医学科研课题设计与基金申报.ppt

浅谈科研课题设计思路 血压调节神经机制研究思路 武宇明河北医科大学基础医学研究所生理学研究室wuphy 选题设计观察和实验 实施 资料整理和数据分析总结 论文报告 提出假设 研究结果 检验假设 科研的基本程序 科研选题 选题的重要性 选题的重要性 成败的关键 提出课题比解决课题更难 wellbegun halfdone 良好的开端是成功的一半 科研选题 选题的重要性 水平的标志 能否提出重要问题和是否能想出新的解决办法 代表了科学素养 初学者应当循序渐进 前进的足迹 自我设计的里程碑 确立研究方向 科研选题 原则 科学性 国内外研究现状和发展趋势创新性 新技术 新理论创新性是科学研究的核心 是衡量研究水平高低的主要标准 实用性 基础研究也应具备应用前景可行性 选题的可操作性 科研选题 选题的步骤 选题的步骤 课题提出 被动和主动 实践积累 导师 文献 课题分析 必要性 目标 范围 目的 意义 环境 初步调查 可能性 技术和资源条件 开题报告 书面方式报告选题的目的 意义 依据 初步的方案等等 选题举例 文献资料 工作基础 大量研究表明 雌激素对于心血管系统具有重要的保护作用 然而 随着研究的进展 hrt所带来的不良后果如生殖系统肿瘤及乳腺癌发生 子宫内膜增生 高血凝状态等已愈来愈受到人们的关注 这些不良效应在一定程度上影响了其推广应用 因此 人们致力于寻求雌激素的替代物 期望这种替代物能保留雌激素对心血管系统等的保护作用 同时避免上述的不良影响 这类物质被称做选择性雌激素受体调质 植物雌激素正是其中之一 问题 1 植物雌激素是否能与雌激素 17 雌二醇 一样地调变动脉压力感受器活动及其反射效应 2 植物雌激素是否同样能调变中枢交感神经元的活动 提出课题 植物雌激素对老年雌性大鼠动脉压力感受器反射和交感中枢的调变作用 交感系统的激活 交感紧张性升高是高血压发病的原因之一 降低交感系统的紧张性将是治疗高血压的有效途径 交感系统紧张性的调节一方面来自于外周压力感受性反射传入冲动 另一方面交感中枢神经元本身的活动均可调节交感的传出的紧张性 从而调节心脏和血管的活动 进而调节血压 因此探讨压力感受性反射和交感中枢神经元的活动将是研究治疗高血压的靶点之一 选题举例 文献资料 工作基础 与正常大鼠比较 自发性高血压大鼠的颈动脉窦压力感受性反射的调节能力是下降的 研究发现内源性h2s是维持机体基础血压稳定的重要因素 在cse基因敲除的小鼠模型中 缺失cse基因的小鼠的血浆 主动脉 心脏及其他组织h2s水平明显下降 而血压却显著升高 血管的舒张功能减弱 选题举例 文献资料 工作基础 一 硫化氢是否可以降低自发性高血压大鼠的血压 如果可以 是否可通过降低交感传出活动 从而降低对外周阻力血管的紧张性调节 二 硫化氢是否可以易化shr大鼠的窦神经放电 可以降低压力感受性反射的闭环工作点 增加压力感受反射的传入冲动从而降低交感中枢紧张 三 硫化氢对交感中枢神经元的直接调节作用是怎样的 是否抑制rvlm区神经元的放电 其离子机制如何 选题举例 文献资料 工作基础 课题设计 科研设计 在进行具体研究前 对将要进行的课题工作进行全面的 科学的规划 制定出研究课题的具体实施方案 科研设计是科研的灵魂严密的设计是取得有价值结果的先决条件从这个意义上说没有 设计 就没有科研 科研设计内容 有标准的处理因素 硫化氢的应用选择合适的研究对象 自发性高血压大鼠制定可靠的测量指标 血压 神经元放电 交感传出活动 压力感受反射 神经元上的离子电流变化选择科学的统计分析方法 实验研究的基本要素 降压手段 高血压动物 血压值 三要素 1 处理因素 2 受试对象 3 实验效应 其他因素 其他效应 受试对象 人动物微生物细胞分子基因 医学科研设计的基本原则 对照的原则 目的在于鉴别出试验组的效应 消除和控制非试验因素 消除或减少试验误差或偏倚 阴性对照 阳性对照随机的原则 使总体中各观察对象被抽中的机会均等 保证各试验组的非试验因素均衡化 重复的原则 目的是估计试验误差 提高试验结果的可靠性 对照原则的常用对照方法 空白对照安慰剂对照实验对照相互对照标准对照自身对照历史对照 