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专题4生物技术在其他方面的应用 知识梳理 一 植物的组织培养技术1 菊花的组织培养过程 制备 固体培养基 外植体消毒 培养 栽培 2 月季的花药培养 ms 接种 移栽 脱分化 胚状体 愈伤组织 再分化 丛芽 生根 二 dna和蛋白质技术1 dna的粗提取与鉴定 1 提取原理 dna和蛋白质等其他成分在不同浓度的nacl溶液中 不同 在nacl溶液浓度为 mol l时 dna的溶解度最小 dna不溶于 但是细胞中某些蛋白质则溶于酒精 2 主要步骤 选取实验材料破碎细胞 获取含 的滤液去除滤液中的杂质dna的 3 dna的鉴定 dna 二苯胺 蓝色 溶解度 0 14 dna 析出与鉴定 酒精 沸水浴 2 多聚酶链式反应扩增dna片段 1 pcr原理 反应场所 在一定的 中 反应条件 提供 模板 分别与两条模板链相结合的两种 四种脱氧核苷酸 耐热的 过程的控制 控制 使dna复制在体外反复进行 2 pcr过程 pcr一般要经历 多次循环 每次循环可以分为 和 三步 3 pcr结果 两引物间固定长度的dna序列呈 扩增 即 缓冲溶液 dna 引物 dna聚合酶 温度 30 变性 复性 延伸 指数 2n 3 血红蛋白的提取和分离 1 常用的分离方法 法 凝胶电泳法等 2 纯度鉴定 一般用 方法来测定蛋白质的相对分子质量 该方法电泳时蛋白质分子的迁移率主要取决于 凝胶色谱 sds 聚丙烯酰胺凝胶电泳 蛋白质分子的大小 三 植物有效成分的提取1 提取玫瑰精油实验 1 方法 法 2 实验流程 水蒸气蒸馏 水蒸气蒸馏 nacl 无水na2so4 2 提取橘皮精油的实验 1 方法 一般采用 法 2 实验流程 石灰水浸泡 漂洗 压榨 过滤 静置 再次过滤 橘皮油 压榨 3 胡萝卜素的提取 1 胡萝卜素性质 水 微溶于乙醇 石油醚等有机溶剂 2 提取方法及流程 方法 法 最适宜作萃取剂 实验流程 胡萝卜 粉碎 萃取 浓缩 胡萝卜素 3 鉴定方法 法 不溶于 易溶于 萃取 石油醚 干燥 过滤 纸层析 盲点判断 1 2011 江苏高考t16b 二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株 2 2012 广东高考t2a 培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是组织培养 3 2013 江苏高考t4a 进行dna粗提取和鉴定实验时 加入洗涤剂后用力进行快速 充分的研磨 4 2012 江苏高考t18a 洗涤剂能瓦解细胞膜并增加dna在nacl溶液中的溶解度 5 2013 北京高考t5d pcr呈指数扩增dna片段是因为上一轮反应产物可作为下一轮反应模板 6 蒸馏法的实验原理是利用水将芳香油溶解下来 再把水蒸发掉 剩余的就是芳香油 盲点判断点拨 1 二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到的是单倍体 单倍体是高度不育的 不能产生后代 2 草莓脱毒苗的培养采用了茎尖组织培养的方法 3 进行dna粗提取和鉴定实验时 为防止dna分子断裂 应该是加入洗涤剂和食盐后进行轻缓 充分的搅拌和研磨 4 洗涤剂可以溶解细胞的细胞膜 去除脂质和蛋白质 但不能增加dna在nacl溶液中的溶解度 5 pcr呈指数扩增是因为dna的半保留复制 所以上一轮的产物可作为下一轮的模板 这是pcr呈指数扩增dna片段的原因 6 蒸馏法是利用水蒸气将挥发性较强的芳香油携带出来 再用分液漏斗使油水分离 网络概览 考点一植物的组织培养1 植物细胞全能性表达的条件 1 离体状态 2 适宜的营养物质 大量元素 微量元素等无机营养和有机营养 3 植物激素 生长素 细胞分裂素 4 适宜环境条件 温度 ph和光照条件 5 无菌条件 2 