再有 RBCLyseResistance 的报警 WNR通道的要点 8 NRBC 案例1 有核红细胞 9 镜检 NRBC10 和仪器结果基本一致 通过XN仪器的检测 在做常规的CBC DIFF检测时即可得到NRBC的结果 自动修正白细胞计数 对儿童 血液病病人的检测非常重要 相较于其他仪器NRBC报警后需人工镜检修正白细胞数量 XN可减少镜检工作量 缩短报告时间 对妇幼 儿童医院非常实用 案例1 有核红细胞 10 案例2 乳糜或难溶红细胞 XE 2100的BASO通道出现胡须样散点图 仪器报警 RBCLYSERES 白细胞结果打 号 WBC结果为8 92 11 XE 2100的DIFF通道白细胞结果为5 57 12 XN检测WNR通道白细胞结果 WNR通道采用核酸荧光染色 XE 2100的胡须样散点因为荧光强度低 在散点图上靠左侧分布 不影响WBC结果 WBC为6 01与XE 2100中WBC D5 57结果一致 XN的WBC结果抗干扰能力比XE强 13 XE系列 XN系列 采用新的溶血素 使白细胞破坏程度下降 尽量保持原型 从而和XE相比较 LYMPH和MONO的散点群更加明确地得以划分 大大降低白细胞分类不出结果的概率 WDF通道道 14 溶血剂 LysercellWDF染色液 FluorocellWDF WDF散点图 SSC 侧向散射光 SFL 侧向荧光 检测参数NEUT LYMPH MONO EO IG报警信息Atypicallymph Blast AbnLymph IGpresent PLTClumps WBCAbnormalScattergram WDF通道道 15 WDF通道中 对白细胞进行计数并分类为中性粒细胞 淋巴细胞 单核细胞以及嗜酸性粒细胞 同时定量检出幼稚粒细胞 IG 以及异型淋巴细胞 HFLC 等的异常细胞 使用价值 对IG和异淋异常报警的复检规则制定更具定量化 有效降低复检率 WDF通道道 16 案例1 IG定量结果 17 IG镜检结果 IG 6 18 案例2 HFLC异型淋巴细胞 19 HFLC仪器结果3 8 镜检结果 2 20 溶血剂 LysercellWPC染色液 FluorocellWPC WPC散点图 SSC 侧向散射光 SFL 侧向荧光 FSC 前向散射光 Blast AbnLymph 参数 HPC 参考参数 报警 Abnormallymph Blasts Atypicallymph WPC通道 21 案例5 髓系白血病李某某 女 确诊慢性粒细胞白血病 首次检测采用CBC DIFF模式检测 仪器报警 Blasts AbnLympho 22 23 镜下可见髓系幼稚细胞 最后确诊为慢性粒细胞白血病 利用WPC通道 可对原来报警进行确认 提高检测特异性 还可对白血病进行初步筛查及分型 淋系 髓系 24 案例6 淋巴系白血病 25 Countresultsarebasicallyunsuspicious B 慢性淋巴细胞白血病 在外周血或骨髓中见到有特征性的多毛细胞细胞化学 酸性磷酸酶 ACP 染色阳性且不被酒石酸 TRAP 抑制 PAS阳性 免疫表型 sIg CD19CD20CD22CD11CCD25CD103 26 XN系列改变了XE2100每个标本都要使用IMI通道的检测方式 结合REFLEX功能 用户可以设定一定的复检规则 有针对性的使用WPC通道 该通道同样采用核酸荧光染色的方法 利用原始淋巴细胞和原始髓细胞表面磷脂含量的差异 在特定的溶血素作用下 原始淋巴细胞呈高荧光强度 而原始髓细胞呈低荧光强度 易达到初步鉴别淋巴系或髓系的白血病 WPC通道的要点 WPC通道反映的是 在试剂中细胞的状态而不是在体内细胞的状态 Blast在试剂中反应不大所以 细胞膜上不易开孔而难染色 导致它出现在体积较大 荧光强度较低的区域里 相反 AbnLymph在试剂中受试剂影响大 与染色性较强 所以出现在体积较小 荧光强度强的区域 主要作用 1 白血病的初步筛选 2 降低复检率 3 HPC的定量检测 用于PBSCT干细胞采集时间的判断 27 稀释剂 CELLPACKDFL染色液 FluorocellPLT PLT F散点图 SFL 侧向荧光 FSC 前向散射光 参数 PLT IPF报警PLTAbnormalscattergram PLTClumps PLT F通道 28 SFL SFL FSC PLT O XE PLT F XN FSC PLT F PLT O IPF IPF LowersizePLT LowersizePLT PLT F与PLT O的主要区别 1 荧光染料的改变 PLT F的荧光染料以噁嗪为主 可以有效去除白细胞碎片 红细胞碎片 小红细胞的干扰 2 计算机分析方式的改变 避免样本中存在的微小血小板的漏检 PLT F与PLT O的区别 29 在PLT F通道 使用了不同于RET通道的荧光色素 由于选择性染色血小板 故网织红细胞难以染色 另外 也不易受到红细胞碎片的影响 即使是血小板低值样本 也可高精度检测 IPF仅在PLT F通道可以检测 由于在RET通道无法检测 因此未搭载PLT F通道的仪器类型 无法检测IPF PLT F通道的要点 30 案例7 8 小红细胞 碎片 仪器提示 小红细胞 从直方图看红细胞峰左移 血小板直方图异常 尾部抬高 初步判断是小红细胞或者红细胞碎片干扰 PLT结果为541 10 9 L 31 镜检 可见大量小红细胞及碎片 32 加做PLT F 排除部分细胞碎片 血小板结果降低为179 10 9 L 33 第一次检测 案例9 巨大血小板 张XX ITP病人 经过治疗11天后 外周血出现较多巨大血小板 XN首次检测血小板为15 10 9 L 血小板直方图异常 触发了REFLEX规则加做PLT F通道检测血小板 执行了第二次检测 PLT结果为80 10 9 L 利用DI60阅片可见巨大血小板 PLT F通道的结果更接近镜检结果 避免血小板假性减少而给临床错误判断 为临床提供的准确的参考依据 34 第二次检测 血小板低 仪器触发3R复检规则 自动进行第二次检测 PLT结果为80 10 9 L 35 利用DI60自动阅片机阅片镜检 可发现大量大血小板 36 XN的自动计数复检功能 3R 3R是指XN系列的三个复检方式仪器可以根据规则判定结果 执行 Repeat 分析 Rerun 分析 Reflex 分析以获得第二次分析结果 37 用户可以根据本医院病人的特点 设定LW的自动复检规则 有助于提高低值白细胞时的精密度和准确性LW模式通过增加细胞分析的颗粒数 使低值白细胞时的报警能力也能提高 避免白血病的漏检该复检方式有助于减少人工审核带来的漏检风险 使检测流程更加规范 LW检测模式的要点 38 案例10 LW模式 没有异常细胞报警 39 LW模式出现Blast AbnLymph REFLEXLW 40 镜检看到原始细胞 41 WBC低值标本 3R工作流程 5 6x10 4 uL WBC报警 触发Reflexf规则 仪器自动复检 LW模式CBC DIFF WPC 数量由仪器低值模式确认 异常细胞由WPC 幼稚细胞通道 确认无异常 42 XN体液散点图 XE 5000体液散点图