课题论证内容 立题依据是否充分研究方案是否先进和科学有无创新性或特色是否可行预期结果和效益 中国知网 维普网 万方数据库 medline 美国国立医学图书馆 斯坦福大学图书馆 课题实施 预试验 在正式实施研究方案前 应先在小范围作一次预试验 其目的是检验试验设计的科学性和可行性 以免由于设计不周 盲目开展试验而造成人力 物力和财力的浪费研究方案正式实施 科研课题申报书的撰写 项目类别 基础研究探索未知 认识自然现象 揭示客观规律 不具备特定的商业目的推动社会进步 一旦重大突破 对社会 经济影响巨大只讲世界第一 不讲国内第一以发表论文的水平及被同行引用的次数为评价的标准应用研究 项目类别 应用基础研究是应用研究中的基础性工作 围绕重大或广泛的应用目标探索新原理 新方法 开拓新领域的定向研究医学科研项目 课题多属此类研究 防病治病 优生优育和人类健康 应用研究应用目的明确 为进一步发展某一技术 提高生产率解决疾病的诊断 治疗 预防 控制 康复等问题开发研究是科学知识转化为生产力的主要环节技术革新 工艺改造 产品更新 项目和具体课题名称 确定课题名称宜小不宜大确定课题名称要有创新意识课题名称表述中明确 突出一般以15 20个汉字为宜 在题目中应尽量不用缩写 化学分子式等夸大措辞 题目有问题的项目 中草药抗菌的免疫调节研究胃肠道疾病的病理 生理和药理胸心外科手术中的暂时替代功能临床观察研究生化检验检测在糖尿病病人尿蛋白中的临床意义观察研究老年相关疾病干预控制的研究项目 主题词 科学的规范参考 医学主题词树状结构表 参考 医学主题词著录规范 参加人员情况 知识结构合理学历层次合理年龄结构合理人数适当以真正参加人员为主真实签名 摘要 名片式 400字以内 概述研究方法 内容 目标 科学意义简明扼要 实词假设评审专家没有足够的时间看后面的内容 也能把握整个标书的主要内容如 用 方法 手段 进行 研究 探索 证明 问题 对阐明 机制 揭示 规律有重要意义 为 奠定基础 提供 思路 植物雌激素对老年雌性大鼠动脉压力感受器反射和交感中枢的调变作用 由颈动脉窦区在体隔离灌流和电生理技术 研究以三羟异黄酮为代表的植物雌激素对老年雌性大鼠的动脉压力感受器活动及其反射的调变作用 以神经元电活动的细胞外引导和微量注射技术 观察植物雌激素对老年雌性大鼠脑干交感中枢神经元的直接作用 通过以上实验 不仅能阐明植物雌激素对老年雌性大鼠的心血管效应和中枢作用 而且有助于了解其对心血管保护作用的生理学基础 采用自行设计的大鼠颈动脉窦区压力感受器在体隔离灌流技术 目前国内外尚无类似的研究报道 通过颈动脉内注射植物雌激素 以及向延髓腹外侧头端和尾端分别微量注射植物雌激素所诱发的心血管活动和肾神经放电的变化 得以确定植物雌激素对交感中枢的直接作用 观察植物雌激素调变压力感受器及其反射活动 还能直接抑制延髓内的交感神经元 则这两方面作用综合在一起即可明确植物雌激素对老年雌性大鼠心血管系统保护作用的主要神经机制 此项结果独特而有新意 植物雌激素对老年雌性大鼠动脉压力感受器反射和交感中枢的调变作用 硫化氢对缺血心肌保护作用的细胞机制研究 已有研究发现内源性硫化氢 hydrogensulfide h2s 是维持机体基础血压的重要因素 内源性h2s水平的降低是自发性高血压 肺动脉高压等形成的重要原因 本课题在心肌缺血 再灌注损伤的动物模型上观察硫化氢对缺血心肌细胞损伤及凋亡的影响及其机制 用全细胞膜片钳技术观察硫化氢对豚鼠缺血心室肌细胞的动作电位 l 型钙离子电流和atp敏感性钾电流的影响及其机制 应用激光共聚焦显微镜观察硫化氢对缺血心室肌细胞内钙离子浓度的影响及其机制 通过以上实验不仅能揭示硫化氢对缺血心肌的保护作用并可探讨其心肌保护作用的细胞机制 此研究首次观测外源性硫化氢对缺血心肌细胞的损伤及凋亡的保护作用并探讨这种保护作用与凋亡基因相关蛋白fas bcl2和bax表达的关系 首次观察硫化氢对缺血心室肌细胞的动作电位及l 型钙离子电流影响和atp敏感性钾电流的影响及确切机制 并直接观察到硫化氢对缺血心室肌细胞内钙离子浓度的影响及其机制 本课题从在体动物到细胞水平 