植物组织培养技术和花药离体培养技术的比较 3 影响植物组织培养的主要因素 1 培养材料 不同植物的影响 不同的植物组织 培养的难易程度差别很大 容易进行无性繁殖的植物也容易进行组织培养 同一植物发育状况 保存状况的影响 同一种植物材料 材料的年龄 保存时间的长短等对培养也有影响 幼龄 保存时间短的植物材料容易培养成功 2 无菌条件 培养基上有细菌等微生物存在时 它们比植物细胞生长 繁殖得更快 而且它们会产生毒素 使培养的植物细胞很快中毒腐烂 因此在培养过程中要求进行一系列的消毒 灭菌 并且要求无菌操作 3 植物激素 在配制好的ms培养基中 常常需要添加植物激素 其中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂 脱分化和再分化的关键性激素 高考警示 1 植物组织培养的关键 在植物组织培养的过程中采用无菌技术 主要包括培养基灭菌 外植体消毒 实验操作在酒精灯火焰附近进行 培养过程在无菌培养箱中进行 2 花药离体培养的意义 利用生殖细胞进行的组织培养技术 得到的是单倍体植株 由于单倍体是高度不育的 因此其意义是进行单倍体育种 而不是直接利用单倍体植株 通关典题 2012 新课标全国卷 为了探究6 ba和iaa对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响 某研究小组在ms培养基中加入6 ba和iaa 配制成四种培养基 见下表 灭菌后分别接种数量相同 生长状态一致 消毒后的茎尖外植体 在适宜条件下培养一段时间后 统计再生丛芽外植体的比率 m 以及再生丛芽外植体上的丛芽平均数 n 结果如下表 回答下列问题 1 按照植物的需求量 培养基中无机盐的元素可分为和两类 上述培养基中 6 ba属于类生长调节剂 2 在该实验中 自变量是 因变量是 自变量的取值范围是 3 从实验结果可知 诱导丛芽总数最少的培养基是号培养基 4 为了诱导该菊花试管苗生根 培养基中一般不加入 填 6 ba 或 iaa 解题指南 解答本题需掌握以下知识 1 植物培养基营养成分的组成 2 对照实验中自变量与因变量的判断方法 3 生长素含量与细胞分裂素含量的比值对植物组织分化的影响 解析 1 根据植物的需求量 组成生物体的元素可以分为大量元素和微量元素 6 ba属于细胞分裂素类生长调节剂 2 根据实验目的和实验步骤中的数据 可以得出iaa的浓度是自变量 菊花再生丛芽外植体的比率和再生丛芽外植体上的丛芽平均数是因变量 由表中数据可以看出iaa的浓度范围是0 0 5mg l 1 3 再生丛芽的外植体数乘以外植体上丛芽平均数即为丛芽总数 诱导丛芽总数最少的培养基是1号培养基 4 当生长素用量与细胞分裂素用量的比值较高时 容易诱导试管苗生根 所以培养基中一般加入iaa 而不加入6 ba 答案 1 大量元素微量元素细胞分裂素 2 iaa浓度再生丛芽外植体的比率 m 和再生丛芽外植体上的丛芽平均数 n 0 0 5mg l 1 3 1 4 6 ba 延伸探究 本题表中0 5mg l 1的6 ba是否是诱导再生丛芽的最适浓度 如果不是最适浓度 应设计怎样的实验进行探究 提示 不一定 应设置一组实验 自变量为具有浓度梯度的6 ba溶液 iaa浓度为0 1mg l 1 统计再生丛芽外植体的比率 m 以及再生丛芽外植体上的丛芽平均数 n 并比较得出最适浓度 解题金手指 生长素和细胞分裂素在植物组织培养中的作用的判断 1 有生长素存在 细胞分裂素的作用呈现加强的趋势 2 使用顺序不同 结果不同 见下表 3 用量比值不同 结果也不同 见下表 加固训练 2014 唐山模拟 植物的花药培养在育种上有特殊的意义 植物组织培养可用于无病毒植株及细胞产物的工厂化生产等方面 请回答相关问题 1 利用月季的花药离体培养单倍体时 选材非常重要 一般来说 在期花药培养的成功率最高 为了选择该时期的花药 通常选择的花蕾 