液质联用仪原理及操作注意事项ppt课件.pptx

液质联用仪原理及操作注意事项 LDD 1 液质联用技术简介 2 液质联用技术简介 3 主要内容 4 一 质谱的系统结构示意图 5 质谱系统各部件介绍 1 离子源 产生离子化 并将产生的离子在电场的作用下进入毛细管 3 离子光学组件 包括skimmer1 八级杆以及Len1和Len2 进一步除去溶剂和中性分子 高效的离子传输组件 聚焦随机运动的离子进入四级杆 2 毛细管 离子导入通道 将离子源产生的离子传输进入质谱 同时隔离外部的常压与质谱内部的高真空 4 四级杆MS1和MS2 质量过滤器 优化离子传输和质谱分辨率 可以选择让某些质荷比的离子一次通过或者所有离子全通过 5 碰撞池 高压碰撞池 优化裂解 六级杆设计有助于捕获碎片离子 6 检测器 包括高能打拿级和电子倍增器 增强信号 高增益 6 ESI离子源的原理 ESI将溶液中的离子转变为气相离子三大步骤 1 在喷雾毛细管尖端产生带电雾滴2 通过溶剂蒸发和雾滴分裂使带电雾滴变小 这一过程反复进行 直至生成很小的带电雾滴3 由很小带电雾滴产生气相离子 特点 1 直角喷雾离子源设计 大大减少了未离子化的中性液滴进入质谱中 降低噪音 保证毛细管和离子光路更干净 抗污染 2 反吹干燥系统 加速喷雾的溶剂挥发 减少溶剂簇和流动相的附加离子 在standby状态时 仍维持一定的干燥气温度和流量 避免空气吸入质谱真空系统 极大的减少了污染 7 库伦爆炸 原理 带有被测物质离子的流动相在雾化针尖端发生雾化 液滴表面富集带同种电荷的离子 内部带相反电荷聚集 形成带电液滴细的喷雾 在电场的作用下 飞向毛细管 加热的氮气干燥气体反向流动 带走液滴中的中性溶剂分子 从而收缩液滴 直至排斥的静电力超过液滴表面张力 引起库伦爆炸 过程不断重复 待分析物离子最终变成气态进入毛细管 8 MS2Scan MS2SIM ProductIonScan MRM 二 定量方法的开发 逻辑顺序 9 10 11 12 13 三 液质操作系统的注意事项 1 2 3 4 流动相 14 三 液质操作系统的注意事项 1 2 3 反相色谱柱 15 三 液质操作系统的注意事项 检测器的选择 16 三 液质操作系统的注意事项 正离子模式 负离子模式 正负离子模式选择的一般原则 17 四 质谱系统的日常维护及故障排除 维护周期 18 四 质谱系统的日常维护及故障排除 1 冲洗雾化气组件样品运行结束后 可以使用90 乙腈 10 水 把质谱设置on 冲洗三分钟 可以有效除去雾化器以及质谱切换阀内痕量的样品残留 当雾化器较脏时 可取下雾化器 使用合适的 可以充分溶解可能的样品残留的溶剂超声 雾化器尖端不可接触到容器壁 19 四 质谱系统的日常维护及故障排除 2 清洗电喷雾雾化室将仪器设置为standby 待离子源温度冷却后 用50 异丙醇 水溶液浸湿无尘布 擦拭弧形电极和喷雾挡盖以及周围 切禁直接对着毛细管末端冲洗 压力会增大 造成涡轮泵负载急剧增加 容易损坏涡轮泵 20 四 质谱系统的日常维护及故障排除 3 打开气镇阀必须每周逆时针拧开气镇阀到底 维持20 30min 把油气分离器内多余的泵油放回泵内 然后顺时拧紧 关闭气镇阀 关机前务必确认气镇阀处于关闭状态 否则泵油可能因此回流到质谱的真空腔内 损坏仪器 21 四 故障排除 信号低 质量准确度差 雾化器出口是小液滴而不喷雾 无