离子通道水平上逐步探讨了硫化氢对心脏保护作用及其机制 为外源性给于硫化氢干预高血压 肺动脉高压形成及治疗心血管疾病的临床应用提供理论依据 硫化氢对自发性高血压大鼠动脉压力感受性反射和交感中枢调控机制的研究 高血压的患病率逐年升高 交感系统紧张性升高是重要的发病因素之一 外周压力感受反射的钝化及交感中枢紧张性的增高会导致交感传出增多 降低交感紧张性是治疗高血压的有效途径 硫化氢为内源性的气体信号分子 高血压动物体内硫化氢水平降低 延髓腹外侧头端在维持交感紧张和压力感受反射调节中均具有重要意义 本实验采用自发性高血压动物模型 记录清醒动物血压和肾交感传出神经放电 观察硫化氢的降压和降低交感传出冲动作用 在体隔离灌流颈动脉窦记录窦神经放电和压力感受反射 观察硫化氢对压力感受反射的调节作用 从脊髓背根注射荧光染料 在延髓腹外侧头端找到压力感受反射传入的中枢神经元 分离神经元 用脑片膜片钳记录神经元离子电流变化 探讨硫化氢对交感中枢神经元调控作用的离子机制 本实验通过分别从整体神经 局部神经元放电 离子通道电流记录等方法探讨硫化氢对交感系统调节作用及其离子机制 为硫化氢防治高血压提供理论基础 科研计划书 立题依据 国内研究现状国外研究现状面临的问题和发展趋势课题的意义 立题依据格式 项目描述及发展趋势国内外治疗措施及存在的优缺点自己研究的项目有什么优点和缺点开展本项目研究的意义主要参考文献 真实 研究目标 明确 解决什么问题 明确硫化氢对缺血心肌的保护作用 明确硫化氢对缺血心肌保护作用与凋亡基因相关蛋白的关系 明确硫化氢心肌保护作用的电生理机制 明确硫化氢心肌保护作用的细胞内机制 研究内容 要表述你要做什么 简洁第一部分 整体水平实验 硫化氢对家兔心肌缺血 再灌注损伤的影响及机制第二部分 器官和离子通道水平实验 硫化氢心肌保护作用的电生理机制研究第三部分 细胞水平实验 硫化氢对心室肌细胞内和线粒体内钙离子浓度的影响及其机制拟解决的关键性问题 1 2个 科研计划书 课题研究目标 研究内容和拟解决的关键性问题 硫化氢对自发性高血压大鼠动脉压力感受性反射和交感中枢调控机制的研究 研究目标 明确 解决什么问题 1 明确硫化氢对自发性高血压大鼠的血压的降压作用 2 降压调节中的压力感受性反射传入冲动的变化和对交感中枢神经元自发放电的影响 3 揭示对压力敏感的中枢神经元电活动调控的离子机制 研究内容 要表述你要做什么 简洁第一部分 硫化氢对清醒的自发性高血压大鼠血压和肾神经传出放电活动的影响 明确慢性应用硫化氢可降低自发性高血压大鼠血压和肾神经交感传出活动 第二部分 硫化氢对自发性高血压大鼠动脉压力感受器活动的影响 压力感受器水平的调节 第三部分 硫化氢对自发性高血压大鼠交感中枢神经元活动的影响 中枢水平的调节 神经元放电活动的调节离子通道水平的调节 硫化氢对自发性高血压大鼠动脉压力感受性反射和交感中枢调控机制的研究 拟采取的研究方法 技术路线及其可行性分析 研究方法 要表述你怎样做 写清楚你如何来完成这一研究项目的具体实施步骤 过程 程序 研究方法等 内容要具体技术路线 流程表的形式可行性分析 技术 设备 经费及时间 技术路线 科研计划书 计划进度 预期成果及效益分析 计划进度 分阶段完成的科研任务 年 月 年 月完成 任务预期成果 论文 论著 专利 批文等效益分析 社会效益 经济效益 包括有关的工作积累 近年来取得的科研成绩 主要设备和保障措施工作积累 申请者和项目组成员的学历与研究简历 已发表的与本项目有关的论文 论著 已获得的学术奖励情况以及承担或参与过相关的科研课题等主要设备 开展本课题具有的仪器设备保障措施 设备 经费与时间的保障 科研计划书 研究基础 根据科研工作开展计划编制预算经费预算总额 仪器设备 试剂 试验动物 其他仪器设备试剂试验动物其他 临床观察随访及特殊检查费用 经费预算总额 单位自筹 其他渠道资助 申请经费单位自筹 应当提供出资证明及其他相关财务资料其他渠道资助 应提供出资证明及其他相关证明资料申请经费 要尽量少 做到真实 合理 科研计划书 经费计算 课题申报 省市相关科研项目 