确定花粉发育时期最常用的方法有法 但是对于花粉细胞核不易着色的植物 需采用法 该法能将花粉细胞核染成色 2 若要进行兰花无病毒植株的培育 首先选择兰花的作为外植体 从外植体到无病毒试管苗 要人为控制细胞的和过程 3 进行组织培养需配制ms培养基 在该培养基中常需要添加 等激素 欲有利于根的分化 植物激素的用量比例 4 不同植物的组织培养除需营养和激素外 等外界条件也很重要 5 无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素 下列各项中使用化学药剂进行消毒的是 采用灼烧方法进行灭菌的是 填序号 培养皿 培养基 实验操作者的双手 三角锥形瓶 接种环 花蕾 解题指南 解答本题需要注意以下三点 1 植物组织培养的选材 脱毒苗 分生区 花药离体培养 单核靠边期 2 植物激素在组织培养过程中的作用及影响 3 组织培养时正确的无菌操作 解析 1 早期的花药比后期的更容易培养成功 一般来说 在单核期 细胞核由中央移向细胞一侧的时期 花药培养成功率最高 该时期的花药通常存在于完全未开放的花蕾中 2 根尖 茎尖中几乎不含病毒 由已分化组织形成植物个体的过程要先经过脱分化形成愈伤组织 后经过再分化形成植物体 3 生长素与细胞分裂素等植物激素可调节脱分化和再分化 当生长素含量多于细胞分裂素含量时 利于生根 4 植物组织培养时 除需要营养 激素外 还需要适宜的温度 ph和光照等 5 对实验器具进行灭菌处理 对实验过程中的活体材料或用具进行消毒处理 答案 1 单核靠边完全未开放醋酸洋红焙花青 铬矾蓝黑 2 茎尖分生组织脱分化再分化 3 生长素细胞分裂素 两空顺序可以颠倒 生长素多于细胞分裂素 4 ph 温度 光照 5 延伸探究 1 利用月季的花药离体培养产生单倍体有几种途径 请分别用简单的流程画出来 提示 两种途径 2 ms培养基与微生物培养基有什么不同 提示 ms培养基成分中含有无机盐 水 植物激素等有机物 微生物培养基含有碳源 氮源 水 无机盐及生长因子等 考点二dna和蛋白质技术1 dna与蛋白质在理化性质方面的差异 2 比较细胞内dna复制与体外dna扩增 pcr 3 分离dna和蛋白质的比较 高考警示 1 dna的粗提取的关键 提取dna时dna和蛋白质的溶解与析出是相反的 实验时一定要明确dna分子的去向 防止误将dna分子丢弃 2 pcr技术的注意事项 pcr是通过控制温度实现的 需要在pcr仪中进行 pcr扩增的dna片段是由两种引物决定的 3 分离蛋白质技术的应用 凝胶色谱法和电泳法分离的蛋白质可以来自pcr扩增的产物表达所得 所以可以通过对相关蛋白质的分析 进行相关的遗传分析 通关典题 2013 广东高考改编 地中海贫血症属于常染色体遗传病 一对夫妇生有一位重型 地中海贫血症患儿 分析发现 患儿血红蛋白 链第39位氨基酸的编码序列发生了点突变 c t 用pcr扩增包含该位点的一段dna片段l 突变序列的扩增片段可用一种限制酶酶切为大小不同的两个片段m和s 但正常序列的扩增片段不能被该酶酶切 如图a 目前患儿母亲再次怀孕 并接受了产前基因诊断 家庭成员及胎儿的pcr扩增产物酶切电泳带型示意图见图b 终止密码子为uaa uag uga 1 在获得单链模板的方式上 pcr扩增与体内dna复制不同 前者通过解开双链 后者通过解开双链 2 据图分析 胎儿的基因型是 基因用a a表示 患儿患病可能的原因是的原始生殖细胞通过过程产生配子时 发生了基因突变 从基因表达水平分析 其患病是由于 解题指南 解答本题需要明确以下两点 1 体内dna复制与pcr的区别 基因突变的有关知识 2 能够准确识别电泳结果的图示 并根据图示写出亲代和子代的基因型 解析 1 pcr是体外扩增dna的方式 通过高温使双链解开 体内dna的复制则是通过解旋酶使dna双链解开 2 由题意可知重型 地中海贫血症是隐性遗传病 突变后的序列可以被剪切成m和s两个片段 