国家自然基金国家科技计划申报中心部级课题教育部科技部卫生部省级科研课题省自然科学基金课题 省科技计划项目 厅局级科研课题 课题申请程序 了解申报要求选题查新撰写申请书 获得基金资助情况 获得基金资助情况 获奖情况 主要研究参与心血管保护作用的生物活性物质 特别是对心血管系统内感受器机能的调节 业已发表研究论文30余篇 sci收录9篇 在国内居领先地位 研究内容一 植物雌激素对老年雌性大鼠动脉压力感受器反射和交感中枢的调变作用 该研究得到国家基金项目 3040051 和河北省自然基金 303467 的资助 可对于开发植物雌激素类的药物 用于预防及治疗妇女绝经期后心血管发病率升高 上述成果已发表10篇研究论文 sci收录3篇 国家级核心期刊7篇 证明植物雌激素对颈动脉窦压力感受器活动有抑制作用 在国内外首次提出了植物雌激素保护心血管活动的血压调节机制 genisteininhibitscarotidsinusbaroreceptoractivityinanesthetizedrats actapharmacolsin 2005 jul 26 7 840 844 sciif1 677 颈动脉灌流三羟异黄酮 50 mol l 时abp的反射性变化的原始记录图 植物雌激素三羟异黄酮抑制麻醉大鼠颈动脉窦压力感受器反射 生理学报 2002 54 4 354 358 从肾神经放电方面证明了植物雌激素对交感中枢传出效应有抑制作用从而明确了植物雌激素心血管保护作用的中枢传出机制 不同浓度gst对海马ca1区神经元放电活动的抑制作用及量 效关系 从抑制中枢神经元活动的角度证明植物雌激素对中枢神经元有保护作用 阐明了植物雌激素对交感中枢神经元保护的电生理机制 effectsofgenisteinonneuronaldischargesinparaventricularnucleusofrathypothalamicslices chinesejpharmacandtoxic 2007 21 3 effectsofgenisteinonneuronaldischargesinrathippocampalca1area neuroscibull 2005 21 6 380 384 gst对下丘脑室旁核神经元通过降低其活动而具有保护作用 这种作用与钾电流有关 似与其激动girks促进k 外流引起细胞膜超极化以及no产生增加有关 effectsofgenisteinonneuronaldischargesinparaventricularnucleusofrathypothalamicslices chinesejpharmacandtoxic 2007 21 4 241 246 气体分子硫化氢对缺血 再灌注心肌的保护作用 研究得到教育部新世纪优秀人才支持计划和河北省自然基金 河北省杰出青年基金的资助 c200700821 气体分子硫化氢对缺血 再灌注心肌的保护作用 外源性给予h2s 可通过兴奋katp通道促进k 外流 同时通过抑制ca2 内流 进而影响豚鼠乳头状肌电生理效应 论文发表 xum wuym etal electrophysiologicaleffectsofhydrogensulfideonguineapigpapillarymuscles actaphysiolsin 生理学报 2007 59 2 215 220 图3不同浓度的h2s对豚鼠乳头肌动作电位的影响 气体分子硫化氢对缺血 再灌注心肌的保护作用 研究内容二 硫化氢对家兔窦房结起搏细胞的电生理活动的影响 xum wuym etal electrophysiologicaleffectsofhydrogensulfideonpacemakercellsinsinoatrialnodesofrabbits actaphysiolsin 生理学报 2008 60 2 175 180 通讯作者 硫化氢对人心房肌电生理活动的影响 effectsofh2sontransmembraneactionpotentialsofhumanatrialfibers a control b nahs50 mol l c nahs100 mol l d