而正常序列无法被剪切 因此母亲 父亲 患儿和胎儿的基因型分别为aa aa aa和aa 母亲和父亲的基因型为aa和aa 生下患儿可能是因为母亲的原始生殖细胞通过减数分裂产生配子时发生了基因突变 由图可知 该突变为模板链上的gtc突变成了atc mrna上由cag变成uag 因此终止密码子提前出现 使翻译提前终止 答案 1 高温解旋酶 2 aa母亲减数分裂mrna上编码第39位氨基酸的密码子变为终止密码子 链的合成提前终止 链变短而失去功能 延伸探究 电泳法只能分离蛋白质分子吗 试分析原因 提示 不是 电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程 该方法除用于分离蛋白质外 也可用于分离大小不等的dna片段 解题金手指 用电泳法进行遗传分析的方法第一步 提取待测个体的dna分子 第二步 利用pcr技术扩增dna片段或对目的基因进行酶切 得到大小不同的dna片段 第三步 利用电泳法分离不同大小的dna片段 第四步 利用已知个体的基因型作为对照 分析待测个体的基因型 加固训练 凝胶色谱技术是一种快速而又简单的分离技术 对高分子物质有很好的分离效果 目前已经被多个领域广泛应用 不但应用于科学实验研究 而且已经大规模地用于工业生产 据图回答问题 1 a b均为蛋白质分子 其中先从层析柱中洗脱出来的是 原因是 2 自己制作凝胶色谱柱时 在色谱柱底部d位置相当于多孔板的结构可由替代 3 装填凝胶色谱柱时 色谱柱内不能有气泡存在 原因是 4 洗脱用的液体应尽量与浸泡凝胶所用的液体 填 相同 或 不同 洗脱时 对洗脱液的流速要求是 5 若选用sephadexg 75 则 g 表示 75表示 解题指南 解答本题应从以下两点分析 1 凝胶色谱柱分离原理 相对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶间隙移动 相对分子质量较小的则进入凝胶内部通道 2 凝胶色谱柱的填充成功与否影响蛋白质的分离 解析 1 用凝胶色谱技术分离各种不同蛋白质时 大分子物质由于直径较大 只能分布于颗粒之间 所以向下移动的速度较快 小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外 还可以进入凝胶颗粒的内部 在向下移动的过程中 从一个凝胶颗粒内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒内 如此不断地进入和扩散 小分子物质的下移速度落后于大分子物质 所以大分子物质先洗脱出来 2 自己制作凝胶色谱柱时 在色谱柱底部d位置相当于多孔板的结构可由尼龙网和尼龙纱替代 3 在色谱柱中装填凝胶的时候要尽量紧密 以降低凝胶颗粒之间的空隙 一是在装填凝胶柱时 不得有气泡存在 因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序 降低分离效果 二是凝胶色谱操作过程中 不能发生洗脱液流干 露出凝胶颗粒的现象 一旦发生上述两种情况 凝胶色谱柱需要重新装填 4 洗脱液应与浸泡凝胶所用液体相同 且洗脱液流速要稳定 以免干扰洗脱结果 答案 1 aa相对分子质量较大 无法进入凝胶内部的通道 只能在凝胶间隙移动 路程较短 移动速度较快 2 尼龙网和尼龙纱 3 气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序 降低分离效果 4 相同保持稳定 5 凝胶的交联程度 膨胀程度及分离范围凝胶得水值 即每克凝胶膨胀时吸水7 5g 延伸探究 1 在血红蛋白的提取过程中 哪些过程能影响血红蛋白提取纯度 提示 红细胞的洗涤次数少 不能除去血浆蛋白 离心速度过高和时间过长 会使白细胞一同沉淀 得不到纯净的红细胞 2 如何检测血红蛋白的分离是否成功 提示 看血红蛋白的红色区带是否均匀 平整地随着洗脱液缓慢流出 考点三植物有效成分的提取1 植物有效成分的提取的三种方法比较 2 增加植物有效成分的提取量的关键措施 1 蒸馏法提取植物芳香油 提取量主要取决于植物材料中芳香油的含量 由于植物芳香油易挥发 因此用水蒸气蒸馏法提取植物芳香油时应选择新鲜的植物材料 干燥后植物芳香油挥发 2 压榨法提取植物芳香油 植物材料中的果胶 果蜡会影响压榨和出油率 压榨前通常采用石灰水浸泡的方法除去果胶 果蜡 以提高出油率 3 萃取法提取植物有效成分 原料的颗粒大小会影响萃取的效果 因此通常采用粉碎的方法处理植物材料 以提高萃取效率 含水量会影响萃取的效果 因此通常采用干燥的方法处理植物材料 以提高萃取效率 高考警示 1 植物有效成分提取方法不同 不同的植物精油的性质不同 实践中需要选择合适的方法进行提取 能够利用蒸馏法提取的物质应该具有热稳定性 否则会发生植物有效成分的分解 不适于蒸馏法的可以考虑压榨法 但是需要原料中植物芳香油的含量较大 否则不易压榨出来 2 用萃取法提取植物有效成分应注意的问题 萃取温度和时间都会影响萃取的效果 通常采用加热的方法提高萃取效率 温度过高会影响植物有效成分的品质 因此萃取时应严格控制温度 延长萃取时间 通关典题 2014 上海模拟 许多植物含有天然香料 如薄荷叶中含有薄荷油 现用薄荷叶提取薄荷油 回答问题 1 薄荷油是挥发性物质 提取薄荷油时应选用 鲜 干 薄荷叶作原料 其原因是 2 用萃取法提取薄荷油时 采用的溶剂是 原理是 3 用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时 在油水混合物中加入氯化钠的作用是 常用于分离油层和水层的器皿是 分离出的油层中加入无水硫酸钠的作用是 除去固体硫酸钠的常用方法是 解题指南 解答本题需要明确以下知识 1 提取植物有效成分时选材的注意事项 2 怎样根据植物有效成分的特点选择合适的提取方法 3 蒸馏法和萃取法提取植物有效成分的注意事项 解析 1 薄荷油具有芳香性 属于挥发性强的物质 在鲜薄荷叶中含量较高 可以用水蒸气蒸馏法提取 也可以用萃取法提取 2 薄荷油易溶于酒精 因此可用酒精作为萃取剂提取薄荷油 3 油水混合物中加入nacl可使nacl溶解于水中 增大盐的浓度 加速油水分层 分离油层和水层需要利用分液漏斗 无水硫酸钠具有很强的吸水性 加入无水硫酸钠的目的是除去油层中的水 然后经过滤可除去固体硫酸钠 答案 1 鲜薄荷油是挥发性物质 鲜薄荷叶才含薄荷油 2 有机溶剂薄荷油易溶于有机溶剂且挥发性强 3 使溶液分层分液漏斗除水过滤 延伸探究 1 萃取法提取植物芳香油时 是否一定要将材料进行干燥 为什么 提示 不一定 因为干燥时会导致植物芳香油挥发或分解 2 用萃取法提取植物芳香油时 为了获得纯净的植物芳香油 选择的萃取剂应具有什么特点 提示 应是植物芳香油的良好溶剂 便于溶解植物芳香油 应是水不溶性的 防止水分一起被萃取出来 难以去除 应与芳香油具有不同的沸点 便于挥发掉溶剂 得到纯净的植物芳香油 解题金手指 植物芳香油进一步分离的方法用蒸馏 压榨 萃取法提取的植物有效成分都不是纯净的 还含有许多杂质或提取剂 进一步提纯的方法也要根据杂质或提取剂的特性确定 1 固液分离法 过滤 用于除去提取液中的固体颗粒物等杂质 2 液液分离法 分液 利用植物有效成分与提取剂的比重差异 如分离油水混合物的油层和水层 3 液液分离法 蒸馏 利用了植物有效成分与提取剂沸点的差异 蒸发掉沸点低的液体 如胡萝卜素萃取液的浓缩 加固训练 下列是与芳香油提取相关的问题 请回答 1 玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取 其理由是玫瑰精油具有的性质 提取玫瑰精油时应选用 鲜 干 玫瑰花瓣作原料 2 当蒸馏瓶中的水和原料量一定时 蒸馏过程中 影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和 