nahs200 mol l e washout therecordswerefromthesamecell similarresultswereobtainedinotherscells h2s对人心房肌细胞的电活动起负性的抑制作用 其主要是通过增加katp通道的开放和抑制钙离子内流所实现 内源性h2s可以在心房肌细胞由cse介导所产生 且作为调节人心房肌细胞电生理活动的重要因子之一 硫化氢对人心房肌电生理活动的影响 论文发表 xum wuym 通讯作者 etal electrophysiologicaleffectsofhydrogensulfideonhumanatrialfibers chinmedj 2011 124 21 3455 3459 硫化氢抗豚鼠心肌心律失常发生的作用 fig 1originalrecordingshowingtheeffectsofh2sonouabaininduceddelayedafterdepolarization dad andtriggeredactivity ta inguineapigpapillarymuscle a controlb ouabain 1 mol l c ouabain 1 mol l nahs 100 mol l nahs预处理使迟后去极化的潜伏期延长 幅值下降 时程缩短 触发活动的发生率明显下降 预先应用格列苯脲部分阻断nahs的作用 bayk8644预处理可完全阻断nahs的作用 l name预处理对nahs的作用无影响 h2s具有抑制乳头肌迟后去极化及触发活动的作用 其机制可能与兴奋atp敏感的钾通道促进k 外流 抑制ca2 内流有关 论文发表liuhx xum guoq xuehm wuym effectsofhydrogensulfideonouabain induceddelayedafterdepolarizationandtriggeredactivityinguineapigpapillarymuscles 中华医学杂志 2011 91 43 3050 3053 硫化氢抗豚鼠心肌心律失常发生的作用 压力感受性反射 压力感受器活动 h2s h2s 硫化氢对麻醉大鼠颈动脉窦压力感受性反射的影响 xiaol wuym zhangh liuyx herr hydrogensulfidefacilitatescarotidsinusbaroreflexinanesthetizedrats actapharmacolsin 2006 27 3 294 298 sci收录 if20061 125 硫化氢对麻醉大鼠颈动脉窦压力感受器活动的影响 xiaolin wuyu ming wangru liuyi xian wangfu wei herui rong hydrogensulfidefacilitatescarotidsinusbaroreceptoractivityinanesthetizedmalerats chinesemedicaljournal 2007 120 15 1343 1247 sci收录 fig 1originalrecordingshowingtheresponsesofisnatointrasinusperfusionwithnahs 50 mol l a control b nahs c washout 延髓腹外侧 rvlm 延髓腹外侧头端微量注射硫化氢对麻醉大鼠的交感传出活动的影响 py锥体束tr斜方体n xii舌下神经n vii面神经pgl巨细胞旁核rvl腹外侧核 microinjection rsna bp hr 1 延髓腹外侧区组织定位图 fig 1mocroinjectionsiteinthervlm a rvlm caudaltothetrapezoidbodies lateraltothepyramidandrostraltotherootletsofthe nerveb pyramid rvlm b a h2s对麻醉大鼠血压 心率和肾神经放电活动的影响 fig 2originaltracingshowingtheeffectsof4mmol