当原料量等其他条件一定时 提取量随蒸馏时间的变化趋势是 3 如果蒸馏过程中不进行冷却 则精油提取量会 原因是 4 用萃取法提取玫瑰精油时 采用的溶剂是 原理是 5 某植物花中精油的相对含量随花的不同生长发育时期的变化趋势如图所示 提取精油时采摘花的最合适时间为天左右 6 从薄荷叶中提取薄荷油时 填 能 或 不能 采用从玫瑰花中提取玫瑰精油的方法 理由是 解题指南 解答本题需要明确以下三点 1 提取芳香油的方法有三种 蒸馏法 压榨法和萃取法 其原理不同 2 根据欲提取的芳香油的性质选择适当的提取方法 3 根据图像的变化趋势确定提取精油时采摘花的最合适时间 解析 1 玫瑰精油难溶于水 易溶于有机溶剂 化学性质稳定 故采用水蒸气蒸馏法和萃取法提取 应选用鲜的玫瑰花 因为干燥时玫瑰精油会挥发 2 当蒸馏瓶中的水和原料量一定时 蒸馏过程中 影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和蒸馏温度 当原料量等其他条件一定时 提取量随蒸馏时间的变化趋势是 一定时间内随蒸馏时间的延长而增加 一定时间后提取量不再增加 3 蒸馏时玫瑰精油随水蒸气一起蒸馏出来 如果不进行冷却 部分精油会随水蒸气挥发而流失 4 玫瑰精油易溶于有机溶剂 因此萃取时所选用的溶剂必须是有机溶剂 如酒精 石油醚 乙醚 戊烷等 5 根据图示可以确定提取精油时采摘花的最合适时间为a天左右 此时精油相对含量最高 6 薄荷油与玫瑰精油化学性质相似 同样可以采用水蒸气蒸馏法提取 答案 1 难溶于水 易溶于有机溶剂 化学性质稳定鲜 2 蒸馏温度在一定时间内提取量随提取时间的延长而增加 一定时间后提取量不再增加 3 下降部分精油会随水蒸气挥发而流失 4 酒精 石油醚 乙醚 戊烷等玫瑰精油易溶于有机溶剂 5 a 6 能薄荷油与玫瑰精油化学性质相似 1 2014 济南模拟 人们生产和生活与生物技术实践密切相关 请回答下列问题 1 生物技术实践离不开无菌技术 无菌技术主要通过消毒和灭菌过程来避免杂菌污染 常用的灭菌方法有灭菌 干热灭菌和灭菌 2 在制作果醋过程中 若榨取的果汁非常浑浊 解决方法是 3 为满足广大人民群众的需要 科技工作者采用植物组织培养技术在温室大棚内生产出大量质优价廉的各种花卉 下图所示是郁金香芽尖通过特定操作接入试管后 在一定条件下形成试管苗的培育过程 芽尖组织在接种至培养基之前 必须进行消毒处理 整个组织培养过程需在条件下操作 并严格控制好各个时期的培养条件 为促进芽尖组织细胞分裂生长 所使用的培养基中应有和细胞分裂素两类植物激素 再分化时 除必要的营养供应和激素调节外 还需要的条件是 4 植物组织培养的优点是 解析 1 常用的灭菌方法有灼烧灭菌 干热灭菌和高压蒸汽灭菌三种 2 果汁浑浊是因为果汁中含有果胶 可用果胶酶使果汁变得澄清 3 植物组织培养需要在严格的无菌条件下操作 因此培养过程应在无菌培养箱中进行 生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂 脱分化与再分化的两种关键激素 因此培养基中应含有生长素和细胞分裂素 4 由于植物组织培养取材少 繁殖周期短 因此可以快速繁殖植物 由于植物组织培养选择的外植体为茎尖或根尖 输导组织尚未建成 一般无病毒 故可用于培养脱毒植株 答案 1 灼烧高压蒸汽 2 用果胶酶处理 3 无菌 生长素 光照 适宜的温度 ph 4 快速繁殖 培育无病毒植株 易错提醒 植物组织培养繁殖植物属于无性繁殖 不能改变植物的遗传特性 因此可获得无病毒植物 而不是抗病毒植物 2 2014 衡阳模拟 科学家发现家蝇体内存在着一种抗菌活性蛋白 这种蛋白具有极强的抗菌能力 受到研究者重视 1 分离该抗菌蛋白可用电泳法 其原理是根据蛋白质分子的 大小及形状不同 在电场中的不同而实现分离 2 可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的体外抗菌特性 抗菌实验所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供和 3 分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液 培养一定时间后 比较两种培养基中菌落的 确定该蛋白质的抗菌效果 4 细菌培养常用的接种方法有和 实验结束后 对使用过的培养基应进行处理 解题指南 解答本题需要明确以下三点 1 分离蛋白质的原理和常用方法 2 微生物的培养基的成分和作用 3 微生物培养的接种方法和无菌技术 解析 1 电泳法分离蛋白质的原理是根据蛋白质分子的电荷 带电情况 大小及形状不同 在电场中的迁移速度不同而实现分离 2 牛肉膏和蛋白胨均为天然成分 含有丰富的营养物质 主要为细菌生长提供碳源和氮源 3 由于抗菌蛋白能够抑制微生物的生长 因此在加入该抗菌蛋白的培养基上长出的菌落少 通过比较菌落数量即可确定该抗菌蛋白的抗菌效果 4 细菌培养常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法 实验结束后 为避免有害菌污染环境 对使用过的培养基应进行灭菌处理 答案 1 电荷 带电情况 迁移速度 2 碳源氮源 3 数量 4 平板划线法稀释涂布平板法灭菌 3 2013 山东高考 胡萝卜素是一种常用的食用色素 可分别从胡萝卜或产生胡萝卜素的微生物体中提取获得 流程如下 1 筛选产胡萝卜素的酵母菌r时 可选用或平板划线法接种 采用平板划线法接种时需要先灼烧接种环 其目的是 2 培养酵母菌r时 培养基中的蔗糖和硝酸盐可以分别为酵母菌r提供和 3 从胡萝卜中提取胡萝卜素时 干燥过程应控制好温度和 以防止胡萝卜素分解 萃取过程中宜采用方式加热以防止温度过高 萃取液浓缩前需进行过滤 其目的是 4 纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素 鉴定过程中需要用胡萝卜素标准样品作为 解题指南 解答本题时 需要注意以下两点 1 明确酵母菌的培养需要碳源 氮源 生长因子等 糖类物质是重要的碳源之一 2 明确胡萝卜素易分解 干燥时间过长会造成胡萝卜素分解 解析 本题考查微生物的实验室培养 植物有效成分的提取 1 接种微生物的方法主要有稀释涂布平板法和平板划线法 接种过程为了避免其他杂菌的污染 要进行无菌操作 所以接种前需对接种环灼烧灭菌 2 蔗糖主要提供碳源 也可以作为能源物质 硝酸盐含氮元素 可提供氮源 3 温度过高 干燥时间过长会导致胡萝卜素分解 由于萃取剂往往有挥发性 直接加热时挥发出来的有机溶剂遇明火易爆炸 萃取后需将原料中的固体物滤去 4 提取出来的胡萝卜素往往不是纯的 用标准样品主要起对照的作用 答案 1 稀释涂布平板法灭菌 或防止杂菌污染 2 碳源氮源 3 时间水浴滤去不溶物 4 实验 对照 加固训练1 2014 青岛模拟 请回答下列与生物技术实践有关的问题 1 生物组织中不同有机物提取的方法各有不同 玫瑰精油是世界香料工业不可取代的原料 其提取方法是 血红蛋白的提取方法是 主要是根据将血红蛋白与其他物质分开 2 生物中有许多微生物技术的应用 酿造果醋时利用的菌种是 腐乳制作过程中 豆腐相当于微生物生长的 3 把从酵母细胞中提取的淀粉酶固定在尼龙布上制成固定化酶 采用的方法是 4 pcr技术一般要经历三十多次循环 每次循环可以分为三步 解析 1 玫瑰精油具有较强的挥发性和热稳定性 因此可以采用水蒸气蒸馏法提取 血红蛋白的提取则利用凝胶色谱法 原理是利用相对分子质量的大小不同将蛋白质与其他物质分开 2 酿造果醋的菌种是醋酸菌 制作腐乳时毛霉等微生物在豆腐上生长 因此

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