l 50nl nahsmicroinjectedintothervlmonbp hrandrsna microinjectionofh2s theexpressionofcbsinrvlm theyellow browncytoplasmrepresentedpositivesignalsofcbsexpression a 40 b 100 c 400 a b c rvlm rvlm cbs 免疫组化检测延髓腹外侧cbs的表达 guoq jins wangxl wangr xiaol herr wuym hydrogensulfideintherostralventrolateralmedullainhibitssympatheticvasomotortonethroughatp sensitivek channels jept 2011 338 2 1 9 onlinepublished sci收录 if4 093 hydrogensulfideintherostralventrolateralmedullainhibitssympatheticvasomotortonethroughatp sensitivek channels jept 2011 338 2 458 465 sci收录 if4 093 通讯作者 hydrogensulfidedefendsagainstthecardiovascularriskofnw nitro l argininemethylester inducedhypertensioninratsviathenitricoxide endothelialnitricoxidesynthasepathway chinmedj 2014 127 21 3751 3757 sci收录 if20131 106 通讯作者 electrophysiologicaleffectsofhydrogensulfideonhumanatrialfibers chinmedj 2011 124 21 3455 3459 sci收录 if20110 983 通讯作者 microinjectionofresveratrolintorostralventrolateralmedulladecreasessympatheticvasomotortonethroughnitricoxideandintracellularca2 inanesthetizedmalerats actapharmacolsin 2008 29 8 906 912 sci收录 if1 677 通讯作者 hydrogensulfidefacilitatescarotidsinusbaroreceptoractivityinanesthetizedmalerats chinmedj 2007 120 15 1343 1247 通讯作者 sci收录 if20070 615 urotensiniiinhibitscarotidsinusbaroreflexinanesthetizedmalerats actapharmacolsin 2007 28 2 216 220 sci收录 if20061 677 第一作者 hydrogensulfidefacilitatescarotidsinusbaroreflexinanesthetizedrats actapharmacolsin 2006 27 3 294 298 通讯作者 sci收录 if20061 677 genisteininhibitscarotidsinusbaroreceptoractivityinanesthetizedmalerats actapharmacolsin 2005 26 7 840 844 通讯作者 sci收录 if20051 677 effectsofurotensiniionelectricalactivityofparaventricularneuronsinrathypothalamicslices chinjneuroana 2007 23 3 24